一種由鎖陽致腎陽虛證動物模型的製作方法
2023-10-08 16:40:49 1
專利名稱：一種由鎖陽致腎陽虛證動物模型的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種動物模型的建立，尤其是一種由鎖陽致腎陽虛證動物模型的製作方法。
背景技術：
動物模型是進行中醫病證研究所採用的常用實驗手段，「腎陽虛」證是中醫常見證候，但從實驗動物模型模擬腎陽虛證臨床表現方面還沒有有效的實驗動物模型製作方法， 這大大影響相關實驗結果的準確性。
發明內容
本發明的目的就是針對模擬腎陽虛證臨床表現方面的實驗動物模型的製作，提供一種由鎖陽致腎陽虛證動物模型的製作方法。本發明採用的技術方案是一種由鎖陽致腎陽虛證動物模型的製作方法，其特徵是，選擇昆明種小鼠210隻，雄性，體重18 22g，將以上小鼠分成5組，分別為分別為正常對照組1 肌注生理鹽水+灌水，肌注生理鹽水+灌鎖陽高劑量造模組2，肌注生理鹽水+中劑量造模組3，肌注生理鹽水+低劑量造模組4，氫考造模組5 肌注氫考+灌水造模組。所述鎖陽高、中、低造模組按照體表面積比值折算小鼠高、中、低劑量分別為等效劑量的1倍量、5倍量、10倍量，即分別為11. 70g/kg、5. 85g/kg、l. 17g/kg，均按25ml/kg體積灌胃給藥。所述氫考造模組的造模劑量劑量為0. 25-0. 5mg/d/只，用生理鹽水配成不同濃度的混懸液，0. Iml/只/天后肢肌肉注射。所述正常對照組30隻小鼠，鎖陽高、中、低造模組各40隻小鼠，氫考造模組60隻小鼠。本發明的一種由鎖陽致腎陽虛證動物模型的製作方法，具有使實驗結果更加準確的特點。
具體實施例方式本發明的一種由鎖陽致腎陽虛證動物模型的製作方法，選擇昆明種小鼠210隻， 雄性，體重18 22g，將以上小鼠分成五組，分別為正常對照組1 肌注生理鹽水+灌水。肌注生理鹽水+灌鎖陽高劑量造模組2、肌注生理鹽水+中劑量造模組3，肌注生理鹽水+低劑量造模組4。氫考造模組5 肌注氫考+灌水造模組，根據預試驗的情況，分別設置不同的動物數，正常對照組300隻，鎖陽高、中、低造模組各40隻，氫考造模組60隻。按照不同的給藥時間和劑量進行造模。所述鎖陽高、中、低造模組按照體表面積比值折算小鼠高、中、低劑量分別為等效劑量的1倍量、5倍量、10倍量，即分別為11. 70g/kg、5. 85g/kg、l. 17g/kg， 均按25ml/kg體積灌胃給藥。所述氫考造模組的造模劑量劑量為0. 25-0. 5mg/d/只，用生理鹽水配成不同濃度的混懸液，0. Iml/只/天后肢肌肉注射。
確定動物腎陽虛表現的主、次症及積分標準，見表1。觀察各組小鼠的毛色光亮度、精神萎靡程度、肛門便染、少食、怠動、倦縮、畏寒肢冷、死亡情況等症狀，進行積分分級判斷，結果進行組間Raddit分析，對積分值進行組間t檢驗處理，每日定時記錄體重，結果進行組間t檢驗。分別於造模7、10、15天後，取部分小鼠測定體溫，結果進行組間統計學處理。取部分小鼠每天固定時間將小鼠逐只放入小鼠自主活動儀中，自由活動30分鐘以熟悉環境。連續2天。然後繼續造模，末次給藥後1小時，用小鼠自主活動儀記錄2分鐘內小鼠的活動次數，結果進行組間統計學處理。取部分小鼠於末次給藥後1小時，進行低溫負重遊泳實驗。實驗時在小鼠尾部吊約Ig重物，自投入1-4°C的冰水中開始計時，計錄鼻孔沉下水面所需的時間，以此來反映小鼠的低溫耐力。結果進行組間t檢驗。表1.動物腎陽虛證的主、次症判定及積分標準
權利要求
1.一種由鎖陽致腎陽虛證動物模型的製作方法，其特徵在於選擇昆明種小鼠210隻，雄性，體重18 22g，將以上小鼠分成5組，分別為分別為正常對照組1 肌注生理鹽水+灌水， 肌注生理鹽水+灌鎖陽高劑量造模組2，肌注生理鹽水+中劑量造模組3，肌注生理鹽水+低劑量造模組4，氫考造模組5 肌注氫考+灌水造模組。
2.根據權利要求1所述的一種由鎖陽致腎陽虛證動物模型的製作方法，其特徵在於 所述鎖陽高、中、低造模組按照體表面積比值折算小鼠高、中、低劑量分別為等效劑量的1 倍量、5倍量、10倍量，即分別為11. 70g/kg、5. 85g/kg、l. 17g/kg，均按25ml/kg體積灌胃給藥。
3.根據權利要求1所述的一種由鎖陽致腎陽虛證動物模型的製作方法，其特徵在於 所述氫考造模組的造模劑量劑量為0. 25-0. 5mg/d/只，用生理鹽水配成不同濃度的混懸液，0. Iml/只/天后肢肌肉注射。
4.根據權利要求1所述的一種由鎖陽致腎陽虛證動物模型的製作方法，其特徵在於 所述正常對照組30隻小鼠，鎖陽高、中、低造模組各40隻小鼠，氫考造模組60隻小鼠。
全文摘要
本發明公開了一種由鎖陽致腎陽虛證動物模型的製作方法，其特徵是，選擇昆明種小鼠210隻，雄性，體重18～22g，將以上小鼠分成5組，分別為分別為正常對照組、鎖陽高、中、低造模組，氫考造模組，其中鎖陽高、中、低造模組按照體表面積比值折算小鼠高、中、低劑量分別為等效劑量的1倍量、5倍量、10倍量，即分別為11.70g/kg、5.85g/kg、1.17g/kg，均按25ml/kg體積灌胃給藥，氫考造模組的造模劑量劑量為0.25-0.5mg/d/只，用生理鹽水配成不同濃度的混懸液，0.1ml/只/天后肢肌肉注射。
文檔編號A61K49/00GK102166232SQ201110083049
公開日2011年8月31日 申請日期2011年4月2日 優先權日2011年4月2日
發明者呂麗莉, 孫玲, 孫蓉, 徐新剛, 王平, 陸永輝 申請人:山東省中醫藥研究院