一種水產品複合微生物添加劑及其製備方法與應用的製作方法

2023-05-04 17:01:06 1

專利名稱：一種水產品複合微生物添加劑及其製備方法與應用的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種水產品複合微生物添加劑909及其製備方法與應用，屬於微生物 調節劑在水產養殖業中應用的生物材料技術領域。
背景技術：
隨著健康無公害養殖的普及和推廣，微生物製劑以其無毒害、無殘留等優點，越來 越受到人們的關注和青睞。利用某些微生物的代謝作用，降低養殖水體的氨氮、硫化氫含 量，從而有效預防水產動物中毒，淨化了水質，給水產動物創造良好的生存環境。同樣，一些 微生物能夠促進餌料的轉化，進而營養成分被養殖動物吸收利用，間接促進養殖動物的生長。水產品複合微生物添加劑909的研發，採用適合水產養殖環境的微生物菌種，充 分發揮了微生物物質代謝的功能，通過多菌種間協同作用起到對水產養殖增產增效增收的 目的。

發明內容
本發明所要解決的問題是採用多種菌種製備複合微生物菌劑，利用該複合微生物 菌劑製成水產品複合微生物添加劑909應用在水產養殖業。菌劑進入水產動物體內，形成 優勢種群，參與腸道微生物的平衡，提高餌料利用率和動物生長速度，提高動物機體非特異 性免疫功能，防病抗病。本發明的技術解決方案如下一種水產品複合微生物添加劑909採用產朊假絲酵 母(Candida utilis) ATCC No. 22023，沼澤紅假單胞菌onas Palustris) ATCCNo. 33872，嗜酸乳桿菌(Zeaio力aci/^As acidophilus) ATCC No. 11073，乳酸鏈球 菌(Sti^ptococcus lactis) ATCC No. 19435，枯草芽孢桿菌(feci/A/s subtil is) KKL No. 6633製備菌種；所述菌種的質量百分比如下產朊假絲酵母1(Γ40%，沼澤紅假單胞菌 15 50%，嗜酸乳桿菌5 25%，乳酸鏈球菌5 30%，枯草芽孢桿菌10 35%。所述的一種水產品複合微生物添加劑的製備步驟如下
1.接種將所述各菌種接於斜面培養基上。產朊假絲酵母培養溫度25 30°C，培養時 間為6 48h ；沼澤紅假單胞菌培養溫度為25 30°C，培養時間為6 48h ；嗜酸乳桿菌培 養溫度為27 35°C，培養時間為6 48h ；乳酸鏈球菌培養溫度為27 35°C，培養時間為 6 48h ；枯草芽孢桿菌培養溫度為27 37°C，培養時間為6 48h ；
2.一級菌種培養將所述菌種分別接種於盛有液體培養基的50mL錐形瓶中，培養基用 無菌海水配製，pH為6. 0 8. 0。錐形瓶放入搖床振蕩，溫度為30°C，振蕩24 48h ；採用 血球計數板計數，菌液中菌種數量分別達到IO8個/mL ；
3.二級發酵將所述菌種分別接種於盛有液體培養基的IOOOmL錐形瓶中，培養基用無 菌海水配製，pH6. 0 8. 0，放入搖床振蕩，溫度為30°C，振蕩48 72h ；使菌種數量分別達 到IO8個/mL以上，將各菌種按所述菌種的質量百分比混合；
34.三級發酵將混合後的菌液接種於盛有複合菌劑培養基的發酵罐中，複合菌劑培養 基pH6. 0 8. 0，接種量為1 5%，30°C下培養4 7天，使發酵液中菌數達到5 10 X IO8 個/mL，即得到所述微生物複合菌劑。所述液體培養基配方為
1.產阮假絲酵母採用的液體培養基配方為稀釋去除啤酒花的麥芽汁至濃度為 12Brix,瓊脂15 g，高壓滅菌30分鐘；
2.沼澤紅假單胞菌採用的液體培養基配方為氯化銨1.5g，磷酸二氫鉀1. 5g，七水硫 酸鎂0. 8g，氯化鈉4. Og,碳酸氫鈉1. 8g，氯化鈣0. Olg, VBO. Ig,酵母粉1. 0 g，乙酸鈉4. Og, 微量元素1. OmL/L包括(六水氯化鐵5. Og,七水硫酸鋅1. Og,五水硫酸銅0. 05g,六水氯化
鈷0. 5g，硼酸1. Og,四水氯化錳0. 5g)，添加乙酸調節pH，水適量；
3.嗜酸乳桿菌、乳酸鏈球菌採用的液體培養基配方為乳酪蛋白腖10g、蛋白腖10g、 酵母膏5g、葡萄糖5g、吐溫80 lg、K2HP042g、醋酸鈉5g、檸檬酸二胺2g、
MgSO4 · 7Η200· 2g、MnSO4 · H2O 0. 05g、水 1000ml ；
4.枯草芽孢桿菌採用的液體培養基配方為牛肉膏5g、蛋白腖10g、Nacl3g、pH 7.0。 所述複合菌劑培養基配方為蜂蜜1 8g/100mL、蔗糖5 10g/100mL、蛋白腖0. 1
0. 8g/100mL、KH2PO4 0. 2 0. 5g/100mL、K2HPO4 0. 5 3g/100mL、MgSO4 · 7Η20 0· 5 3g/100mL、Nacl 0. 5 10g/100mL 其餘為蒸餾水。所述水產品複合微生物添加劑909在水產品養殖中作為飼料添加劑。本發明的有益效果是一種複合微生物添加劑採用產朊假絲酵母、沼澤紅假單胞 菌、嗜酸乳桿菌、乳酸鏈球菌、枯草芽孢桿菌製備菌種。以上菌種分別經過一級菌種培養， 二、三級發酵，使發酵液中菌數達到5 10X IO8個/mL，即得水產品複合微生物添加劑909。 本產品經長期實地驗證，配方合理，功效穩定，能提高幼體成活率，促進水產動物生長，提高 飼料轉化率，防病抗病，提高產品產量，改善產品品質。
具體實施例方式
權利要求
一種水產品複合微生物添加劑，其特徵在於採用產朊假絲酵母(Candida utilis)ATCC No.22023，沼澤紅假單胞菌(Rhodopseudom onas Palustris)ATCCNo.33872，嗜酸乳桿菌(Leatobacillus acidophilus) ATCC No.11073，乳酸鏈球菌(Streptococcus lactis) ATCC No.19435，枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)ATCC No.6633製備菌種；所述菌種的質量百分比如下產朊假絲酵母10~40%，沼澤紅假單胞菌15~50%，嗜酸乳桿菌5~25%，乳酸鏈球菌5~30%，枯草芽孢桿菌10 35%。
2.根據權利要求1所述的一種水產品複合微生物添加劑的製備方法，其特徵在於所 述水產品複合微生物添加劑909的製備步驟如下1.接種將所述各菌種接於斜面培養基上。產朊假絲酵母培養溫度25 30°C，培養時 間為6 48h ；沼澤紅假單胞菌培養溫度為25 30°C，培養時間為6 48h ；嗜酸乳桿菌培 養溫度為27 35°C，培養時間為6 48h ；乳酸鏈球菌培養溫度為27 35°C，培養時間為 6 48h ；枯草芽孢桿菌培養溫度為27 37°C，培養時間為6 48h ；2.一級菌種培養將所述菌種分別接種於盛有液體培養基的50mL錐形瓶中，培養基用 無菌海水配製，pH為6. 0 8. 0。錐形瓶放入搖床振蕩，溫度為30°C，振蕩24 48h ；採用 血球計數板計數，菌液中菌種數量分別達到IO8個/mL ；
3.二級發酵將所述菌種分別接種於盛有液體培養基的IOOOmL錐形瓶中，培養基用無 菌海水配製，pH6. 0 8. 0，放入搖床振蕩，溫度為30°C，振蕩48 72h ；使菌種數量分別達 到IO8個/mL以上，將各菌種按所述菌種的質量百分比混合；
4.三級發酵將混合後的菌液接種於盛有複合菌劑培養基的發酵罐中，複合菌劑培養 基pH6. 0 8. 0，接種量為1 5%，30°C下培養4 7天，使發酵液中菌數達到5 10 X IO8 個/mL，即得到所述微生物複合菌劑。3.根據權利要求2所述的水產品複合微生物添加劑的製備方法，其特徵在於所述液 體培養基配方為1.產阮假絲酵母採用的液體培養基配方為稀釋去除啤酒花的麥芽汁至濃度為 12Brix,瓊脂15 g，高壓滅菌30分鐘；2.沼澤紅假單胞菌採用的液體培養基配方為氯化銨1.5g，磷酸二氫鉀1. 5g，七水硫 酸鎂0. 8g，氯化鈉4. Og,碳酸氫鈉1. 8g，氯化鈣0. 01g, VB0. Ig,酵母粉1. 0 g，乙酸鈉4. Og, 微量元素1. 0mL/L包括(六水氯化鐵5. Og,七水硫酸鋅1. Og,五水硫酸銅0. 05g,六水氯化鈷 0. 5g，硼酸1. Og,四水氯化錳0. 5g)，添加乙酸調節pH，水適量；3.嗜酸乳桿菌、乳酸鏈球菌採用的液體培養基配方為乳酪蛋白腖10g、蛋白腖10g、 酵母膏5g、葡萄糖5g、吐溫80 lg、K2HP042g、醋酸鈉5g、檸檬酸二胺2g、MgSO4 · 7H20 0. 2g、MnSO4 · H2O 0. 05g、7jC 1000ml ；4.枯草芽孢桿菌採用的液體培養基配方為牛肉膏5g、蛋白腖10g、Nacl3g、pH 7.0。4.根據權利要求2所述的一種水產品複合微生物添加劑的製備方法，其特徵在於 所述複合菌劑培養基配方為蜂蜜1 8g/100mL、蔗糖5 10g/100mL、蛋白腖0. 1 0. 8g/100mL、KH2PO4 0. 2 0. 5g/100mL、K2HPO4 0. 5 3g/100mL、MgSO4 · 7Η20 0· 5 3g/100mL、Nacl 0. 5 10g/100mL 其餘為蒸餾水。
5.根據權利要求1所述的一種水產品複合微生物添加劑的應用，其特徵在於所述水 產品複合微生物添加劑在水產品養殖中作為飼料添加劑。
全文摘要
一種水產品複合微生物添加劑的製備方法與應用，屬於微生物調節劑在水產養殖業應用的生物材料技術領域。採用產朊假絲酵母10~40%，沼澤紅假單胞菌15~50%，嗜酸乳桿菌5~25%，乳酸鏈球菌5~30%，枯草芽孢桿菌10~35%。以上菌種分別經過一級菌種培養，二、三級發酵，使發酵液中菌數達到5～10×108個/mL，即得水產品複合微生物添加劑。本產品經長期實地驗證，配方合理，功效穩定，能夠提高幼體成活率，促進水產動物生長，提高飼料轉化率，防病抗病，提高產品產量，改善產品品質。
文檔編號C12R1/125GK101948757SQ201010296820
公開日2011年1月19日 申請日期2010年9月30日 優先權日2010年9月30日
發明者劉美娜, 崔國臣 申請人:大連三科生物工程有限公司