從玄參中提取多酚類化合物的方法

2023-12-05 16:42:21 1

專利名稱：：從玄參中提取多酚類化合物的方法
技術領域：
：本發明涉及從玄參中提取多酚類化合物的方法。
背景技術：
：玄參(ScrophulariaL.)為玄參禾鬥植物玄參(ScrophularianingpoensisHemsl)的乾燥根，別名元參、黑參、浙玄參、烏元參等。玄參中含有豐富的多酚類化合物。多酚類化合物的主要功能性質是作為許多酶體系的抑制劑或激活劑、金屬螯合劑以及自由基清除劑。多酚類化合物通過酚羥基的離解和自由基途徑產生抗氧化作用，是醫藥、食品、化妝品中很有前景的一類天然抗氧化劑和自由基清除劑。所以從玄參中如何提取多酚類化合物具有重要的研究價值和廣泛的應用前景。目前採用的從玄參中提取多酚類化合物的方法有回流、冷浸、回流和滲漉等方法(國家藥典委員會編，中華人民共和國藥典(2005年版一部)，2005:76-77;程存歸等，南京理工大學學報，2006(30)，243-247)。以粉碎的玄參藥材為原料，以滲漉法和回流法等從玄參中提取多酚類化合物，提取時間長，溶劑消耗量大，受儀器限制提取量小，成本也高。
發明內容本發明提供了從玄參中提取多酚類化合物的方法，採用快速溶劑萃取(簡稱ASE)方法。該ASE方法是在一定的溫度(50°C-200°C)和壓力(1000-3000psi或10.3-20.6MPa)下用溶劑對固體或半固體樣品進行萃取的方法。使用常規的溶劑、利用增加溫度和提高壓力提高萃取的效率，其結果大大加快了萃取的時間並明顯降低萃取溶劑的使用量。ASE快速溶劑萃取技術具有如下的顯著特點時間短(僅用15-20分鐘)、溶劑少(萃取10-20克樣品僅用15-30毫升溶劑)、萃取效率高。從玄參中提取多酚類化合物的方法的步驟和條件如下按照乾燥的玄參粉末和硅藻土的質量比為11.2:24，把乾燥的玄參粉末和硅藻土混勻後裝入萃取池，萃取壓力9.6-20.6MPa、靜態5-10min，提取溫度為40-8(TC，提取溶劑為體積濃度為60-90%的乙醇水溶液；提取次數為1-3次，合併萃取液，萃取結束後濃縮提取液，得到了玄參中提取的多酚類化合物。本發明得到的玄參中提取的多酚類化合物的總多酚含量，採用Folin-Ciocalteu測定方法，結果表示為每克樣品中含有相當沒食子酸的毫克數。吸取上述提取的樣品溶液O.2ml，加入lmL0.5N的Folin-Ciocalteu試劑，再加入0.8mL7.5%的碳酸鈉溶液充分混合，室溫下放置0.5小時，然後在765nm下測吸光度。用質量濃度範圍為0.020.2mg/mL的沒食子酸溶液製作標準曲線，y=9.5623x_0.1332(R2=0.9999)，如圖1所示。所有測定重複2次，一致性很好。有益效果本發明提供的從玄參中提取多酚類化合物的方法，比傳統方法節省提取時間短僅用15-20分鐘；使用的溶劑少萃取10-20克樣品僅用15-30毫升溶劑)漂取效率高經過本發明的方法提取的總多酚化合物的含量為0.3658-0.3842mg/g，所提取的總多酚的含量是其他提取方法約1.5-1.8倍。圖l為沒食子標準曲線圖。圖2為不同提取方法獲得的從玄參中提取的總多酚化合物含量的柱狀圖。圖中分別為本發明提供的ASE方法、超聲提取法和回流提取法柱狀圖。可以看出本發明提供的ASE方法，可以明顯提高從玄參中提取多酚類化合物的產量。具體實施方式實施例1將乾燥的玄參粉末，過60目篩，準確稱量2.049g，加入3.058g硅藻土混勻後裝入萃取池，萃取壓力10.3MPa、靜態5min，提取溫度4(TC，提取溶劑為80X(v/v)乙醇水溶液，提取次數為1次，萃取結束後濃縮提取液，得到了玄參中提取的多酚類化合物。樣品總酚含量的測定採用Folin-Ciocalteu方法，結果表示為每克樣品中含有相當沒食子酸的毫克數。吸取O.2mL上述提取液，加入lmLO.5N的Folin-Ciocalteu試劑，再加入0.8mL7.5(m/m)%的碳酸鈉溶液充分混合，室溫下放置0.5小時然後在765nm下測吸光度，測得從玄參中提取的總多酚的含量為0.2909mg/g。實施例2將乾燥的玄參粉末，過60目篩，準確稱量2.030g，加入2.980g硅藻土混勻後裝入萃取池，萃取壓力11.8MPa、靜態5min，提取溫度45t:，提取溶劑為60X(V/V)乙醇水溶液，提取次數為2次，合併萃取液，萃取結束後濃縮提取液，得到了玄參中提取的多酚類化合物。樣品總酚含量的測定採用Folin-Ciocalteu方法，結果表示為每克樣品中含有相當沒食子酸的毫克數。吸取O.2mL上述提取液，加入lmLO.5N的Folin-Ciocalteu試劑，再加入O.8mL7.5%(m/m)的碳酸鈉溶液充分混合，室溫下放置0.5小時，然後在765nm下測吸光度，測得從玄參中提取的總多酚的含量為0.2055mg/g。實施例3將乾燥的玄參粉末，過60目篩，準確稱量2.016g，加入2.004硅藻土混勻後裝入萃取池，萃取壓力10.3MPa、靜態5min，提取溫度6(TC，提取溶劑為80X(V/V)乙醇水溶液，提取次數為3次，萃取結束後濃縮提取液，得到了玄參中提取的多酚類化合物。樣品總酚含量的測定採用Folin-Ciocalteu方法，結果表示為每克樣品中含有相當沒食子酸的毫克數。吸取O.2mL上述提取液，加入lmLO.5N的Folin-Ciocalteu試劑，再加入0.8mL7.5%(m/m)的碳酸鈉溶液充分混合，室溫下放置0.5小時，然後在765nm下測吸光度，測得從玄參中提取的總多酚的含量為0.0450mg/g。實施例4將乾燥的玄參粉末，過60目篩，準確稱量2.032g，加入2.432g硅藻土混勻後裝入萃取池，萃取壓力10.3MPa、靜態5min，提取溫度8(TC，提取溶劑為80^乙醇水溶液，提取次數為3次，萃取結束後濃縮提取液，得到了玄參中提取的多酚類化合物。樣品總酚含量的測定採用Folin-Ciocalteu方法，結果表示為每克樣品中含有相當沒食子酸的毫克數。吸取O.2mL上述提取液，加入lmLO.5N的Folin-Ciocalteu試劑，再加入O.8mL7.5%(m/m)的碳酸鈉溶液充分混合，室溫下放置0.5小時，然後在765nm下測吸光度，測得從玄參中提取的總多酚的含量為0.3658mg/g。實施例5將乾燥的玄參粉末，過60目篩，準確稱量2.063g，加入0.2341硅藻土混勻後裝入萃取池，萃取壓力13.3MPa、靜態5min，提取溫度80°C，提取溶劑為60%乙醇水溶液，提取次數為1次，萃取結束後濃縮提取液，得到了玄參中提取的多酚類化合物。樣品總酚含量的測定採用Folin-Ciocalteu方法，結果表示為每克樣品中含有相當沒食子酸的毫克數。吸取O.2mL上述提取液，加入lmLO.5N的Folin-Ciocalteu試劑，再加入O.8mL7.5%(m/m)的碳酸鈉溶液充分混合，室溫下放置0.5小時，然後在765nm下測吸光度，測得從玄參中提取的總多酚的含量為0.2498mg/g。實施例6將乾燥的玄參粉末，過60目篩，準確稱量2.002g，加入2.234g硅藻土混勻後裝入萃取池，萃取壓力10.3MPa、靜態5min，提取溫度65t:，提取溶劑為60X乙醇水溶液，提取次數為2次，萃取結束後濃縮提取液，得到了玄參中提取的多酚類化合物。樣品總酚含量的測定採用Folin-Ciocalteu方法，結果表示為每克樣品中含有相當沒食子酸的毫克數。吸取O.2mL上述提取液，加入lmLO.5N的Folin-Ciocalteu試劑，再加入0.8mL7.5%(m/m)的碳酸鈉溶液充分混合，室溫下放置0.5小時，然後在765nm下測吸光度，測得從玄參中提取的總多酚的含量為0.2401mg/g。玄參ASE正交試驗因素水平表、正交表和實驗結果分析如下表l因素水平表tableseeoriginaldocumentpage5表2LJ33)正交表和實驗結果分析tableseeoriginaldocumentpage6tableseeoriginaldocumentpage6採用L9(33)正交試驗，來確定利用ASE150型快速溶劑萃取儀進行了玄參快速溶劑萃取的最佳條件，結果見表2。各因素對快速溶劑萃取玄參影響大小的順序為B(主)一C—A(次)。本實驗選擇AAC3組合萃取作為從玄參中快速溶劑萃取的最佳工藝，即使用80-90%(V/V)乙醇水溶液在8(TC溫度下提取3次，每次5min。參考文獻[l]Kitagawaletal.OntheiridoidconstituentisolatedfromtherootsofscrophulariabuergeranaMiq.ChemArarmBull,1967，15(8):1254[2]LIYM，JIANGSH，ZHUDY.Progressofstudyonthechemicalconstituentofinscrophulariaplantandactivityinpharmacology[J].ChinTraditHerbDrugs(中草藥)，1999，30(4):307310.[3]李醫明，蔣山好，高文運，等.玄參中的苯丙素苷成分[J].中草藥.1999，30(7):487489[4]李醫明，蔣山好，高文運，等.玄參的脂溶性化學成分[J].藥學學報.1999，34(6):448450[5]李醫明，蔣山好，等.玄參屬植物化學成分與藥理活性研究進展[J].中草藥1999,30(4):307310[6]張建春，朱健美.玄參的化學成分與藥理作用研究進展[J].山東醫藥工業.2003,22(1):2527[7]張雯潔，等.中藥玄參的化學成分[J].雲南植物研，1994，16(4):407412[8]鄒臣亭，楊秀偉.玄參中一個新的環烯醚萜苷化合物[J].中草藥.2000，31(4):241243[9]SubramaniSellappan，CasimirCAkoh&GerardKrewer.PhenolicCompoundsandAntioxidantCapacityofGeorgia—GrownBlueberriesandBlackberries[J].J.Agric.FoodChem.，2002，50(8):2432-2438.[10]Sanchez-MorenoC，LarrauriJA&Saura-CalixtoF.Freeradicalscavengingcapacityandinhibitionoflipidoxi_dationofwines，grapejuicesandrelatedpolyphenoliccon_stituents[J].FoodRes.Int.，1999，32:407-412.[11]石碧，狄瑩植物多酚[M].北京:科學出版社，2000:124.[12]陳欣欣，許時嬰.黑莓渣提取物中多酚類化合物抗氧化活性的研究[J].食品工業，20Q7(3):3-6.權利要求從玄參中提取多酚類化合物的方法，其特徵在於步驟和條件如下按照乾燥的玄參粉末和硅藻土的質量比為1～1.2∶2～4，把乾燥的玄參粉末和硅藻土混勻後裝入萃取池，萃取壓力9.6-20.6Mpa，靜態5-10min，提取溫度為40-80℃，提取溶劑為體積濃度為60-90％的乙醇水溶液，提取次數為1-3次，合併萃取液，濃縮提取液，得到玄參中提取的多酚類化合物。全文摘要本發明提供了從玄參中提取多酚類化合物的方法。取乾燥的玄參藥材粉末，加入硅藻土混勻後入萃取，萃取結束後濃縮提取液。本發明提供的從玄參中提取多酚類化合物的方法，與傳統方法相比提取時間短僅用15-20分鐘；使用的溶劑少萃取10-20克樣品僅用15-30毫升溶劑)；萃取效率高經過本發明的方法提取的總多酚化合物的含量為0.3658-0.3842mg/g，所提取的總多酚的含量是其他提取方法約1.5-1.8倍。文檔編號C07G99/00GK101709068SQ20091021784公開日2010年5月19日申請日期2009年11月12日優先權日2009年11月12日發明者劉春明,劉質淨,張紅晶,時東方,李麗,王強,鄭梅竹申請人:長春師範學院