愛滋病病毒速殺劑的製作方法
2023-04-24 01:54:06
專利名稱:愛滋病病毒速殺劑的製作方法
技術領域:
本發明涉及一種滅菌劑,特別是對愛滋病病毒的速殺劑。
中國專利名稱為「液體洗消劑」、申請號為88100230和名稱為「固體肝炎及愛滋病毒消洗靈」,申請號為89102226分別公開了一種洗消劑和一種消洗靈,前者主要採用次氯酸鈉,後者則採用氯化磷酸鈉來作殺菌劑,它們均為氯製劑。根據愛滋病病毒分離和抗體測定,HIV是愛滋病的病源。HIV屬逆轉錄RNA病毒,形態為典型的D型病毒,有偏心核,逆轉錄酶需Mg++離子,主要的核心蛋白生物學特性是嗜T4淋巴細胞。細胞在感染病毒後1-2周後大量釋放病毒,形成融合細胞,最後細胞被破壞。病毒核酸HIV病毒是人的逆轉錄病毒,有三個標準的病毒基因,進一步的分子生物學研究發現,HIV有很大的遺傳變異,包括核酸的點變異、缺失或插入。細胞外層的囊膜蛋白(GP 120)很容易改變,由逆轉錄酶活性來確定其滅活程度。採用氯製劑來殺滅愛滋病病毒不足之處是殺滅速度慢,殺滅效率低,所需的劑量大,且會有微毒。
本發明的目的在於避免上述現有技術的不足之處,提供一種毒殺滅速度快,殺滅效率高,所需的劑量小,且無毒的愛滋病病毒速殺劑。
本發明的愛滋病病毒速殺劑由五碳雙縮醛、十二烷基苯甲基二甲基溴化銨、T-肽、α-丁內酯、乙醇和去離子水組成,其重量百分比為五碳雙縮醛 1.0~2.5十二烷基苯甲基二甲基溴化銨 2.8~5.5T-肽 0.15~0.4乙醇(95%) 15.0~35.0去離子水 60.0~80.0本發明的目的可以通過以下方法來達到a.將十二烷基苯甲基二甲基溴化銨加入乙醇(95%)中,升溫至45±2℃,攪拌溶解1小時;
b.將T-肽、α-丁內酯溶解於去離子水中,再加入五碳雙縮醛,溶解完全;
c.將上述a得到的乙醇溶液與上述b得到的水溶液混合均勻,測定其pH值至6~7即可。
五碳雙縮醛是一種新型消毒劑,其結構中的兩個醛基可與細菌細胞的氨基發生反應,對細胞外層起封閉作用,能滅活細胞酶,從而達到滅菌作用。十二烷基苯甲基二甲基溴化銨是一種陽離子表面活性劑,因其攜帶正電荷的表面活性離子,有抑菌作用。α-丁內酯具有血漿疫苗殺菌作用、速殺劑中加入微量的α-丁內酯可大大增加其滅活能力。T-肽是一種帶有醯胺基團的化合物,是蛋白質水解的中間產物,稱為縮氨酸,有抑菌作用。這幾種組分配製而成的速殺劑具有極強的滅活能力,能滅活周質酶、鹼性磷酸酶和細胞酶,從而達到快速的滅菌作用。
以下結合實施例對本發明作進一步詳述按下表所列數據選取各組分,用上述方法在1000升不鏽鋼反應釜中配製。
以下為愛滋病病毒速殺劑滅活愛滋病毒(HIV)效果的試驗結果。
一、病毒感染試驗受試病毒為HIV BA-2株,試驗時於50ul病毒懸液中加入1ml MT4細胞懸液,室溫吸附40分鐘後,2000轉/分,離心沉澱細胞,用200ul RPMI1640培養基懸浮沉澱的細胞,在96孔微量培養板上用MT4細胞滴定病毒滴度。每稀釋度病毒做四孔,以細胞病變作為病毒感染指標,按Reed-Muench法計算TCID50。
二、中和劑試驗實驗所有中和劑為含1%甘氨酸+0.5%吐溫80的磷酸鹽緩衝液,用以下八組試驗考核中和效果,重複三次。
1.(速殺劑+病毒)+中和劑50ul 1∶3速殺劑與50ul病毒懸液混合作用1分鐘後,加入50ul中和劑,中和30分鐘。
2.中和劑+病毒50ul中和劑與50ul病毒懸液混合作用30分鐘。
3.(速殺劑+中和劑)+病毒50ul 1∶3速殺劑與50ul中和劑混合作用30分鐘後,再與50ul病毒懸液作用1分鐘。
4.速殺劑+病毒50ul 1∶3速殺劑與50ul病毒懸液混合作用1分鐘。
以上四組作用後按方法一滴定病毒感染滴度。
5.病毒對照按方法一進行。
6.(速殺劑+中和劑)+細胞50ul 1∶3速殺劑與50ul中和劑混合作用30分鐘後,加入MT4細胞懸液,40分鐘後按方法一滴定培養。
7.中和劑+細胞50ul中和劑與1ml MT4細胞混合40分鐘後按方法一滴定培養。
8.細胞對照培養孔中細胞,不加病毒。
三、病毒滅活試驗取50ul不同濃度的速殺劑與50ul病毒懸液混合作用一分鐘後,加入50ul中和劑,中和作用30分鐘,按方法一檢測病毒感染滴度,同時設立未滅活的病毒對照和正常細胞對照,重複五次,按下式計算滅活率
滅活率(%)= (對照組平均病毒感染滴度-消毒組平均病毒感染滴度)/(對照組平均病毒感染滴度) ×100%檢測結果表1中和劑試驗結果組別 平均感染滴度(TCID50)1 1.2332 4.8723 4.9704 0.8745 5.242從表1可見,中和劑可中和速殺劑對病毒的滅活作用,中和劑及中和產物對病毒無明顯抑制作用。此外,中和劑及中和產物對培養細胞無明顯毒性,細胞對照生長良好。
表2速殺劑對HIV的滅活效果速殺劑稀釋度 平均滅活率(%)1:1 1001:3 99.991:9 99.37
表2結果說明,病毒與速殺劑原液作用1分鐘未見引起細胞病變,1∶3稀釋的速殺劑在一分鐘內可將HIV滅活99.99%,1∶9稀釋速殺劑作用1分鐘不能達到消毒要求。
急性毒性試驗小鼠LD50=11071.3mg/kg眼刺激及皮膚斑貼試驗對家兔急性眼刺激分指數(最高值)=4;局部皮膚刺激積分為0。結論是本發明所述的速殺劑屬無毒產品。對兔眼基本無刺激性,對家兔皮膚無刺激作用。
本發明的速殺劑具有殺滅愛滋病病毒速度快、殺菌效率高,所需劑量小,且無毒的優點。
權利要求
1.一種愛滋病病毒速殺劑,其特徵在於由五碳雙縮醛、十二烷基苯甲基二甲基溴化銨、T-肽、α-丁內酯、乙醇和去離子水組成,其重量百分比為五碳雙縮醛 1.0~2.5十二烷基苯甲基二甲基溴化銨 2.8~5.5T-肽 0.15~0.4α-丁內酯 0.02~0.5乙醇(95%) 15.0~35.0去離子水60.0~80.0
2.根據權利要求1所述的愛滋病病毒速殺劑,其特徵在於a.將十二烷基苯甲基二甲基溴化銨加入乙醇(95%)中,升溫至45±2℃,攪拌溶解1小時;b.將T-肽、α-丁內酯溶解於去離子水中,再加入五碳雙縮醛,溶解完全;c.將上述a得到的乙醇溶液與上述b得到的水溶液混合均勻,測定其pH值至6~7即可。
全文摘要
一種由五碳雙縮醛、十二烷基苯甲基二甲基溴化銨、T-肽、α-丁內酯、乙醇、去離子水組成的愛滋病病毒速殺劑。其中五碳雙縮醛的兩個活潑醛基可與蛋白質發生反應,T-肽和α-丁內酯可大大增加其滅活能力,同時能快速滅活周質酶、鹼性磷酸酶和細胞酶。本發明的速殺劑具有殺滅愛滋病病毒速度快、殺菌效率高,所需劑量小,且無毒的優點。
文檔編號A01N37/00GK1074800SQ92100520
公開日1993年8月4日 申請日期1992年1月27日 優先權日1992年1月27日
發明者黃標春 申請人:黃標春