一種鑑別真偽驢皮阿膠的方法
2023-05-05 07:29:51 2
專利名稱：一種鑑別真偽驢皮阿膠的方法
技術領域：
本發明涉及真偽驢皮阿膠的鑑別技術，具體地，本發明涉及一種高效液相色譜法鑑別真偽驢皮阿膠的技術。本發明還涉及驢皮阿膠和雜皮膠混合樣品中驢皮阿膠百分含量的測定以及樣品膠中的馬皮膠組分百分含量的測定。
背景技術：
阿膠作為常用的補益中藥，具有悠久的歷史，被歷年中國藥典收載。阿膠是由驢皮經去毛後等預處理後再經過煎煮濃縮熬製而成的固體膠，味甘、性平、滋陰潤肺，補血、止血，主治血虛萎黃、眩暈心悸、肌萎無力、心煩不眠、虛風內動、肺燥咳嗽、吐血尿血、便血崩漏，妊娠胎漏等。正品阿膠為驢皮阿膠，而其它動物皮熬製的膠均為偽阿膠(假阿膠)。偽膠功效與阿膠不同，甚至有嚴重的副作用，不但給市場帶來了混亂，而且危害消費者的身心健康。由於各種偽阿膠的製備工藝及膠的外觀性狀與阿膠相似，又因其成分複雜，所以鑑別真偽十分困難。傳統的鑑別方法(如查看膠斷面色澤，手感，水試，膠懸浮液性狀等)多根據膠的理化性質或表觀性狀進行鑑別而且需要相當的經驗，因此準確性差；尤其是在膠的形態和色澤十分相似的情況下更難以根據膠的形態學特徵進行真偽區分。雖然也有人利用紫外，紅外等方式進行鑑別，但膠溶液含有不同種類物質，這種分析方式對於阿膠中不同物質的混合物沒有針對性，而且準確性也不高，重現性非常低。另外，對於熬膠過程中利用雜皮加入驢皮方式得到雜皮膠，這種利用混合物直接光譜掃描鑑別阿膠真偽的方式準確性極差。
本發明的目的在於提供一種鑑別阿膠真偽的方法，這種方法能夠快速而準確地鑑別阿膠地真偽，而且鑑別所需樣品量少，預處理簡單，具有重複性高，操作簡單等特點，發展的真偽鑑別方法不但能夠鑑別阿膠的真偽，而且還可以測定樣品膠中雜皮膠的百分含量。
發明內容
本發明的上述目的是通過將膠溶解後得到的溶液進行預處理，以去除在制膠過程中加入的豆油、冰糖等輔料以及膠中的不溶物，將得到的阿膠溶液進行沉澱操作，離心去除沉澱物，收集上清液，將該上清液通過高效液相色譜直接分析，確定驢皮阿膠以及雜皮膠的特徵組分及其含量。
本發明的具體方法如下一種鑑別真偽驢皮阿膠的方法，其具體步驟如下1取一定量的樣品膠加入一定量的蒸餾水，在室溫下振蕩6～10小時。
2將1得到的阿膠溶液離心，去除上層白色物質和下層沉澱物，留中間黃色透明溶液。
3向2得到的透明溶液中加入一定濃度的沉澱劑，振蕩數分鐘後低溫保存2～4小時，離心收集上層清液。
4將3得到的清液進行高效液相色譜分析。
5積分樣品膠中驢皮阿膠特徵峰面積，計算其與純驢皮阿膠特徵組分峰面積之比，即為樣品膠中驢皮阿膠的百分含量。
6積分樣品膠中馬皮膠特徵峰面積，計算其與純馬皮阿膠特徵組分峰面積之比，即為樣品膠中馬皮膠的百分含量。
待鑑別樣品膠的處理過程如圖1所示，當樣品膠中檢測到驢皮膠的特徵組分的峰面積與標準阿膠的驢皮特徵組分峰面積相等時，樣品膠為真阿膠，否則，樣品膠為假阿膠或混有雜皮的偽阿膠，其中雜皮的含量通過驢皮膠特徵峰的面積確定。
圖1待鑑別膠的預處理過程示意2純驢皮阿膠特徵峰(RT＝11.70)圖370％驢皮阿膠的混合樣品的高效液相色譜4待測樣品膠的高效液相色譜5樣品D-純馬皮膠高效液相色譜6樣品E-純驢皮阿膠高效液相色譜7樣品F-待測樣品膠高效液相色譜圖以下結合具體實施例說明本發明的方法實施例一1樣品樣品A純驢皮阿膠，樣品B含70％驢皮阿膠的混合膠，樣品C待測樣品膠2所需儀器(1)離心機(2)高效液相色譜儀
(3)可變波長紫外檢測器3樣品處理(1)分別取2.00g膠加入18.00g去離子水，超聲振蕩至膠全部溶解；(2)在12000rpm下離心15min，收集中間清澈部分溶液；(3)取(2)收集的溶液0.5ml，加入0.5ml沉澱劑，混合均勻；(4)將(3)混合液在4℃下存放3小時，10000rpm下離心10min離心；(5)取上清液高效液相色譜分析。
(6)其它膠樣品按(1)-(5)相同的方法處理。
4高效液相色譜分析液相系統Agilent 1100，四元泵，自動進樣器，在線脫氣機檢測器二極體陣列檢測器(Finnigan UV6000)色譜柱Agilent SB C-18(4.6×250mm)流動相A雙蒸水(0.1％TFA)B乙睛(0.1％TFA)進樣量20μl流速0.5ml/min檢測波長318nm梯度條件 AB0min100％0％30min 10％ 90％5分析結果，圖2為樣品A-真阿膠的高效液相色譜圖，其中RT＝11.70的組分為驢皮阿膠的特徵組分，峰面積從＝8015。圖3為樣品B-含70％驢皮阿膠的混合樣品的高效液相色譜圖，驢皮特徵組分峰面積為AA＝5707。圖4為樣品C-待測樣品膠的高效液相色譜圖，驢皮特徵組分峰面積為AA＝6829，因此其驢皮膠含量為85％。
實施例二1樣品樣品D純馬皮阿膠樣品E純驢皮阿膠，樣品F待測樣品膠2所需儀器(1)離心機(2)高效液相色譜儀(3)可變波長紫外檢測器3樣品處理(1)分別取2.00g樣品膠加入18.00g去離子水，超聲振蕩至膠全部溶解；(2)在12000rpm下離心15min，收集中間清澈部分溶液；(3)取(2)收集的溶液0.5ml，加入0.5ml沉澱劑，混合均勻；(4)將(3)混合液在4℃下存放3小時，10000rpm下離心10min離心；(5)取上清液高效液相色譜分析。
(6)其它膠樣品按(1)-(5)相同的方法處理。
4高效液相色譜分析液相系統Agilent 1100，四元泵，自動進樣器，在線脫氣機檢測器二極體陣列檢測器(Finnigan UV6000)色譜柱Agilent SB C-18(4.6×250mm)流動相A雙蒸水(0.1％TFA)B乙睛(0.1％TFA)進樣量20μl流速0.5ml/min檢測波長296nm
梯度條件A B0min 95％5％40min 10％85％5分析結果，圖5為樣品D-純馬皮膠的高效液相色譜圖，其中RT＝10.9的組分為馬皮膠的特徵組分，峰面積MA＝24286。圖6為樣品E-驢皮阿膠的高效液相色譜圖，馬皮特徵組分峰面積為MA＝0。圖7為待測樣品膠的高效液相色譜圖，馬皮特徵組分峰面積為AA＝3739，因此其馬皮膠含量為15.4％。
權利要求
1.一種鑑別真偽驢皮阿膠的方法，其特徵在於，該方法包括(1)取待測樣品，用適當的溶液溶解，(2)(1)得到的溶液經離心後取中間的清液，(3)向(2)得到的清液中加入沉澱劑，離心後收集上清液，(4)將(3)得到的清液通過高效液相色譜分析，(5)樣品的真偽通過驢皮阿膠特徵組分的峰面積確定，
2.根據權利要求1所述的方法，膠溶液離心後收集的是中間的清液。
3.根據權利要求1的要求，向權利要求2的清液中加入的沉澱劑可以是三氯乙酸，丙酮，甲醇，硫酸銨等。
4.根據權利要求1所述的方法，高效液相色譜法分析的是(3)得到的清液。
5.根據權利要求1所述的方法，當待測樣品中驢皮特徵組分的峰面積等於純驢皮阿膠的高效液相色譜中的特徵峰的峰面積時，待測樣品為真驢皮阿膠。反之，根據此峰面積與純驢皮阿膠的高效液相色譜中的特徵峰的峰面積之百分比計算樣品膠中的驢皮膠百分含量。
全文摘要
本發明涉及一種真偽阿膠的鑑別方法，具體地，該方法將膠溶解後得到的溶液進行預處理，以去除人為加入的輔料以及不溶物，然後再通過沉澱操作去除沉澱，將其上清夜通過高效液相色譜分析，根據液相色譜結果中驢皮特徵組分的含量確定阿膠的真偽及雜皮含量。本發明鑑定阿膠真偽具有重複性好、操作簡單、成本低，簡便快捷的優點。
文檔編號G01N30/00GK1635374SQ20031012348
公開日2005年7月6日 申請日期2003年12月29日 優先權日2003年12月29日
發明者張貴鋒, 蘇志國 申請人:中國科學院過程工程研究所