病毒滅活劑的製作方法
2023-04-29 07:44:21 2
專利名稱：病毒滅活劑的製作方法
病毒滅活劑
技術領域：
本發明涉及病毒滅活劑，特別是涉及對諾羅病毒及A型流感病毒有滅活效果的病毒滅活劑。
背景技術：
一直以來，以醇作為主劑的組合物作為除菌劑廣泛使用，再者，作為對諾羅病毒有滅活效果的組合物，公開有例如，向釀造用醇配合葡萄水果種子提取液和植酸的組合物(專利文獻I)、向乙醇配合鹼性物質和表面活性劑的組合物(專利文獻2)、及向乙醇配合有機酸鹽和桉樹提取物的組合物(專利文獻3)等。另一方面，近年公開、在貝殼煅燒鈣、氧化鈣及作為其水和物的氫氧化鈣中有抗菌性(專利文獻4)、公開了向此貝殼煅燒鈣配合有機酸鹽的食品的制菌劑(專利文獻5)、向煅燒鈣配合多元醇脂肪酸酯及乙醇的食品用除菌劑(專利文獻6)等。但是，貝殼煅燒鈣等的對諾羅病毒的滅活效果尚不明。現有技術文獻專利文獻專利文獻I:特開2007-320924號公報專利文獻2:特開2008-189645號公報專利文獻3:特開2009-179577號公報專利文獻4:特開平11-222796號公報專利文獻5:特開平11-290044特號公報專利文獻6:特開2002-272434號公報
發明內容發明要解決的技術課題本發明鑑於上述事實，以提供煅燒鈣等的明顯有病毒滅活效果，特別是有諾羅病毒滅活效果的新穎的病毒滅活劑作為課題。解決課題的技術方案本發明人為了解決上述課題而重複銳意研究的結果，發現配合氫氧化鈣的水溶液或水分散體不僅有諾羅病毒滅活效果，再者也有A型流感病毒滅活效果，從而完成本發明。S卩，本發明的要旨如下。〔I〕諾羅病毒滅活劑，其特徵在於，其是配合氫氧化鈣而成的水溶液或水分散體；〔2〕A型流感病毒滅活劑，其特徵在於，其是配合氫氧化I丐而成的水溶液或水分散體；〔3〕上述〔I〕或〔2〕所述的病毒滅活劑，其為代替氫氧化鈣，或者與該氫氧化鈣一同，配合氧化鈣和/或煅燒鈣而成；〔4〕上述〔I〕 〔3〕之任一項所述的病毒滅活劑，其是再配合乙醇及乳酸鈉而成；〔5〕上述〔4〕所述的病毒滅活劑，其中氫氧化鈣、氧化鈣及煅燒鈣之中，配合的成分的合計的配合比例是O. 01 30重量％、乙醇的配合比例是5 30重量％、乳酸鈉的配合比例是I 30重量％ ；〔6〕上述〔I〕 〔5〕之任一項所述的病毒滅活劑，其中所述氫氧化鈣、氧化鈣及煅燒鈣的平均粒徑均為O. I 10 μ m ;〔7〕食品，其用上述〔I〕 〔6〕之任一項所述的病毒滅活劑進行病毒滅活處理而得到；〔8〕上述〔7〕所述的食品，其中所述食品是鮮魚貝類。發明效果通過本發明，提供有諾羅病毒滅活效果和A型流感病毒滅活效果的病毒滅活劑。
圖I是PCR產物的電泳圖。圖2是PCR產物的電泳圖。圖3是示對被金黃色葡萄球菌汙染的生牡蠣進行除菌處理之時的，生牡蠣的活菌數的經時變化的圖。圖4是示對被沙門氏菌汙染的生牡蠣進行除菌處理之時的，生牡蠣的活菌數的經時變化的圖。圖5是示對被0-157汙染的生牡蠣進行除菌處理之時的，生牡蠣的活菌數的經時變化的圖。圖6是示對被副溶血性弧菌汙染的生牡蠣進行除菌處理之時的，生牡蠣的活菌數的經時變化的圖。圖7是示對被大腸桿菌汙染的生牡蠣進行除菌處理之時的，生牡蠣的活菌數的經時變化的圖。圖8是示對浸潰到人工海水的生牡蠣進行除菌處理之時的，生牡蠣的活菌數的經時變化的圖。實施方式本發明的病毒滅活劑是將氫氧化鈣配合到水而得到的水溶液或水分散體，有諾羅病毒滅活效果、A型流感病毒滅活效果及貓杯狀病毒滅活效果，再者對一般食中毒菌有除菌效果。作為本發明的配合成分，也可代替氫氧化鈣，或者與氫氧化鈣一同，使用例如，使氧化鈣或煅燒鈣等的與水反應而生成氫氧化鈣的成分的I種以上。以下，在本說明書，氫氧化鈣、及氧化鈣、煅燒鈣等的與水反應而生成氫氧化鈣的成分總稱為「病毒滅活成分」。上述病毒滅活成分之中，煅燒鈣是將牡蠣殼、扇貝殼、北極貝殼、卵殼或珊瑚殼等、 煅燒前的成分是碳酸鈣的動物性來源的鈣在600°C以上、優選在900 1200°C的溫度煅燒或通電加熱15 60分鐘左右而得到，主成分是氧化鈣。得到的煅燒鈣的飽和水溶液的pH 優選在11 13的範圍。煅燒鈣通常使用適合於食品添加物規格的。病毒滅活成分的平均粒徑不特別限定，通常是O. I ΙΟμπι。另外，病毒滅活劑中的病毒滅活成分的配合比例不特別限定，通常是O. 01 30重量％。在本發明中，為了提高病毒滅活效果或對食中毒菌的除菌效果，作為病毒滅活成分以外的其他配合成分，可配合例如，乙醇或有機酸鹽。乙醇優選適合於常規食品添加物規格。病毒滅活劑中的乙醇的配合比例不特別限定，通常以5 30重量％的範圍配合。
有機酸鹽而言，可舉出例如，檸檬酸鹽、乳酸鹽、蘋果酸鹽、酒石酸鹽、草酸鹽、醋酸鹽、蟻酸鹽、琥珀酸鹽、富馬酸鹽、葡萄糖酸鹽等，這些可單獨或適宜組合2種以上而使用。 鹽而言，可舉出鹼金屬鹽等。在這些之中，也優選乳酸鹽，更優選乳酸鈉。病毒滅活劑中的有機酸鹽的配合比例不特別限定，通常以I 30重量％的範圍配合。在本發明的病毒滅活劑中，除了上述的成分之外，在不妨礙本發明的效果的範圍內，可適量含有可配合到除菌劑的公知的成分。這樣的成分而言，可舉出防腐劑、氧化防止劑、表面活性劑、染料、香料、染料等。本發明的病毒滅活劑的pH從病毒滅活效果或對食中毒菌的除菌效果的觀點來看，優選11 14,更優選11 13。本發明的病毒滅活劑，特別是諾羅病毒滅活效果和A型流感病毒滅活效果顯著， 再者對一般食中毒菌除菌效果也優良。在本發明中，根據上述的配合成分的濃度，可作為各成分基本上溶解於水的水溶液型，或者作為各成分之中一部分溶解於水，一部分分散於水中的水分散型而使用。本發明的病毒滅活劑在使用時不用水稀釋而直接使用也可，但在使用水分散型時，優選用水稀釋而使用。在直接使用水溶液型或水分散型時，或者將這些用水稀釋而使用時等、採用任何的使用方法時，病毒滅活劑中的病毒滅活成分的配合比例在實際的使用濃度均優選O. 01 5重量％。使用水溶液型時填充到噴霧容器等中，可在例如，食品工場、飲食店的廚房或家庭的廚房等，向作業者的手、腕等的皮膚、菜刀、鍋等的烹調器具、皿、容器等的餐具、鮮魚貝類、蔬菜、肉類等的生鮮食品、加工食品等、有上述病毒的附著的擔憂的部分噴霧而使用。另外，使用水分散型時，使用時可用水稀釋，在上述例示的適用對象物之中，將可攜帶病毒的浸潰而使用。
實施例以下，根據試驗例等更詳細地說明本發明，但本發明不以任何方式受這些的限定。I.對貓杯狀病毒的滅活效果的驗證A.試驗概要配合氫氧化鈣、乙醇、乳酸鈉，將餘部作為水將下述配方的水分散體(本發明品)作為待測樣品，在(財)日本食品分析中心，對於對貓杯狀病毒的本發明品的滅活效果實施驗證試驗。即，由於諾羅病毒自體不被穩定的培養，在本試驗中，從形態的特徵或基因組的結構，將作為諾羅病毒的近親的貓杯狀病毒作為代替病毒使用。試驗的詳細如下。B.試驗方法〔I〕待測樣品水分散體(本發明品)
氫氧化鈣12. 8重量％乙醇19. 7重量％乳酸鈉9. 9重量％水57. 6重量％
〔2〕試驗病毒
貓杯狀病毒F-9ATCC VR-782 (貓杯狀病毒)
〔3〕使用細胞
CRFK細胞(大日本製藥公司)
〔4〕使用培養基
細胞增殖培養基
(I)向Eagle MEM培養基「二 ^ 4 」(I)(日水製藥公司)加10%胎牛血清。
(2)細胞維持培養基
向Eagle MEM培養基「二 ^ (I)(日水製藥公司)加2%胎牛血清。
〔5〕病毒懸浮液的製備
(I)細胞的培養
使用細胞增殖培養基，將使用細胞在組織培養用瓶內單層培養。
(2)病毒的接種
單層培養後，從瓶內除去細胞增殖培養基，接種試驗病毒。接下來，加細胞維持培養基而在37°C的碳酸氣體溫育器(CO2濃度5%)內培養I 5天。
(3)病毒懸浮液的製備
培養後，使用倒置相差顯微鏡觀察細胞的形態，確認細胞發生形態變化(細胞變性效果)。接下來，將培養液離心分離(3，000r/min，10分鐘)，將得到的上清液作為病毒懸浮液。
〔6〕試驗操作
使用純化水而製備待測樣品的2%懸浮液而作為試驗液。向試驗液Iml添加病毒懸浮液O. 1ml、混合之後，以80 90r/min振蕩著室溫保存,6及24小時後,將試驗液使用細胞維持培養基稀釋100倍。
再有，以純化水作為對照的試驗液同樣地進行試驗。但是，在開始時就進行測定。
〔7〕病毒感染價的測定
使用細胞增殖培養基，將使用的細胞在組織培養用微板(96孔)內進行單層培養之
後，除去細胞增殖培養基而加各O. Iml細胞維持培養基。接下來，將試驗液的稀釋液O. Iml 接種到各4孔，在37°C的碳酸氣體溫育器(CO2濃度5%)內培養4 7天。培養後，使用倒置相差顯微鏡觀察細胞的形態變化(細胞變性效果)的有無，根據Reed-Muench法算出50% 組織培養感染量(TCID5tl)而換算成每試驗液Iml的病毒感染價。結果顯示於表I。表I
試驗病毒對象Ioh TCIDsc/ml**開始時6小時後24小時後貓杯狀病毒#_#品8.5<2.5<2.5I8,58.27.8
TCID50 :半數組織培養感染劑量，50%組織培養感染量* I :每試驗液Iml的TCID5tl的對數值開始時測定作用開始後立即的對照的TCID5tl，作為開始時。對照純化水作用條件室溫、振動保存〈2. 5:檢測不到從表I知，本發明品在6小時以內完全地滅活3. I X IO8TCID5cZml的貓杯狀病毒。2.對諾羅病毒的滅活效果的驗證(I)配合氫氧化鈣、乙醇、乳酸鈉，將餘部作為水將下述配方的水溶液(本發明品) 作為待測樣品，在1^ ^ 3*株式會社食品檢查中心，對於本發明品的對諾羅病毒的滅活效果實施驗證試驗。〈待測樣品水溶液(本發明品)>
權利要求
1.諾羅病毒滅活劑，其特徵在於，其是配合氫氧化鈣而成的水溶液或水分散體。
2.A型流感病毒滅活劑，其特徵在於，其是配合氫氧化鈣而成的水溶液或水分散體。
3.權利要求I或2所述的病毒滅活劑，其為代替氫氧化鈣，或者與該氫氧化鈣一同，配合氧化鈣和/或煅燒鈣而成。
4.權利要求I 3之任一項所述的病毒滅活劑，其是再配合乙醇及乳酸鈉而成。
5.權利要求4所述的病毒滅活劑，其中在氫氧化鈣、氧化鈣及煅燒鈣之中，配合的成分的合計的配合比例是O. 01 30重量％、 乙醇的配合比例是5 30重量％、乳酸鈉的配合比例是I 30重量％。
6.權利要求I 5之任一項所述的病毒滅活劑，其中氫氧化鈣、氧化鈣及煅燒鈣的平均粒徑均為O. I 10 μ m。
7.食品，其用權利要求I 6之任一項所述的病毒滅活劑進行病毒滅活處理而得到。
8.權利要求7所述的食品，其中所述食品是鮮魚貝類。
全文摘要
本發明提供煅燒鈣等的明顯有病毒滅活效果，特別是有諾羅病毒滅活效果的新穎的病毒滅活劑。包括將氫氧化鈣、氧化鈣及煅燒鈣之中1種以上配合到水中而得到的水溶液或水分散體。上述成分之外、可配合乙醇和有機酸鹽。
文檔編號A01N31/02GK102612320SQ20108005078
公開日2012年7月25日 申請日期2010年11月9日 優先權日2009年11月10日
發明者小谷博秀, 山下泰治, 川上大雄 申請人:株式會社川上