用於治療疼痛和其它α2腎上腺素能介導疾病的方法及組合物的製作方法

2023-05-09 11:41:01

專利名稱：用於治療疼痛和其它α2腎上腺素能介導疾病的方法及組合物的製作方法
用於治療疼痛和其它Ct 2腎上腺素能介導疾病的方法及組合物本申請是2004年8月19提交的題為「用於治療疼痛和其它α 2腎上腺素能介導疾病的方法及組合物」的第200480033439. 9號(國際申請號PCT/US2004/027415)專利申請的分案申請。本申請根據35U.S.C. § 119 Ce) (I)要求2003年9月12日提交的臨時專利申請60/502, 327的優先權，該臨時專利申請的內容通過引用納入本說明書中。
背景技術：
人類腎上腺素能受體屬於膜內在蛋白質(integral membrane protein),它被分為兩個大類，即α和β腎上腺素能受體。兩種類型都在與兒茶酚胺、去甲腎上腺素和腎上腺素結合後介導外周交感神經系統的作用。去甲腎上腺素由腎上腺素能神經末梢產生，而腎上腺素由腎上腺髓質產生。腎上腺素能受體對這些化合物的結合親和力成為分類的基礎受體對去甲腎上腺素的結合傾向強於腎上腺素，更強於合成化合物異丙基腎上腺素。β受體對這些激素的優選的結合親和力與上述順序相反。在很多組織中，由α受體激活引起的功能響應，例如平滑肌收縮，與β受體結合引起的響應相反。接下來，通過來自各種動物和組織源的所述受體的藥理學特徵，將α和β受體之間的功能差別進一步突出並細化。結果，將α和β腎上腺素能受體進一步細分為三種α I、二種α 2和二種β亞型。現已認識到α I和α 2受體之間的功能差別，並開發了與這兩種亞型選擇性結合的化合物。這樣，在WO 92/00073中，報導了特拉唑嗪的R ( + )對映異構體與α I亞型的腎上腺素能受體選擇性結合的選擇能力。由於α2受體的激動劑刺激被認為抑制腎上腺素和去甲腎上腺素的分泌，而α 2受體的拮抗作用被認為增加這些激素的分泌，因此該化合物的α I/α 2選擇性顯著。這樣，由於α 2腎上腺素能受體介導引起血漿兒茶酚胺濃度升高，並伴有生理後遺症(心率增加，且平滑肌舒張或收縮)，因此一般認為非選擇性的α腎上腺素能阻斷劑例如苯氧苄胺和酚妥拉明的使用受到限制。此外，測定α激動劑活性和選擇性的方法包括RSAT (受體選擇與擴增技術)測定法，該測定法在 Messier 等，High Throughout Assays Of Cloned Adrenergic,Muscarinic, Neurokinin And Neurotrophin Receptors In Living Mamma.Iian Cells,Pharmacol. Toxicol. 76:308_11( 1995)中有報導，並針對α 2受體的測定進行了調整。該測定法檢測受體介導的接觸抑制損失，所述損失導致匯合細胞的混合群中含有受體的細胞的選擇性增殖。細胞數目的增加可用合適的轉染標記基因例如β_半乳糖苷酶進行檢測，其活性可簡單地在96孔板中檢測。激活G蛋白Gq的受體引起該響應。當與具有Gi受體識別域的雜合Gq蛋白即Gq/ 52共表達(coexpress)時,通常與Gi偶聯的α 2受體激活RSAT響應。見Conklin等，Substitution of Three Amino Acids Switches Receptor Spec ificityOf Gaa To That Of Gia, Nature 363:274-6. (1993)。為了解α-腎上腺素能受體的全面背景，讀者可以關注Robert R. Ruffolo,Jr., a -Adrenoreceptors:Molecular Biology, Biochemistry and Pharmacology,(Progress in Basic and Clinical Pharmacology 系列，Karger，1991)，其中講述了 a Jα2亞分類基礎、分子生物學、信號轉導、激動劑結構-活性關係、受體功能以及表現出α-腎上腺素能受體親和性的化合物的治療應用。來自人類組織源的α受體亞型的克隆、測序和表達使得將α I腎上腺素能受體細分為α ΙΑ、a IB和a ID。類似地,人類α 2腎上腺素能受體也可分為α 2Α、α 2Β和a 2C受體。每種α2受體亞型表現 出自身的藥理學和組織特異性。諸如可樂定和美託咪定的α 2受體全激動劑具有有效的止痛活性，因此，目前通常直接向中樞神經系統給藥，例如鞘內或硬膜外給藥。這樣的α 2受體全激動劑有時可用於治療慢性痛，例如腫瘤痛、術後疼痛、神經病變性疼痛、異常性疼痛、皰疹後神經痛、應激性腸道症候群以及其它內臟痛。所述α2全激動劑在其中具有某種治療活性的其它疾病包括成癮治療(例如戒毒或戒菸)、注意力缺損-活性過高障礙(ADHD)、圖雷特症候群、抑鬱及其它精神病障礙、高血壓、高眼壓(例如與某些類型的青光眼相關的高眼壓)以及痙攣。然而，這些藥劑並非普遍地、有效地用作止痛劑或用於治療所述的其它適應症，這是由於其療效和顯著的、有時甚至是佔優勢的心血管活性及鎮靜活性之間的治療窗帶很窄，並且這些藥劑與其它和鎮靜效果相關的藥物之間有顯著的相互作用。作為後一原因的例子，參見例如 Higuchi H.等，The Interaction Between Propofol And Clonidine For LossOf Consciousness, Anesth. Analg. 94 (4) :886_91, (2002 年 4 月)；Jaffe, R.等，AdverseInteraction between Clonidine and Verapamil,Annals Pharmacother. 28 (7-8):881-3(1994年7-8月)(報導可樂定和異搏定的鎮靜效果之間潛在的致命的協同作用)。由於在治療劑量下常見的副作用，包括高的鎮靜和心血管抑制活性，FDA批准的α 2受體激動劑(到目前僅包括α 2受體全激動劑)更常用作局部藥物或局部施用的藥物，而較少用作全身性藥劑。這樣，α 2全激動劑可樂定用於高眼內壓(IOP)的眼科治療，所述高眼內壓是由於例如青光眼引起的。由於藥物以滴眼液的形式直接給藥至眼睛，因此可將許多常見的全身效應最小化。然而，即使將該藥物向眼睛局部施用(這使得藥物可以滲透進入眼內的血管，並通過鼻淚管進入鼻子，從而導致全身遞送)，也不能消除該副作用，因此治療有效劑量仍然被該副作用所限制。

發明內容
本發明的第一個實施方案涉及如下意外發現，即向哺乳動物、特別是人類共同給藥I)第一組分，該組分含有一種其活性導致α 2腎上腺素能受體直接或間接激活的化合物，以及2)第二組分，該組分含有α I腎上腺素能受體拮抗劑，導致第一組分治療活性的效能提高，且第一組分的鎮靜活性沒有明顯提高。這樣，所述兩種組分的共同給藥使第一組分的治療活性和鎮靜活性之間的治療窗帶變寬。在一個目前優選的實施方案中，本發明涉及治療疾病的方法，所述疾病選自疼痛，特別是慢性痛；神經變性疾病；交感神經增強的、應激相關的疾病；以及眼病，包括青光眼和高眼壓。
優選地，包含於所述第一組分中的化合物選自a 2受體激動劑和去甲腎上腺素轉運抑制劑(例如三環抗抑鬱劑或TCA)。a 2全激動劑和TCA的例子在本領域早已是公知的；然而，本發明的發明人相信，本說明書公開的方法是在本專利申請中首次提出的。TCA (包括阿米替林(Amitril、Elavil)和去甲替林(Aventyl、Pamelor);去甲丙咪嗪(Pertofrane、Norpramin);多慮平(SinequaruAdapin);丙咪嗪(Janamine、Tofranil)；普羅替林(Vivactil);三甲丙咪嗪(Surmontil)；以及氯米帕明(Anafranil))最初用於治療抑鬱症。然而，已有報告稱它們可治療的疾病的範圍很寬，例如重鬱發作、所謂的非典型抑鬱症、驚恐性障礙、社交恐怖症、食慾過盛、發作性睡病、(未)伴有過度興奮的注意力缺陷障礙(ADD)、偏頭痛以及各種其它慢性痛症候群，包括神經病變性疼痛、兒童遺尿症以及強迫性神經失調。在其它嚴重精神病一例如躁鬱症、精神分裂症和情感性精神障5尋一的情況下發生的抑鬱症狀也可用TCA治療，下面會討論一些對此的說明。
對於很多TCA而言,與a 2受體全激動劑一樣,一種危險的副作用是鎮靜作用。為此，通常醫生要求在夜間睡前服用。心血管作用也與這些藥物有關。常見的有直立性高血壓，即站起或快速改變姿勢時的暈眩。經常報導的有快速心跳，有時伴有心悸。所述藥物會對不健康的心臟有害，例如導致EKG (心電圖)改變或心律不齊(心臟節律或傳導的紊亂)；或者，會惡化或加快心絞痛、心力衰竭或心肌梗死(心臟病發作)。這些心臟作用可能使很多患者不考慮採用TCA。正是這些心臟作用使得過量服用三環類藥物相當危險。過量服用可導致嚴重的、可能致命的心臟併發症。在美國，三環抗抑鬱劑是目前因服藥過量導致死亡的首要原因。已有報導稱，在分娩過程中，a 2全激動劑可樂定的硬膜外給藥有效地提供緩解疼痛和運動阻滯的作用,這類似於局部麻醉劑丁哌卡因-芬太尼(bupivacaine-fentanyl)的作用。在此將Angelo，Reg. Anaesth. &Pain Med. 25:3 (2000年1-2月)通過引用納入本說明書中。然而，與採用局部麻醉劑相比，這些作用伴有明顯更大的鎮靜作用和心血管作用。其它a 2全激動劑例如美託咪定也得到類似的結果。a 2激動劑，例如a 2受體全激動劑，已通過外周或非外周給藥用於治療慢性痛，例如腫瘤痛、術後疼痛、皰疹後神經痛、應激性腸道症候群以及其它內臟痛，糖尿病性神經病變、與肌肉痙攣相關的疼痛、複雜性局部疼痛症候群(CRPS)、交感神經維持性疼痛(sympa thetically maintained pain)、頭痛、異常性疼痛(allodynicpain)，炎性疼痛，例如與關節炎相關的炎性疼痛，胃腸疼痛，例如應激性腸道症候群(IBS)和克羅恩病，以及神經病變性疼痛。然而，在各種情況下，用這樣的化合物進行的治療被一方面的止痛作用和另一方面的過度鎮靜之間窄的治療窗帶所限制。同樣，諸如阿可樂定(一種全激動劑)和溴莫尼定的a 2腎上腺素能激動劑已用於眼用製劑中，以治療青光眼和其它涉及高IOP或涉及葡萄膜鞏膜房水流出減小的眼病。雖然通過將藥物直接置入(installation)眼內而給藥降低了藥物的全身濃度，並因而降低了不期望的副作用，但是藥物的吸收或攝入仍然通過置入而發生。因此，最有效地治療高眼內壓所需要的藥物劑量經常因在該濃度下可能也存在有害的副作用而受限。相反，本發明包括治療哺乳動物(含人類)的方法，所述哺乳動物患有對a 2激活劑 (activating agent)的治療有應答的疾病，所述方法包括將a I腎上腺素能受體拮抗劑和 a 2激活劑向所述哺乳動物給藥，其中的鎮靜作用或心血管抑制作用的程度小於將等效劑量的A2AA單獨給藥後的上述作用的程度。
「 a 2激活劑」或「A2AA」指的是其活性導致將a 2腎上腺素能受體直接或間接激活的a 2激動劑、TCA或其它化合物。當用於治療疼痛、特別是慢性痛時，與組合物中僅含有單獨的止痛劑A2AA的情況相比，本發明的方法提供了雖然不是獨有的、但是明顯更好的止痛活性(即更低的EC50)。此外，這樣的共同給藥不會嚴重影響藥物濃度和鎮靜以及降血壓活性之間的劑量-應答關係，而在採用僅含有一種止痛劑A2AA的組合物的情況下，所述的嚴重影響是常見的。「EC50」指的是一種給定試劑的濃度，在該濃度下觀察到活性是測得的最大活性的一半。在止痛及其它應用中，A2AA的優選給藥途徑可以是外周或非外周給藥，包括口服、靜脈內給藥、鞘內給藥以及硬膜外給藥。任一組分(或兩種組分)的其它可能的給藥方式包括，但不限於，鞘內泵、皮下泵、皮膚貼片、靜脈注射、皮下注射、肌肉注射、局部乳膏或凝膠，或口服藥丸，或上述方法的組合。雖然A2AA的外周給藥方法目前在某些應用中並不是優選的，但在這些應用中也可觀察到所要求的方法的優勢，該優勢至少部分地取決於試劑及其給藥所針對的適應症的特性。 除了活性成分之外，第一和第二組分優選含有一種或多種與所選的給藥方式相適應的可藥用載體。本說明書使用的短語「可藥用載體」指的是可藥用材料、組合物或賦形齊U，例如液體或固體的填充劑、稀釋劑、賦形劑、溶劑或封裝材料。每種載體必須在以下意義上是「可接受的」:與製劑的其它成分相容，與給藥方式相容，且對患者無害。可充當可藥用載體材料的一些實例包括，但不限於(a)糖類，例如乳糖、葡萄糖和蔗糖；(b)澱粉，例如玉米澱粉和馬鈴薯澱粉；(C)纖維素及其衍生物，例如羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素和醋酸纖維素；(d)西黃蓍膠粉；(e)麥芽；(f)明膠；(g)滑石；(h)賦形劑，例如可可油和栓劑蠟；
(i)油類，例如花生油、棉籽油、紅花油、芝麻油、橄欖油、玉米油以及大豆油；(j) 二醇類，例如丙二醇；(k)多元醇類，例如甘油、山梨醇、甘露醇以及聚乙二醇；(I)酯類，例如油酸乙酯和十二酸乙酯；(m)瓊脂；(n)緩衝劑，例如氫氧化鎂、氫氧化鋁、硼酸和硼酸鈉，以及磷酸鹽緩衝劑；(O)藻酸；(P)無熱源水；(q)等滲鹽水；(r)林格溶液；(S)乙醇；(t)磷酸鹽緩衝溶液；以及U)其它適合用於藥物製劑的無毒、相容物質。在用於治療慢性痛的方法中，以下說明可能有助於理解本發明。已知慢性痛(例如源於腫瘤、關節炎以及很多神經病變損傷的疼痛)和急性痛(例如由即時機械刺激，例如組織切割、擠壓、刺、碾壓產生的疼痛)是不同的神經現象，它們在很大程度上或者由不同的神經纖維和神經受體介導，或者由這些神經在慢性刺激下的重排或功能改變介導。急性疼痛的鎮靜作用傳遞非常快，其傳遞主要是通過傳入的神經纖維，即C纖維，這種神經纖維對機械刺激、熱刺激和化學刺激的閥值通常較高。雖然慢性痛的機理還沒有被完全理解，但是急性組織損傷能在最初的刺激之後幾分鐘或幾小時內引起繼發症狀(secondary symptom),包括引起疼痛響應所需的刺激強度在局部降低。該現象通常發生於從最初刺激的位置向外發散的一個區域內(但大於所述位置)，這被稱為痛覺過敏。繼發應答可以引起顯著提高的對機械或熱刺激的敏感性。A傳入纖維(AP和AS纖維)受刺激的閾值比C纖維的低，且A傳入纖維可能涉及慢性痛的感覺。例如，在正常條件下，對這些纖維的低閾值刺激(例如輕刷或撩癢)是不痛的。然而，在某些條件下，例如神經損傷後，或在稱為帶狀皰疹的皰疹病毒介導疾病中，即使是施以輕觸或衣服的拂拭也可以是很痛的。該狀況被稱為異常性疼痛，並且可能至少部分地由AP傳入神經介導。C纖維也可能涉及慢性痛的感覺，但是如果是這樣，那麼很明顯，神經元長時間持續的炎症(firing)導致某種改變，該改變導致慢性痛的感覺。本說明書使用的術語「疼痛」包括急性和慢性痛。本說明書使用的術語「急性痛」指的是快速的、通常具有高閾值的疼痛，它由損傷引起，例如切割、擠壓、燒灼，或化學刺激，例如暴露於辣椒的活性成分辣椒素中。本說明書使用的術語「慢性痛」指的是除急性痛之外的其它疼痛，包括但不限於，神經病變性疼痛、內臟疼痛、纖維肌疼痛、炎性疼痛、頭痛、肌肉痛和牽涉痛。可以理解的是，慢性痛相對來說是長期的，例如幾個月或幾年，且可以是持續的或間歇的。在一個實施方案中，本發明的方法用於治療「神經病變性疼痛」，本說明書使用的術語「神經病變性疼痛」指的是因神經損傷引起的疼痛。神經病變性疼痛不同於傷害感受性疼痛，是因涉及小的皮膚神經、肌肉或結締組織中的小神經的急性組織損傷而引起的疼痛。與神經病變性疼痛相反，傷害感受性疼痛通常限於組織修復期間，通常可通過止痛劑或類鴉片物質緩解(Myers, Regional Anesthesia 20:173-184 (1995))。 神經病變性疼痛通常是長期的或慢性的，可以在最初的急性組織損傷之後發展數天或數月。神經病變性疼痛可涉及持續自發性疼痛以及異常性疼痛或痛覺過敏，所述異常性疼痛是一種對通常不痛的刺激所產生的疼痛反應，所述痛覺過敏是一種對通常輕微的疼痛刺激，例如針刺所產生的強化的反應。神經病變性疼痛通常對類鴉片物質治療有抗性(Myers, supra,1995)。本發明的方法可用於治療由下述原因導致的神經病變性疼痛，所述原因包括但不限於，外周神經、背根神經節、脊髓、腦幹、丘腦或皮層的外傷、損傷或疾病。可由本發明的方法治療的神經病變性疼痛包括，神經痛例如皰疹後神經痛，去傳入痛，以及糖尿病性神經病變。可以理解的是，本發明的方法可用於治療神經病變性疼痛，而不論所述疼痛的病因如何。作為非限制性的例子，本發明的方法可用於治療由下述原因導致的神經病變性疼痛外周神經障礙例如神經瘤；神經壓迫；神經壓傷或拉伸，或神經不完全橫切；或單一神經病變或多發性神經病變。作為進一步的非限制性的例子，本發明的方法可用於治療下述疾病引起的神經病變性疼痛，例如背根神經節壓迫；脊髓發炎；脊髓挫傷、脊髓瘤或脊髓半切除(hemisection)；以及腦幹、丘腦或皮層的瘤或損傷。如上所述，本發明的方法可用於治療單一神經病變或多發性神經病變導致的神經病變性疼痛。神經病變是外周神經系統中的機能失調或病變，其臨床特徵是感覺或運動神經元異常。術語單一神經病變是指僅單一外周神經受影響的神經病變，而術語多發性神經病變是指多個外周神經受影響的神經病變。神經病變的病因可以是已知的或未知的。已知的病因包括疾病或中毒狀態的併發症，所述疾病或中毒狀態包括例如引起神經病變的最常見的代謝失調一糖尿病，或輻射、缺血或脈管炎。可由本發明的方法治療的多發性神經病變包括，但不限於，由脊髓灰質炎後症候群、糖尿病、酒精、澱粉狀蛋白、毒素、HIV、甲狀腺機能減退、尿毒症、維生素缺乏、化療、2』，3』 -雙脫氧胞苷(ddC)治療或法布裡病(Fabry』 sdisease)引起的多發性神經病變。可以理解的是，本發明的方法可用於治療這些或其它類型的、病因已知或未知的慢性神經病變性慢性痛。本發明的方法也可用於治療由頭痛導致的慢性痛，所述頭痛包括緊張性頭痛、偏頭痛、叢集性頭痛、激素性頭痛(hormone headache)、反彈性頭痛、竇性頭痛以及器質性頭痛。本發明的方法還可用於治療由活動導致的慢性痛，所述活動包括但不限於，例如長時間用電腦工作、用重物或重型機械工作或長時間站立，以及重複運動障礙(repetitivemotion disorder) (RMD)0 RMD是多種能導致慢性痛的肌肉疾病。可導致RMD的原因有用力過度、不正確的姿勢、肌肉疲勞、神經或組織壓迫、活動或運動的過多不間斷重複，或由不自然的或笨拙的運動，例如臂或腕的扭曲引起的摩擦。常見的RMD發生於手、腕、肘、肩、頸、背、臀、膝、腳、腿和踝，而手和臂最經常受影響。本發明的方法可用於治療任何類型的RMD弓丨起的慢性痛。本發明的方法還可用於治療由肌肉過度緊張導致的慢性痛，例如某種類型的背痛，例如因椎間盤突出而導致的背痛；坐骨神經痛和關節痛，以及由發炎導致的慢性痛，所述發炎包括由發炎性疾病一例如骨關節炎和類風溼性關節炎一引起的發炎；組織或關節的損傷例如壓碾、刺、拉伸引起的發炎；由感染例如結核病引起的發炎；或神經性發炎。作為非限制性的例子，本發明的方法可用於治療慢性胃腸炎，包括克羅恩病、潰瘍性結腸炎、胃炎、應激性腸病，以及慢性內臟痛，例如腫瘤引起的或腫瘤治療時伴隨的疼痛，例如化療或 放療時伴隨的疼痛。類似地，本發明的方法可用於治療慢性炎症疼痛，例如由關節炎一例如類風溼性關節炎、痛風性關節炎或骨關節炎；脊椎炎；或自身免疫性疾病例如紅斑狼瘡引起的慢性炎症疼痛。本發明的方法還可用於治療慢性肌肉痛、與物質濫用或戒除相關的慢性痛以及病因已知或未知的其它類型的慢性痛。在本發明的方法中，可以理解的是，第一和第二藥物可採用任何相應的方法共同給藥。它們可採用相同或不同的方法、同時或不同時地給藥。除治療疼痛以外，已知a 2激動劑和TCA可用於神經保護。例如，下列疾病可用本說明書所述的第一和第二組分治療，該組分根據本發明的方法將導致較小的副作用，所述疾病包括但不限於，神經變性疾病，例如帕金森病、阿爾茨海默病、肌萎縮性側索硬化症和多發性硬化；局部缺血，例如中風；癲癇；以及神經病，例如糖尿病性和缺血性視網膜病。此夕卜，精神病例如精神分裂症和雙相形精神障礙現在也被認為在某種程度上涉及神經變性。此外，現在已知本發明的組合物以及方法可用於預防或治療多種交感神經增強的、應激相關的疾病中的任意一種，且沒有伴隨的鎮靜作用。所述疾病包括，但不限於，感覺超敏反應，例如，與纖維肌痛或頭痛例如偏頭痛相關的感覺超敏反應；胃腸疾病，例如應激性腸道症候群和消化不良；皮膚病，例如牛皮癬；心血管障礙；心動過速；外周血管收縮障礙，例如雷諾症候群和硬皮病；恐慌發作；代謝障礙，例如II型糖尿病、胰島素抗性和肥胖症；肌肉收縮障礙，包括骨骼肌收縮障礙、平滑肌收縮障礙、痙攣以及與緊張型頭痛相關的肌肉收縮障礙；行為失常；以及性功能障礙。在一個實施方案中，所述交感神經增強疾病是除了交感神經維持性疼痛之外的疾病，所述交感神經維持性疼痛是任何能通過交感神經阻斷緩解的疼痛。有關該應用的背景知識見於2003年9月12日提交的、名稱為「用於識別改進的非鎮靜a -2激動劑的新方法」的美國專利申請No. 60/502，840，該專利申請與本專利申請具有相同的申請日，並且根據共同的轉讓義務具有相同的受讓人，在此通過引用將其納入本說明書。在a 2激活劑和a I拮抗劑共同給藥的基礎上，本發明具有了治療神經變性疾病的治療功效，並且與單獨使用A2AA相比，其鎮靜或心血管副作用更低。通過減少或防止神經元死亡，可以認識到對病理生理學或症狀的改善。本說明書使用的術語「神經元死亡」指的是響應損傷或異常的死亡誘導而導致的神經細胞破壞。「神經元死亡」的定義中不包括非病理學的神經元凋亡，例如在胚胎發育過程中發生的神經元凋亡，或在含有易凋亡神經元(apoptosis-liable neuron) 一例如嗅上皮一的自我更新組織中發生的神經元凋亡。因此，術語神經元死亡可以包括非嗅覺神經上皮的神經元損傷，例如中樞神經系統神經元一例如腦神經元一的損傷，以及非易凋亡神經元中的神經元損傷。當用於涉及神經元死亡時，本說明書使用的術語「減少」指的是防止、降低或消除神經細胞中的死亡誘導。通過將有 效量的A2AA和a I拮抗劑給藥以減少神經元死亡，是一種治療涉及神經元死亡或功能障礙的疾病的有效方法，且具有最小化的鎮靜或心血管副作用。本說明書使用的術語「神經變性疾病」指的是特徵為進行性神經系統功能障礙的疾病。神經變性疾病包括一組不同種類的中樞或外周神經系統疾病，所述疾病具有多種不同的病因。這樣的疾病可以是，但不限於，遺傳性的、繼發於中毒或代謝過程，且可以因感染而導致。神經變性疾病是可與年齡有關的或慢性的進行性疾病。該疾病的特徵可以是腦的相對特定的區域的異常或特定神經元群的異常。在不同的神經變性疾病中，受影響的特定細胞群通常決定了該疾病的臨床表型。具體而言，神經變性疾病可以與特定的染病中樞或外周神經系統結構的萎縮相關。示例性的神經變性疾病包括，但不限於，運動神經元病(ALS)、帕金森症候群、多發性硬化、瀰漫性大腦皮層萎縮、路易體痴呆、皮克病、中腦皮質邊緣痴呆(mesolimbocortical dementia)、丘腦變性、延髓性麻痺、亨廷頓舞蹈病、皮質紋狀體脊髓變性、皮質基底神經節變性、大腦小腦變性(cerebrocerebellar degeneration)、具有疫攣性下肢輕癱的家族性痴呆、葡聚糖體病(polyglucosan body disease)、希-德症候群、橄欖體腦橋小腦萎縮、進行性核上麻痺、畸形性肌張力障礙、哈-斯病、Meige症候群、家族性震顫、吉累斯 德拉圖雷特症候群、棘紅細胞增多症伴發舞蹈病(acanthocytic chorea)、弗裡德賴希共濟失調、霍姆斯家族性小腦皮層萎縮(Holmes familial cortical cerebellaratrophy)、AIDS 相關痴呆、GSS 氏病(Gerstmann-Straussler-Scheinker disease)、進行性脊髓性肌萎縮、進行性延髓性麻痺(progressive balbar palsy)、原發性側索硬化、遺傳性肌萎縮、痙攣性截癱、腓側肌萎縮、肥大性間質性多發性神經病、多神經炎型遺傳性共濟失調、視神經病變、糖尿病性視網膜病變、阿爾茨海默病以及眼肌麻痺。本領域技術人員理解，這些和其它輕度、中度或重度的神經變性疾病可以用本發明的方法治療。在本發明的另一個實施方案中，提供了治療眼病的方法，該方法包括將含有A2AA的第一組分和含有a I受體拮抗劑的第二組分共同給藥。在該實施方案中，能夠在所產生的鎮靜和心血管作用大幅降低的A2AA濃度下獲得治療功效。可用本發明的方法治療的眼病的例子包括但不限於，青光眼一包括開角型青光目艮，高眼壓，黃斑病和視網膜變性，例如非滲出性年齡相關黃斑變性(ARMD)、滲出性年齡相關黃斑變性(ARMD)、脈絡膜新生血管形成、糖尿病性視網膜病、中心性漿液性脈絡膜視網膜病變、囊樣黃斑水腫、糖尿病性黃斑水腫、近視性視網膜變性；炎性疾病，例如急性多灶性鱗狀色素上皮病變、貝切特病、鳥槍彈樣視網膜脈絡膜病變、傳染性疾病(梅毒、萊姆病、結核病、弓形體病)、中間葡萄膜炎(睫狀體平坦部炎)、多灶性脈絡膜炎、多發性一過性白點症候群(Multiple Evanescent White Dot Syndrome, MEWDS)、眼結節病(OcularSarcoidosis)、後鞏膜炎、匍行性脈絡膜炎(ser piginous choroiditis)、視網膜下纖維化和葡萄膜炎症候群、伏-小柳-原田症候群、點狀內層(punctate inner)脈絡膜病變、急性後極部多灶性鱗狀色素上皮病變、急性視網膜色素上皮炎、急性黃斑視神經視網膜病；血管和滲出性疾病，例如糖尿病性視網膜病、視網膜中央動脈阻塞病、視網膜中央靜脈阻塞、彌散性血管內凝血病、視網膜分支靜脈阻塞、高血壓性眼底改變(Hypertensive FundusChanges)、眼缺血症候群、視網膜動脈微動脈瘤、慢性滲出性視網膜病(Coat』 s Disease)、旁中心凹毛細血管擴張、半側視網膜靜脈阻塞、視乳頭靜脈炎(Papillophlebitis)、視網膜中央動脈阻塞、視網膜分支動脈阻塞、頸動脈病(CAD)、霜樣樹枝狀(Frosted Branch)脈管炎、鐮狀紅細胞性視網膜病和其它血紅蛋白病、血管樣條紋、家族性滲出性玻璃體視網膜病變；伊爾斯病；創傷性疾病、外科疾病以及環境疾病，例如交感性眼炎、葡萄膜炎性視網膜病(Uveitic Retinal Disease)、視網膜脫離、外傷、視網膜雷射治療、光動力學治療、光凝固、手術中血流灌注不足、輻射性視網膜病、骨髓移植性視網膜病(Bone MarrowTransplant Retinopathy);增殖性疾病，例如增殖性玻璃體視網膜病以及視網膜前膜(Epiretinal Membrane);傳染性疾病,例如眼組織胞眾菌病、眼弓蛔蟲病、擬眼組織胞眾菌病症候群(PH0S)、眼內炎、弓形體病、與HIV感染相關的視網膜病、與HIV感染相關的脈絡膜病、與HIV感染相關的葡萄膜病、病毒性視網膜炎、急性視網膜壞死、進行性視網膜外層 (outer retinal)壞死、真菌性視網膜病、眼梅毒、眼結核、瀰漫性單側亞急性視神經視網膜炎、蠅蛆病；遺傳病，例如視網膜色素變性、伴有視網膜營養不良的全身性疾病、先天性靜止性夜盲、錐體(cone)營養不良、斯塔加特病和眼底黃色斑點症(Fundus Flavimaculatus)、貝斯特病、視網膜色素上皮的圖形營養不良(pattern dystrophy)、X伴性(X-linked)視網膜劈裂症、索斯比眼底營養不良(Sorsby』 s Fundus Dystrophy)、良性同心性黃斑病、Bietti結晶樣營養障礙、彈性假黃瘤(pseudoxanthoma elasticum);視網膜損傷,例如黃斑洞、巨大視網膜撕裂；視網膜腫瘤，例如與腫瘤相關的視網膜病、RPE的先天性肥大、後部葡萄膜黑色素瘤(Posterior Uveal Melanoma)、脈絡膜血管瘤、脈絡膜骨瘤、脈絡膜轉移、視網膜及視網膜色素上皮的混合性錯構瘤(Combined Hamartoma)、視網膜母細胞瘤、眼底的血管增生瘤(Vasoproliferative Tumor)、視網膜星形細胞瘤和眼內淋巴瘤。視神經視網膜和視神經的缺血可在以下情況下發生視網膜分支靜脈阻塞、視網膜分支動脈阻塞、視網膜中央動脈阻塞、視網膜中央靜脈阻塞、玻璃體內手術、視網膜變性例如視網膜色素變性和與年齡相關的黃斑變性。本發明的方法中使用的組合物一例如共同給藥的A2AA和a I拮抗劑一其減少神經元死亡或功能障礙的能力，可以通過在用所述化合物進行治療和未進行治療的情況下分析可觀測的神經細胞破壞的信號或徵兆而加以測定。神經元凋亡死亡的引發對細胞功能和形態具有可觀測的影響，並且對含有功能障礙或凋亡神經元的組織、器官以及動物體也有可觀測的影響。因此，神經元破壞的指標可以包括可觀測的分子參數變化，例如凋亡誘導基因表達的增加；細胞功能變化，例如線粒體功能降低；細胞形態變化，例如細胞收縮和起泡(bleb);器官和組織的功能以及形態變化，例如出現梗塞或其它損害，其嚴重性可以通過包括損傷體積(lesion volume)和損傷尺寸(lesion size)在內的參數進行測定；動物模型中的生理變化，包括功能變化和行為變化，前者包括例如運動功能損失、死亡率增加以及存活率減小，後者包括例如痴呆發作或記憶損失。可以通過在細胞、組織、器官或動物體中對其至少兩個狀態的神經元破壞指標進行比較，來測定所述細胞、組織、器官或動物體的神經元破壞指標的降低。這樣，神經元破壞指標的降低可採用相對於對照條件的方式表達。對照條件可以是，例如治療前的、未進行治療的、以其它方法治療的或正常動物中的細胞、組織、器官或動物體，或者由本領域技術人員確定的其它合適條件。在具體的實施方案中，本發明的方法通過將本發明的第一和第二組分進行外周給藥來實施。本說明書中使用的術語「外周給藥」或「通過外周給藥」指的是將試劑引入研究對象的中樞神經系統之外。外周給藥包括除直接向脊柱或腦給藥之外的其它任何給藥途徑。這樣，清楚的是，鞘內和硬膜外給藥以及盧頁內注射(cranial injection)或植入雖然在本發明的實施方案的範圍內，但不在術語「外周給藥」或「通過外周給藥」的範圍內。外周給藥可以是局部或全身給藥。局部給藥導致遞送至局部給藥部位的藥用組合物顯著多於遠離給藥部位的區域。全身給藥導致藥用組合物的遞送基本上遍及研究對象的整個外周神經系統，也可導致遞送至中樞神經系統，這有賴於該組合物的特性。可用於本發明方法的外周給藥途徑包括，但不限於，口服、局部給藥、眼內給藥、靜脈或其它注射，以及植入微泵或其它緩釋裝置或製劑。可用於本發明的藥用組合物可以以下方式進行外周給藥，例如任何可接受形式的口服，例如片劑、液體、膠囊、粉劑等；靜脈注射、腹膜內注射、肌肉注射、皮下注射或非經腸注射；經皮擴散或電泳；任何可接受形式的局部給藥，例如滴劑、乳膏、凝膠或藥膏；以及通過微泵或其它植入的緩釋裝置或製劑。本發明還涉及治療哺乳動物疼痛的方法，所述方法包括外周或非外周共同給藥a)第一組分，該組分含有一種其活性導致a 2腎上腺素能受體直接或間接激活的化合物，以及b)第二組分，該組分含有a I腎上腺素能受體拮抗劑，其中根據該方法第一組分以有效引起半數最大止痛作用的劑量給藥時所引起的鎮靜程度，小於相似的染病哺乳動物中，在沒有所述第二組分的情況下，以有效引起半數最大止痛作用的劑量給藥時所引起的鎮靜程度。本發明的本實施方案和其它實施方案可以是非外周的，例如鞘內或硬膜外給藥，或全身給藥，例如口服、腹膜內給藥、靜脈給藥、肌肉給藥或經皮給藥。除了治療疼痛以外，本發明的另一實施方案涉及治療已知a受體激動劑對其有效的其它疾病。這樣的疾病包括但不限於，諸如高眼壓和青光眼的眼病，交感神經增強的、應激相關的疾病，神經變性疾病，以及痙攣。用a腎上腺素能藥物治療這些疾病可能也會引起有害的鎮靜副作用，本發明可幫助改善該副作用。在本實施方案中，對於將第一和第二組分向眼睛的治療性給藥，可優選將第一和第二組分進行局部遞送。局部眼用製劑在本領域是公知的。眼用藥用組合物可以通過以下所述製備將治療有效量的第一和第二組分(或者作為單一製劑，或者作為獨立的製劑)作為活性組分與常規的可眼用藥用賦形劑結合，並製成適合於局部眼用的單位劑型。在液體製劑中，每種成分的治療有效量通常在約0. 0001到約5% (W/W)之間，優選約0. 001到約I. 0% (W/W)之間。對於眼用，優選的溶液可採用生理鹽水溶液作為主要賦形劑來製備。優選採用合適的可藥用緩衝體系(例如，但不限於，硼酸鹽、氨基丁三醇或磷酸鹽緩衝體系)將這樣的眼用溶液的PH保持在約6. 2到約7. 8之間。所述製劑也可含有常規的可藥用防腐劑、穩定劑和表面活性劑。優選的可用於本發明的眼用局部方法和組合物中的防腐劑包括，但不限於，氯化苯甲烷銨、其它聚合(polymeric)季銨防腐劑(例如PHMB和:Polyquad )、氯代丁醇、硫柳汞、醋酸苯汞以及硝酸苯汞。特別優選的一類防腐劑是氧化性防腐劑，例如穩定化的二氧化氯(例如Plir i te 穩定化的二氧化氯)、穩定化的氧硼酸鹽(oxyborate)等。用於眼用製劑的表面活性劑可以包括離子或非離子表面活性劑，例如，但不限於，Triton (例如TritonX-100),Tween(例如聚山梨醇酯40、聚山梨醇酯80)和Pluronic 表面活性劑。同樣，多種優選的賦形劑可用於本發明的眼用製劑中。這些賦形劑包括，但不限於，聚乙烯醇；Carbopols (丙酸與烯丙基蔗糖交聯的聚合物)；Pemulin ;聚乙烯吡咯烷酮；泊洛沙姆；纖維素製品，例如羧甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羥甲基纖維素 等。可優選將所述眼用製劑製成乳劑。如果這樣，所述乳劑可以是水包油乳劑或油包水乳劑。該乳劑可含有防腐劑和/或賦形劑；然而，乳劑通常會含有至少一種表面活性劑，
並會含有乳化劑。乳化劑也可以是一種表面活性劑。一種優選的乳化劑是Pemulin ，它
是一種交聯的聚丙烯酸酯。如果方便,或者根據需要,可以加入張力調節劑(tonicity adjustor)。張力調節劑包括但不限於，鹽類，特別是氯化鈉、氯化鉀，甘露醇和甘油，或任何其它合適的可眼用張力調節劑。可以採用多種緩衝劑以及調節pH值的方法，只要獲得的製劑是可眼用的。相應地，緩衝劑包括醋酸鹽緩衝劑、檸檬酸鹽緩衝劑、磷酸鹽緩衝劑和硼酸鹽緩衝劑。酸或鹼可以根據需要用於調節這些製劑的PH值。類似地，用於本發明的可眼用抗氧化劑包括，但不限於，偏亞硫酸氫鈉、硫代硫酸鈉、乙醯半胱氨酸、丁基化羥基茴香醚以及丁基化羥基甲苯。可包括於眼用製劑中的其它賦形劑組分有螯合劑。優選的螯合劑是依地酸二鈉，但是其它螯合劑也可代替其使用或與其結合使用。各組分可按以下的量使用組分量(% w/w)
各活性成分約0. 001-5
防腐劑約0-0.10
賦形劑約0-40
張力調節劑約0-10
緩衝劑約0.01-10
PH值調節劑按將pH值調至4. 5-7. 5所需
抗氧化劑按需
表面活性劑按需
純水按需補至100%本發明的活性化合物的實際劑量取決於具體的化合物和待治療的疾病；對合適劑量的選擇是本領域技術人員熟知的。將本發明的眼用製劑方便地包裝為適合於計量施用的形式，例如於裝有滴管的容器中，以方便向眼睛的施用。適合於滴用的容器通常由合適的惰性、無毒塑料製成，通常容納約0. 5到約15ml的溶液。通常將不含防腐劑的溶液裝於不可再封的(non-resealable)容器中，該容器中可容納最多約10個、優選最多約5個單位劑量，其中典型的單位劑量是I到約8滴，優選I到約3滴。一滴的體積通常在約20-35. mu. I。在本發明的方法中，第一組分優選選自a2激動劑或TCA;更優選a 2激動劑；最優選為選自可樂定、溴莫尼定、美託咪定、米伐折醇(mivazerol)和替扎尼定的a 2全激動劑。這些化合物及其合成方法是公知的。在具體的實施方案中，a I腎上腺素能受體拮抗劑選自哌唑嗪、特拉唑嗪和5-甲基烏拉地爾。前兩種化合物及其合成方法分別在美國專利3，511，836和4，026，894中記述；後一化合物是一種易於合成的烏拉地爾衍生物，其合成方法記述於美國專利3，957，786中。這些和本專利申請中所參引的所有其它參考文獻在此通過引用納入本說明書中。此外，其它a I受體拮抗劑在本領域是公知的；很多這樣的化合物已獲臨床批准。另參見Lagu，26 Drugs of the Future 757-765 (2001)和 Forray 等，8Exp. Opin. Invest. Drugs 2073(1999)，在此通過引用將其納入本說明書中，其中提供了很多a I拮抗劑的例子。在本發明說明書的教導下，對於本領域技術人員而言，其它實施方案將是顯而易見的。


圖I示出了在採用硫前列酮誘導異常性疼痛模型的野生型小鼠中，與5-甲基烏拉地爾共同給藥時或不與5-甲基烏拉地爾共同給藥時的可樂定的止痛活性。圖2是與5-甲基烏拉地爾共同給藥時或不與5-甲基烏拉地爾共同給藥時的可樂定的劑量應答曲線，下面將對其實施加以更詳細的記述。結果表明，5-甲基烏拉地爾對可樂定的鎮靜作用沒有影響。
圖3示出了在採用硫前列酮誘導異常性疼痛模型的野生型小鼠中，與5-甲基烏拉地爾共同給藥時或不與5-甲基烏拉地爾共同給藥時的阿米替林的止痛活性。圖4示出了將哌唑嗪(圖4A)、溴莫尼定(圖4B )、溴莫尼定和0. 001%哌唑嗪(圖4C)以及溴莫尼定和0. 003%哌唑嗪向兔眼局部給藥的情況下，經處理的和未處理的兔眼的眼內壓。
具體實施例方式在第一個實施方案中，本發明涉及申請人的如下意外發現向需要治療的哺乳動物外周或非外周共同給藥一種組合物，所述組合物含有
I)第一組分，該組分含有一種其活性導致直接或間接刺激a 2腎上腺素能受體活性的化合物，以及2)第二組分，該組分含有一種a I腎上腺素能受體拮抗劑，當產生治療效果所需的第一組分的劑量小於在相似的接受第一組分作為單獨的治療劑給藥的、染病哺乳動物中產生類似治療效果所需的劑量時，上述給藥導致較低的鎮靜和/或心血管副作用。這意味著，可通過將第一和第二組分向哺乳動物、包括人類共同給藥來獲得治療有效的效果，該效果包括例如止痛、降眼壓活性、神經保護等，而且，和類似的有效治療劑量的第一組分的給藥相比，所述共同給藥在治療劑量下的鎮靜作用顯著降低，並且心血管活性有所抑制。在目前優選的實施方案中，所述哺乳動物因慢性痛而需要止痛劑。因此，在本發明的該實施方案中，申請人發現，將一種其活性導致a 2腎上腺素能受體直接或間接激活的化合物(A2AA) —例如a 2受體全激動劑，例如可樂定、美託咪定或替扎尼定或TCA，與一種a I受體拮抗劑共同給藥，可導致a 2介導的A2AA治療活性的「暴露(unmasking)」或增大，並伴有A2AA治療效能的提高，且使用該試劑時常見的鎮靜副作用基本未升高。結果，對於用選定的A2AA進行的治療而言，其治療窗帶與無a I拮抗劑的給藥相比有所增大，這使得可以在某些情況下增加A2AA的用量，而在另一些情況下用量不變但副作用減小。優選地，所述A2AA為a 2腎上腺素能受體激動劑。雖然應將本發明理解為不受任何具體理論的限制，但是申請人相信，本發明之所以起作用是因為，對a I受體或其一種或多種亞型一包括人類a 1A、a IB和a ID受體一的刺激，使刺激a2A、028和/或a 2C受體所產生的活性(例如止痛、降眼壓、神經保護或其它活性)減弱。另外還相信，大多數A2AA並沒有確定為缺乏a I刺激活性(無論其是否被稱為a 2 「選擇性」的)，因此具有足夠的內在a I激動劑活性以導致所述減弱作用。因此可以相信，a I拮抗劑的共同給藥阻止了刺激a I受體所導致的有害反作用。優選地，所述a I拮抗劑至少具有a IA受體拮抗劑活性、a IB拮抗劑活性或a ID受體拮抗劑活性。更優選地，所述a I受體拮抗劑至少具有a IA受體拮抗劑活性。所述拮抗劑可以在一個以上的a I受體亞型上具有拮抗劑活性。將A2AA和a I拮抗劑向哺乳動物共同給藥，除了不增加、甚至有時減少用a 2激動劑治療哺乳動物時出現的鎮靜副作用以外，還提高了 A2AA的治療效果(即拓寬了 「治療窗帶」)，因而使得能夠以低於其它情況下可能的劑量進行治療。在另一個實施方案中，本發明涉及治療哺乳動物疼痛的方法，所述方法包括給藥I)第一組分，其活性導致a 2腎上腺素能受體的直接或間接激活，以及2)第二組分，該組分含有一種a I腎上腺素能受體拮抗劑。優選地，所述A2AA選自a 2受體激動劑和去甲腎上腺素轉運抑制劑(例如三環抗抑鬱劑或TCA);更優選選自a受體激動劑。或者，所述A2AA優選選自溴莫尼定、可樂定、替扎尼定、美託咪定、去甲腎上腺素和MPV-2426 (雷度咪定)。另外，在另一個實施方案中，本發明涉及治療哺乳動物的高眼內壓的方法，所述方法包括給藥1)第一組分，其活性導致a 2腎上腺素能受體的直接或間接激活，以及2)第二組分，該組分含有一種a I腎上腺素能受體拮抗劑。在該實施方案中，優選的給藥途徑可以是局部眼用製劑，例如溶液劑、懸浮劑或乳劑。在一個優選的實施方案中，A2AA是a 2激動劑，更優選a 2全激動劑。優選將第一和第二組分包含於單一製劑中以進行共同給藥，但是第一和第二組分也可作為單獨的組合物共同給藥。本說明書使用的「共同給藥」應當包括第一和第二組分作為單一的組合物給藥，或者分別作為單獨的組合物給藥。此外，各組分可通過不同的途徑 給藥，並且/或者可同時或稍微不同時給藥。在另一個實施方案中，本發明包括組合物，所述組合物含有治療有效量的第一和第二組分，並配有可藥用載體。在另一個實施方案中，所述第一和第二組分可以各自是單個分子的結構域(domain)。例如,通過採用化學連接劑(chemical linker)例如雙官能試劑,使AA2A (選自TCA或a 2激動劑)和a I拮抗劑綴合(conjugation),從而可將第一和第二組分連接起來。申請人:現給出實施例，以解釋本發明的某些實施方案。本發明不受這些實施例的限制。實施例I :通過a 2激動劑和a I拮抗劑的共同給藥減輕慢性痛一種慢性疼痛(特別是外周神經病變)模型涉及實驗動物中某側L5 (也可選用L6)脊柱神經的手術結紮。手術後痊癒的大鼠體重恢復並表現出與正常大鼠相似的一般活性水平。然而，上述大鼠的足部出現異常，其中後爪中度外翻並且腳趾緊握在一起。更重要的是，受手術影響一側的後爪在手術後約I周內對諸如對人類產生輕觸感的低閥值的機械刺激引起的疼痛表現出敏感性。上述對通常非疼痛性輕觸的敏感性稱為「觸覺異常疼痛」並持續至少兩個月。該反應包括抬起受影響的後爪以逃避刺激，輕舔爪並保持其懸空多秒。上述反應在對照組中均不常見。手術前使大鼠麻醉。將手術部位的毛刮淨並用聚烯吡酮磺或奴佛卜因準備好手術部位後，從胸椎XIII向下到骶骨切開，並使肌肉組織從L4到S2水平的脊椎骨(左側)上分離。找到L6脊椎骨，用小骨鉗仔細橫切除去，使得可目視辨別L4 L6脊柱神經。分出L5 L6脊柱神經並用6-0絲線緊緊結紮起來。在右側進行相同的手術步驟以作為對照，除了不進行脊柱神經的結紮。確定止血完全後縫合傷口。在切開區域塗抹少量抗生素藥膏後，將大鼠轉移到調熱-溫燈下的塑料恢復籠中。在實驗當天即手術後至少七天，通過鞘內注射、腹膜內注射、口服管飼法或這些方法中之一或多種的組合，向大鼠(每試驗組有6隻)給藥試驗藥物。或者，可以通過鞘內給藥5iU於50%DMS0中的硫前列酮(前列腺素E2受體激動齊U) 200ng，在動物中引起異常性疼痛。在該模型中，從硫前列酮的脊柱給藥後15分鐘起的35分鐘內，對畫刷觸摸脅腹的疼痛反應評分8次。Minami等，57Pain 217-223 (1994)。按16分制，單獨的硫前列酮給藥得到的分數為12-13分。將化合物配製到0. 01-5%的DMSO中，對於全身給藥，劑量為lml/kg體重，對於鞘內給藥,劑量為於鹽水中的5 ii I。以0. 01至10. Oii g的鞘內劑量對可樂定進行測試。在Chung大鼠模型中，在給藥前及給藥後30分鐘用弗雷氏毛測量觸覺的異常疼痛，所述弗雷氏毛是一系列硬度遞增的細毛。將大鼠置於底部為金屬絲網的塑料籠中並允許適應約30分鐘。穿過絲網用足以產生輕微彎曲的力向大鼠後爪的腳底中部區域垂直施加弗雷氏毛並保持6 8秒。施加的力據計算在0.41 15. I克的範圍內。如果爪收縮敏捷，則認為是積極應答。正常的動物將不對此範圍內的刺激產生應答，但經手術結紮的爪將對 I 2 克毛產生收縮應答。米用 Dixon,ff. J. , Ann. Rev. Pharmacol. Toxicol. 20:441一462(1980)的方法測定50%爪收縮閥值，將該文通過引用納入本說明書中。比較用藥前後的閥值並以15. I克的正常閥值為基礎計算觸覺敏感性的逆轉百分比。結果表明，可樂定在大鼠和小鼠中都具有劑量依賴方式的止痛作用。在異常疼痛大鼠的Chung模型中，鞘內劑量為0. I ii g時沒有止痛作用，而在劑量為I. 0 ii g時觀察到最大的止痛作用。為了確定治療窗帶，用各種劑量的可樂定治療大鼠，並檢測其鎮靜作用。為了測定鎮靜作用，用各種劑量的可樂定對六隻雄性Sprague-Dawley大鼠進行鞘內注射。注射藥物30分鐘後，按以下所述監測運動能力以對鎮靜作用評分。將大鼠置於被覆蓋的暗室中，並用數字通信分析器(digicom analyzer) (Omnitech Electronic)每5分鐘測量其探究行為(exploratory behavior)—次。每當大鼠將沿X和Y方向的32光電束陣列遮斷時，機器進行記錄，並量化該大鼠與用鹽水代替可樂定給藥的對照動物之間的行為差異。在該檢測中，3. Oiig的鞘內劑量具有溫和的鎮靜作用，而IOiig的劑量引起最大的鎮靜作用。因此，止痛與鎮靜之間的分離為大約3-10倍。在硫前列酮誘導異常性疼痛的小鼠模型中，得到類似的結果。如圖I所示，在硫前列酮誘導小鼠模型中，在可樂定給藥之前5分鐘，以30 ii g/kg的劑量將a I拮抗劑5-甲基烏拉地爾腹膜內給藥，使有效止痛劑量比單獨使用可樂定的劑量應答降低了 10倍(見圖1)，而鎮靜劑量不變(見圖2)。這樣，在慢性痛模型中，可樂定(一種a 2激動劑)和一種a I拮抗劑的共同給藥將疼痛和鎮靜之間的治療窗帶從3-10倍「加寬」到30-100倍。實施例2 :通過TCA和a I拮抗劑(5_甲基烏拉地爾)的共同給藥減輕慢件痛三環抗抑鬱劑(TCA)是一種常用的處方抗抑鬱劑和止痛劑，它通過抑制去甲腎上腺素的攝取而間接刺激a 2受體。用硫前列酮誘導異常性疼痛小鼠模型和TCA阿米替林(amitriptylene)進行實驗，實驗方式類似於以上實施例I中所述。化合物阿米替林及其製備方法記述於美國專利3，205，264中，在此通過引用將其納入本說明書中。將所述劑量的阿米替林溶於50%DMS0中並對每隻小鼠鞘內注射5 ii 1，並且IP注射30 u g/kg的5-甲基烏拉地爾或通過類似途徑注射鹽水。按實施例I中所述對畫刷的刺激評分，結果示於圖3中。與a 2激動劑和a I拮抗劑的組合一樣，阿米替林和a I拮抗劑的 組合也降低了獲得最大止痛作用所需的劑量，在本例中，降低了約3倍。因此，本實施例表明，對a 2腎上腺素能受體的直接或間接(例如通過增加去甲腎上腺素的產生，或者通過限制去甲腎上腺素的攝取或轉化(turnover))刺激與a I拮抗作用相結合，與單獨使用A2AA相比增加了鎮靜作用和治療功效之間的治療窗帶。實施例3 :通過a 2激動劑和a I拮抗劑(哌嗶嗪)的共同給藥減輕慢性痛在採用類似於針對硫前列酮誘導異常性疼痛模型所述方法的情況下，腹膜內給藥a I拮抗劑哌唑嗪(100ng/kg)在單獨給藥時(疼痛分數=4. 8±0. 6)或在硫前列酮誘導異常性疼痛模型中(12. 8±0. 8)均沒有效果。將哌唑嗪向小鼠給藥，15分鐘後將硫前列酮和各種鞘內劑量的可樂定(0. 03,0. I和0. 4微克，於5微升的50%DMS0中)向小鼠給藥。在與a I拮抗劑共同給藥的情況下，可 樂定的止痛劑量應答如下0. 03微克劑量為13. 3±0. 9，0. I微克劑量為4. 8±0. 8，0. 4微克劑量為4.8±0.6。這表明，可樂定的EC5tl與可樂定的單獨i.t.給藥相比降低了大約4倍。這樣，A2AA和a I拮抗劑的共同給藥與單獨使用A2AA相比，再次提高了其效能。在該實驗中，0. I微克的可樂定在不存在哌唑嗪的情況下沒有止痛作用。實施例4 :通過相同途徑將a 2激動劑和a I拮抗劑給藥減輕慢性痛實驗步驟與實施例I相同，不同之處在於將總體積5微升、於50%DMS0中的可樂定(各種劑量)和5-甲基烏拉地爾(I微克，鞘內)通過鞘內注射共同給藥。結果基本上與Cil拮抗劑通過腹膜內注射的情況相似。因此，可將兩種試劑同時或稍微不同時給藥，可通過相同或不同的途徑給藥，且具有相同或相似的治療效果。實施例5 :用a 2激動劑和a I拮抗劑治療高眼內壓採用雄性紐西蘭兔評估對正常IOP測量的藥效。小心地握住兔子以將刺激最小化。應當通過頸背部將其抓起，並用另一隻手支撐其後腿。將兔子從籠中取出後，向每隻眼
睛給藥約25yi的稀釋的Ophthet ic⑧〔O. 05%)局部麻醉劑。在雙眼中進行初始的iop
測定。此時將左右眼之間的IOP差等於或大於3mmHg的兔子替換掉。在時間零點(T=O)對兩眼測定後，立即將0. 1% (w/w)的溴莫尼定酒石酸鹽眼用製劑滴入每隻實驗兔的一隻隨機選擇的測試眼的角膜上。還將0.001%或0.003% (w/w)的鹽酸哌唑嗪向非對照(non-control)兔給藥。向另一隻眼給予不含藥的賦性劑。所述眼用制
劑含有50ppm的Pur i (穩定化的二氧化氯)、0. 5%的羧甲基纖維素、0. 6% (w/w)的硼
酸鹽緩衝劑(PH7. 7)和少量鹽(NaCl、KC1、CaCl2' MgCl2X在7小時內，以指定的時間間隔測量給藥的(本側)和未給藥的(對側)眼的眼內壓。使用Model 30ClassiCTM眼壓計作為測量和記錄儀器進行壓力讀取。該儀器通過扁平張力測量法非侵入地測量眼內壓(I0P)。圖4A示出了將35微升0. 003%的哌唑嗪滴入本側兔眼得到的眼內壓。可以看出，與未給藥的眼相比，開始時眼內壓有一個小的下降，然後在2小時內返回基線。圖4B示出了滴入0. 1%的a 2激動劑溴莫尼定的結果。在該情況下，眼內壓在開始的30分鐘內有顯著上升，然後下降約30%。雖然在人類中未觀察到該效果，但是IOP開始的上升與a I激動劑活性有關。在0. 1%的溴莫尼定和0. 001%的哌唑嗪共同給藥的情況下，觀察到很小的差另IJ，如圖4C所示。然而，當將0. 1%的溴莫尼定和0. 003%的哌唑嗪滴入兔眼時(圖4D)，開始時僅觀察到很小的眼壓升高，然後IOP最多降低約40%，這表明a I拮抗劑的加入提高了該劑量的溴莫尼定的治療效果，並伴有該劑量的a I活性的降低。
以下權利要求 基於本發明的這些和其它實施方案。
權利要求
1.用於治療哺乳動物的感覺超敏反應的方法，包括共給予 1)選自溴莫尼定、替扎尼定、美託咪定和米伐折醇的第一化合物，以及 2)選自5-甲基烏拉地爾、烏拉地爾、特拉唑嗪和布那唑嗪的第二化合物， 其中第一化合物以有效引起對所述感覺超敏反應的半數最大治療功效的劑量給藥時所引起的鎮靜程度，小於在相似的染病哺乳動物中，在沒有所述第二化合物的情況下，給予所述第一化合物時所引起的鎮靜程度。
2.權利要求I的方法，其中所述第一化合物以選自外周、非外周及其結合的方式給藥。
3.權利要求I的方法，其中所述第二化合物以選自外周、非外周及其結合的方式給藥。
4.權利要求2的方法，其中所述外周給藥選自鞘內給藥、硬膜外給藥、口服給藥、腹膜內給藥、靜脈內給藥、肌內給藥、經皮給藥及其組合。
5.權利要求3的方法，其中所述外周給藥選自鞘內給藥、硬膜外給藥、口服給藥、腹膜內給藥、靜脈內給藥、肌內給藥、經皮給藥及其組合。
6.權利要求I的方法，其中所述第一化合物和第二化合物以單一組合物給藥。
7.權利要求I的方法，其中所述第一組合物和第二組合物以不同組合物給藥。
全文摘要
治療哺乳動物的包括眼病、應激相關的疾病以及神經變性疾病在內的疾病的方法和組合物，採用直接或間接刺激α2腎上腺素受體激動劑活性、且具有最小的鎮靜作用或其它副作用的組合物。
文檔編號A61K31/4168GK102657664SQ201210139388
公開日2012年9月12日 申請日期2004年8月19日 優先權日2003年9月12日
發明者D·W·吉爾, J·E·唐奈羅 申請人:阿勒根公司