一種小牛血去蛋白提取物注射液的製備工藝的製作方法

2023-11-06 21:16:32 3

專利名稱：一種小牛血去蛋白提取物注射液的製備工藝的製作方法
技術領域：
本發明屬於醫學生化藥物領域，具體的涉及一種小牛血去蛋白提取物注射液的製備工藝。
背景技術：
從小牛血液中提取的「小牛血去蛋白提取物」是一種小分子的生物活性物質，含小分子多肽、胺基酸、核苷酸等物質。小牛血去蛋白提取物注射液可增強組織細胞對氧及葡萄糖攝取與利用作用，改善細胞乏氧狀態和機體內環境，增加心、腦、肝等臟器的血流量，改善微循環，在低血氧以及能量需增加等情況下，可以促進能量代謝，增加供血量。
目前，小牛血去蛋白提取物注射液主要是通過將小牛血濃縮、超濾或透析後製備而成，在關鍵的去蛋白工序中常因步驟多，時間長，使有效成分丟損比較多。例如CN1579420A公開了一種小牛血去蛋白提取物輸液的製備工藝，採用酸鹼變性法去除蛋白質，加入酸、鹼的量要求精確，或多或少都會導致酸性或鹼性蛋白除不淨甚至會引起其它雜質，影響產品質量。

發明內容
本發明針對現有技術的不足，提供一種製備工藝簡單的小牛血去蛋白提取物注射液的製備工藝。
本發明的一種小牛血去蛋白提取物注射液的製備工藝，其包括如下步驟將小牛血清攪拌，粗濾去除水不溶性蛋白，離心，過濾，精濾，超濾，減壓濃縮，調pH值至6.5～7.5，滅菌，冷凍緩化放置，調pH值至5.5～6.5，超濾，精濾和除菌過濾，灌裝，滅菌。
具體地為將小牛血清攪拌5～10min，粗濾去除水不溶性蛋白，離心，濾紙過濾，0.2～0.65μm濾膜精濾，超濾2次，將超濾液減壓濃縮至原體積的18～22％，調pH值至6.5～7.5，滅菌，冷凍，緩化放置3～15d，調pH值至5.5～6.5，用5000～8000分子量的超濾器進行超濾，經0.2～0.45μm濾膜精濾和無菌套筒進行除菌過濾後，灌裝，滅菌，即得。
更具體地為將小牛血清攪拌5～10min，紗布粗濾去除纖維蛋白後，以5000～10000rpm離心1～2min，濾紙過濾，0.2μm濾膜精濾，用10000～20000分子量的超濾器進行超濾，再用5000～8000分子量的超濾器進行超濾，將超濾液在50～70℃減壓濃縮至原體積的18～22％，用7％的HCl調pH值至6.5～7.5，100℃滅菌30min，-10～-18℃冷凍1～2d，緩化放置3～15d，調pH值至5.5～6.5，用6000分子量的超濾器進行超濾，經0.2μm濾膜精濾和無菌套筒進行除菌過濾後，灌裝，滅菌，即得。
活力測定按國家藥品標準(WS1-XG-029-2000)所附的「呼吸活性測定法」。
過敏試驗按國家藥品標準(WS1-XG-029-2000)所附的「過敏試驗法」。
本發明益處本發明先採用攪拌法去除纖維蛋白等水不溶性蛋白質，之後再採用超濾法去除蛋白，與現有技術比較，不僅能達到相同的去除蛋白質效果，而且節省資源。本發明製備的小牛血去蛋白提取物注射液生物活性高，雜質少，應用安全。
具體實施例方式
以下實施例用於說明本發明，但不用來限制本發明的範圍。
實施例1
將小牛血清200升，攪拌5min，紗布粗濾去除纖維蛋白，以5000rpm離心2min，濾紙過濾，0.2μm濾膜精濾，用10000分子量的超濾器進行超濾，再用8000分子量的超濾器進行超濾，將超濾液在70℃減壓濃縮至原體積的22％為44升。用7％的HCl調pH值至6.5，100℃滅菌30min，-10℃冷凍2d，緩化放置3d，進一步除去雜質，用7％的HCl調pH值至6.5，用6000分子量的超濾器進行超濾，去除大分子雜質，經0.2μm濾膜精濾和無菌套筒進行除菌過濾後，灌裝，滅菌，即得。
實施例2將小牛血清500升，攪拌10min，紗布粗濾去除纖維蛋白，以10000rpm離心1min，濾紙過濾，0.45μm濾膜精濾，用20000分子量的超濾器進行超濾，再用5000分子量的超濾器進行超濾，將超濾液在50℃減壓濃縮至原體積的18％為90升。調pH值至7.5，100℃滅菌30min，-18℃冷凍1d，緩化放置15d，進一步除去雜質，調pH值至5.5，用5000分子量的超濾器進行超濾，去除大分子雜質，經0.45μm濾膜精濾和無菌套筒進行除菌過濾後，灌裝，滅菌，即得。
實施例3將小牛血清400升，攪拌8min，紗布粗濾去除纖維蛋白，以8000rpm離心2min，濾紙過濾，0.65μm濾膜精濾，用15000分子量的超濾器進行超濾，再用6000分子量的超濾器進行超濾，將超濾液在70℃以下減壓濃縮至原體積的20％為80升。調pH值至7，100℃滅菌30min，-15℃冷凍1d，緩化放置8d，進一步除去雜質，調pH值至6，用8000分子量的超濾器進行超濾，去除大分子雜質，經0.3μm濾膜精濾和無菌套筒進行除菌過濾後，灌裝，滅菌，即得。
按國家藥品標準(WS1-XG-029-2000)所附的「呼吸活性測定法」和「過敏試驗法」對上述3個實施例中根據本發明的方法製備的小牛血去蛋白提取物注射液分別進行活力測定和過敏試驗，測定結果見表1。
表1 小牛血去蛋白提取物注射液活力測定和過敏試驗結果

權利要求
1.一種小牛血去蛋白提取物注射液的製備工藝，其包括如下步驟將小牛血清攪拌，粗濾去除水不溶性蛋白，離心，過濾，精濾，超濾，減壓濃縮，調pH值至6.5～7.5，滅菌，冷凍，緩化放置，調pH值至5.5～6.5，超濾，精濾和除菌過濾，灌裝，滅菌。
2.根據權利要求1所述的製備工藝，其特徵在於，如上所述的小牛血去蛋白提取物注射液的製備工藝，包括如下步驟將小牛血清攪拌5～10min，粗濾去除水不溶性蛋白，離心，濾紙過濾，0.2～0.65μm濾膜精濾，超濾2次，將超濾液減壓濃縮至原體積的18～22％，調pH值至6.5～7.5，滅菌，冷凍，緩化放置3～15d，調pH值至5.5～6.5，用5000～8000分子量的超濾器進行超濾，經0.2～0.45μm濾膜精濾和無菌套筒進行除菌過濾後，灌裝，滅菌，即得。
3.根據權利要求1所述的製備工藝，其特徵在於，如上所述的小牛血去蛋白提取物注射液的製備工藝，包括如下步驟將小牛血清攪拌5～10min，紗布粗濾去除纖維蛋白後，以5000～10000rpm離心1～2min，濾紙過濾，0.2μm濾膜精濾，用10000～20000分子量的超濾器進行超濾，再用5000-8000分子量的超濾器進行超濾，將超濾液在50～70℃減壓濃縮至原體積的18～22％，用7％的HCl調pH值至6.5～7.5，100℃滅菌30min，-10～-18℃冷凍1～2d，緩化放置3～15d，調pH值至5.5～6.5，用6000分子量的超濾器進行超濾，經0.2μm濾膜精濾和無菌套筒進行除菌過濾後，灌裝，滅菌，即得。
全文摘要
本發明涉及小牛血去蛋白提取物注射液的製備工藝，其步驟包括將小牛血清攪拌粗濾除去水不溶性蛋白質，離心，過濾，精濾，超濾2次，減壓濃縮，調pH值至6.5～7.5，滅菌，冷凍緩化放置，調pH值至5.5～6.5，超濾，精濾和除菌過濾後，灌裝，滅菌。本發明製備的小牛血去蛋白提取物注射液生物活性高，雜質少，應用安全。
文檔編號A61P39/00GK101084922SQ20071011795
公開日2007年12月12日 申請日期2007年6月26日 優先權日2007年6月26日
發明者方同華 申請人:黑龍江省珍寶島製藥有限公司