編碼B型肝炎病毒核心蛋白的核酸分子和包含其的疫苗的製作方法

2023-06-02 08:48:41

編碼B型肝炎病毒核心蛋白的核酸分子和包含其的疫苗的製作方法
【專利摘要】本文提供編碼HBV核心蛋白的新型共有胺基酸序列的核酸序列，以及表達所述蛋白質序列的基因構建體/載體和疫苗。本文還提供使用所提供的所述核酸序列來產生針對HBV的免疫反應的方法。
【專利說明】編碼B型肝炎病毒核心蛋白的核酸分子和包含其的疫苗
發明領域
[0001]本發明涉及編碼B型肝炎病毒(HBV)核心蛋白及其片段的核酸序列；涉及B型肝炎病毒(HBV)核心蛋白及其片段、涉及改進的HBV疫苗、用於誘導針對HBV的免疫反應的改進方法以及用於預防地和/或治療地使個體針對HBV免疫的改進方法。
[0002]發明背景
[0003]本申請要求2011年2月11日提交的美國臨時專利申請號61/442，162的優先權，所述專利申請以引用方式併入本文。
[0004]B型肝炎是全球範圍內流行的常見感染，其導致了肝硬化、肝功能衰竭以及肝細胞癌的發展。顯著數量的肝炎病例未被報導出來是因為所述疾病的無症狀特性。雖然如此，每年仍報導了約3.5億慢性B型肝炎病例。大部分肝炎感染的人群是在不發達國家或者發展中國家。
[0005]所述病毒基於其包膜蛋白上存在的抗原表位而被分為四種主要血清型(adr、adw、ayr、ayw)。根據基因組序列的變化，HBV存在至少八種基因型(A-H)。HBV的替代基因型具有流行的地理分布。
【權利要求】
1.一種核酸分子，所述核酸分子包含編碼選自由以下組成的組的一種或多種蛋白質的編碼序列:包含SEQ ID NO:2的蛋白質；與SEQ ID NO:298%同源的蛋白質；包含SEQ IDNO:2的蛋白質的為至少20個胺基酸的免疫原性片段；以及與SEQ ID NO:298%同源的蛋白質的為至少20個胺基酸的免疫原性片段。
2.如權利要求1所述的核酸分子，其進一步包含連接至所述蛋白質的N端的信號肽。
3.如權利要求1所述的核酸分子，其編碼選自由以下組成的組的一種或多種蛋白質:SEQ ID NO:2 ；SEQ ID NO:4 以及 SEQ ID NO:6。
4.如權利要求1所述的核酸分子，其包含選自由以下組成的組的一個或多個序列:包含SEQ ID NO:1的核酸序列；與SEQ ID NO: 198%同源的核酸序列；其片段，所述片段包含編碼免疫原性片段的核酸序列，所述免疫原性片段包含由SEQ ID NO:1編碼的至少20個胺基酸；以及其片段，所述片段包含編碼免疫原性片段的核酸序列，所述免疫原性片段包含與由SEQ ID NO:1編碼的蛋白質98%同源的蛋白質的至少20個胺基酸。
5.如權利要求1所述的核酸分子，其進一步包含連接至所述核酸序列的5』端的信號肽。
6.如權利要求1所述的核酸分子，所述核酸分子包含選自由以下組成的組的一個或多個核苷酸序列:SEQ ID NO:1 ；SEQ ID NO: 3 ;以及 SEQ ID NO: 5。
7.如權利要求1所述的核酸分子，其中所述核酸分子是質粒。
8.如權利要求1所述的核酸分子，其中所述核酸分子是表達載體，並且編碼所述一種多種蛋白質的序列可操作地連接至調控元件。
9.如權利要求1所述的核酸分子，其中所述核酸分子被併入到病毒顆粒中。
10.如權利要求1所述的核酸分子，其中包含SEQID NO: 2的蛋白質的所述免疫原性片段為至少60個、至少120個或至少180個胺基酸。
11.如權利要求1所述的核酸分子，其中與SEQID NO:298%同源的蛋白質的所述免疫原性片段為至少60個、至少120個或至少180個胺基酸。
12.—種誘導針對HBV抗原的免疫反應的方法，所述方法包括對個體施用如權利要求1所述的核酸分子。
13.—種保護個體免受HBV感染的方法，所述方法包括對個體施用如權利要求1所述的核酸分子。
14.一種保護已被診斷患有HBV感染的個體的方法，所述方法包括對個體施用如權利要求I所述的核酸分子。
15.—種選自由以下組成的組的蛋白質:
SEQ ID NO:2 ； 與SEQ ID NO:2 98%同源的蛋白質； SEQ ID NO:2的免疫原性片段，所述免疫原性片段包含SEQ ID NO:2的20個或更多個胺基酸； 與SEQ ID NO: 2 98%同源的蛋白質的免疫原性片段，所述免疫原性片段包含20個或更多個胺基酸。
16.如權利要求15所述的蛋白質，其中包含SEQID NO:2的蛋白質的所述免疫原性片段為至少60個、至少120個或至少180個胺基酸。
17.如權利要求15所述的蛋白質，其中與SEQID NO:298%同源的蛋白質的所述免疫原性片段為至少60個、至少120個或至少180個胺基酸。
18.如權利要求15所述的蛋白質，其編碼選自由以下組成的組的蛋白質:SEQIDNO:2 ；SEQ ID NO:4 以及 SEQ ID NO:6。
19.一種誘導針對HBV抗原的免疫反應的方法，所述方法包括對個體施用如權利要求15所述的核酸分子。
20.一種保護個體免受HBV感染的方法，所述方法包括對個體施用如權利要求15所述的核酸分子。
21.—種保護已被診斷患有HBV感染的個體的方法，所述方法包括對個體施用如權利要求15所述的核酸分子。
22.一種適用於在受試者體內產生針對HBV的免疫反應的疫苗，所述疫苗包含: 根據權利要求1所述的核酸分子，以及 佐劑分子。
23.如權利要求22所述 的疫苗，其中所述佐劑是IL-12、IL-15、IL-28或RANTES。
【文檔編號】A61K39/29GK103442732SQ201280008596
【公開日】2013年12月11日 申請日期:2012年2月13日 優先權日:2011年2月11日
【發明者】D·B·韋納, 嚴健, N·奧本－阿傑伊 申請人:賓夕法尼亞大學託管會