一種B肝表面抗原血清室內質控品的製造和使用方法與流程
2023-08-11 13:00:46
本發明涉及醫療領域，尤其涉及一種一種B肝表面抗原血清室內質控品的製造和使用方法。
背景技術：
質控品是用於體外診斷的質量控制物質(定值和非定值)，是一種旨在用於醫學用途的檢測系統中使用的物質、材料、物品或設備，其目的是評價或驗證測量精密度、測量準確度、由於試劑或分析儀器的變化檢測系統可能產生的分析偏差等性能特徵。質量控制物質(定值和非定值)，可用於能力驗證、實驗室內質量控制。
在國內已申請的相關專利中，並沒有關於B肝質控品的現有專利，即相關技術領域中，完整的操作方法及流程尚屬空白，沒有完整、清晰的製備及使用方法，更不能對隨機變量敏感和發現隨機問題並進行持續改進。
技術實現要素：
針對現有技術中存在的上述缺陷，本發明旨在提供一種製備及使用方法完整、清晰，對隨機變量敏感、能用來發現隨機問題並進行持續改進的一種B肝表面抗原血清室內質控品的製造和使用方法。
為了實現上述目的，本發明採用以下技術方案：一種B肝表面抗原血清室內質控品的製造方法，包括如下步驟：
1）原料採集及篩選：
①收集B肝表面抗原分別為陽性和陰性的血漿或血清，將B肝陽性血漿或血清和B肝陰性血漿或血清分開標註，並篩選出無明顯溶血、黃疸、脂肪或汙染的血漿或血清，作為預備用血漿或血清；
②對步驟①篩選過的預備用血漿或血清定感染四項（TPPA、HbSAg、HIV、HCV-IgG），篩選出結果為陰性的血漿或血清，作為備用血漿或血清；
2）稀釋血清製造：
①將1）獲得的備用血漿或血清置於55℃-60℃環境下，保溫0.5-1h，進行滅活處理；
②將步驟①滅活後的血漿或血清進行離心處理，離心轉速為3000-3500r/min，離心時間為5-10分鐘，分別獲得B肝陽性血清和多組B肝陰性血清；
③將每組B肝陰性血清至少分裝5支試管，然後對B肝陽性血清進行稀釋，直至將B肝陽性血清稀釋至標準試劑盒的2-4倍，獲得多組備用質控品；
④按步驟③多次反複製造，直至將每組備用質控品按每周使用10次配夠一年的劑量；
⑤按照標準方法在備用質控品內加入對應濃度的廣譜防腐劑；
3）備用質控品的保存與監測：
①將2）製備的備用質控品分裝保存並標記，保存於條件溫度不高於-20℃，溼度不大於10%的環境中；
②按每周每組檢測一支的頻率對備用質控品進行動態跟蹤檢測，並從第三周起記錄檢測結果；
4）質控：
①將3）中步驟②獲得的數據填表並繪圖，具體為以臨床檢驗中心的標準質控品作為陰性參照，繪編Levery-Jennings質控圖，圖中採用S/CO作為縱座標、周次作為橫座標、13S為質控限；
②均勻性檢測：隨機抽取10個分裝後的樣本，對每個樣本重複檢測1次，進行t分析；隨機抽取20個分裝後的樣本，對每個樣本單孔測定，本互對比，進行CV%分析；
③穩定性檢測：每隔60天，採用3天的結果，每天對質控品重複檢測1次，進行方差分析；每隔30天，採用1天的結果，每天對質控品重複檢測3次，與上一次檢測數據進行進行CV%分析；
④抑菌效果檢測：取樣本2-3ml進行科學評估，用無菌吸管隨機吸取200ul分別平均注入於2塊營養瓊脂平板，均勻平鋪，然後將營養瓊脂平板置於35℃-37℃下培養40-50h，計數菌落數，計數方法為細菌總數（cfu/ml）=5*（2塊平皿菌落數之和/2），進行細菌滋生的風險評估；
⑤在整個過程中必須嚴格防護，防止洗板機異常、標本之間交叉感染、室溫下長時放置（大於2h）等異常情況出現；
5）持續改進：
在統計數據發現異常時立即徹底排查失控原因，總結並改進。
採用上述方法製造的B肝表面抗原血清室內質控品的使用方法，包括如下步驟：
1）儲存：所有質控品存儲在條件溫度不高於-20℃，溼度不大於10%的環境中，存儲方式為將質控品先放入密封容器後再將密封容器放入無霜冰箱；
2）復溶：置於15℃-25℃下15-20min，期間緩慢轉動質控品，在解凍後搖晃質控品至其均勻；
3）使用：將2）復溶後的質控品按標準方法進行正常使用。
與現有技術比較，本發明由於採用了上述方案，具有以下優點：製備及使用方法完整、清晰；本發明不僅將製造流程與方法詳細地進行了公開，還對質控品的質量進行了均勻性檢測、穩定性檢測及抑菌效果檢測，填補了現有技術的空白領域，也使得生產出的質控品質量更為可靠；由於採用了Levery-Jennings質控圖，圖中採用S/CO作為縱座標、周次作為橫座標、13S為質控限，由於使用的是最常用的質控圖，門檻低，可操作性強，而且因為採用的是13S質控限，對生產過程中產生的不可預知的隨機問題非常敏感，有助於在生產的同時不斷在細節上持續改進、優化生產工藝這種方法對隨機變量尤其敏感、能用來準確和快速地發現隨機問題並在後續和生產過程中進行持續改進，與同時申請的專利相比較，本發明更側重於隨機問題的發現和持續改進，對優化工藝過程和產品質量控制方法都有很大幫助。
具體實施方式
實施例1：
一種B肝表面抗原血清室內質控品的製造方法，包括如下步驟：
1）原料採集及篩選：
①收集B肝表面抗原分別為陽性和陰性的血漿或血清，將B肝陽性血漿或血清和B肝陰性血漿或血清分開標註，並篩選出無明顯溶血、黃疸、脂肪或汙染的血漿或血清，作為預備用血漿或血清；
②對步驟①篩選過的預備用血漿或血清定感染四項（TPPA、HbSAg、HIV、HCV-IgG），篩選出結果為陰性的血漿或血清，作為備用血漿或血清；
2）稀釋血清製造：
①將1）獲得的備用血漿或血清置於55℃-60℃環境下，保溫0.5-1h，進行滅活處理；
②將步驟①滅活後的血漿或血清進行離心處理，離心轉速為3000-3500r/min，離心時間為5-10分鐘，分別獲得B肝陽性血清和多組B肝陰性血清；
③將每組B肝陰性血清至少分裝5支試管，然後對B肝陽性血清進行稀釋，直至將B肝陽性血清稀釋至標準試劑盒的2-4倍，獲得多組備用質控品；
④按步驟③多次反複製造，直至將每組備用質控品按每周使用10次配夠一年的劑量；
⑤按照標準方法在備用質控品內加入對應濃度的廣譜防腐劑；
3）備用質控品的保存與監測：
①將2）製備的備用質控品分裝保存並標記，保存於條件溫度不高於-20℃，溼度不大於10%的環境中；
②按每周每組檢測一支的頻率對備用質控品進行動態跟蹤檢測，並從第三周起記錄檢測結果；
4）質控：
①將3）中步驟②獲得的數據填表並繪圖，具體為以臨床檢驗中心的標準質控品作為陰性參照，繪編Levery-Jennings質控圖，圖中採用S/CO作為縱座標、周次作為橫座標、13S為質控限；
②均勻性檢測：隨機抽取10個分裝後的樣本，對每個樣本重複檢測1次，進行t分析；隨機抽取20個分裝後的樣本，對每個樣本單孔測定，本互對比，進行CV%分析；
③穩定性檢測：每隔60天，採用3天的結果，每天對質控品重複檢測1次，進行方差分析；每隔30天，採用1天的結果，每天對質控品重複檢測3次，與上一次檢測數據進行進行CV%分析；
④抑菌效果檢測：取樣本2-3ml進行科學評估，用無菌吸管隨機吸取200ul分別平均注入於2塊營養瓊脂平板，均勻平鋪，然後將營養瓊脂平板置於35℃-37℃下培養40-50h，計數菌落數，計數方法為細菌總數（cfu/ml）=5*（2塊平皿菌落數之和/2），進行細菌滋生的風險評估；
⑤在整個過程中必須嚴格防護，防止洗板機異常、標本之間交叉感染、室溫下長時放置（大於2h）等異常情況出現；
5）持續改進：
在統計數據發現異常時立即徹底排查失控原因，總結並改進。
採用上述方法製造的B肝表面抗原血清室內質控品的使用方法，包括如下步驟：
1）儲存：所有質控品存儲在條件溫度不高於-20℃，溼度不大於10%的環境中，存儲方式為將質控品先放入密封容器後再將密封容器放入無霜冰箱；
2）復溶：置於15℃-25℃下15-20min，期間緩慢轉動質控品，在解凍後搖晃質控品至其均勻；
3）使用：將2）復溶後的質控品按標準方法進行正常使用。
實測效果為，採用本實施例所述製備及方法，可製造出失效率低於0.5%的B肝表面抗原血清室內質控品，遠低於市面常用的質控品（約3%），還具備了持續改進優化的可能性。
對所公開的實施例的上述說明，僅為了使本領域專業技術人員能夠實現或使用本發明。對這些實施例的多種修改對本領域的專業技術人員來說將是顯而易見的，本文中所定義的一般原理可以在不脫離本發明的精神或範圍的情況下，在其它實施例中實現。因此，本發明將不會被限制於本文所示的這些實施例，而是要符合與本文所公開的原理和新穎特點相一致的最寬的範圍。