一種楤木的種苗快速繁殖的方法
2023-05-14 08:17:01 1
一種楤木的種苗快速繁殖的方法
【專利摘要】本發明公開了一種楤木的種苗快速繁殖的方法,涉及一種生物技術應用領域,具體方法如下:第一步是取楤木的頂端休眠芽為外植體,先用自來水衝洗乾淨,再用70%酒精浸泡,再放入0.1%升汞的溶液中消毒,最後用無菌水衝洗乾淨;第二步是將消毒好的外植體切成0.5~1cm的小塊,接種在準備好的誘導培養基上培養,培養條件為:光強1500~20001x,溫度(25±1℃),12h光照,待分化出不定芽;第三步是將誘導出的不定芽轉接到繼代培養基上進行增殖培養,使芽苗長得更加健壯;第四步是將分化的不定芽接種到生根培養基中,待有不定根生出即可準備移栽,移栽後成活率可達80%以上。本發明方法簡單易行,操作簡單,且繁殖速度快,適合工廠化育苗。
【專利說明】一種鍃木的種苗快速繁殖的方法
【技術領域】
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[0001]本發明涉及一種生物技術應用領域,是一種利用植物組織離體培養技術,用於一種惚木的種苗快速繁殖的方法。
【背景技術】
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[0002]惚木別鳥不宿、百鳥不棲、刺桐,為五加科落葉灌木獲小喬木。小枝疏生細刺,被黃絨毛。2?3回羽狀複葉互生;羽片有小葉5?13枚,基部有小葉一對;小葉片卵形、寬卵形或卵狀橢圓形,先端漸尖或短漸尖,基部圓形或近心形緣具細鋸齒。傘形花序再組成頂生大型圓錐花序,主軸長30cm以上,一級分枝在主軸上總狀排列,花梗明顯,花白色;果球形,具5稜,熟時黑色或紫黑色。花期6-8月,果期9-10月。產於全國各地,生於向陽坡、溝谷中、林緣或路邊曠地,灌叢中。我國華北、華中、華東、華南、西南等地均有分布。惚木具有食用和藥用價值,富含蛋白質、脂肪、還原糖、維生素及15種胺基酸和多種礦物質;有滋陰潤燥、補中益氣、祛風溼、散瘀結、消腫毒、健胃、活血等功效。
[0003]近年來,受生態環境的變化和市場需求增加等因素的影響,現有的野生惚木的資源存量正在迅速減少,已引起人們的普遍關注。惚木自然繁殖率較低,再生能力差。惚木雖能開花結籽,可以進行有性繁殖,但種子繁殖變異率較大,商品性降低,且繁殖率很低。生產上主要採用無性繁殖,枝條或根段進行扦插繁殖,但往往造成資源的浪費與植被的破壞,且扦插育苗成活率低,成本高。
【發明內容】
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[0004]本發明的目的就是針對現有技術的不足,而提供一種惚木的種苗快速繁殖的方法。本發明具有簡單易行,操作簡單,且繁殖速度快,適合工廠化育苗的優點。
[0005]本發明的技術解決措施如下:
[0006]一種惚木的種苗快速繁殖的方法,其特徵在於,包括如下步驟:(I)小塊莖尖的備用;(2)外植體誘導和繼代培養;(3)芽苗接種生根培養基。
[0007]所述小塊莖尖備用的方法為:於2?3月取惚木的頂端的休眠芽為外植體,先將嫩枝芽水洗乾淨後,先用70%乙醇浸泡30s?Imin,再用0.1 %升萊消毒5?1min,用無菌水衝洗4?5次,用無菌幹濾紙吸去殘留水分,在超淨工作檯上用無菌解剖刀剝去莖尖外面的芽鱗片,並切成0.5?Icm的小塊備用。
[0008]所述外植體誘導和繼代培養的方法為:將上述的外植體接種到附加(1.0?2.0)mg/L 6-BA、(0.01 ?0.l)mg/L NAA,O ?0.5mg/L IBA,O ?0.5mg/L 2-4D 的 MS 培養基上進行誘導、分化和繼代培養基,四周左右就可以形成不定芽,待苗長到2?3cm時,將苗分成單株,轉接到培增殖培養基上;蔗糖的質量分數為30克每升,瓊脂的質量分數為7克每升,pH 為 5.8。
[0009]所述芽苗接種生根培養基的方法為:將誘導出的芽苗接種到附加(O?0.5)mg/L6-BA、(O ?0.5) mg/L IBA、(O ?0.5) mg/L NAA、(O ?0.5)mg/LIBM、(O ?3g/L)活性炭的1/2MS的生根培養基上,一個月可分化出I?3條粗壯的不定根,即可移栽。
[0010]所述培養基的培養條件為:光強1500?20001x,溫度(25±1°C ),12h光照;各階段的培養基附加物質,不同濃度的6-BA、IBA、NAA、2-4D、IBM組合,形成一套快繁體系,同時在生根培養基中加入了 IBM和活性炭物質。
【具體實施方式】
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[0011]以下結合具體實施例來對本發明作進一步的描述,但本發明所要求保護的範圍並不局限於實施方式所涉及之範圍。
[0012]實例1:
[0013]將惚木的休眠芽水洗乾淨後,先用70%乙醇浸泡lmin,再用0.1%升汞消毒5min,用無菌水衝淨外植體表面,在超淨工作檯上用無菌解剖刀將莖尖切成厚度0.5?Icm左右的小塊,置於培養基MS+1.5mg/L 6-BA+0.01mg/L NAA上進行培養,再將誘導出的不定芽接種在1/2MS+0.5mg/L IBA+0.01mg/L NAA的生根培養基上,經過4周左右,會長出I?3條左右的新根,即可移栽。
[0014]實例2:
[0015]將惚木的嫩枝芽水洗乾淨後,先用70%乙醇浸泡lmin,再用0.1%升汞消毒8min,用無菌水衝淨外植體表面,在超淨工作檯上用無菌解剖刀將莖尖切成厚度0.5?Icm左右的小塊,置於培養基MS+1.0mg/L 6-BA+0.2mg/L IBA上進行培養,再將誘導的不定芽接種在1/2MS+0.5mg/L IBM+0.2mg/L NAA+2g/L活性炭的生根培養基上進行生根,經過4周左右,幼苗會長出I?3條左右的新根,即可移栽。
[0016]實例3:
[0017]將惚木的嫩芽水洗乾淨後,先用70%乙醇浸泡30s,再用0.1%升萊消毒1min,用無菌水衝淨外植體表面,在超淨工作檯上用無菌解剖刀將莖尖切成厚度0.5?Icm左右的小塊,置於培養基MS+2.0mg/L6-BA+0.5mg/L 2-4D上進行培養,再將誘導的不定芽接種在1/2MS+0.2mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA的生根培養基上進行生根,經過一個月左右,幼苗會長出I?3條左右的新根,即可移栽。
[0018]實例4:
[0019]將惚木的嫩芽水洗乾淨後,先用70%乙醇浸泡30s,再用0.1%升萊消毒7min,用無菌水衝淨外植體表面,在超淨工作檯上用無菌解剖刀將莖尖切成厚度0.5?Icm左右的小塊,置於培養基MS+2.0mg/L6-BA+0.5mg/L IBA+0.2mg/L 2_4D上進行培養,再將誘導的不定芽接種在1/2MS+0.5mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA的生根培養基上進行生根,經過一個月左右,幼苗會長出I?3條左右的新根,即可移栽。
【權利要求】
1.一種惚木的種苗快速繁殖的方法,其特徵在於,包括如下步驟:(1)小塊莖尖的備用;(2)外植體誘導和繼代培養;(3)芽苗接種生根培養基。
2.根據權利要求1所述的一種惚木的種苗快速繁殖的方法,其特徵在於:所述小塊莖尖備用的方法為:於2?3月取惚木的頂端的休眠芽為外植體,先將嫩枝芽水洗乾淨後,先用70%乙醇浸泡30s?Imin,再用0.1 %升萊消毒5?1min,用無菌水衝洗4?5次,用無菌幹濾紙吸去殘留水分,在超淨工作檯上用無菌解剖刀剝去莖尖外面的芽鱗片,並切成0.5?Icm的小塊備用。
3.根據權利要求1所述的一種惚木的種苗快速繁殖的方法,其特徵在於:所述外植體誘導和繼代培養的方法為:將上述的外植體接種到附加(1.0?2.0)mg/L 6-BA、(0.01?0.l)mg/L NAA,O?0.5mg/L IBA,O?0.5mg/L 2-4D的MS培養基上進行誘導、分化和繼代培養基,四周左右就可以形成不定芽,待苗長到2?3cm時,將苗分成單株,轉接到培增殖培養基上;蔗糖的質量分數為30克每升,瓊脂的質量分數為7克每升,pH為5.8。
4.根據權利要求1所述的一種惚木的種苗快速繁殖的方法,其特徵在於:所述芽苗接種生根培養基的方法為:將誘導出的芽苗接種到附加(O?0.5)mg/L6-BA、(O?0.5)mg/LIBA、(O ?0.5)mg/L NAA、(O ?0.5)mg/L IBM、(O ?3g/L)活性炭的 1/2MS 的生根培養基上,一個月可分化出I?3條粗壯的不定根,即可移栽。
5.根據權利要求3或4所述的一種惚木的種苗快速繁殖的方法,其特徵在於:所述培養基的培養條件為:光強1500?20001x,溫度(25±1°C ),12h光照;各階段的培養基附加物質,不同濃度的6-BA、IBA、NAA、2-4D、IBM組合,形成一套快繁體系,同時在生根培養基中加入了 IBM和活性炭物質。
【文檔編號】A01H4/00GK104255498SQ201410505669
【公開日】2015年1月7日 申請日期:2014年9月28日 優先權日:2014年9月28日
【發明者】陳麗萍, 魚南洋, 張志友, 韓明麗, 趙根, 李豔冬, 譚宏, 胡亮 申請人:湖州市農業科學研究院