提高人參皂苷m1與異丁醯氯單酯化選擇性的合成方法
2023-05-09 16:02:31
提高人參皂苷m1與異丁醯氯單酯化選擇性的合成方法
【專利摘要】本發明介紹一種提高人參皂苷M1與異丁醯氯單酯化選擇性的合成方法：首先將人參皂苷M1糖苷基的6號位羥基用叔丁基二甲基氯矽烷醚化保護起來，再與等當量的異丁醯氯在冰水浴，氮氣保護，二氯甲烷為溶劑，三乙胺為敷酸劑，DMAP(4-二甲氨基吡啶)催化的條件下發生單酯化反應，最後用四丁基氟化銨脫去矽保護基。
【專利說明】提高人參皂苷M1與異丁醯氯單酯化選擇性的合成方法
【技術領域】
[0001]屬於中藥製劑領域。本發明涉及人參皂苷Ml的氯矽烷保護反應。
【背景技術】
[0002]人參具有抗衰老、抗炎、抗過敏、降血糖、修復神經損傷和保肝等作用。近年來的研究表明，人參皂苷具有抗腫瘤的作用，大部分都是以Rg3、Rh1, Rh2等為主要研究對象。他們在促進腫瘤細胞凋亡和腫瘤細胞分化等方面表現出顯著作用，不同結構的人參皂苷在抗腫瘤活性方面存在差異，其中二醇型人參皂苷抗腫瘤活性明顯強於三醇型人參皂苷。隨著皂苷藥代動力學研究的深入，發現真正發揮抗腫瘤作用的是皂苷動物體內的次級代謝產物Compound K又稱人參阜苷Ml,人參阜苷Compound K屬於原人參二醇型阜苷。研究表明人參皂苷Compound K的酯化衍生物具有更好的抗腫瘤活性。EMl (Ml的硬脂酸酯、棕櫚酸酯和油酸酯的混合物)與Ml相比具有更強的抗腫瘤活性。但是EMl來源有限，難以分離純化。而利用化學合成技術獲得的系列Ml衍生物水溶性差。採用酯鍵、醚鍵等方式給Ml的修飾基引入水溶性較好的基團，使其兼具脂溶性和水溶性，人參皂苷Ml的結構式上有六個羥基，從而選擇性酯化和提高單酯化產率具有很重要的研究價值。
[0003]氯矽烷保護-去保護過程廣泛應用於羥基的保護反應，用氯矽烷將Compound K的糖苷基上最活潑的6號位羥基保護上，再與醯氯發生酯化反應，根據動力學和基團位阻大小對酯化位置的影響，從而優化了單酯化反應的選擇性，易於分離提純，提高酯化反應產率。
[0004]
【發明內容】
[0005]人參皂苷Ml和叔丁基二甲基氯矽烷為原料合成人參皂苷Ml的單醚化產物，將其產物與等當量的異丁醯氯在冰水浴，氮氣保護，二氯甲烷為溶劑，三乙胺為敷酸劑，DMAP催化的條件下發生單酯化反應，最後用四丁基氟化銨脫去叔丁基二甲基矽基。
[0006]本發明的積極效果在於用氯矽烷將人參皂苷Ml的糖苷基上最活潑的6號位羥基保護上，再與醯氯發生酯化反應，根據動力學和基團位阻大小對酯化位置的影響，從而優化了單酯化反應的選擇性，易於分離提純，提高酯化反應產率。
[0007]實驗例I人參皂苷Ml與異丁醯氯單酯化選擇性的合成儀器與試劑:
儀器:Agilent 1260 LC高效液相色譜儀；尼高麗550型傅立葉變換紅外光譜儀；RE52CS-1旋轉蒸發·儀，上海亞榮生化儀器廠；SHZ-D (III)旋轉水式真空泵，鞏義市英峪予華儀器廠；ETS-D4加熱磁力攪拌器，德國IKA公司；BT 323S電子天平，北京賽多利斯儀器系統有限公司；FH-203三用紫外分析儀(UV)，上海精科實業有限公司；KQ-50B超聲波清洗器，崑山市超聲儀器有限公司；柱層析矽膠(200-300目)，煙臺牟平區康比諾化學試劑廠；薄層層析矽膠(GF254)，煙臺牟平區康比諾化學試劑廠；試劑:叔丁基二甲基氯矽烷，阿法埃莎化學有限公司；異丁醯氯，阿法埃莎化學有限公司；三乙胺，天津科密歐化學試劑有限公司；二氯甲烷，國藥集團化學試劑有限公司；無水硫酸鈉，天津科密歐化學試劑有限公司；石油醚，天津科密歐化學試劑有限公司；乙酸乙酯，天津科密歐化學試劑有限公司
1.人參皂苷Ml與叔丁基二甲基氯矽烷的單醚化合成
在裝有電磁攪拌器的25mL休良克瓶中，加入100 mg人參皂苷Ml，5倍當量的叔丁基二甲基氯矽烷，氮氣保護，冰水浴下加入適量的三乙胺溶解，反應10 min後，升至室溫，薄層色譜法監測反應進程，24h反應完畢後，加入飽和氯化銨溶液停止反應。經CH2C12(3X10 mL)萃取，Brine洗有機相,無水Na2SO4乾燥,濃縮溶劑。
[0008]柱層析純化過程:矽膠量，5 g ;流動相，甲醇/ 二氯甲烷；
梯度洗脫後得到Rf值為9/34(8%Me0H/CH2Cl2)的產物100 mg 產物為乳白色固體為人參皂苷Ml的叔丁基二甲基矽醚。
[0009]2.人參皂苷Ml的叔丁基二甲基矽醚與異丁醯氯的單酯化反應
在裝有電磁攪拌器的25mL休良克瓶中，加入60 mg人參皂苷Ml的叔丁基二甲基矽醚，5%當量的DMAP，氮氣保護，冰水浴下加入適量的二氯甲烷溶解和三乙胺，反應10 min後，加入等當量的異丁醯氯，薄層色譜法監測反應進程，24h反應完畢後，加入飽和氯化銨溶液停止反應。經CH2Cl2(3X10 mL)萃取，Brine洗有機相，無水Na2SO4乾燥，濃縮溶劑。
`[0010]柱層析純化過程:矽膠量，6 g ;流動相，乙酸乙酯/石油醚；
梯度洗脫後得到Rf值為27/38 (8%Me0H/CH2Cl2)的酯35mg產率為56.5%
得到 Rf 值為 18/38 (8%Me0H/CH2Cl2)的酯 26mg 產率為 42%
兩種單酯產率和為98.5%
3.脫保護基反應
將兩種人參皂苷Ml的叔丁基二甲基矽醚與異丁醯氯的單酯化反應產物分別加入到50ML的圓底燒瓶中，用無水四氫呋喃溶解，加入1.5當量的四丁基氟化銨，反應2h後停止。得到脫保護基反應產物。
[0011]柱分離後得到兩個人參皂苷Ml的單酯產物，圖1和圖2為其結構式。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0012]圖1人參皂苷Ml的叔丁基二甲基矽醚與異丁醯氯的單酯化合成產物I的結構式。
[0013]圖2人參皂苷Ml的叔丁基二甲基矽醚與異丁醯氯的單酯化合成產物2的結構式。
[0014]【具體實施方式】
[0015]實施例1
1.人參皂苷Ml與叔丁基二甲基氯矽烷的單醚化合成
在裝有電磁攪拌器的25mL休良克瓶中，加入100 mg人參皂苷Ml，5倍當量的叔丁基二甲基氯矽烷，氮氣保護，冰水浴下加入適量的三乙胺溶解，反應10 min後，升至室溫，薄層色譜法監測反應進程，24h反應完畢後，加入飽和氯化銨溶液停止反應。經CH2Cl2 (3 X 10 mL)萃取，Brine洗有機相,無水Na2SO4乾燥,濃縮溶劑。柱層析純化過程:矽膠量，5 g;流動相，甲醇/ 二氯甲烷；
梯度洗脫後得到Rf值為9/34(8%Me0H/CH2Cl2)的產物100 mg產物為乳白色固體為人參皂苷Ml的叔丁基二甲基矽醚。
[0016]2.人參皂苷Ml的叔丁基二甲基矽醚與異丁醯氯的單酯化反應
在裝有電磁攪拌器的25mL休良克瓶中，加入60 mg人參皂苷Ml的叔丁基二甲基矽醚，5%當量的DMAP，氮氣保護，冰水浴下加入適量的二氯甲烷溶解和三乙胺，反應10 min後，加入等當量的異丁醯氯，薄層色譜法監測反應進程，24h反應完畢後，加入飽和氯化銨溶液停止反應。經CH2Cl2(3X10 mL)萃取，Brine洗有機相，無水Na2SO4乾燥，濃縮溶劑。
[0017]柱層析純化過程:矽膠量，6g ;流動相，乙酸乙酯/石油醚；
梯度洗脫後得到Rf值為27/38 (8%Me0H/CH2Cl2)的酯35mg產率為56.5%
得到 Rf 值為 18/38 (8%Me0H/CH2Cl2)的酯 26mg 產率為 42%
兩種單酯產率和為98.5%
3.脫保護基反應
將兩種人參皂苷Ml的叔丁基二甲基矽醚與異丁醯氯的單酯化反應產物分別加入到50ML的圓底燒瓶中，用無水四氫呋喃溶解，加入1.5當量的四丁基氟化銨，反應2h後停止。得到脫保護基反應產物。
【權利要求】
1.一種提高人參皂苷Ml與異丁醯氯單酯化選擇性的合成方法:反應流程為:保護-酯化_去保護。
2.根據權利要求1，合成具體方法為I在裝有電磁攪拌器的25mL休良克瓶中，加入100mg人參皂苷Ml，5倍當量的叔丁基二甲基氯矽烷，氮氣保護，冰水浴下加入適量的三乙胺溶解，反應10 min後，升至室溫，薄層色譜法監測反應進程，24h反應完畢後，加入飽和氯化銨溶液停止反應；經CH2Cl2 (3 X 10 mL)萃取，Brine洗有機相，無水Na2SO4乾燥，濃縮溶劑；2其次，柱層析純化之後進行人參皂苷Ml的叔丁基二甲基矽醚與異丁醯氯的單酯化反應:在裝有電磁攪拌器的25mL休良克瓶中，加入60 mg人參皂苷Ml的叔丁基二甲基矽醚，5%當量的DMAP，氮氣保護，冰水浴下加入適量的二氯甲烷溶解和三乙胺，反應10 min後，加入等當量的異丁醯氯，薄層色譜法監測反應進程，24h反應完畢後，加入飽和氯化銨溶液停止反應；經CH2Cl2 (3 X IOmL)萃取，Brine洗有機相，無水Na2SO4乾燥，濃縮溶劑；柱層析純化過程:矽膠量6 g ;流動相，乙酸乙酯/石油醚；梯度洗脫後得到Rf值為27/38 (8%Me0H/CH2Cl2)的酯35mg產率為56.5%得到Rf值為18/38 (8%Me0H/CH2Cl2)的酯26mg產率為42%,兩種單酯產率和為98.5% ；3進行脫保護基反應得到人參皂苷Ml與異丁醯氯單酯化合成產物。
3.根據權利要求1，人參皂苷Ml和叔丁基二甲基氯矽烷為原料合成人參皂苷Ml的單醚化產物，將其產物與等當量的異丁醯氯在冰水浴，氮氣保護，二氯甲烷為溶劑，三乙胺為敷酸劑，DMAP催化的條件下發生單酯化反應，最後用四丁基氟化銨脫去叔丁基二甲基矽基。
4.根據權利要求1，柱層析純化之後進行人參皂苷Ml的叔丁基二甲基矽醚與異丁醯氯的單酯化反應選擇性生成3號位和4號位兩種單酯的產率和達到98.5%。
5.根據權利要求1，人參皂苷Ml的叔丁基二甲基矽醚與異丁醯氯的單酯化反應選擇性生成兩種單酯的結構式如圖1和圖2。
【文檔編號】C07J17/00GK103588844SQ201310577912
【公開日】2014年2月19日 申請日期:2013年11月19日 優先權日:2013年11月19日
【發明者】弓曉傑, 肖景楠, 陳麗榮, 徐斐 申請人:大連傑信生物科技有限公司