因子viii的修飾的製作方法
2023-06-21 10:34:41 2
專利名稱：因子viii的修飾的製作方法
技術領域：
本發明涉及因子VIII衍生物、所述衍生物的製備方法和所述衍生物在治療中的用途。
背景技術：
因子VIII是凝血級聯(cascade)中一種重要的蛋白質。因子VIII缺失會導致凝血疾 病一血友病A。可通過在需要時向患者給予因子VIII來治療血友病A。由於因子VIII的 血漿半衰期低，使得目前不可能用因子VIII有效且便捷地預防性治療血友病A。因此，在長 時間內維持充足的因子VIII活性是困難的。從而，鑑別出具有較長血漿半衰期的新的因子 VIII衍生物能提供一種安全且便捷地預防性治療血友病A的方法。有時通過引入合適的化學部分可增加蛋白質的血漿半衰期，所述化學部分能在將 該蛋白質從血液中清除的重要位置處保護該蛋白質。將化學部分引入蛋白質中使其作為報 告子基團也是有利的。但是，如果這些化學部分被非選擇性地引入，則所述蛋白質的生物活 性可能會降低或受損。因此，理想的是向蛋白質中區域選擇性的引入化學部分。但是實現 向諸如因子VIII這樣的大蛋白質中區域選擇性的引入化學部分是困難的。因此需要向因子VIII中區域選擇性的引入化學部分的新技術。發明概述
本發明人令人意外地已經發現穀氨醯胺轉移酶選擇性地靶向因子VIII中有限數量的 穀氨醯胺殘基。因此在合成因子VIII衍生物時使用穀氨醯胺轉移酶使得可以向因子VIII 中區域選擇性的引入化學部分。這些方法已經被用於製備一類新穎的因子VIII衍生物。因此，本發明涉及一種式(I)的因子VIII衍生物、或其藥學上可接受的鹽
權利要求
1.式(I)的因子VIII衍生物、或其藥學上可接受的鹽
2.根據權利要求1的因子VIII衍生物，其中所述部分M1包含一個或多個聚乙二醇 (PEG)部分、多肽或血漿蛋白質連接子。
3.根據權利要求2的因子VIII衍生物，其中所述肽是白蛋白、或抗體或其片段。
4.根據權利要求2的因子VIII衍生物，其中所述血漿蛋白質連接子是白蛋白連接子。
5.根據權利要求2的因子VIII衍生物，其中所述部分M1包含聚乙二醇(PEG)部分。
6.根據權利要求1的因子VIII衍生物，其中所述部分M2包含生物素、螢光標記或放射性同位素。
7.根據前述任一項權利要求的因子VIII衍生物，其中m代表0或1-9的整數，η代表 1-10的整數，並且m和η的總和是1-10。
8.根據前述任一項權利要求的因子VIII衍生物，其中B代表C2-C6亞烷基。
9.根據權利要求1的因子VIII衍生物，其中 B代表C2-C4亞烷基；m代表0或1-5的整數，η代表1_6的整數，並且m和η的總和是1_6 ；和 M代表包含了聚乙二醇(PEG)部分和/或白蛋白連接子的部分(M1)。
10.根據權利要求1的因子VIII衍生物，其中 B代表C2-C4亞烷基；m代表0或1-5的整數，η代表1_6的整數，並且m和η的總和是1_6 ；和 M代表包含了生物素或螢光標記的部分(Μ2)。
11.根據權利要求9或10的因子VIII衍生物，其中B代表C3亞烷基。
12.藥物組合物，其包含前述任一項權利要求所定義的因子VIII衍生物和藥學上可接受的載體或稀釋劑。
13.用於對人體或動物體通過醫療進行治療的權利要求1-11任一項所定義的因子 VIII衍生物。
14.用於治療血友病A的根據權利要求13的因子VIII衍生物。
15.權利要求1-11任一項所定義的因子VIII衍生物在製備治療血友病A的藥物中的用途。
16.一種治療血友病A患者的方法，該方法包括向所述患者給予治療有效量的權利要求1-11任一項所定義的因子VIII衍生物或權利要求12定義的藥物組合物。
17.—種式(II)的因子VIII衍生物、或其藥學上可接受的鹽
18.—種權利要求17所述的式(II)的因子VIII衍生物的製備方法，該方法包括使因子VIII與式(III)化合物在穀氨醯胺轉移酶的存在下反應H2N-O-B-O-NH2(III)其中B如權利要求1或8-10任一項所定義。
19.根據權利要求18的方法，其中所述穀氨醯胺轉移酶是茂原鏈輪絲菌 (Mreptomyces mobaraense)穀氨酉先胺轉移酶。
20.權利要求1至11任一項所述式(I)的因子VIII衍生物的製備方法，其包括使權利要求17所述的式(II)的因子VIII衍生物與式(IV)的醛反應
全文摘要
一種式(I)的因子VIII衍生物、或其藥學上可接受的鹽(I)其中B代表C2-C10亞烷基；m代表0或1-19的整數，n代表1-20的整數，並且m和n的總和是1-20；P代表從因子VIII的穀氨醯胺殘基側鏈去除m+n個氨甲醯基後獲得的因子VIII單或多價(poly)殘基；和M代表增加所述因子VIII衍生物的血漿半衰期的部分(M1)，或者報告子部分(M2)。
文檔編號C07K14/755GK102333788SQ201080007495
公開日2012年1月25日 申請日期2010年2月18日 優先權日2009年2月19日
發明者佩施克 B., M. 卡普夫 D., 馬德森 K., 贊德爾 M. 申請人:諾沃—諾迪斯克有限公司