一種生產亞環己基二氧基庚烯醇的產朊酵母催化法

2023-08-01 12:32:11 1

一種生產亞環己基二氧基庚烯醇的產朊酵母催化法
【專利摘要】一種生產亞環己基二氧基庚烯醇的產朊酵母催化法。以產朊酵母細胞為催化劑，直接催化製備光活性(2S,3S)-1,2-（亞環己基二氧基）庚-6-烯-3-醇，反應罐中加入磷酸鹽緩衝液，加入白土調控底物、產物濃度，用產朊假絲酵母細胞進行生物催化反應，產品收率高，對映體過量率高，充分發揮了生物催化的優勢。
【專利說明】一種生產亞環己基二氧基庚烯醇的產朊酵母催化法

【技術領域】
[0001] 本發明屬於製藥工程【技術領域】，特別涉及到產朊假絲酵母細胞生物催化製備手性 醫藥中間體（2S，3S)-1，2-(亞環己基二氧基）庚-6-烯-3-醇的技術。

【背景技術】
[0002] (2S, 3S) _1，2-(亞環己基二氧基）庚_6_烯_3_醇是合成手性藥物、精細化學品、 農藥品和其他特殊材料的重要中間體。生物催化不對稱合成具有環境友好、條件溫和、選擇 性高等優點，作為綠色高效製備手性化合物的優先途徑，被越來越多地應用於生產一些高 附加值的手性化合物。生物催化製備（2S，3S) -1，2-(亞環己基二氧基）庚-6-烯-3-醇具 有很好的應用前景。
[0003] 生物催化具有催化效率高、選擇性強、條件溫和、環境友好等突出優點，是可持續 發展過程中替代和拓展傳統有機化學合成的重要方法。其中手性拆分和不對稱合成是生物 催化最具吸引力的應用領域。在作為生物催化劑的六大類酶中，水解酶能夠催化動力學拆 分外消旋體得到手性產品，在工業生物催化中一直扮演著重要角色。近幾年來，氧化還原 酶在工業上的應用得到了迅速增長。目前，採用水解酶動力學拆分法、生物還原法和生物 氧化法工業製備光學活性手性化合物的比例為4:2:1。
[0004] (2S, 3S) _1，2-(亞環己基二氧基）庚_6_稀_3_醇是合成手性藥物、精細化學品、 農藥品的重要手性砌塊，由於有2個手性中心，使得化學合成較為困難，成本高。本發明將 米用生物催化製備（2S，3S) _1，2_ (亞環己基二氧基）庚_6_烯_3_醇。


【發明內容】

[0005] 本發明採用產朊假絲酵母細胞催化製備（2S，3S)-1，2_ (亞環己基二氧基） 庚-6-烯-3-醇，反應式如下：

【權利要求】
1. 一種產朊假絲酵母細胞生物催化製備（2S，3S)-1，2-(亞環己基二氧基） 庚-6-烯-3-醇的方法，其特徵在於反應罐中加入磷酸鹽緩衝液，裝料係數為0. 6-0. 7, pH 為6. 2,加入吸附了底物S-亞環己基甘油醛與4-溴-1- 丁烯的白土，使底物S-亞環己基甘 油醛添加量為80-90 g/L，底物S-亞環己基甘油醛與底物4-溴-1-丁烯摩爾比為1，麥芽 浸膏25-30 g，木糖14-16 g/L，支鏈化13碳格爾伯特醇聚氧乙烯醚為13-18g/L，121°C高壓 滅菌30分鐘；冷卻至30-31°C時，加入溼酵母細胞使濃度為25-28g/L，通氣比為0. 10-14V/ (V分鐘)，進行生物催化反應，反應時間為82-90小時；反應結束後，分別濾出細胞、白土，用 乙酸乙酯萃取反應液、萃取白土，合併乙酸乙酯萃取液和萃取白土的乙酸乙酯，蒸出乙酸乙 酯，得到產物（2S，3S)-1，2-(亞環己基二氧基)庚-6-烯-3-醇，反應轉化率94-96%，產品 收率92-94 %，對映體過量率（ee%) 97-98 %。
2. 權利要求1所述的方法，其特徵在於溼酵母細胞製備過程如下：產朊假絲酵母經斜 面、搖瓶、種子罐培養得到種子液；發酵罐加入培養液，裝料係數為〇. 6-0. 7,121°C高壓滅 菌30分鐘，冷卻至27-28°C，將產朊假絲酵母種子液接種至發酵罐，接種比例為6-6. 5%，通 氣比為1. 4-1. 6V/ (V分鐘)，27-28°C培養18-20小時，用過濾式離心機離心得到溼酵母細 胞，用作生物催化反應催化劑。
3. 權利要求1所述的方法，其特徵在於種子培養基成份為：酵母提取物10 g/L，葡萄 糖20 g/L，蛋白腖20 g/L，pH6;配製固體培養基時添加15g/L的瓊脂粉； 培養液成份為：葡萄糖18-22 g/L，麥芽浸膏25-30 g/L，木糖8-10 g/L，（NH4)2S04 4.8-5.3 g/L，KH2P04 9-11 g/L，MgS04.7H20 0.3-0.4 g/L，CaCl2 0.35-0.4 g/L,硫酸銨 0· 2-0. 25g/L，硫酸鎂 0· 3-0. 4g/L, ρΗ5· 6。
4. 權利要求1所述的方法，其特徵在於所述吸附了底物的白土製作方法為，將底物 S-亞環己基甘油醛和4-溴-1- 丁烯混溶，R-亞環己基甘油醛與4-溴-1- 丁烯摩爾比為1， 用白土吸收此溶液，即得到吸附了底物的白土，調節底物與白土用量，使得底物與白土的質 量比率為0. 35-0. 38。
【文檔編號】C12P17/04GK104293847SQ201410537232
【公開日】2015年1月21日 申請日期:2014年10月13日 優先權日:2014年10月13日
【發明者】劉均洪, 李 傑 申請人:青島科技大學