雷公藤多苷固體脂質納米粒的製備方法

2023-12-05 13:15:11 2

專利名稱：：雷公藤多苷固體脂質納米粒的製備方法
技術領域：
：本發明涉及中藥製劑領域，具體是將中藥雷公藤的有效部位雷公藤多苷製成固體脂質納米粒的方法。
背景技術：
：雷公藤系衛矛科雷公藤屬植物，具有抗炎、抗腫瘤、免疫抑制等多種活性，臨床廣泛用於治療類風溼性關節炎，慢性腎炎、紅斑狼瘡和各種皮膚病，但其口服吸收不好，胃腸刺激大，不良反應較多，限制了其應用，劑型改造是其增效減毒的有效方法。其中，雷公藤多苷的應用最廣，也認為雷公藤多苷是主要藥理活性成分，主要包括二萜內酯、生物鹼、三萜等一組有效成分，具有抗炎、抗腫瘤、免疫抑制、抗HIV病毒的藥理活性。納米中藥是指運用納米技術製造的、粒徑小於200nm的有效成分、有效部位、原藥及其複方製劑。納米中藥改變了藥物的物理狀態，藥物的活性和生物利用度得到大幅度提高,並可能產生新的藥效。雷公藤已有報導的納米化劑型有CN01133514.9A納米中藥雷公藤昆明山海棠劑型及其製備方法，CN02133332.7A公開了一種雷公藤納米微粒的製備方法，CN200610104979.2A公開了一種雷公藤多甙納米乳藥物及其製備方法。前兩者主要是針對雷公藤醇提取液和雷公藤浸膏，而不是有效部位，針對性不強且方法簡單，後者給藥方式僅局限於外用，應用上受到限制，本發明公開了一種雷公藤多苷固體脂質納米粒的製備工藝，經文獻檢索，將其製成固體脂質納米粒這一劑型尚屬首次，固體脂質納米粒(Solidlipidnanoparticles,SLN)是上世紀90年代初引入的一種新型的納米給藥系統。SLN具有下述優點(Muhlen，1998):①顆粒尺寸小，平均粒徑在納米尺度，可用於注射給藥；②生物相容性好，在製備過程中不會引入有毒聚合物單體等有毒殘留物；③對親脂性藥物有足夠的載藥能力，通過工藝調整，還可以包封親水性藥物；④具有緩釋特性，可延長藥物釋放達數天至數周；⑤其水分散體系可長期穩定保存，通過冷凍乾燥或噴霧乾燥還可製成固體粉末，穩定性好；⑥通過對其表面進行特徵修飾，可將藥物傳遞至特定組織，具有靶向性；⑦有足以供應市場的大規模工業化生產方式；(D價格相對較為低廉。目前，應用於臨床的主要有雷公藤多苷片，雷公藤內酯軟膏，雷公藤片等，雷公藤多苷是雷公藤的有效部位，臨床藥物多以茈為原料，、將其製成固體脂質納米粒這一新的劑型後可改善其吸收，提高生物利用度，增強藥效，降低毒性，並可適用於多種給藥途徑。
發明內容本發明是研究雷公藤多苷固體脂質納米粒的製備方法，目的在於克服現有劑型的不足，提出一種新的雷公藤多苷固體脂質納米粒藥物，方法簡單，生產成本低。雷公藤多苷固體脂質納米粒，其特徵在於含下列組分及重量份數比雷公藤多苷1混合脂質5~15其中混合脂質由類脂和脂質載體按1:1~1:5重量比組成表面活性劑0.5~1.5本發明雷公藤多苷固體脂質納米粒，可通過高溫乳化-低溫固化、薄膜-超聲分散法、高壓乳勻法來製備，經過反覆實驗確定現有製備方法，因為其穩定性、重現性均較好，同時考察了不同的脂質材料、不同的藥脂比、脂質載體與類脂的不同比例，和不同的表面活性劑對其質量的影響，以下是一些研究數據表1不同的脂質材料對TWP-SLN質量的影響脂質材料脂質用量(mg)泊洛沙姆(mg)外觀粒徑(nm)單硬脂酸甘油酯30030較澄清181.1三硬脂酸甘油酯30030較澄清201.5月桂酸甘油酯30030渾濁，有沉澱780.5甘油硬脂酸30030澄清127.3硬脂酸30030略渾濁346,8豆蔻酸甘油酯30030澄清105.9所述納米粒的基質為生理相容性的可生物降解的天然或合成類脂的脂質材料，即脂質載體和類脂，脂質載體可以是磷脂、單硬脂酸甘油酯、三硬脂酸甘油酯、肉豆蔻酸甘油酯、辛酸/癸酸三甘油酯或其中任意兩種或兩種以上的混合物。實驗後優選單硬脂酸甘油酯、三硬脂酸甘油酯、肉豆蔻酸甘油酯。同時研究發現，加入少量液態脂質辛酸/癸酸甘油酯，可提高納米粒穩定性，因為引入液態脂質能夠延緩固態脂質由a晶形向e晶形的轉化，可以延緩藥物的洩露。所述納米粒中加入乳化劑，可起'到穩定粒子TW作用，'芏要是憐脂，可以是卵磷脂，包括大豆卵磷脂、蛋黃卵磷脂；或氫化大豆卵磷脂、氫化蛋黃卵磷脂、雙肉豆蔻磷脂醯膽鹼或二硬脂醯磷脂膽鹼。實驗後優選大豆卵磷脂和卵磷脂。本發明採用表面活性劑修飾或吸附於脂質納米粒表面，以使脂質納米粒達到緩釋的目的。表2不同的藥脂比對TWP-SLN質量的影響tableseeoriginaldocumentpage5表3不同的脂質載體與類脂比例對TWP-SLN質量的影響tableseeoriginaldocumentpage5實驗考察了不同脂質及脂質載體與類脂的比例，確定脂質材料採用固體和液體混合脂質，即加入微量液態脂質，且雷公藤多苷脂質材料的比例為l:5~15,低於l:5時，藥物包裹不完全，造成渾濁，高於l:15時，粒徑增長，脂質易析出，出現分層現象，脂質的用量越大包封率越好，綜合考慮，藥脂比為l:IO時最為適宜。類脂與脂質載體的比例為1~5時，粒徑、包封率均較好。另外對所述表面活性劑進行了篩選，包括泊洛沙姆(Poloxamer，Pluronic)、聚氧乙烯脂肪酸酯(賣澤、Myrj)、聚氧乙烯脂肪醇醚(卞澤、Brij)、聚山梨酯(Polysorbate、吐溫、Tweens)、脂肪酸山梨坦(司盤、Spa&)，'去氫膽酸鹽'、卩，伯樹膠粉。優選泊洛沙姆、吐溫及去氫膽酸鹽。雷公藤多苷固體脂質納米粒的製備方法，其特徵在於將雷公藤多苷溶解於混合脂質溶液中作為油相，在攪拌條件下將油相緩慢加入到同等溫度含表面活性劑0.5~1.5的水相中，保溫攪拌，超聲，自然冷卻後即得初分散體，經冷凍乾燥，即可得雷公藤多苷固體脂質納米粒。雷公藤多苷固體脂質納米粒，其特徵在於其攪拌後，使用探頭超聲措施，減小納米粒粒徑。本發明製得的雷公藤多苷固體脂質納米粒初分散體外觀呈透明淡黃色液體，粒徑在10200nm之間，電位值反映了粒子之間的相互排斥力，-20-50mv較好(詳見附圖3、4)，冷凍乾燥後復溶，粒徑、電位幾無變化，凍幹後可長期保存。電鏡觀察空白納米粒及載藥鈉米粒呈圓形，形態歸整(詳見附圖1、2)，包封率67%，載藥量0.2%，經X衍射檢査，空白SLN樣品與TWP-SLN樣品峰基本一致，說明納米粒晶形未發生變化，較穩定，樣品峰值均大於對照，說明藥物已被包裹進脂質(詳見附圖5-7)。本發明以上述材料將藥物包裹，製成固體脂質納米粒，可提高藥物溶解度改善吸收，提高生物利用度，具有一定的緩釋作用，增強藥效，降低毒性，適用於多種給藥途徑。圖1為空白固體脂質納米粒透射電鏡照片圖2為雷公藤多苷固體脂質納米粒透射電鏡照片圖3為雷公藤多苷固體脂質納米粒電位測定結果圖4為雷公藤多苷固體脂質納米粒粒徑測定結果圖5為雷公藤多苷原料X衍射圖圖6為空白SLN樣品X衍射圖圖7為TWP-SLN樣品X衍射圖具體實施例方式雷公藤多苷可用文獻方法從中藥雷公藤中提取，也可購買。將TWP-SLN通過下列實施例進一步說明本發明的技術方案，但本發明的保護範圍，不局限於此。粒徑、電位測定採用Zetasizer3000HS粒徑測定儀測定。雷公藤多苷固體脂質納米粒的製備(l個處方量)60mg360mg360mg60mg製備工藝取雷公藤多苷、單硬脂酸甘油酯加入丙酮8ml，於80。C加熱溶解；大豆磷脂加入乙醇lml，超聲10min溶解；將上述兩種溶液混勻作為有機相；另取泊洛沙姆溶於20ml水中作為水相，攪拌條件下將有機相用針頭注入8(TC水相中，保溫攪拌4h，揮盡有機溶劑，將該混懸液快速分散至02'C30ml水中，低溫固化2h，0.45um微孔濾膜過濾，即得。所得納米粒平均粒徑為204.5nm,電位-6.8mv實施例2雷公藤多苷固體脂質納米粒的製備(1個處方量)雷公藤多苷60mg硬脂酸300mg大豆磷脂300mg泊洛沙姆60mg製備工藝將雷公藤多苷、硬脂酸、大豆磷脂溶於無水乙醇中；減壓旋轉蒸發去除有機溶劑，形成實施例1雷公藤多苷單硬脂酸甘油蹈大豆磷脂泊洛沙姆7一層脂質薄膜，減壓乾燥，過夜，然後把泊洛'莎姆水溶液緩tf住Xi述脂質薄膜中，超聲lh，0.45um微孔濾膜過濾，即得。所得納米粒平均粒徑為73.8nm電位-14.7mv實施例3雷公藤多苷固體脂質納米粒的製備(l個處方量)雷公藤多苷60mg單硬脂酸甘油酯300mg辛酸甘油酯200ul大豆磷脂60mg泊洛沙姆60mg製備工藝將雷公藤多苷加入到80'C單硬脂酸甘油酯、大豆磷脂、辛酸甘油酯混合脂質液中；再把熱脂相分散到泊洛沙姆水溶液中得到初分散體，高壓勻質56個循環，04'C冷卻結晶，即得。所得納米粒平均粒徑為182.7nm電位-27.6mv實施例4雷公藤多苷固體脂質納米粒的製備(1個處方量)雷公藤多苷60mg單硬脂酸甘油酯300mg大豆磷脂60mg去氫膽酸鈉20mg製備工藝將雷公藤多苷、單硬脂酸甘油酯加入丙酮8ml，於8(TC加熱溶解；大豆磷脂加入乙醇lml，超聲10min溶解；將上述兩種溶液混勻作為有機相；另取去氫膽酸鈉溶於20ml水中作為水相，攪拌條件下將有機相用針頭注入8(TC水相中，保溫攪拌4h，揮盡有機溶劑，將該混懸液快速分散至02。C30ml水中，低溫固化2h，0.45um微孔濾膜過濾，即得。所得納米粒平均粒徑為198.9nm電位-19.4mv8實施例5雷公藤多苷固體脂質納米粒的製備(1個處方量)雷公藤多苷60mg三硬脂酸甘油酯360mg吐溫80200ul泊洛沙姆30mg製備工藝將雷公藤多苷加入到80'C三硬脂酸甘油酯、吐溫80混合脂質液中；再把熱脂相分散到泊洛沙姆水溶液中得到初分散體，高壓勻質56個循環，04'C冷卻結晶，即得。所得納米粒平均粒徑為201nm電位-2L9mv實施例6雷公藤多苷固體脂質納米粒的製備(l個處方量)雷公藤多苷60mg肉豆蔻酸甘油酯360mg吐溫80200ul泊洛沙姆30mg製備工藝將雷公藤多苷加入到8(TC月桂酸甘油酯、吐溫80混合脂質液中；再把熱脂相分散到泊洛沙姆水溶液中得到初分散體，高壓勻質56個循環，04。C冷卻結晶，即得。所得納米粒平均粒徑為145.Onm電位-25.Omv實施例7雷公藤多苷固體脂質納米粒的製備(1個處方量)雷公藤多苷60mg甘油硬脂酸360mg吐溫80200ul泊洛沙姆30mg製備工藝將雷公藤多苷加入到8CTC甘油硬脂酸、吐溫80混合脂質液中；再把熱脂相分散到泊洛沙姆水溶液中得到初分散體，高壓勻質56個循環，04t:冷卻結晶，即得。所得納米粒平均粒徑為127.3nm電位-23.4mv實施例8雷公藤多苷固體脂質納米粒的製備(l個處方量)雷公藤多苷60mg單硬脂酸甘油酯300mg卵磷脂120mg辛酸甘油酯200ul泊洛沙姆30mg製備工藝將雷公藤多苷加入到8(TC甘油硬脂酸、吐溫80混合脂質液中；再把熱脂相分散到泊洛沙姆水溶液中得到初分散體，高壓勻質56個循環，04'C冷卻結晶，即得。所得納米粒平均粒徑為181.1nm電位-28.2mv實施例9雷公藤多苷固體脂質納米粒的製備(1個處方量)雷公藤多苷60mg單硬脂酸甘油酯300mg大豆磷脂300mg吐溫80200ul泊洛沙姆60mg製備工藝將雷公藤多苷、單硬脂酸甘油酯、大豆磷脂、吐溫80溶於無水乙醇中，8(TC水浴溶解作為油相；泊洛沙姆溶於100ml水中，8(TC攪拌條件下，將油相緩緩注入到水相中，保溫攪拌lh，55。C減壓旋蒸30min，以除盡有機溶劑，超聲40min,自然冷卻，0.45um微孔濾膜過濾，即得。所得納米粒平均粒徑為129.5nm電位-17.8mv10實施例IO雷公藤多苷固體脂質納米粒的製備(l個處方量)雷公藤多苷60mg單硬脂酸甘油酯300mg大豆磷脂300mg吐溫80200ul檸檬酸三乙酯200ul泊洛沙姆60mg製備工藝將雷公藤多苷、單硬脂酸甘油酯、大豆磷脂、吐溫80溶於無水乙醇中，8(TC水浴溶解作為油相；泊洛沙姆溶於100ml水中，8(TC攪拌條件下，將油相緩緩注入到水相中，保溫攪拌lh,55。C減壓旋蒸30min，以除盡有機溶劑，超聲40min，自然冷卻，0.45um微孔濾膜過濾，即得。所得納米粒平均粒徑為165.8nm電位-23.9mv實施例11雷公藤多苷固體脂質納米粒的製備(1個處方量)雷公藤多苷60mg單硬脂酸甘油酯300mg大豆磷脂300mg吐溫80200ul辛酸甘油酯200ul泊洛沙姆60mg製備工藝將雷公藤多苷、單硬脂酸甘油酯、大豆磷脂、辛酸甘油酯、吐溫80溶於無水乙醇中，8(TC水浴溶解作為油相；泊洛沙姆溶於100ml水中，80'C攪拌條件下，將油相緩緩注入到水相中，保溫攪拌lh，55。C減壓旋蒸30min,以除盡有機溶劑，超聲40min，自然冷卻，0.45um微孔濾膜過濾，即得。所得納米粒平均粒徑為133.4nm電位-19.8mv11實施例12雷公藤多苷固體脂質納米粒的製備(1個處方量)雷公藤多苷60mg單硬脂酸甘油酯300mg大豆磷脂300mg吐溫80200ul辛酸甘油酯200ul泊洛沙姆60mg製備工藝將雷公藤多苷、單硬脂酸甘油酯、大豆磷脂、辛酸甘油酯、吐溫80溶於無水乙醇中，8(TC水浴溶解作為油相；泊洛沙姆溶於100ml水中，8(TC攪拌條件下，將油相緩緩注入到水相中，保溫攪拌lh，55'C減壓旋蒸30min，以除盡有機溶劑，探頭超聲(300W，180次)，自然冷卻，0.45um微孔濾膜過濾，即得。所得納米粒平均粒徑為95.5nm電位-24.Omv權利要求1、一種雷公藤多苷固體脂質納米粒，其特徵在於含下列組分及重量份數比雷公藤多苷1混合脂質5～15其中混合脂質由類脂和脂質載體按1∶1～1∶5重量比組成表面活性劑0.5～1.5。2、權利要求1的雷公藤多苷固體脂質納米粒，其特徵在於所述脂質載體是單硬脂酸甘油酯、三硬脂酸甘油酯、肉豆蔻酸甘油酯、辛酸/癸酸甘油酯或其中任意兩種或兩種以上的混合物；類脂是是大豆磷脂和卵磷脂；表面活性劑是泊洛沙姆、吐溫80或去氫膽酸鹽。3、權利要求l的雷公藤多苷固體脂質納米粒，其特徵在於粒徑分布在10200nm。4、雷公藤多苷固體脂質納米粒的製備方法，其特徵在於將雷公藤多苷溶解於混合脂質溶液中作為油相，在攪拌條件下將油相緩慢加入到同等溫度含表面活性劑0.51.5的水相中，保溫攪拌，超聲，自然冷卻後即得初分散體，經冷凍乾燥，即可得雷公藤多苷固體脂質納米粒。5、權利要求1的雷公藤多苷固體脂質納米粒的製備方法，其特徵在於攪拌後，使用探頭超聲措施，有效減小納米粒粒徑。全文摘要本發明是一種雷公藤多苷固體脂質納米粒的製備方法。將雷公藤多苷1份溶解於5～15份混合脂質溶液中(其中類脂脂質載體為1～5)作為油相，將油相緩慢加入到同等溫度含表面活性劑0.5～1.5的水相中，保溫攪拌，探頭超聲，自然冷卻後即得初分散體，經冷凍乾燥，即可得雷公藤多苷固體脂質納米粒。該納米粒呈淡黃色，粒徑在10～200nm之間，質量穩定，可用於口服、靜脈注射等多種給藥途徑。本發明方法可靠，操作簡便，耗能低，適於工業化生產，製得的雷公藤多苷固體脂質納米粒較雷公藤多苷原料有較高的溶解性改善其吸收，提高了生物利用度，增強藥效，降低毒性。文檔編號A61K36/37GK101658545SQ200910034968公開日2010年3月3日申請日期2009年9月16日優先權日2009年9月16日發明者張陸勇,江振洲,梅薛申請人:中國藥科大學