一種組培藍莓高效生根培養基的製作方法
2024-03-26 15:16:05
本發明涉及一種組培藍莓高效生根培養基，屬於改良木本植物培養基離體培養藍莓的
技術領域：
。
背景技術：
：藍莓(VacciniumuliginosumLinn.)屬杜鵑花科，越橘屬植物。起源於北美，多年生灌木小漿果果樹。因果實呈藍色，故稱為藍莓。藍莓果實中含有豐富的營養成分，具有防止腦神經老化、強心、抗癌、軟化血管、增強人機體免疫等功能。藍莓是世界糧農組織推薦的五大健康水果之一。目前，中國藍莓種植面積達到12萬餘畝，主要分布於黑龍江、吉林、遼寧、山東、安徽、四川、重慶、雲南等10多個省區。組培苗已是藍莓種苗供應的最主要途徑。藍莓組培苗生根的難度較大，添加0.1-1.0mg/L各濃度梯度萘乙酸(NAA)或吲哚乙酸(IAA)、吲哚丁酸(IBA)的MS或WPM等培養基上的生根試驗顯示，生根率一般在20-30％以下。目前生產上採用的改進措施主要有，(1)瓶外生根，即剛出瓶洗淨的幼苗蘸取高濃度的生長素類物質，如200-500mg/L的吲哚丁酸、萘乙酸等，生根率最高僅達50％左右，但瓶外生根受多種環境因素的影響，且剛出瓶的無根苗十分脆弱，在實際生產中這一方法難以應用；(2)於超淨工作檯上，將增殖苗切成1-2cm小段，基部蘸取高濃度(200-300mg/L)的吲哚丁酸，直插於MS或WPM培養基上，生根率接近70％左右，但1-2cm的莖段過於細小，每次操作只能處理1至數條，操作很不方便，接種效率僅為正常操作的十分之一。以上兩種措施還存在一個共同問題，即高濃度的激素作用於藍莓幼苗，往往導致不同程度的葉片黃化、捲曲，甚至植株畸形，影響後續生長發育，這在生產上是常見的。提高組培藍莓的生根率，屬於藍莓組培苗生產的關鍵技術，是促進藍莓規模化發展的重要課題。技術實現要素：本發明提供一種組培藍莓高效生根培養基，解決現有技術中組培藍莓的生根率以及藍莓大規模生產中的「瓶頸」問題，實現了組培藍莓的生根率達到95％以上，根系發達，煉苗成活率近100％。為了實現本發明的目的，技術方案培養基組成包含：培養基母液包括大量元素、微量元素、鈣鹽、鐵鹽和有機物；所述大量元素組成包含：KNO3為60mg/L；MgSO4·7H2O為92.5mg/L；KH2PO4為42.5mg/L；NH4NO3為100mg/L；所述微量元素組成包含：MnSO4·4H2O為5.6mg/L；ZnSO4·7H2O為2.2mg/L；H3BO3為1.6mg/L；CuSO4·5H2O為0.062mg/L；Na2MoO4·2H2O為0.062mg/L；所述鈣鹽包含Ca(NO3)2·4H2O為200mg/L；所述鐵鹽組成包含：FeSO4·7H2O為7.0mg/L；Na2-EDTA為9.3mg/L；所述有機物組成包含：肌醇為25mg/L；甘氨酸為0.5mg/L；維生素B1為0.25mg/L；維生素B6為0.125mg/L；煙酸為0.125mg/L。本發明的有益效果：1、將木本植物培養基的各組分降低至規定用量的1/4用量，作為藍莓組培生根的基本培養基，並將1/4培養基中K2SO4替換為KNO3，CaCl2.2H2O替換為Ca(NO3)2.4H2O，與現有培養基相比，蔗糖用量從30g/L降低至25g/L，瓊脂從7～10g/L降低至6.2g/L，pH值從5.8～6.0降低至5.4，較低的糖含量有利於消除藍莓對培養基現成碳源的依賴性，促其髮根增強吸收能力，瓊脂含量降低，使水分和溼度更為充足，促其生根，藍莓喜酸性根際環境，降低pH值對生長和生根均有利；2、改良的1/4培養基KNO3的用量為60mg/L，Ca(NO3)2.4H2O的用量為200mg/L，降低了SO42+和Cl-離子對藍莓生根的不利影響，組培液中過量的SO42+和Cl-離子的累積往往會造成危害，而NO3-作為一種游離氮源，容易被植物利用；3、通過對傳統的藍莓生根木本植物培養基成分中碳源、凝固劑及酸鹼度進行改良，使組培藍莓的生根率達到95％以上，根系發達，煉苗成活率近100％，解決了藍莓大規模組培生產的關鍵問題。具體實施方式以下將參照實例對本發明作進一步的詳細描述，但本發明不限於這些具體實例。具體實施例1：1/4木本植物培養基其成分及其組成，具體實施例2：改良1/4木本植物培養基其成分及其組成，具體實施例3：改良1/4木本植物培養基其成分及其組成，具體實施例4：改良1/4木本植物培養基其成分及其組成，具體實施例5：改良1/4木本植物培養基其成分及其組成，具體實施例6：改良1/4木本植物培養基其成分及其組成，對比實施例1～6中母液成分製成組培藍莓培養基，使其在相同環境條件下組培瓶中培養藍莓，其生根率和煉苗成活率結果如下表：實施例生根率/％煉苗成活率/％1708029610037583486905919569498在實驗結果中，實施例2的碳源依賴性下降明顯，下降16％～20％，使其有發達的根系，明顯提高了煉苗成活率。當前第1頁1 2 3