一種燕麥再生體系構建方法
2023-09-17 05:35:40
專利名稱:一種燕麥再生體系構建方法
一種燕麥再生體系構建方法技術領域
本發明屬於燕麥再生體系構建方法。
背景技術:
植物再生體系的構建是利用植物細胞全能性,在無菌條件下利用人工培養基對植物組織的培養,是珍稀物種保留、繁殖的重要途徑,也是工廠化生產脫毒苗的基礎,更是基因功能驗證的必要環節。
燕麥現在的再生體系構建方法主要要有愈傷組織培養、根尖、花葯培養等。愈傷組織培養的主要外植體為未成熟胚與成熟胚。未成熟胚培養與成熟胚培養出愈率高,但其與花葯培養一樣存在時空性,必須等植物性細母胞成熟時或幼胚開始分化才可取材。而且禾本科植物根尖培養與花葯培養也要誘導產生愈傷組織,經愈傷組織分化後成苗。而來源於不同植物或同一種植物不同部位的愈傷組織,在顏色、結構、生長習性等都可能存在差異, 因此需要根據不同的實驗目的控制愈傷組織的狀態。這對外植體、實驗條件如溫度、光照、 PH值、培養基的配製等的要求嚴格,每種培養體系的構建都需要摸索很長時間,耗費大量的人力、物力。且在愈傷組織培養過程中,因細胞的分裂旺盛極容易產生變易,而造成變易發生的因素很多,如光照、溫度、藥品、紫外線等,這非常不利於基因功能的驗證,也不·利於植物遺傳穩定性的保持。發明內容
本發明以優化燕麥再生體系為目的;以保持遺傳穩定性為核心,從提高組織培養成苗率出發,解決上述現行培養方式的弊端,提供一種燕麥再生體系的構建方法。
為解決上述技術問題,本發明的技術方案是一種燕麥再生體系構建方法,所述燕麥再生體系構建方法採用葉基段培養,不經過愈傷組織直接分化成苗,包括如下步驟
SI、將成熟燕麥種子滅菌後,用MS基本培養基培養4-7天;
S2、當燕麥葉長至3_5cm時,取葉基段用MSB培養基培養至成苗。
優選的,所述葉基段培養是種子萌發後取其基段培養,直接分化,向下生根,向上長葉。
優選的,所述MSB培養基為MS與B5相結合,加上IAA與水解酪蛋白。
採用了上述技術方案,本發明的有益效果為本發明因採用葉基段培養,不經過愈傷階段,不需要繼代培養,避免了愈傷組織培養過程中可能產生的基因突變;不需要監控愈傷組織的狀態,不必摸索繼代培養條件,減少了實驗環節,節省人力、物力,大幅度的降低生產成本,提高產出效益。經過實驗測試,本發明的再生體系方法成苗率達98%以上,與現行愈傷組織培養方法比較,節省時間3至6個月,每升培養基成本降低O. 11到4. 68元。
圖I為種子發芽的示意圖2為葉基段培養的示意圖3為分化成苗的示意圖;具體實施方式
下面結合施例對本發明進一步說明。
本發明的實施條件無菌條件,培養基室,溫度、光照、溼度可控的培養室,操淨工作檯。
本發明的實質是葉基段不經過愈傷組織而是直接產生不定芽,萌發成苗。
一種燕麥再生體系構建方法,所述燕麥再生體系構建方法採用葉基段培養,不經過愈傷組織直接分化成苗,包括如下步驟
SI、將成熟燕麥種子滅菌後,用MS基本培養基培養4-7天;
S2、當燕麥葉長至3_5cm時,取葉基段用MSB培養基培養至成苗。
葉基段培養是種子萌發後取其基段培養,直接分化,向下生根,向上長葉。
MSB培養基為MS與B5相結合,加上IAA與水解酪蛋白。
本發明不局限於上述具體的實施方式,本領域的普通技術人員從上述構思出發, 不經過創造性的勞動,所作出的種種變換,均落在本發明的保護範圍之內。
權利要求
1.一種燕麥再生體系構建方法,其特徵在於,所述燕麥再生體系構建方法米用葉基段培養,不經過愈傷組織直接分化成苗,包括如下步驟 51、將成熟燕麥種子滅菌後,用MS基本培養基培養4-7天; 52、當燕麥葉長至3-5cm時,取葉基段用MSB培養基培養至成苗。
2.如權利要求I所述的一種燕麥再生體系構建方法,其特徵在於,所述葉基段培養是種子萌發後取其基段培養,直接分化,向下生根,向上長葉。
3.如權利如權利要求I或2所述的一種燕麥再生體系構建方法,其特徵在於,所述MSB培養基為MS與B5相結合,加上IAA與水解酪蛋白。
全文摘要
本發明公開了一種燕麥再生體系構建方法,所述燕麥再生體系構建方法採用葉基段培養,不經過愈傷組織直接分化成苗,包括如下步驟S1、將成熟燕麥種子滅菌後,用MS基本培養基培養4-7天;S2、當燕麥葉長至3-5cm時,取葉基段用MSB培養基培養至成苗。本發明以優化燕麥再生體系為目的;以保持遺傳穩定性為核心,從提高組織培養成苗率出發,解決上述現行培養方式的弊端,提供一種燕麥再生體系的構建方法。
文檔編號A01H4/00GK102972300SQ20121052905
公開日2013年3月20日 申請日期2012年12月2日 優先權日2012年12月2日
發明者劉景輝, 高彩婷, 寶力高, 趙寶平, 李倩 申請人:內蒙古農業大學