葛根素的應用的製作方法

2023-06-07 00:39:31

專利名稱：：葛根素的應用的製作方法
技術領域：
：本發明涉及醫藥領域，具體為葛根素(Puerarin)在製藥方面的應用，尤其是在製備a-葡萄糖苷酶抑制劑、a-澱粉酶抑制劑和製備治療糖尿病藥物方面的應用。
背景技術：
：葛根是治療糖尿病中藥複方經常出現的中藥。葛根素(Puerarin)是中藥葛根中主要有效成分，其結構如式(I)所示，藥理作用廣泛，目前明確的療效有抗心肌缺血，抗氧化，抗骨質疏鬆，減輕酒精對肝臟的損傷，腦缺氧保護，抗心律失常，降血壓，擴張冠狀動脈，抗缺血_再灌注損傷，保護血管，保肝等。式(1)此外葛根素還能提高急性衰老大鼠的血清S0D、GSD-Px活性，降低MDA以及腦組織中LDF水平，具抗衰老作用；對尿酸轉運因子URAT1有抑制作用，可治療痛風。葛根素性質穩定，安全性好，來源易得，因此開發葛根素新的醫藥用途具有重要意義。
發明內容本發明的目的在於將葛根素應用於製備a-葡萄糖苷酶抑制劑。本發明另一個目的在於將葛根素應用於製備a-澱粉酶抑制劑。本發明還將葛根素應用於製備治療糖尿病的藥物。經過體外試驗證實，中藥材葛根的提取物葛根素對於a-葡萄糖苷酶和a-澱粉酶有抑制作用。以阿卡波糖為對照，葛根素對上述酶的抑制效果是阿卡波糖的13倍，具有良好的作用。降低餐後血糖是預防糖尿病、減少併發症和降低死亡率的重要措施，控制的方法是限制多糖在消化道內的分解和吸收，為此要降低a-葡萄糖苷酶和a-澱粉酶的活性，阻滯雙糖水解成單糖，延緩糖的吸收，使血糖平穩。目前葡萄糖苷酶抑制劑被推薦為降低餐後血糖的一線藥物。將葛根素應用於製備治療糖尿病的藥物，可單獨使用或與其他成分的藥物組合。所述的藥物還包括藥學上可接受的載體，劑型包括片劑、顆粒劑、膠囊、軟膠囊、滴丸、口服液、注射劑等。所述的藥物中，葛根素的含量為5%100%。經體外實驗證明葛根素對α-葡萄糖苷酶和α_澱粉酶活性有很強的抑制作用，為開發成降低餐後血糖，防治糖尿病及其併發症提供科學依據。而且葛根素性質穩定，安全性好；在植物中含量高，提取工藝簡單，來源易得，既經濟又安全，極具推廣應用價值。具體實施例方式試劑阿卡波糖對照品購自上海史瑞可生物有限公司；葛根素對照品購自中國藥品生物製品檢定所；葛根素樣品參照文獻(楊雲，馮衛生主編.中藥化學成分提取分離手冊，中國中醫藥出版社，1998，333)方法提取製備所得。α-葡萄糖苷酶(a-Glucosidase，TypeIFromBakersYeast)、α-澱粉酶(a-Amylase,TypeVI-B=FromPorcinepancreas，PPA)、4_硝基苯酚-α-D-口比喃葡萄糖苷(4-Nitropheny-α-D-glucopyranoside,PNPG)禾口澱粉天青(StarchAzure:PotatostarchcovalentlylinkedwithRemazolBriliantBlueR)均購自Sigma；其餘試劑均為分析純。儀器HWS26型電熱恆溫水浴鍋，PHS-25酸度計，AnkeTGL-16C離心機，上海申生科技產；上海稜光S54PC紫外可見分光光度計。實施例1參照文獻(中藥材，2005，28(1)38)方法，以4_硝基苯酚-α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)為底物；反應體系為2mL0.Imol·廠1的磷酸鹽緩衝液(pH6.8)中加入待測樣品100μ1(DMS0溶解，劑量見表1)，還原穀胱甘肽50μ1(lmg·mL—1)，α-葡萄糖苷酶100μ1(0.57U·mΓ1)，搖勻後37°C溫浴10分鐘；然後加入37°C溫浴好的底物PNPG0.2ml(20mmol37°C水浴反應15min後，加入0.Imol.L-1Na2CO3溶液IOmL終止反應，混勻後在波長400nm處測定吸光度。陽性對照物為阿卡波糖。結果如表1所示。α-葡萄糖苷酶抑制劑活性計算公式如下A空白-(A樣品背景)α-葡萄糖苷酶活性抑制率(％)=--------------------------χ100A空白式中，Afie不加樣品反應後的吸收值A樣品加入樣品反應後的吸收值A背景只加樣品的吸收值實施例2參照文獻(Biosci.Biotechnol.Biochem.2000,64(5)1041)方法，反應體系為澱粉天青5mg用0.5mL的0.05mol·I^pH6.9Tris-HCl緩衝液(含CaCl2O.Olmol·L—1)配製成懸液，於90-95°C水浴加熱5min，再於37°C水浴置5min後，加0.5mL待測樣品葛根素溶液(用DMSO溶解，劑量見表1)，加0.25mL的PPA(α-澱粉酶)溶液(2.3U·mL-1)，混勻後於37°C水浴反應lOmin，加入1.25mL50%冰醋酸終止反應，混勻，4°C條件下6000r/min離心5min，取上清液於595nm處測定吸光度。陽性對照物為阿卡波糖。結果見表1。α-澱粉酶抑制劑活性計算公式如下α-澱粉酶活性抑制率formulaseeoriginaldocumentpage5式中，Ac+:100%酶活性的吸收值(僅溶劑中加酶)Ac_酶活性的吸收值(僅溶劑未加酶)As待測樣品的吸收值(待測樣品加酶)Ab空白的吸收值(待測樣品未加酶)上述實施例1和2酶抑制活性測定實驗中，每個樣品重複三次取其平均值，以平均值計算酶活性抑制率。表1葛根素對α-葡萄糖苷酶和α_澱粉酶活件的抑制作用tableseeoriginaldocumentpage5實施例3取葛根素1kg，加入Ikg澱粉，0.2kg微晶纖維素，硬脂酸鎂0.Olkg,滑石粉0.02kg,置混合機中混合均勻，分裝膠囊。實施例4取瓊脂55g溶於適量的蒸餾水中，加熱使溶，加入200g甘油在攪拌下混勻，最後滴加尼泊金乙酯乙醇溶液100ml(SOg^L-1)；另稱取過80目篩的葛根素粉100g，置研缽中，分次加入上述瓊脂溶液，隨加研磨，適當時間後，置攪拌機中高速攪拌至顆粒均勻細膩為止，加蒸餾水至10L，121°C滅菌20分鐘，即得口服液。實施例5取葛根素1kg，加入澱粉1kg、微晶纖維素0.2kg、羧甲基澱粉鈉0.1kg，置混合機中混合均勻，用70%乙醇水溶液溼法制粒，70°C乾燥，整粒，加硬脂酸鎂0.Olkg,滑石粉0.02kg，混勻，壓片。權利要求葛根素在製備α-葡萄糖苷酶抑制劑方面的應用。2.葛根素在製備a-澱粉酶抑制劑方面的應用。3.葛根素在製備治療糖尿病藥物方面的應用。4.一種治療糖尿病的藥物，其特徵在於，包括重量含量為5%100%的葛根素。5.權利要求4所述治療糖尿病的藥物，其特徵在於，還包括藥學上可接受的載體。6.權利要求4所述治療糖尿病的藥物，其特徵在於，劑型為片劑、顆粒劑、膠囊、軟膠囊、滴丸、口服液或注射劑。全文摘要本發明涉及醫藥領域，公開了葛根素的醫藥用途。葛根素對於α-葡萄糖苷酶和α-澱粉酶有抑制作用，其抑制效果是阿卡波糖的1～3倍。因此可用於製備α-葡萄糖苷酶抑制劑、α-澱粉酶抑制劑和製備治療糖尿病藥物。在製備α-葡萄糖苷酶抑制劑、α-澱粉酶抑制劑和製備治療糖尿病藥物方面的應用。葛根素性質穩定，安全性好；在植物中含量高，提取工藝簡單，來源易得，既經濟又安全，極具推廣應用價值。文檔編號A61K31/352GK101804045SQ20101014356公開日2010年8月18日申請日期2010年4月9日優先權日2010年4月9日發明者葉曉平,宋純清,茅仁剛申請人:上海新康製藥廠;上海師大科技開發總公司