去乙醯基華蟾毒精作為ugt1a4催化o-葡萄糖醛酸結合反應的特異性探針底物的應用的製作方法

2023-05-25 16:17:31

去乙醯基華蟾毒精作為ugt1a4催化o-葡萄糖醛酸結合反應的特異性探針底物的應用的製作方法
【專利摘要】本發明公開一種去乙醯基華蟾毒精作為UGT1A4催化O-葡萄糖醛酸結合反應的特異性探針底物的應用，可用於各種來源的UGT1A4單酶催化O-葡萄糖醛酸結合反應的活性標定，以及定量測定各種哺乳動物組織器官來源的微粒體、S-9 等製備物中UGT1A4催化O-葡萄糖醛酸結合反應的活性，可應用於預測和評價以UGT1A4催化O-葡萄糖醛酸結合反應為主要途徑的化合物在特定機體的代謝清除率，以及UGT1A4介導的O-葡萄糖醛酸結合反應誘發的藥物-藥物相互作用研究，具有特異性更強、代謝產物單一、毒副作用低、廉價易得等優點。
【專利說明】去乙醯基華蟾毒精作為UGT1A4催化O-葡萄糖醛酸結合反 應的特異性探針底物的應用

【技術領域】
[0001] 本發明涉及一種去乙醯基華蟾毒精的新用途，尤其是去乙醯基華蟾毒精作為 UGT1A4催化0-葡萄糖醛酸結合反應的特異性探針底物的應用。

【背景技術】
[0002] 尿苷二磷酸葡萄糖酸酸轉移酶（UDP-glucuronosyltransferases，UGT)是一類II 相代謝酶，催化底物與內源性的輔因子尿苷二磷酸葡萄糖醛酸（UDPGA)發生結合反應，使其 水溶性增加而利於從體內清除。UGT主要表達於肝、腎、腸等機體重要的代謝和排洩器官， 不僅參與膽紅素、留體激素、甲狀腺激素、膽汁酸和脂溶性維生素等內源性物質的代謝，還 在阿片類藥物、鎮痛藥、非留體抗炎藥和抗驚厥藥等藥物的代謝過程中發揮重要作用。當 UGT的功能由於疾病、基因多態性或競爭性抑制等因素發生異常時，會產生內源性物質代謝 紊亂以及藥物處置的異常。特別是一些安全範圍和治療窗比較窄的藥物，往往會產生嚴重 的不良反應。因此，掌握UGT的代謝活性以及藥物經UGT介導的代謝屬性，對於藥物在臨 床的個體化安全應用具有重要意義。然而，UGT超家族包含多個成員（如UGT1A1、UGT1A3、 UGT1A4、UGT1A6、UGT1A7、UGT2B4、UGT2B7及UGT2B15等），各亞型的組織分布、表達水平和代 謝活性存在較大差異，底物範圍雖有重疊卻又不盡相同，這就對UGT酶活和藥物代謝的定 量評價增加了難度。
[0003] UGT1A4是UGT超家族的一員，可以催化UDPGA結合到底物的氮位，如賽庚啶、丙 咪嗪和奧氮平等藥物，也可催化某些藥物的〇-葡萄糖醛酸化反應，如雙氫睪酮，反式雄酮、 10-羥基喜樹鹼等。UGT1A4的活性直接影響這些藥物的體內代謝，對藥物的臨床安全應用 具有非常重要的意義，因此，FDA建議在新藥研發過程中評價UGT1A4對藥物的代謝潛能。目 前，已報導的UGT1A4的探針底物有三氟拉嗪（TFP)，應用LC-MS/MS檢測反應體系中底物剩 餘量或產物生成量，以單位時間內的底物消除量或其葡萄糖醛酸產物的生成量來標定體系 中UGT1A4的活性。但是，TFP只是UGT1A4催化N-葡萄糖醛酸化的探針底物，並不能作為 UGT1A4催化0-葡萄糖醛酸化的探針底物，因而不能全面評價UGT1A4催化葡萄糖醛酸化代 謝的活性。
[0004] 去乙醯基華蟾毒精是中藥蟾酥中重要的活性成分，是A環3位具有β-羥基的蟾 蜍甾烯類化合物，結構式如下：

【權利要求】
1. 一種去乙醯基華蟾毒精作為UGT1A4催化0-葡萄糖醛酸結合反應的特異性探針底物 的應用。
【文檔編號】C12Q1/48GK104480193SQ201410700247
【公開日】2015年4月1日 申請日期:2014年11月28日 優先權日:2014年11月28日
【發明者】馬驍馳, 霍曉奎, 王超, 田象閣, 姜麗, 王長遠, 張寶璟, 黃珊珊, 鄧卅 申請人:大連醫科大學