不溶性載體粒子比濁免疫測定用試藥的製作方法

2023-12-08 22:17:36

專利名稱：不溶性載體粒子比濁免疫測定用試藥的製作方法
技術領域：
本發明提供含膠乳(latex)等不溶性載體粒子的比濁免疫測定用試藥、用不溶性載體粒子的比濁免疫測定方法和含不溶性載體粒子的比濁免疫測定用試劑盒。更具體來說，提供使吸光度穩定，並且能抑制與反應相關的對測定值有影響的血漿成分的作用的含不溶性載體粒子的比濁免疫測定用試藥、用不溶性載體粒子進行的比濁免疫測定方法和含不溶性載體粒子的比濁免疫測定用試劑盒。
另外，特開平9-318632號公報中，記載了將檢測體和負載有抗原或抗體的膠乳混懸液混合，向該混合液中添加二元醇，抗原抗體反應使膠乳粒子凝集，測定由此引起的吸光度變化量，即使檢測體中含有高濃度的需測定的抗原或抗體時，也無需稀釋檢測體，直接用原液就可測定的膠乳比濁免疫測定方法。
另外，特開平7-301632號公報中，記載了負載有表面有羧基的膠乳粒子和與該粒子共價鍵合的鍵合免疫反應體的微粒子，膠乳粒子有直徑0.1～0.6μm和有8～35平方埃表面羧化的負載微粒子以及含有該微粒子和緩衝液的免疫測定試藥。
如上所述，膠乳經常被用於利用膠乳比濁免疫測定法等免疫凝集反應的測定體系中，膠乳混懸液是指通過向其中混入微量的重金屬離子等使與反應液中共存的血漿成分反應，使其對抗原或抗體的膠乳載體的吸附性發生變化，或者使抗原或抗體從與結合了抗原或抗體的膠乳上解離，生成游離的抗原或抗體，反應時，因使膠乳凝集程度發生變化，出現靈敏度不穩定的問題。另外，對於沒有結合抗原或抗體的膠乳，有表面電荷的羧基或磺酸基會因結合重金屬離子，而出現表面電荷變化，靈敏度不穩定的問題。
本發明提供了與膠乳等不溶性載體粒子凝集反應相關，通過抑制對測定值有影響的血漿成分的作用，使凝集反應穩定化，反應液的吸光度穩定化，能得到更精確的測定結果的不溶性載體粒子比濁免疫測定用試藥、不溶性載體粒子比濁免疫測定用試劑盒和用該試藥或試劑盒的不溶性載體粒子比濁免疫測定方法。
本發明者為解決上述課題進行了深入研究，膠乳凝集反應不穩定化的血漿成分，即對於血漿中存在的微量多價金屬離子，用分子式中含有特定基團的化合物的緩衝液，使膠乳表面的荷電狀態穩定化，防止與膠乳結合的抗原或抗體游離，使膠乳凝集反應穩定化，能夠得到精確的測定結果，從而可以完成本發明。
[化學式2] [化學式3])
另外，本發明中，不溶性載體粒子比濁免疫測定方法(權利要求8)，其特徵在於使用不溶性載體粒子和分子內具有化學式1所示基團的化合物或者其鹽組成的緩衝劑，權利要求8所述的不溶性載體粒子比濁免疫測定方法(權利要求9)，其特徵在於上述化合物使用上述[化學式2]所示的通式[I][式中R1，R2與前述相同]所示的化合物，權利要求9所述的不溶性載體粒子比濁免疫測定方法(權利要求10)，其特徵在於通式[I]所示化合物是用上述[化學式3][式中R1，R2，R3與前述相同]所示的化合物，權利要求10所述的不溶性載體粒子比濁免疫測定方法(權利要求11)，其特徵在於通式[II]所示的化合物為蠶豆嘧啶葡糖苷或者麥黃酮，權利要求8～11的任一項所述的不溶性載體粒子比濁免疫測定方法(權利要求12)，其特徵在於在緩衝劑存在下，抗體或抗原保持在不溶性載體粒子中，然後進行免疫凝集反應，權利要求8～12的任一項所述的不溶性載體粒子比濁免疫測定方法(權利要求13)，其特徵在於抗體或抗原保持在不溶性載體粒子中後，在緩衝劑存在下，進行免疫凝集反應，權利要求8～13的任一項所述的不溶性載體粒子比濁免疫測定方法(權利要求14)，其特徵在於緩衝劑是指緩衝劑濃度5～200mmol/L的緩衝液，權利要求8～14的任一項所述的不溶性載體粒子比濁免疫測定方法(權利要求15)，其特徵在於不溶性載體粒子是指不溶性載體粒子濃度為0.005～5重量％的不溶性載體粒子混懸液，權利要求8～15的任一項所述的不溶性載體粒子比濁免疫測定方法(權利要求16)，其特徵在於不溶性載體粒子為膠乳。
而且，本發明中，不溶性載體粒子比濁免疫測定用試劑盒(權利要求17)，其特徵在於包括有含不溶性載體粒子的混懸液、分子內具有上述[化學式1]所示基團的化合物或者其鹽組成的緩衝劑的緩衝液，權利要求17所述的不溶性載體粒子比濁免疫測定用試劑盒(權利要求18)，其特徵在於上述化合物是用[化學式2]中所示的通式[I][式中R1，R2與前述相同]所示的化合物，權利要求18所述的不溶性載體粒子比濁免疫測定用試劑盒(權利要求19)，其特徵在於上述通式[I]所示化合物為上述[化學式3]中通式[II][式中R1，R2，R3與前述相同]所示的化合物，權利要求19所述的不溶性載體粒子比濁免疫測定用試劑盒(權利要求20)，其特徵在於通式[II]所示的化合物為蠶豆嘧啶葡糖苷或者麥黃酮，權利要求17～20的任一項所述的不溶性載體粒子比濁免疫測定用試劑盒(權利要求21)，其特徵在於含緩衝劑的緩衝液是指緩衝劑濃度為5～200mmol/L的緩衝液，權利要求17～21的任一項所述的不溶性載體粒子比濁免疫測定用試劑盒(權利要求22)，其特徵在於含不溶性載體粒子的混懸液是指不溶性載體粒子的濃度為0.005～5重量％的混懸液，權利要求17～22的任一項所述的不溶性載體粒子比濁免疫測定用試劑盒(權利要求23)，其特徵在於不溶性載體粒子為膠乳。最佳實施方式本發明中不溶性載體粒子比濁免疫測定用試藥若是含有不溶性載體粒子、分子內含有[化學式4]所示基團的化合物或其鹽形成的緩衝劑的不溶性載體粒子比濁免疫測定用試藥，則沒有特別限制。另外，本發明中不溶性載體粒子比濁免疫測定方法若是用含有不溶性載體粒子、分子內含有[化學式4]所示基團的化合物或其鹽形成的緩衝劑的不溶性載體粒子比濁免疫測定方法，則沒有特別限制。這裡不溶性載體粒子比濁免疫測定方法是指用不溶性載體粒子進行免疫凝集反應，測定反應後的濃度，對檢測體中的抗原或抗體進行定量的方法。而且，本發明中不溶性載體粒子比濁免疫測定試劑盒若是含有不溶性載體粒子的混懸液，分子內含有[化學式4]所示基團的化合物或其鹽形成的緩衝劑的緩衝液的不溶性載體粒子比濁免疫測定用試劑盒，則沒有特別限制。[化學式4] 上述作為緩衝劑的化合物是指，能用下述通式[I]表示的化合物，通式[I]中的R1，R2相同或不同均可，可以列舉出氫原子、烷基、羥烷基、二(羥烷基)烷基、三(羥烷基)烷基、羧烷基、二(羧烷基)烷基、三(羧烷基)烷基、取代或無取代氨烷基、取代或無取代氨羰基烷基、取代或無取代烷氧基烷基、硫代烷基、二(硫代烷基)烷基、三(硫代烷基)烷基、硫代-羥基-烷基、二(硫代-羥基-烷基)烷基、三(硫代-羥基-烷基)烷基等。
上述烷基、羥烷基、二(羥烷基)烷基、三(羥烷基)烷基、羧烷基、二(羧烷基)烷基、三(羧烷基)烷基、取代或無取代氨烷基、取代或無取代氨羰基烷基、取代或無取代烷氧基烷基、硫代烷基、二(硫代烷基)烷基、三(硫代烷基)烷基、硫代-羥基-烷基、二(硫代-羥基-烷基)烷基和三(硫代-羥基-烷基)烷基中的烷基可以列舉出直鏈或支鏈的碳原子數在1～6的烷基，該直鏈或支鏈的碳數為1～6的烷基具體可列舉出甲基、乙基、丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、己基等。
上述的取代氨烷基及取代氨羰基烷基中的取代基團可以列舉出烷基、羥烷基、羧烷基、硫代烷基、硫代-羥基-烷基、含氮原子的雜環基。該烷基、羥烷基、羧烷基、硫代烷基、硫代-羥基-烷基中的烷基可以列舉出前述的直鏈或支鏈的碳原子數目在1～6的烷基。上述的含氮原子的雜環基可列舉出哌嗪基、嗎啉基、哌啶基等。
上述的取代烷氧烷基中的取代基團可列舉出羥基、羧基、磺酸基等。
另外，通式[I]中的R1、R2和氮原子形成環狀結構，可列舉出取代或無取代的哌嗪基、取代或無取代的嗎啉基或者取代或無取代的哌啶基，該取代的哌嗪基、取代的嗎啉基及取代的哌啶基中的取代基團，可列舉出烷基、羥烷基、二(羥烷基)烷基、三(羥烷基)烷基、羧烷基、二(羧烷基)烷基、三(羧烷基)烷基、取代或無取代氨烷基、取代或無取代氨羰基烷基、取代或無取代烷氧基烷基、硫代烷基、二(硫代烷基)烷基、三(硫代烷基)烷基、硫代-羥基-烷基、二(硫代-羥基-烷基)烷基、三(硫代-羥基-烷基)烷基等。
上述的烷基、羥烷基、二(羥烷基)烷基、三(羥烷基)烷基、羧烷基、二(羧烷基)烷基、三(羧烷基)烷基、取代或無取代氨烷基、取代或無取代氨羰基烷基、取代或無取代烷氧基烷基、硫代烷基、二(硫代烷基)烷基、三(硫代烷基)烷基、硫代-羥基-烷基、二(硫代-羥基-烷基)烷基和三(硫代-羥基-烷基)烷基中的烷基，可以列舉出前述的直鏈或支鏈的碳數在1～6的烷基。
上述的取代氨烷基及取代氨羰烷基中的取代基可以列舉出，前述取代氨烷基及取代氨羰烷基中的取代基。另外，上述取代烷氧基烷基中的取代基團可以列舉出前述取代烷氧基烷基中的取代基。[化學式5] 上述的羥烷基可列舉出羥甲基、2-羥乙基、2-羥丙基、2-羥丁基、2-羥戊基、2-羥己基等，二(羥烷基)烷基可列舉出二(羥甲基)甲基、二(2-羥乙基)甲基等，三(羥烷基)烷基可列舉出三(羥甲基)甲基、三(2-羥乙基)甲基等，羧烷基可列舉出羧甲基、2-羧乙基等，二(羧烷基)烷基可列舉出二(羧甲基)甲基、二(2-羧乙基)甲基等，三(羧烷基)烷基可列舉出三(羧甲基)甲基、三(2-羧乙基)甲基等。
另外，前述的取代或無取代的氨烷基可列舉出氨甲基、2-氨乙基、N-甲氨甲基、2-(N-甲氨基)乙基等，取代或無取代氨羰基烷基可列舉出氨羰甲基、2-氨羰乙基、N-甲氨羰甲基、2-(N-甲氨羰基)乙基等，取代或無取代烷氧基烷基可列舉出甲氧甲基、乙氧甲基、2-甲氧乙基、(羧甲氧基)甲基、(2-羥乙氧基)甲基等，硫代烷基可列舉出硫代甲基、2-硫代乙基等，二(硫代烷基)烷基可列舉出二(硫代甲基)甲基、二(2-硫代乙基)甲基等，三(硫代烷基)烷基可列舉出三(硫代甲基)甲基、三(2-硫代乙基)甲基等，硫代-羥基-烷基可列舉出2-羥基-3-硫代丙基、3-羥基-4-硫代丙基等，二(硫代-羥基-烷基)可列舉出，二(2-羥基-3-硫代丙基)甲基、二(3-羥基-4-硫代丙基)甲基等，三(硫代-羥基-烷基)可列舉出三(2-羥基-3-硫代丙基)甲基、三(3-羥基-4-硫代丙基)甲基等。
另外，通式[I]所示化合物優選為下述通式[II]所表示的化合物，通式[II]中R1、R2、R3相同或不同均可，可列舉出氫原子、烷基、羥烷基、二(羥烷基)烷基、三(羥烷基)烷基、羧烷基、二(羧烷基)烷基、三(羧烷基)烷基、取代或無取代氨烷基、取代或無取代氨羰基烷基、取代或無取代烷氧基烷基、硫代烷基、二(硫代烷基)烷基、三(硫代烷基)烷基、硫代-羥基-烷基、二(硫代-羥基-烷基)烷基、三(硫代-羥基-烷基)烷基等。作上述的烷基、羥烷基、二(羥烷基)烷基、三(羥烷基)烷基、羧烷基、二(羧烷基)烷基、三(羧烷基)烷基、取代或無取代氨烷基、取代或無取代氨羰基烷基、取代或無取代烷氧基烷基、硫代烷基、二(硫代烷基)烷基、三(硫代烷基)烷基、硫代-羥基-烷基、二(硫代-羥基-烷基)烷基和三(硫代-羥基-烷基)烷基分別可列舉前述的各基團，其各目的具體例也如前所述。
上述的取代氨烷基、取代氨羰基烷基和取代烷氧基烷基中的取代基分別可列舉前述的各基團，其具體例也如前所述。[化學式6] 本發明中使用的緩衝劑，具體可列舉出已知的優良緩衝劑蠶豆嘧啶葡糖苷[N，N-二(2-羥乙基)甘氨酸]、麥黃酮{N[三(羥甲基)甲基]甘氨酸}外還有ADA[N-(2-乙醯胺)亞氨二乙酸]等，因為其中下述式[III]所表示的蠶豆嘧啶葡糖苷或式[IV]表示的麥黃酮通過不溶性載體粒子凝集反應而穩定，所以是優選。[化學式7] [化學式8] 上述通式[I]，特別是通式[II]表示的化合物形成的緩衝劑，因為使用濃度為5～200mmol/L，通過膠乳等不溶性載體粒子凝集反應而穩定，所以是優選。不溶性載體粒子凝集反應時的pH對反應的穩定化非常重要，緩衝成分的濃度在5mmol/L以上時，保持一定的pH比較容易，在200mmol/L以下時，不溶性載體粒子的粒子之間不進行抗原抗體反應所致非特異凝集反應。調節含有緩衝成分的緩衝液pH值的酸通常除鹽酸、硫酸、硝酸外、還可以使用醋酸等有機酸，鹼通常可以使用氫氧化鈉、氫氧化鋰、氫氧化鉀、氫氧化銨等。本發明中的緩衝劑除上述緩衝成分外，根據需要也可以含有其他成分。其他成分可以列舉出對檢測體中脂質有溶化效果的表面活性劑，特別是含有聚氧乙二醇基團的非離子類表面活性劑或其他陰離子類、陽離子類表面活性劑。
本發明中不溶性載體粒子在與上述本發明的緩衝劑合用時，若抑制對測定值有影響的血漿成分的作用，使凝集反應穩定化，任何物質均可。例如可列舉出特公昭58-11575號公報中所述的公知的有機高分子物質微粒子、無機氧化物微粒子或者用有機物等處理作為核的這些物質表面的微粒子，具體可列舉出如聚苯乙烯、聚氯乙烯、聚丙烯、(甲基)丙烯酸樹脂、聚甲基甲基丙烯酸酯等合成樹脂(膠乳)、硝基纖維素、纖維素、甲基纖維素等纖維素衍生物、金屬、陶瓷、玻璃、矽橡膠等無機物。其中，特別是聚苯乙烯類合成高分子優選含有作為供電子成分的丙烯酸類單體或磺酸的單體等共聚和形成的聚苯乙烯類合成高分子。
如上所述，本發明中上述的不溶性載體優選使用聚苯乙烯膠乳等膠乳粒子。使用聚苯乙烯膠乳等表面疏水性強的膠乳時，能使蛋白質或肽的吸附順利進行。另外，不使用作為乳化劑的表面活性劑，通過皂化自由重合得到的聚苯乙烯膠乳粒子，由於表面的負電荷之間相斥，即使不用表面活性劑，也能夠穩定的存在，所以優選使用。根據需要也可以使用其他各種改性的膠乳(例如羧酸改性膠乳)、磁性膠乳(含磁性粒子的膠乳)等。
進行免疫測定的定量時，通常對不溶性載體粒子大小的均一性，對表面狀態的控制、對內部結構等的選擇等有極高的要求，這樣的適於作為試藥的膠乳等不溶性載體粒子可以在市售品種中選擇得到。對不溶性載體粒子的形狀沒有特別的限制，例如可以為球狀，球狀的粒徑為平均粒徑在0.03～0.8μm，特別優選平均粒徑在0.06～0.2μm。另外，對發明中不溶性載體粒子在反應液中的濃度也沒有特別限制，例如為0.001～10重量％，優選為為0.005～5重量％，更優選為0.01～2重量％的濃度，這樣通過不溶性載體粒子凝集反應使穩定化成為可能。
本發明中不溶性載體粒子比濁免疫測定用試藥可以例示使用調整至5～200mmol/L含蠶豆嘧啶葡糖苷、麥黃酮等的緩衝劑，使用濃度調整至0.005～5重量％的膠乳等不溶性載體粒子，不溶性載體粒子負載的抗原或抗體和含有其他成分的試藥。另外，試藥也可以使用預先負載有抗原或抗體的不溶性載體粒子。
本發明中不溶性載體粒子比濁免疫測定方法可以例舉出在蠶豆嘧啶葡糖苷、麥黃酮等緩衝劑存在條件下，抗原或抗體通過化學鍵或物理吸附等作用負載在不溶性載體粒子上，然後進行免疫凝集反應的方法，負載有抗原或抗體的不溶性載體粒子在緩衝劑存在條件下進行免疫凝集反應的方法，這時，緩衝劑可以使用緩衝液，不溶性載體粒子可以使用不溶性載體粒子混懸液。也可使用不溶性載體粒子混懸在緩衝液中的狀態。免疫凝集反應時、不溶性載體粒子負載抗原或抗體時，優選緩衝劑濃度在5～200mmol/L，不溶性載體粒子濃度在0.005～5重量％。
本發明的不溶性載體粒子比濁免疫測定用試劑盒，可以例舉出蠶豆嘧啶葡糖苷、麥黃酮等緩衝劑濃度為5～200mmol/L的緩衝液，膠乳等不溶性載體粒子濃度為0.005～5重量％的混懸液，不溶性載體粒子負載的抗原或抗體以及含其他任意成分的試藥組成的試劑盒。另外，測定用試劑盒中，可以使用預先負載有抗原或抗體的不溶性載體粒子。
以下，列舉實施例對本發明進行更詳細的說明，本發明的範圍不限於此。實施例中的％除特別說明外均表示重量％。
權利要求
1.不溶性載體粒子比濁免疫測定用試藥，其特徵在於含有不溶性載體粒子、分子內具有化學式1所示基團的化合物或其鹽組成的緩衝劑。化學式1
2.權利要求1所述的不溶性載體粒子比濁免疫測定用試藥，其特徵在於化合物是用通式I所示的化合物，化學式2 式中R1，R2相同或不同均可，表示氫原子、烷基、羥烷基、二(羥烷基)烷基、三(羥烷基)烷基、羧烷基、二(羧烷基)烷基、三(羧烷基)烷基、取代或無取代氨烷基、取代或無取代氨羰基烷基、取代或無取代烷氧基烷基、硫代烷基、二(硫代烷基)烷基、三(硫代烷基)烷基、硫代-羥基-烷基、二(硫代-羥基-烷基)烷基、三(硫代-羥基-烷基)烷基，或者R1，R2和氮原子形成的環狀結構，形成取代或無取代的哌嗪基、取代或無取代的嗎啉基或者取代或無取代的哌啶基的基團。
3.權利要求2所述的不溶性載體粒子比濁免疫測定用試藥，其特徵在於通式I所示化合物為通式II所表示的化合物，化學式3 式中R1，R2，R3相同或不同均可，表示氫原子、烷基、羥烷基、二(羥烷基)烷基、三(羥烷基)烷基、羧烷基、二(羧烷基)烷基、三(羧烷基)烷基、取代或無取代氨烷基、取代或無取代氨羰基烷基、取代或無取代烷氧基烷基、硫代烷基、二(硫代烷基)烷基、三(硫代烷基)烷基、硫代-羥基-烷基、二(硫代-羥基-烷基)烷基或三(硫代-羥基-烷基)烷基。
4.權利要求3所述的不溶性載體粒子比濁免疫測定用試藥，其特徵在於通式II所代表的化合物為蠶豆嘧啶葡糖苷或者麥黃酮。
5.權利要求1～4的任一項所述的不溶性載體粒子比濁免疫測定用試藥，其特徵在於緩衝劑是指濃度調整至5～200mmol/L的形態。
6.權利要求1～5的任一項所述的不溶性載體粒子比濁免疫測定用試藥，其特徵在於不溶性載體粒子是指濃度調整至0.005～5重量％的形態。
7.權利要求1～6的任一項所述的不溶性載體粒子比濁免疫測定用試藥，其特徵在於不溶性載體粒子是膠乳。
8.不溶性載體粒子比濁免疫測定方法，其特徵在於使用不溶性載體粒子、分子內具有化學式4所示基團的化合物或者其鹽組成的緩衝劑。化學式4
9.權利要求8所述的不溶性載體粒子比濁免疫測定方法，其特徵在於化合物為通式I所示的化合物，化學式5 式中R1，R2相同或不同均可，是指氫原子、烷基、羥烷基、二(羥烷基)烷基、三(羥烷基)烷基、羧烷基、二(羧烷基)烷基、三(羧烷基)烷基、取代或無取代氨烷基、取代或無取代氨羰基烷基、取代或無取代烷氧基烷基、硫代烷基、二(硫代烷基)烷基、三(硫代烷基)烷基、硫代-羥基-烷基、二(硫代-羥基-烷基)烷基、三(硫代-羥基-烷基)烷基，或者R1，R2和氮原子形成的環狀結構，形成取代或無取代的哌嗪基、取代或無取代的嗎啉基或者取代或無取代的哌啶基的基團。
10.權利要求9所述的不溶性載體粒子比濁免疫測定方法，其特徵在於通式I所示化合物為通式II所表示的化合物，化學式6 式中R1，R2，R3相同或不同均可，表示氫原子、烷基、羥烷基、二(羥烷基)烷基、三(羥烷基)烷基、羧烷基、二(羧烷基)烷基、三(羧烷基)烷基、取代或無取代氨烷基、取代或無取代氨羰基烷基、取代或無取代烷氧基烷基、硫代烷基、二(硫代烷基)烷基、三(硫代烷基)烷基、硫代-羥基-烷基、二(硫代-羥基-烷基)烷基或三(硫代-羥基-烷基)烷基。
11.權利要求10所述的不溶性載體粒子比濁免疫測定方法，其特徵在於通式II所示的化合物為蠶豆嘧啶葡糖苷或者麥黃酮。
12.權利要求8～11的任一項所述的不溶性載體粒子比濁免疫測定方法，其特徵在於在緩衝劑存在下，抗體或抗原保持在不溶性載體粒子中，然後進行免疫凝集反應。
13.權利要求8～12的任一項所述的不溶性載體粒子比濁免疫測定方法，其特徵在於抗體或抗原保持在不溶性載體粒子中後，在緩衝劑存在下，進行免疫凝集反應。
14.權利要求8～13的任一項所述的不溶性載體粒子比濁免疫測定方法，其特徵在於緩衝劑是指緩衝劑濃度5～200mmol/L的緩衝液。
15.權利要求8～14的任一項所述的不溶性載體粒子比濁免疫測定方法，其特徵在於不溶性載體粒子是指不溶性載體粒子濃度為0.005～5重量％的不溶性載體粒子混懸液。
16.權利要求8～15的任一項所述的不溶性載體粒子比濁免疫測定方法，其特徵在於不溶性載體粒子為膠乳。
17.不溶性載體粒子比濁免疫測定用試劑盒，其特徵在於包括有含不溶性載體粒子的混懸液、含分子內具有化學式7所示基團的化合物或者其鹽組成的緩衝劑的緩衝液。化學式7
18.權利要求17所述的不溶性載體粒子比濁免疫測定用試劑盒，其特徵在於化合物為通式I所示的化合物，化學式8 式中R1，R2相同或不同均可，是指氫原子、烷基、羥烷基、二(羥烷基)烷基、三(羥烷基)烷基、羧烷基、二(羧烷基)烷基、三(羧烷基)烷基、取代或無取代氨烷基、取代或無取代氨羰基烷基、取代或無取代烷氧基烷基、硫代烷基、二(硫代烷基)烷基、三(硫代烷基)烷基、硫代-羥基-烷基、二(硫代-羥基-烷基)烷基、三(硫代-羥基-烷基)烷基，或者，R1，R2和氮原子形成的環狀結構，形成取代或無取代的哌嗪基、取代或無取代的嗎啉基、或者取代或無取代的哌啶基的基團。
19.權利要求18所述的不溶性載體粒子比濁免疫測定用試劑盒，其特徵在於通式I所示化合物為通式II所示的化合物，化學式9 式中R1，R2，R3相同或不同均可，是指氫原子、烷基、羥烷基、二(羥烷基)烷基、三(羥烷基)烷基、羧烷基、二(羧烷基)烷基、三(羧烷基)烷基、取代或無取代氨烷基、取代或無取代氨羰基烷基、取代或無取代烷氧基烷基、硫代烷基、二(硫代烷基)烷基、三(硫代烷基)烷基、硫代-羥基-烷基、二(硫代-羥基-烷基)烷基、或三(硫代-羥基-烷基)烷基。
20.權利要求19所述的不溶性載體粒子比濁免疫測定用試劑盒，其特徵在於通式II所示的化合物為蠶豆嘧啶葡糖苷或者麥黃酮。
21.權利要求17～20的任一項所述的不溶性載體粒子比濁免疫測定用試劑盒，其特徵在於含緩衝劑的緩衝液是指緩衝劑濃度為5～200mmol/L的緩衝液。
22.權利要求17～21的任一項所述的不溶性載體粒子比濁免疫測定用試劑盒，其特徵在於含不溶性載體粒子的混懸液是不溶性載體粒子的濃度為0.005～5重量％的混懸液。
23.權利要求17～22的任一項所述的不溶性載體粒子比濁免疫測定用試劑盒，其特徵在於不溶性載體粒子為膠乳。
全文摘要
提供抑制與膠乳等不溶性載體粒子凝集反應相關的對測定值有影響的血漿成分的作用，使凝集反應穩定化，使反應液的吸光度穩定，能夠得到精確的測定結果的不溶性載體粒子的比濁免疫測定用試藥、不溶性載體粒子比濁免疫測定用試劑盒、用該試劑或試劑盒進行的不溶性載體粒子比濁免疫測定方法。在蠶豆嘧啶葡糖苷、麥黃酮等分子內含有以下所示基團的化合物的緩衝液存在或不存在的條件下，使不溶性載體粒子負載有抗體或抗原，然後，在上述緩衝液存在的條件下，對抗體或抗原敏感的不溶性載體粒子混懸液和檢測體接觸，發生免疫凝集反應，通過不溶性載體粒子凝集反應，測定產生的濃度，對檢測體中的抗原或抗體進行定量。(式中R
文檔編號G01N33/543GK1443309SQ01812896
公開日2003年9月17日 申請日期2001年6月15日 優先權日2000年6月30日
發明者重信香代子, 小慄一人 申請人:協和梅迪克斯株式會社, 愛賜愛兒股份有限公司