一種分離純化油料中磷脂的方法
2023-11-11 03:30:37 1
專利名稱：一種分離純化油料中磷脂的方法
技術領域：
本發明屬農、林副產品深加工領域。
技術背景
從各種油料中提取磷脂及應用，我國已有很多的研究與實踐。溶劑抽提法，最常用 的溶劑是丙酮，丙酮能溶解油脂和游離脂肪酸但不溶解磷脂，因而可以用丙酮將磷脂中的 油脂等去除，再用無水乙醇或含水乙醇來提取磷脂。溶劑浸提中，浸提次數多、時間長，而且 丙酮對人體有害，經丙酮處理的產品用於食品時，存在丙酮的殘留。超臨界流體CO2萃取法， 其基本原理是將CCV流體充入一個特殊壓力溫度裝置中，使之從油脂樣品中選擇性地將中 性脂在超臨界態下萃取出來，剩下的極性脂部分主要是磷脂，可以加入夾帶劑乙醇提取出 來，但對儀器設備的要求高，生產成本大幅提高，所提取的磷脂仍要進行進一步分離，如用 柱層析法。柱層析法，以吸附劑為固定相，移動相中的溶質在通過固定相時，由於它們的吸 附和解吸能力的不同從而達到分離的目的。現常用的吸附劑為矽膠、氧化鋁、硅藻土等；洗 脫液常選用氯仿、丙酮、甲醇等有一定毒性的有機溶劑，產品中的溶劑殘留是這種方法的缺 點。還有製備薄層色譜法，無機鹽複合沉澱技術等方法也存在試劑安全問題。
發明內容
本發明的目的是提供一種安全、有效、快速、低成本的矽膠柱層析方法來分離純化 油料中的磷脂。本發明的具體工藝步驟(1)將大豆、雞蛋、魚、含磷脂較高的油料及其副產物等原料用95%乙醇提取2次， 過濾，合併提取液，旋蒸得到含磷脂的粗脂肪，其中含有甘油三酯，游離脂肪酸等中性脂；(2)稱取矽膠裝於層析柱中，矽膠高度為2 5cm ；(3)稱取粗脂肪樣品上樣，先用乙酸乙酯洗脫甘油三酯，膽固醇等中性脂和游離脂 肪酸，再用一定量無水乙醇洗脫腦磷脂(PE)，待PE洗脫完畢，然後用95 % 80 %乙醇洗脫 卵磷脂(PC)；(4)減壓濃縮各洗脫液至幹，回收的乙酸乙酯、乙醇可以再利用。本發明經上述柱層析可完全分離腦磷脂和卵磷脂。經薄層層析(TLC)檢測PE純 度達到80%以上，PC純度達到90%以上。本發明的主要特點是利用填充2 5cm高的矽膠柱來成功完全分離PE、PC和中性 月旨。它是利用磷脂的強極性，用安全溶劑乙醇來分離磷脂，(在現有技術中一般矽膠高度都 是大於IOcm以上，即使填充矽膠的高度設置在6 10cm，都很難把PE洗脫下來)，只有把 矽膠高度儘量降到2 5cm，才能很好的把PE洗脫下來；由於PC結構中磷酸端接的基團是 叔丁基胺，能與矽膠緊密接合，在2 5cm矽膠高度的情況下，無水乙醇仍很難洗脫PC，這樣 就可以把PE、PC完全分離，待PE完全洗脫後，再用95% 80%乙醇加大洗脫劑的極性，從 而把PC洗脫。此方法對原料的應用範圍廣，只要含磷脂的油料都可以採用，而且可以靈活運用，適用性強。本發明另一特點是從脂肪提取到最後磷脂的分離純化用的都是安全溶劑乙酸乙酯、乙醇和水，且可以回收再利用，用這種純化技術得到的產品用於食品、醫藥和化 妝品，安全性高。本發明的優點是1、採用安全溶劑通過矽膠柱層析一次性地分離了脂質中的PE、 PC、中性脂和游離脂肪酸；2、設備簡單，矽膠用量少，試劑消耗量少，成本低；3、適用範圍 廣，對含磷脂的油料可根據具體情況靈活運用。
具體實施例方式本發明將通過以下實施例作進一步說明。實施例1。稱取用95%乙醇提取的1.0113g蛋黃脂肪，溶於乙酸乙酯中，備用。取粗孔II矽 膠2. 6g加入流動相乙酸乙酯製成漿狀，溼法裝於(20mmX120mm)玻璃柱中，柱內矽膠高度約 為2cm。將製備好的蛋黃脂肪樣品緩緩倒入柱中，進樣完畢後首先加入60mL流動相乙酸乙 酯洗脫甘油三酯、膽固醇、游離脂肪酸等成分；再用160mL無水乙醇，每20mL分步收集流出 液，TLC定性分析，20 140mL富含PE部分；最後用270mL 90%無水乙醇，每30mL分步收 集，TLC定性分析，60 240mL富含PC組分作為層析產品。合併相同成分，得PE、PC分別為 0.0472g和 0. 3372。實施例2。稱取用95%乙醇提取的0.4073g鄱陽湖黃顙魚脂肪，溶於乙酸乙酯中，備用。取 粗孔II矽膠2. Sg加入流動相乙酸乙酯製成漿狀，溼法裝於(20mmX120mm)玻璃柱中。將制 備好的魚脂肪樣品緩緩倒入柱中，進樣完畢後首先加入30mL流動相乙酸乙酯洗脫甘油三 酯，膽固醇，游離脂肪酸等中性脂；再用140mL無水乙醇每20mL分步收集流出液，TLC定性 分析，20 120mL富含PE部分；最後用240mL 90%無水乙醇每30mL分步收集，TLC定性 分析，60 210mL富含PC組分作為層析產品。合併相同成分，得PE、PC分別為0. 0182g和 0.0352。
權利要求
一種分離純化油料中磷脂的方法，其特徵是(1)將大豆、雞蛋、魚、含磷脂較高的油料及其副產物用95％乙醇提取2次，過濾，合併提取液，旋蒸得到含磷脂的粗脂肪；(2)稱取矽膠裝於層析柱中，矽膠高度為2～5cm；(3)稱取粗脂肪樣品上樣，先用乙酸乙酯洗脫中性脂和游離脂肪酸，再用無水乙醇洗脫腦磷脂，待PE洗脫完畢，然後用95％～80％乙醇洗脫卵磷脂；(4)減壓濃縮各洗脫液至幹。
全文摘要
一種分離純化油料中磷脂的方法，其特徵是(1)將大豆、雞蛋、魚、含磷脂較高的油料及其副產物用95％乙醇提取2次，過濾，合併提取液，旋蒸得到含磷脂的粗脂肪；(2)稱取矽膠裝於層析柱中，矽膠高度為2～5cm；(3)稱取粗脂肪樣品上樣，先用乙酸乙酯洗脫中性脂和游離脂肪酸，再用無水乙醇洗脫腦磷脂，待PE洗脫完畢，然後用95％～80％乙醇洗脫卵磷脂；(4)減壓濃縮各洗脫液至幹。本發明採用安全溶劑通過矽膠柱層析一次性地分離了脂質中的PE、PC、中性脂和游離脂肪酸；設備簡單，矽膠用量少，試劑消耗量少，成本低；適用範圍廣，對含磷脂的油料可根據具體情況靈活運用。
文檔編號C07F9/10GK101838285SQ20101016641
公開日2010年9月22日 申請日期2010年5月7日 優先權日2010年5月7日
發明者劉蓉, 李廣焱, 李靜, 胡蔣寧, 範亞葦, 鄧澤元, 雷琳 申請人:南昌大學