一種總多酚含量檢測方法與流程
2023-11-09 22:32:07
本發明屬於食品
技術領域：
，具體涉及一種總多酚含量檢測方法。
背景技術：
：自由基是由氧化反應而產生的對身體有害物質。它幾乎攻擊體內的所有細胞。造成人體組織、器官遭到破壞，加速機體衰老和致病。自由基過多可引起心、腦、血管疾病，誘發腫瘤，引起老年性痴呆、白內障、糖尿病、肝病、帕金森氏病、免疫力低下等。多酚是在植物性食物中發現的,具有潛在促進健康作用的化合物。當前被稱為「第七類營養素」。由於多酚結構本身有多個共軛雙鍵，即使某些位置的電子被自由基搶走，靠共軛效應分子結構穩定從而保護細胞，具有清除多種自由基功能。因此總多酚含量的檢測對食品生產開發均有重要意義。總多酚含量的測定方法有高錳酸鉀法、酒石酸分光光度法、氨基安替比林比色法、紫外分光光度法等。其中高錳酸鉀法在氧化酚類物質的同時，一些酚類衍生物和非酚類物質也可以被高錳酸鉀氧化，測定結果的重複性差；酒石酸分光光度法多用來檢測菸葉中酚類物質含量，適用範圍小；氨基安替比林比色法常常應用揮發酚的測定上，因此此方法酚的提取步驟比較麻煩，實驗過程繁雜、費時。技術實現要素：根據以上現有技術的不足，本發明所要解決的技術問題是提出一種總多酚含量檢測方法，通過分光光度計進行吸光度測定，根據沒食子酸標準曲線進行計算得樣品總多酚含量，縮短了檢測時間，降低了檢測要求，解決了其他檢測方法儀器要求高，樣品處理繁瑣的問題。為了解決上述技術問題，本發明採用的技術方案為：一種總多酚含量檢測方法，通過使樣品中多酚類化合物在鹼性溶液中，與福林酚試劑中的鎢鉬酸在避光條件下進行定量氧化反應，而鎢鉬酸自身則被還原生成藍色化合物，所述的藍色化合物的深淺程度與含酚基團的數目成正比，對反應後的樣品進行吸光度測定，根據沒食子酸標準曲線計算出樣品中總多酚含量。優選的，所述的鹼性溶液為Na2CO3溶液，其中Na2CO3與蒸餾水的質量比為12:88。優選的，所述的沒食子酸標準曲線為沒食子酸標準溶液的濃度與吸光度的線性關係曲線。優選的，所述的定量氧化反應的反應時間為2h。優選的，所述的沒食子酸標準溶液中沒食子酸標準品與蒸餾水的質量體積比為1:10mg/mL。一種總多酚含量檢測方法，包括如下步驟：步驟一：檢測採用紫外分光光度計，測定條件設為：波長765nm，檢測前開機預熱30min；步驟二：空白溶液的製備：於試管中加入福林酚試劑1mL及質量百分數為12％的碳酸鈉溶液2mL，並用水定容至25ml，得空白溶液，在室溫下避光反應2h，反應後的空白溶液在765nm波長處對分光光度計進行調零；步驟三：沒食子酸標準溶液的配製：稱量沒食子酸標準品25mg，用水溶解後定容於250mL容量瓶中，得到0.1mg/mL的沒食子酸標準溶液；步驟四：標準曲線的制定：分別移取沒食子酸標準溶液0.00、0.25、0.50、0.75、1.00、1.25、1.50mL置於試管中並分別加入福林酚試劑1mL，搖勻後再分別加入質量百分數為12％的Na2CO3溶液2mL，用水定容至25mL，搖勻，室溫下避光反應2h後，在765nm波長下測定反應物的吸光度；步驟五：標準曲線的繪製：以沒食子酸標準溶液的濃度為橫坐標，以反應物的吸光度為縱坐標，製作標準曲線，計算得標準曲線公式；步驟六：樣品的測定：取1mL樣品於試管中，並加入福林酚試劑1mL及質量百分數為12％的碳酸鈉溶液2mL，用水定容至25mL，在室溫下避光反應2h後測定樣品的吸光度；步驟七：樣品中總多酚含量的計算：將樣品的吸光度帶入標準曲線公式中計算出樣品中總多酚含量。優選的，步驟二、步驟四、步驟六中所述的試管為具塞試管。優選的，步驟六中所述1mL樣品的量是用移液管進行量取。本發明有益效果是:本發明總多酚含量檢測方法通過分光光度計進行吸光度測定，根據沒食子酸標準曲線進行計算，縮短了檢測時間，降低了檢測要求，解決了其他檢測方法儀器要求高，樣品處理繁瑣的問題。附圖說明圖1為沒食子酸標準溶液的濃度與吸光度的關係曲線圖。具體實施方式下面通過對實施例的描述，對本發明作進一步詳細的說明，以幫助本領域技術人員對本發明的發明構思、技術方案有更完整、準確和深入的理解。一種總多酚含量檢測方法，包括如下步驟：步驟一：檢測採用紫外分光光度計，測定條件設為：波長765nm，檢測前開機預熱30min；步驟二：空白溶液的製備：於具塞試管中加入福林酚試劑1mL及質量百分數為12％的碳酸鈉溶液2mL，並用水定容至25ml，得空白溶液，在室溫下避光反應2h，反應後的空白溶液在765nm波長處對分光光度計進行調零；步驟三：沒食子酸標準溶液的配製：稱量沒食子酸標準品25mg，用水溶解後定容於250mL容量瓶中，得到0.1mg/mL的沒食子酸標準溶液；步驟四：標準曲線的制定：分別移取沒食子酸標準溶液0.00、0.25、0.50、0.75、1.00、1.25、1.50mL置於具塞試管中並分別加入福林酚試劑1mL，搖勻後再分別加入質量百分數為12％的Na2CO3溶液2mL，用水定容至25mL，搖勻，室溫下避光反應2h後，在765nm波長下測定反應物的吸光度；步驟五：標準曲線的繪製：以沒食子酸標準溶液的濃度為橫坐標，以反應物的吸光度為縱坐標，製作標準曲線，計算得標準曲線公式；步驟六：樣品的測定：用移液管進行量取1mL樣品於具塞試管中，並加入福林酚試劑1mL及質量百分數為12％的碳酸鈉溶液2mL，用水定容至25mL，在室溫下避光反應2h後測定樣品的吸光度；步驟七：樣品中總多酚含量的計算：將樣品的吸光度帶入標準曲線公式中計算出樣品中總多酚含量。下表1為採用上述實驗方法測定的沒食子酸標準溶液的濃度與吸光度的值：表1標準曲線濃度吸光度0.000.0000.250.1340.500.2630.750.3801.000.4841.250.5861.500.680當前第1頁1 2 3