一種使用拭子採集體液檢測間日瘧的檢測試劑盒的製作方法
2023-09-15 19:54:40 1
專利名稱：一種使用拭子採集體液檢測間日瘧的檢測試劑盒的製作方法
技術領域：
本實用新型是涉及生物應用技術領域，特別是涉及一種使用拭子採集體液檢測間日瘧的檢測試劑盒。
背景技術：
瘧疾(malaria)是因瘧原蟲寄生人體組織而引起的寄生原蟲病。臨床上以間歇性發冷、發熱、肝脾腫大為主要特徵。主要包括間日瘧、惡性瘧、三日瘧和卵形瘧。間日瘧是瘧疾的一種類型，為間日痕原蟲(Plasmodium vivax)所引起,其特點為每隔48小時反覆發作一次，主要表現為先冷後熱，出汗後恢復正常，兩次發作期間表現正常。其傳播媒介為中華按蚊。目前對間日瘧檢測的主要方法是對血液樣本進行採集檢測間日瘧原蟲，在膠體金的檢測方法中，有檢測間日瘧和惡性瘧抗原的報導，但使用口腔液拭子進行IgG檢測尚未有相關報導。和傳統試劑相比，使用口腔液拭子進行IgG檢測具有採樣容易，減少患者的痛苦，減少檢測人員的工作量的優點。
發明內容本實用新型的目的是提供一種使用拭子採集體液檢測間日瘧的檢測試劑盒，具有採樣容易、操作簡便、反應快速、敏感性高、特異性強、適合現場檢測等優點。
本實用新型提供一種使用拭子採集體液檢測間日瘧的檢測試劑盒，其特徵在於塑料支撐板(7) —端連接上樣墊(1)，上樣墊(I)的一端緊密壓接含有標記間日瘧特異性的抗原的膠體金墊(2)，膠體金墊(2) —端緊密壓接硝酸纖維素(NC)膜(3)，硝酸纖維素膜包被有相互分離的檢測線T線(5)和質控C線(6)，檢測線T (5)為包被在NC膜上的抗人IgG抗體，質控(C)線(6)為包被在NC膜上的抗間日瘧特異性抗原的抗體，硝酸纖維素膜的另一端連接吸樣墊(4)形成試紙。所述的一種使用拭子採集體液檢測間日瘧的檢測試劑盒，其特徵在於其抗體的包被方法為:以0.0lM pH7.2磷酸鹽緩衝液(PBS)將抗人IgG抗體配製成5mg/ml的溶液，用噴膜儀在NC膜下部以1-1.5ul/cm的參數進行劃線，包被T線，同時在NC膜上部包被間日瘧特異性抗原的抗體作為C線，劃線後將NC膜在乾燥間，溫度20-25 V，溼度小於30 %，乾燥2-5小時。將標記好間日瘧特異性抗原的膠體金顆粒製成膠體金墊，與包被抗體的硝酸纖維素膜和其他輔料製備成試紙條。所述的一種使用拭子採集體液檢測間日瘧的檢測試劑盒，其特徵在於其檢測方法為:用口腔拭子尼龍墊端從嘴的上牙齦一角開始，從左慢慢壓拭到右，用時5到6秒，然後，從右慢慢壓拭到左，用時5到6秒，反覆3次，然後反轉口腔拭子，從嘴的下牙齦一角開始，重複上述過程，壓拭力度，以受檢者有酸脹感，且無明顯不適為準；壓拭後，立即將口腔拭子浸入樣本緩衝液中，先後讓拭子的兩面緊貼試管壁，上下刮擦6-8次，管內液體即為口腔液樣本，將試紙條平放，在上樣墊上加入IOOul樣品，使膠體金溶解並在NC膜上層析，然後用肉眼直接觀察在15分鐘內C、T線的出現情況，並判定檢測結果。本實用新型的有益效果是:提供一種使用拭子採集體液檢測間日瘧的檢測試劑盒。和傳統試劑相比，使用口腔液拭子進行IgG檢測具有採樣容易，減少患者的痛苦，減少檢測人員的工作量的優點。
:圖1使用拭子採集體液檢測間日瘧的檢測試劑盒試紙結構示意圖。附圖符號說明:1:上樣墊；2:膠體金墊；3:NC膜；4:吸樣墊5:檢測線Tl ；6:質控(C)線；7:塑料支撐板。圖2採集口腔液拭子結構示意圖附圖符號說明:1:尼龍墊端；2:手持端。
具體實施方式
實施例:製備間日瘧的檢測試劑盒試紙將間日瘧特異性抗原使用膠體金標記，製成膠體金墊，以0.0lM pH7.2磷酸鹽緩衝液(PBS)將抗人IgG抗體配製成5mg/ml的溶液，用噴膜儀在NC膜下部以1_1.5ul/cm的參數進行劃線，包被T線，同時在NC膜上部包被間日瘧特異性抗原抗體作為C線，劃線後將NC膜在乾燥間，溫度20-25°C，溼度小於30%，乾燥2_5小時。將膠體金墊和包被好的NC膜和其他輔料裝配成試紙條。 將已確診間日瘧IgG抗體陽性的病人作為待檢者，將50例已確診間日瘧IgG抗體陰性的健康人作為對照組待檢者。用口腔拭子尼龍墊端從嘴的上牙齦一角開始，從左慢慢壓拭到右，用時5到6秒，然後，從右慢慢壓拭到左，用時5到6秒，反覆3次，然後反轉口腔拭子，從嘴的下牙齦一角開始，重複上述過程，壓拭力度，以受檢者有酸脹感，且無明顯不適為準；壓拭後，立即將口腔拭子浸入樣本緩衝液中，先後讓拭子的兩面緊貼試管壁，上下刮擦6-8次，管內液體即為口腔液樣本，將試紙條平放，在上樣墊上加入IOOul樣品，使膠體金溶解並在NC膜上層析，然後用肉眼直接觀察在15分鐘內C、T線的出現情況，並判定檢測結果O檢測結果的解釋:如果對照區內的對照線沒有出現，檢測結果無效，如果僅在對照區出現一條線對照線，結果為陰性。如果檢測線和對照線都出現，即試紙上出現兩條線，則檢測結果為陽性。通過臨床血清檢測，IgG為陽性的樣本和IgG為陰性的樣本，本試劑檢測和臨床診斷結果完全一致。臨床檢測表明本試劑的性能和現有診斷手段相比無顯著性差異，適合用於臨床檢測。
權利要求1.一種使用拭子採集體液檢測間日瘧的檢測試劑盒，其特徵在於塑料支撐板(7) —端連接上樣墊(1)，上樣墊(I)的一端緊密壓接含有標記間日瘧特異性抗原的膠體金墊(2)，膠體金墊(2) —端緊密壓接硝酸纖維素膜(3)，硝酸纖維素膜包被有相互分離的檢測線T線(5)和質控C線(6)，檢 測線T(5)為包被在硝酸纖維素膜上的抗人IgG抗體，質控(C)線(6)為包被在硝酸纖維素膜上的抗間日瘧特異性抗原的抗體，硝酸纖維素膜的另一端連接吸樣墊⑷形成試紙。
專利摘要本實用新型涉及生物應用技術領域，特別涉及一種使用拭子採集體液檢測間日瘧的檢測試劑盒，採用拭子採集口腔液，用膠體金標記間日瘧重組抗原，包被抗人IgG抗體實現對口腔液中抗間日瘧IgG抗體的檢測。具有操作簡便、反應快速、敏感性高、特異性強、適合現場檢測和經濟實用等優點。
文檔編號G01N33/569GK203101393SQ20122059677
公開日2013年7月31日 申請日期2012年11月12日 優先權日2012年11月12日
發明者祁軍, 劉寅, 於智睿, 劉振宇, 柴宏森, 左鋒, 於佳 申請人:中華人民共和國天津出入境檢驗檢疫局