高純度秦皮甲素及其製備方法
2023-05-09 13:23:21
專利名稱：高純度秦皮甲素及其製備方法
技術領域：
本發明涉及高純度秦皮甲素及其製備方法。
背景技術：
秦皮為常用中藥，通常來源於木犀科植物苦櫪白蠟樹FraxinusrhynchophyllaHanee、白蠟樹Fraxinus chinensis Roxb、尖葉白蠟樹Fraxinusszaboana Lingelsh.或宿柱白蠟樹Fraxinus stylosaLing的乾燥枝皮或幹皮。中醫理論認為，秦皮具有清熱燥溼、收澀、明目等功效，常用於治療熱痢、洩瀉、赤白帶下、目赤腫痛、目生翳膜等症。現代研究表明，秦皮具有抗病原微生物、抗炎、利尿、抗凝和抗過敏等作用。秦皮的主要成分為香豆素類，包括秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮素等，其中秦皮甲素含量最高，約1％。
目前，秦皮甲素的製備採用95％的乙醇回流提取方法，該包括將提取液濃縮至無醇味後，用乙酸乙酯進行萃取，以除去秦皮乙素。所得溶液再進行濃縮析出秦皮甲素晶體。在該方法，要使用95％的乙醇和乙酸乙酯，成本高，並且萃取過程容易乳化，操作較麻煩。而且，濃縮步驟存在很大困難，因為溶液體積過小時，粘度太大，很難析出晶體。另外，而且得到的秦皮甲素晶體中含大量秦皮素，純度不理想。
另外，在現有的提取秦皮甲素的方法，通常使用乙酸乙酯來進萃取，如果操作人員在工作工程中長期接觸乙酸乙酯會對人體造成傷害，例如肝臟受損等，而且也會對環境造成一定的汙染。
因此，本領域急需一種提取高純度秦皮甲素的簡便方法，它對環境和人體無害。
發明內容
本發明的目的在於提供一種高純度秦皮甲素的製備方法，該方法操作簡便、成本低、產率高，可用於工業化生產，而且本發明的方法對於環境和人體無害。
本發明提供了一種秦皮甲素的製備方法，所述方法包括從秦皮中提取秦皮甲素、分離、濃縮和結晶步驟，其中分離步驟是如下的柱層析步驟a)離心或過濾提取步驟中所得提取液，將濾液或上清液直接加入大孔吸附樹脂柱，其中秦皮原料和樹脂的重量比為1∶2～1∶3；b)待提取液全部通過樹脂柱後，用洗脫劑洗脫，待洗脫液澄清後，開始收集洗脫液，直到收集完10-15倍柱體積的洗脫液後停止收集。
本發明還提供了一種秦皮甲素組合物，它包含90-100重量％的秦皮甲素。
本發明製備秦皮甲素的方法操作簡單，產率高，並且生成的秦皮甲素純度非常高。另外，本發明使用水代替乙酸乙酯可以避免操作過程中對人體和環境的傷害。
具體實施例方式
本發明提供了一種秦皮甲素的製備方法，所述方法包括從秦皮中提取秦皮甲素、分離、濃縮和結晶步驟，其中分離步驟是如下的柱層析步驟a)離心或過濾提取步驟中所得提取液，將濾液或上清液直接加入大孔吸附樹脂柱，其中秦皮原料和樹脂的重量體積比為1∶2～1∶3；b)待提取液全部通過樹脂柱後，用洗脫劑洗脫，待洗脫液澄清後，開始收集洗脫液，直到收集完10-15倍柱體積的洗脫液後停止收集。
在本發明的方法中，所述提取步驟在本領域中是常規的。例如，所述提取步驟的具體過程可如下進行1)將中藥秦皮粉碎成粗粉(例如10～40目的粉末)，然後將秦皮粗粉置於常壓回流裝置中；2)在所述回流裝置中加入5-10倍量(以所述中藥秦皮的重量計)的水；3)加熱回流60-90分鐘，得到提取液；4)步驟2和3重複進行2～4次，然後合併提取液。
在本發明中，所用原料為常規的中藥秦皮，例如產地為陝西或甘肅的中藥秦皮。
在本發明的柱層析步驟中，所述洗脫劑是常規的。在本發明的一個優選實例中，所述洗脫劑選自去離子水。
在本發明的柱層析步驟中，所述大孔吸附樹脂是常規的，它通過市售得到。在本發明的一個優選實例中，所述大孔吸附樹脂選自非極性或弱極性大孔吸附樹脂中的一種或幾種。在本發明的另一個實例中，所述大孔吸附樹脂選自D101(天津農藥廠生產，苯乙烯型)、HZ-802、DM130(山東魯抗醫藥集團生產)、AB-8(天津南開大學化工廠生產，苯乙烯型)、Diaion HP-20(日本三菱公司生產，苯乙烯型)中一種或幾種。
在本發明的方法中，所述濃縮步驟是常規的。例如所述濃縮步驟的具體過程可如下進行1)將柱層析步驟所得洗脫液濃縮到0.5～1倍柱體積；2)將步驟1中所得溶液置於4～15℃冷藏12～24小時，然後離心或過濾。
在本發明的方法中，所述結晶步驟是常規的。例如，所述結晶步驟的具體過程可如下進行1)將濃縮步驟所得的濃縮物液置於4～10℃冰箱中析晶，12～24小時後進行過濾或離心；2)將所得晶體加熱溶於水中，所述水的用量使所得溶液的體積與析晶前相同，然後將所得溶液置於4～10℃的冰箱中進行重結晶；3)次日過濾得到晶體，即為秦皮甲素，純度90％～100％。
本發明還提供了一種秦皮甲素組合物，它包括90-100重量％的秦皮甲素。
在本發明中，所述秦皮甲素組合物較好包含92-99重量％、更好94-99重量％、最好98-99重量％的秦皮甲素。
本發明利用大孔吸附樹脂將秦皮素、秦皮乙素及大量色素吸附，而且柱層析前提取液不需濃縮，從而省去了萃取的步驟。在本發明的方法中，可以直接用水進行提取、分離等步驟。因此，相對於現有技術來說，本發明的方法操作簡便、成本低。另外，由本發明所得的秦皮甲素色澤好，純度高。
下面結合實施例細說明本發明，這些實施例只是用於舉例說明的目的，並沒有限制本發明的範圍。
秦皮甲素的鑑定方法根據藥典2005版一部中藥秦皮的含量測定方法鑑定秦皮甲素以及測定秦皮甲素的純度，對照品購自中國藥品生物製品檢驗所。
實施例1在秦皮粗粉(產地甘肅)(20目)1公斤中加水10升，並加熱回流提取1小時。然後將殘渣再加水提取兩遍，每次加水8升，回流時間為1小時。合併提取液，並將所得提取液直接加入1公斤的2000ml的AB-8樹脂柱(天津南開大學化工廠，苯乙烯型)中，以每小時3個柱體積上樣。上樣完畢後，用30升水洗脫，待洗脫液澄清後，開始收集洗脫液，直到收集20升洗脫液後停止收集。將所收集的20升洗脫液濃縮至1升，然後置於冰箱中過夜。次日，過濾冷藏的濃縮液，並用少量水洗滌濾餅。然後，用1升水加熱溶解後濾餅後將所得溶液置於冰箱中重結晶。次日過濾得到沉澱物，即為秦皮甲素(8g，純度97％)。
實施例2將秦皮粗粉(產地甘肅)(20目)1公斤中加水10升，並加熱回流提取1.5小時。然後將殘渣再加水提取三遍，每次加水8升，回流為1小時。合併提取液，並將所得提取液直接加入3000ml的Diaion HP-20樹脂(日本三菱公司產，苯乙烯型)中，以每小時3個柱體積上樣。上樣完畢後，用60升水洗脫，待洗脫液澄清後，開始收集洗脫液，直到收集40升洗脫液後停止收集。將所收集的40升洗脫液濃縮至1升，將所述濃縮液置於冰箱中過夜。次日，過濾冷藏的濃縮液，並用少量水洗滌濾餅。然後，用1升水加熱溶解後濾餅後將所得溶液置於冰箱中重結晶。次日過濾得到沉澱物，即為秦皮甲素(15g，純度98.6％)實施例3傳統工藝採用5倍量(以秦皮粗粉的重量計)的95％的乙醇回流提取秦皮粗粉12小時。將提取液濃縮至無醇味後，加一倍量(以濃縮液的體積計)溫水溶解，並用等量(以溫水的體積計)乙酸乙酯萃取3遍。將水層濃縮至小體積後，將濃縮液置於冰箱中析晶。析出晶體後過濾，晶體用水和甲醇反覆重結晶，得秦皮甲素。
傳統工藝與本發明的比較
權利要求
1.一種秦皮甲素的製備方法，所述方法包括從秦皮中提取秦皮甲素、分離、濃縮和結晶步驟，其中部分步驟是如下的柱層析步驟a)離心或過濾提取步驟中所得秦皮甲素提取液，將濾液或上清液直接加入大孔吸附樹脂柱，其中秦皮原料和樹脂的重量比為1∶2～1∶3；b)待提取液全部通過樹脂柱後，用洗脫劑洗脫，待洗脫液澄清後，開始收集洗脫液，直到收集完10-15倍柱體積的洗脫液後停止收集。
2.如權利要求1所述的方法，其特徵在於所述洗脫劑是去離子水。
3.如權利要求1所述的方法，其特徵在於所述大孔樹脂選自非極性或弱極性大孔吸附樹脂中的一種或幾種。
4.如權利要求1所述的方法，其特徵在於提取步驟的具體過程可如下進行1)將中藥秦皮粉碎成粗粉，然後將秦皮粉置於常壓回流裝置中；2)在所述回流裝置中加入5-10倍量的水，以所述中藥秦皮的重量計；3)加熱回流60-90分鐘，得到提取液；4)步驟2和3重複進行2～4次，然後合併提取液。
5.如權利要求1所述的方法，其特徵在於濃縮步驟的具體過程可如下進行1)將柱層析步驟所得洗脫液濃縮到0.5～1倍柱體積2)將步驟1中所得溶液置於4～15℃冷藏12～24小時，然後離心或過濾。
6.一種秦皮甲素組合物，它包含90-100重量％的秦皮甲素。
7.如權利要求6所述的組合物，其特徵在於所述秦皮甲素的濃度為92-99％。
全文摘要
本發明提供了一種秦皮甲素的製備方法，所述方法包括提取、柱層析、濃縮和結晶步驟，其中柱層析步驟如下a)離心或過濾提取步驟中所得提取液，將濾液或上清液直接加入大孔吸附樹脂柱，其中秦皮藥材和樹脂的重量比為1∶2～1∶3；b)待提取液全部通過樹脂柱後，用洗脫劑洗脫，待洗脫液澄清後，開始收集洗脫液，直到收集完10－15倍柱體積的洗脫液後停止收集。本發明製備秦皮甲素的方法操作簡單，產率高，並且生成的秦皮甲素純度非常高。
文檔編號C07D311/00GK1955173SQ20051003072
公開日2007年5月2日 申請日期2005年10月26日 優先權日2005年10月26日
發明者楊保華, 雷仕慶, 郭雅琦, 烏旭瓊, 夏凌雲 申請人:信誼藥廠