包含四環素類的抗炎組合物及其用途的製作方法

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專利名稱：包含四環素類的抗炎組合物及其用途的製作方法
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包含四環素類的抗炎組合物及其用途
背景技術：
本申請與2007年3月23日提交的美國臨時專利申請 60/896， 564有關並要求其優先權，所述申請被併入本文作為參考。炎症是對損傷、毒素、瘤形成或微生物侵入的局部化響應， 其特徵在於包括發紅、發熱、腫脹和疼痛在內的症狀。炎症包括細胞、 滲出和分子組分。細胞組分涉及從血管運動到發炎的組織中的白細胞。 滲出組分涉及包含蛋白質例如纖維蛋白、細胞因子和抗體的流體的移 動。分子組分包括多個系列的分子，包括細胞因子、前列腺素、 一氧 化氮、免疫球蛋白、和細胞粘著分子。分子水平的炎症症狀包括1) 細胞組分和代謝物的變化，包括離子通道、細胞因子、趨化因子、受 體、細胞粘著分子、固有的結合分子、轉錄因子、和包括一氧化氮在 內的信號轉導分子；和2)循環中炎症性標記物的水平升高，包括白 細胞、紅細胞沉降率、C反應蛋白、類風溼因子、免疫球蛋白E、和包 括腫瘤壞死因子ot和白細胞介素6在內的細胞因子。過度的炎症或長的炎性過程可以引起相關器官的炎症性紊 亂和功能異常。炎症性紊亂包括多種疾病糖尿病、肥胖症、動脈粥 樣硬化、病毒病、白內障、再灌注損傷、癌症和肉狀瘤病；感染後的 腦膜炎和風溼熱；風溼病，包括系統性紅斑狼瘡、骨關節炎、類風溼 性關節炎；皮膚炎症性病症，包括各種形式的痤瘡和紅斑痤瘡；和腸 炎症性病症，包括腸易激症候群和克羅恩氏病。在這些各種疾病過程 中的炎症性響應的向心性使得其調節是預防、控制或醫治人類疾病中 的主要因素。由Gallin等人，(1999)出版的對炎症的全面綜述以及在
5以下參考文獻中的炎症的另外的實例被併入本文用於進一步定義炎症
和炎症性病症Hansson， 2005; Wellen， 2005; Karin， 2005; Popovic, 2005;美國專利5，919， 775和7, 122, 578;和US公布的專利申請 2005/0164993和2006/0194773。另外，現在有廣泛的證據證明，中樞 神經系統(CNS)內的炎症促進許多急性和慢性的變性病症，並且可能促 進某些精神病學疾病。與炎症有關的CNS病症和疾病包括癲癇症、腦 外傷、多發性硬化、帕金森氏病和阿爾茨海默氏病(Lucas， 2006)。炎症的發病機理涉及在發炎位置產生促炎細胞因子。促炎 細胞因子的產生可以由局部損傷、由代謝過程的局部變化或由細菌和/ 或其它微生物感染而引發(Day， 2005; Golub， 2006)。基於這些觀察， 炎症性病症的大多數治療集中於其中觀察到炎性變化的位置或組織。 因此，抗炎藥物的給藥包括藥物的系統和/或局部遞送到炎症位置中。 例如，類風溼性關節炎的治療是基於通過循環將抗炎藥物遞送到實際 上出現炎症的患病位置(Gallin， 1999)。另外，藥物的局部遞送用於 治療炎症。例如，局部給藥用於治療皮膚炎症性病症，例如紅斑痤瘡 和痤瘡(美國專利7， 078， 048)。關節炎是被研究最多的炎症性病症。儘管有大量的研究， 但是促進該病症發病機理的確切機制仍基本上是未知的。普遍接受的 是，與白細胞合作的特化白細胞和細胞與各種形式關節炎的發病機理 和治療有關。炎性細胞和促炎性分子的越來越長的列表包括各種T細 胞、B細胞、抗原遞呈細胞，包括樹突狀細胞和促炎性細胞因子的廣 泛列表例如TNFct和IL-1。這個列表的新近的成員是白細胞介素 IL-32，其涉及類風溼性關節炎的發病機理(Joosten， 2006)。用於治療炎症性病症的藥理學試劑包括甾體和非齒體化合 物。本發明中使用的藥理學試劑四環素屬於非甾體類。
四環素類形成獨特的抗生素類別，對細菌和哺乳動物細胞 具有多效性活性。四環素可作為天然產物、四環素半合成化合物和化 學子務飾的四環素(Chopra, 2001、美國專利7， 008， 631、美國公布的專 利申請2006/0194773)得到。最通常使用的四環素類是天然的(四環素 和土黴素)、和半合成的(多西環素和米諾環素)。合成的四環素類化合 物是在結構上與抗生素四環素有關，但是其抗生素活性基本上或完全 地被消除。在抗微生物作用方面，四環素類作為廣鐠抗菌素在核糖體 水平抑制細菌蛋白合成。引起細菌菌抹生長抑制的四環素類的最小抑 菌濃度(MIC)典型地為0.1jag/ml -32pg/ml。 Petersen等人(1999) 報導說四環素對於包括大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和沙門氏菌在內的 多個菌株的最小抑菌濃度為0. 12ng/ml到32jig/ml的範圍，而米諾 環素為0. 06jag/ml-32jag/ml，取決於菌林敏感性。Webster等人(1982) 報導了對於痤瘡丙酸桿菌(Propionobacterium)的敏感性和不敏感性 菌林的MIC分別為四環素為0.6 pg/ml和5-10 |ig/ml,米諾環素為 0. 3ug/ml和5Mg/ml。 Agwuch， 2006報導了多西環素在人類中的抗 菌MICs。為0. l-25jag/ml的範圍。四環素類的抗微生物作用顯著地受到鉀和鎂的抑制。 D'Amato(1975)報導了四環素對於假單胞細菌屬的MIC在2. 1 mM4丐鹽 或1.4mM鎂鹽的存在下增加達到8倍，在細菌生長培養基中存在所述 兩種鹽時增加達到32倍。四環素類在哺乳動物系統中的作用包括對炎症、蛋白水解、 血管生成、凋亡和骨代謝的影響(Chopra, 2001; Roberts, 2003; Sapadin， 2006)。四環素類的抗炎作用具有特殊的意義，在於其已經 與關節炎、癌症、哮喘、心血管病症和皮膚病有關。與四環素類的抗 微生物作用相反，這些化合物在哺乳動物細胞中的抗炎作用潛在機制仍是難以捉摸的。實驗數據指示，四環素類對於與炎症有關的若干過 程有影響。這些影響中的一些在非常高的四環素類濃度時在體外觀察
到，例如在〉20iag/ml的水平，這是在標準治療條件下在血液中不能 達到的水平。典型地，血清中的四環素類峰濃度為2-5jag/ml的範圍 (Agwuh， 2006)。尚未確定四環素類的抗炎作用與其抗菌活性的相關程度。 例如，在痤瘡的情況中，痤瘡丙酸桿菌的存在似乎是與炎性病變的形 成有關且痤瘡的成功的抗菌治療與痤瘡丙酸桿菌種群的減少有關。然 而，皮膚上的痤瘡丙酸桿菌的密度與炎症的程度和痤瘡的嚴重程度不 相關。另外，在抗生素療法之後的痤瘡丙酸桿菌計數的減少程度與臨 床效果不相關。美國專利申請2006/0293290將用米諾環素治療痤瘡的有 效性歸因於這種藥物的抗菌作用。有人提出，四環素類如下減輕患病位置的炎症抑制吞噬 作用、抑制嗜中性遷移和趨化性、抑制T-淋巴細胞活化、抑制磷脂酶 A2、抑制氧化氮合酶的表達、抑制金屬蛋白酶活性、抑制促炎症性細 』包因子分泌物和刺激抗炎細胞因子分泌(Dreno， 2004; Sapadin， 2006; 美國公布的專利申請2006/0194773,第0060段)。四環素類在約0. 3 ing/ml到約40|ag/ml的範圍觀察到抗炎效果(Krakauer， 2003;Amin, 1996; Kuzin， 2001; Golub等人，1998)。四環素用於抗炎作用的有 效濃度範圍與這些藥物用於抗生素作用的有效範圍重疊。四環素類的抗炎作用的複雜性使得難以確定其體內作用的 潛在機制。在具有炎症性組分的各種病症(例如各種形式的關節炎、皮 膚病、自身免疫紊亂和變應性紊亂、心血管病症和癌症)中觀察到這些 作用時，情況尤其是這樣。
在口服給藥後，四環素到血液中的吸收基本上在胃和鄰近 的小腸中發生。四環素類的吸收得到螯合劑和表面活性劑的刺激，並 且受到食物、奶、和二價或三價陽離子(例如鈣、鎂、鋅和鐵)的存在 的抑制。四環素和土黴素的吸收受食物影響降低約50-70 %。食物對 多西環素和米諾環素的吸收的抑制效果較小，為約20%-30%的減少。 由鉀和鎂增補劑和抗酸組合物引起四環素吸收的大得多的抑制作用 (約85%) (Welling， 1977; Leyden, 1985;和Depperman， 1989)。多價陽離子與四環素化合物形成複合物。兩個鈣陽離子或 一個鎂陽離子與一個四環素分子形成一個複合物。金屬-四環素複合物 的細胞攝取低於單獨的四環素化合物的攝取。這引起對四環素吸收的 抑制(Chopra， 2001)。在通過口服給藥進行治療時，四環素吸收的抑 製作用和得到的血液中這些藥物的較低濃度被認為是消極地影響四環 素類抗炎作用的一個因素。為了避免四環素類吸收受到食物的抑制，標準推薦是在進 食或者給予包含高水平二價陽離子的藥物或礦物質增補劑的一小時之 前或2小時之後服用四環素類。這些預防措施對於抗細菌治療和抗炎 治療都是推薦的。作為避免食物的極端的預防措施，美國專利 5， 250， 442推薦在治療類風溼性關節炎中在四環素的口服給予之前禁 食12小時。認為血清水平是四環素化合物作為抗炎藥的系統有效性的 指示。在正常口服劑量(250-500 mg bid)之後實現的血清中四環素水 平為約2-5jLig/ml。大多數四環素類必需給藥達到4次以便維持血清 中的治療濃度(Chopra 2001)。四環素類的標準治療劑量為，四環素約 250 mg-500 mg，半合成四環素類約100 mg-200 mg。
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四環素類的標準劑量給藥的副作用包括噁心、胃腸刺激和 眩暈。為了減輕這些問題，開發了具有較低劑量四環素的治療用製劑。 基於指示齒齦組織中膠原蛋白減少、基質降解和炎症減少的研究 (Golub， 1998和DelRosso, 2004)，小劑量多西環素(20 mg bid)由 美國食品與藥物管理局(FDA)批准用於治療成年人牙周炎。在一系列美國專利中，Ashley描述了低的、非抗生素(低 於抗微生物)劑量的四環素化合物用於治療痤瘙和紅斑痤奄的用途。美 國專利7， 008， 631 (Ashley, 2006年3月7日)描述了同時治療眼睛紅 斑痤瘡和痤瘡的方法，美國專利7, 014， 858 (Ashley, 2006年3月21 日)描述了治療痤瘡和毛細血管擴張的方法，美國公布的專利申請 2005/0209202 (Ashley, 2005年9月22日)描述了治療紅斑痤瘙的方 法。在這些公開中，四環素化合物的活性和有用性與血清中的四環素 水平有關，並且四環素的給藥途徑可以是口服或靜脈內。在一些情況 中，考慮局部施用(參見美國專利7， 008，631，第9列，第40行)。多西環素的小劑量給藥最近由FDA批准用於治療成年人患 者中紅斑痤瘡的炎性病變(丘滲和膿皰)。該製劑包含30 mg的立即釋 放和10 mg延遲釋放的多西環素，由Collagenex Pharmaceuticals, Inc.以商品名Oracea銷售(NDA 50-805， 2006;美國專利5,789, 395 和5， 919， 775)。在Oracea中使用的立即/持續釋放多西環素組合物的 40mg 口服劑量在血清中產生多西環素的抗菌水平(Cmax 0. 6 ± 0. 2 ja g/ml)。在Oracea的試驗中，約10 %的受試者被評價為清除或將近清 除，病變的平均減小為約50%。將單劑量的Oracea與食物一起給予導 致多西環素的吸收速率和程度分別降低45%和22%(0racea， Prescription Information)。 該處方信息 (Prescription Information)包括Oracea.應該在飯前1小時或飯後2小時服用的警 告。
已經提出低劑量多西環素對炎症性紅斑痤瘡和痤瘡的作用 可能部分是由於通過抑制細菌趨化因子的產生、金屬蛋白酶活性和促 炎症性細胞因子的產生而在目標位置直接對炎性過程的作用 (Bikowski， 2003; Weinberg, 2004;美國專利5， 789, 395)。半合成的四環素類如多西環素和米諾環素具有比四環素更 大的親脂性。這允許半合成四環素類進入血液的更有效的細胞滲透和 吸收。在被多價金屬抑制吸收方面，半合成四環素類還具有低於天然 四環素類的敏感性。這些性能使得多西環素和米諾環素成為用於治療 細菌感染和炎症的四環素備選者。在抗炎治療中，多西環素和米諾環 素的有效劑量低於四環素的有效劑量。自1971年，四環素已經被實驗上用於治療關節炎。這些試 驗的綜述指示，不超過3個月的四環素給藥引起類風溼性關節炎(RA) 中的疾病活動和急性期反應物少量減少。在使用米諾環素進行試驗時 觀察到有利的效果(Stone， 2003)。用四環素治療關節炎不產生顯著的 利益(Skinner， 1971)。在這些試驗中的四環素的日劑量為多西環素 50-200 mg;米諾環素10-200 mg和四環素250 mg。骨關節炎的治療已經集中於抑制炎症性細胞因子產生和抑 制患病位置的金屬蛋白酶。觀察到多西環素對對側的膝而非對指標膝 的輕微效果(Pelletier， 2006)。在另一個實施例中，關節炎的治療合併了四環素的抗菌作 用與抗病毒劑阿昔洛韋、和抗原蟲藥甲硝唑或硝基咪唑(美國專利 7， 053， 073和美國公布的專利申請2006/0172956)。到目前為止，仍沒有確立的使用四環素類的關節炎治療。 所有使用四環素類的關節炎治療都是在實驗的基礎上進行的。
對於系統遞送，將四環素口服給藥或非腸道給藥(包括靜脈 內/肌肉內和皮下注射)。最常見的是口服給藥。四環素可以以片劑、丸劑、膠嚢和流體的形式口服給藥。 例如，用於口服給藥的多西環素由Pfizer Inc， NY以商標Vibramycin 銷售。Vibramycin適用於治療或預防感染性疾病和預防痴疾。 Vibramycin可以以多種形式得到，包括包含50或100 mg多西環素 的膠嚢(NDC 0069-0940-50,在fda. com)，包含100 mg多西環素的片 劑(NDC 0069-0990-50， 在fda. com)，和包衣片劑(Vibra-Tabs， NDC 0069-0990)。這些片劑提供多西環素的持續釋放。釋放在20分鐘的延 遲之後在胃中開始。Vibramycin的另 一種形式是糖漿(NDC 0069 B0871-93，在fda. com)，每5 ml包含50 mg多西環素鈣鹽且惰性成 份包括氯化鈣。美國專利4, 126， 680和4， 081， 527描述了包含多西環素、 土黴素和金黴素的鈣和鎂鹽的液體組合物，金屬與四環素化合物的摩 爾比為約l: 1到約2: 1。美國專利3， 957， 980描述了包含磷酸鹽
和鎂鹽的多西環素的可注射溶液，其中金屬與多西環素的摩爾比最大 為8:1。美國專利3， 275，513描述了包括四環素化合物、脲、醇和鈣 鹽的口服組合物，其中鉀與四環素的摩爾比為2 : 1。美國專利2， 736， 725公開了由四環素化合物、鋁、金屬離 子(包括鈣和鋅離子)、和a-羥基羧酸組成的水溶性複合物，其中最大 摩爾比為1:8:10:24。包含這種複合物的溶液已經被用作抗生素用於 肌肉注射。後來'725專利承認，已經確定了鋁對人有毒，這種金屬的 可溶鹽不應被併入到藥物製劑中。美國專利4， 060， 605公開了以包括鉤和鎂在內的金屬形成的鹽的形式給藥的水溶性多西環素衍生物。美國專利4， 061, 676指出，四環素類的鈣鹽可用於製備穩 定的口服懸浮液(第4列，第40段)。在美國公布的專利申請2005/0019396中描述了包含多西 環素和金屬複合物的固體組合物。多西環素-金屬複合物包括單價和二 價金屬。發明人猜測金屬與多西環素的優選比例為1.5-2.5。美國公 布的專利申請2006/0183719描述了含四環素化合物-金屬複合物的另 一種固體組合物。複合物的金屬部分包括單價和二價金屬。在複合物 中，金屬與四環素化合物的摩爾比為約3: l到約l :3。含金屬和四環素化合物的組合物被設計用於治療細菌感 染。四環素到血液中的吸收是在抗細菌治療中達到感染位置的關鍵步 驟。所述'396和"19的公布申請公開了用於組合物的金屬鹽的量不 顯著地妨礙四環素的吸收。所述。96申請公開了可以從固體劑型的多 西環素-鉤複合物吸收多西環素的治療量，其中鈣與多西環素的摩爾比 最大為3: l(第0021-0023段)。在所述'719申請中，公開了身體可 以有效地從固體劑型的金屬複合物中吸收四環素(第0030段)。包括四環素類和硫酸釣的組合物4皮用於植入物，以便保證 長期(數天)釋放四環素類和其它藥物(美國專利6， 753， 007和5， 807， 567)。為了避免胃腸刺激和噁心，在給藥半合成四環素類 (Vibramycin)引起胃腸道刺激和噁心的情況中，允許食用少量的食物、 奶和蘋果汁。用於限制治療細菌感染時由四環素類引起的胃腸刺激的 另 一個方法是使用具有有限溶解度的四環素鹽。這些組合物的綜述包 括在美國專利5, 538, 954中，其被併入本文作為參考。
美國專利4, 837, 030描述了包含米諾環素的控制釋放組合 物。米諾環素在胃中部分釋放並在腸中部分釋放，以便在抗細菌治療 期間口服給藥時不產生噁心或眩暈。美國專利6, 638， 532描述了用於治療細菌感染的合併了包 含四環素和多西環素的立即釋放和延遲釋放組合物的三種劑型。包含四環素化合物的用於口服給予的另 一種產品是 MinocinMR,用於治療痤疳。Minocin MR膠嚢是Wyeth (Wyeth， 2005) 的產品，在小丸中包含100mg的米諾環素鹽酸鹽。這些膠嚢已經被配
制為其中一部分米諾環素劑量在胃中遞送、而第二部分劑量用於在十 二指腸和上部胃腸道吸收的"雙重遞送"系統(Wyeth, 2005, p. 5. 2)。腸溶組合物還用於遞送鎂(美國專利6， 887， 492和 4,150,111)。四環素的藥物製劑包括促進四環素化合物溶解和遞送到胃 腸道中的輔助的非活性化合物，包括載體、粘結劑、和製片劑。因 為多價陽離子抑制四環素類的吸收，包括四環素類的藥物製劑排除了 使用顯著量的這些陽離子的可溶性鹽。加入少量的硬脂酸鎂或硬脂酸 鈣(每個劑量不到10 mg)作為潤溼劑。炎症是在多種病症中觀察到的主要的病理狀態之一。炎症 性病症在位置和病理學方面的各種後果具有一個共有的決定因素。對 於這些病症的起因尚無明確的解釋。流行的理論涉及炎症的多因素起 因。目前，類固醇和非類固醇藥物用於治療與炎症相關的各種過程(Day， 2005)。它們提供一定程度的緩解，但是並不是該病症的治癒方法或令 人滿意的控制措施。炎症影響數百萬的人，急需開發更好的炎症治療
14方法。為了成功地接近炎症的治療，需要發展對引發炎症的主要貢獻 因素的更充分的理解，以及發展新的治療方法來顯著地減輕或治療炎 症性病症。本申請中描述的所有的專利、專利申請和其它參考文獻都 被併入本文作為參考。

發明內容
本發明描述了用於治療炎症性病症的方法。所述新的治療 是基於如下的發現在腸中發生的過程嚴重影響外周位置的炎症性病 症。例如，公開了四環素化合物在外周位置的抗炎作用起源於小腸， 並且這是這些化合物的抗炎作用的關鍵步驟。本發明的有效組合物包 括四環素化合物和多價金屬(作為四環素從腸轉運到血液中的抑制 劑)。與先前的假設相反，四環素轉運抑制劑促進四環素在抗炎治療中 的有效性。本發明的組合物和方法包括天然的、半合成的、和合成的 四環素類，以及四環素類的藥學可接受的鹽。本發明的組合物包括單獨的四環素化合物或四環素化合物 的混合物。本發明的組合物口服給藥，並且可以單獨使用或與其它藥 物組合使用。本發明的四環素組合物的治療用途包括治療炎症性病症和 在不同程度上受到炎症影響的病症，包括關節炎、癌症、糖尿病、炎 症性皮膚病、心血管病症和CNS病症。發明詳述在為了介紹本發明，本文(包括權利要求)中使用以下定義 的術語單數形式"一"、"一個"、"該"包括複數的對象，除 非上下文明確地指出不是這樣。在本文中的一些句子中，這通過在單 詞後添加"(s)"來表示。"受試者"或"患者"是指脊推動物，優選哺乳動物，更 優選為人。有效的化合物、有效量，表示化合物或化合物的量足以引 起病症的至少一種症狀的所期望的變化，和/或生物學過程的所期望的 變化。由於有效量或有效的化合物引起的變化應該是沒有該量或化合 物時的數值的至少約15%。炎症是活組織對傷害、創傷、毒素、瘤形成或微生物侵入 的響應，其包括一種或多種以下特徵發紅、發熱、腫脹和疼痛。炎 症包括細胞、滲出和分子組分。與炎症有關的另外的定義、實例和症 狀被包括在本文中的專利申請和所有相關的參考文獻中。炎症性病症，表示炎症作為該病症的主要或附屬組分的病 症。這個術語還包括其中藥理學活性的四環素化合物以不同於在炎症 位置的抗微生物作用的其它方式治癒、減輕或預防病症的四環素響應 性狀態。與炎症有關的另外的定義、實例和症狀被包括在專利申請和 本文中所有的相關參考文獻中。
治療、處理包括治療性和/或預防性治療和處理。炎症的治療或抗炎治療意在包括以合乎需要的方向治癒、 預防、減輕、或影響與炎症和/或炎症性病症有關或由其引起的至少一 種症狀。抗炎作用包括藥用化合物在以合乎需要的方向治癒、預防、 減輕、或影響與炎症和/或炎症性病症有關或由其引起的至少一種症狀 過程中的生物學和/或生物化學作用或活性。這個術語不包括所述化合 物到其抗炎作用位置的轉運、以及與轉運有關的過程。外周位置意指人或哺乳動物生物體的遠離胃腸道的位置。四環素化合物，四環素類。這些術語包括連接有各種官能 團的線性稠合的四個六元環結構的化合物。這些化合物的代表性結構 是四環素，具有以下化學結構4-(二甲氨基)-l ，4，4oc，5，5a，6， 11, 12 a -八氫-3， 6， 10， 12， 12 a -五羥基-6-甲基-l， 11-二氧代-2-萘 甲醯胺(Merck Index 8913)。四環素化合物包括天然的、半合成的和 合成的結構。四環素化合物的實例包括在Chopra， 2001; US公布的專 利申請2006/0166945和2006/0194773中。四環素的吸收。在人和其它哺乳動物和脊推動物中，四環 素化合物從胃腸道到血液中的轉運。在其它生物系統中的四環素類吸 收過程通過添加具體的術語來描述，例如四環素到細菌細胞中的吸收。四環素類吸收的抑制劑。能夠使四環素類從胃腸道到血液 中的轉運抑制至少10。/。的化合物或化合物混合物。抑制四環素類從藥 物組合物釋放的化合物(例如腸溶包衣化合物和延遲釋放化合物)不被 包括在這個定義之內。
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四環素吸收的有效抑制劑。這個術語包括能夠使四環素吸 收抑制至少約15%但是不超過約85°/ 的四環素吸收抑制劑，例如多價的 金屬陽離子。四環素吸收的抑制劑的有效量。這個術語描述使四環素吸 收抑制至少約15°/。但不超過約85%的多價金屬陽離子和其它化合物的胃吸收的抑制劑。能夠使化合物例如四環素從胃到血液中 的轉運抑制至少50%的化合物。抑制四環素從藥物組合物釋放的化合 物(例如腸溶包衣化合物和延遲釋放化合物)不被包括在這個定義之 內。腸免疫系統。這個術語包括與免疫響應有關並且位於腸和 腸繫膜腺體內的組織、細胞和分子組分。腸免疫系統包括局部化在腸 壁中的特化的上皮細胞和淋巴細胞、派伊爾氏淋巴集結和腸繫膜腺體。 特化細胞和淋巴細胞包括樹突狀細胞、巨噬細胞、嗜中性白細胞、T 細胞(包括CD4+ T細胞、CD8+ T細胞和T輔助細胞)、B細胞、產生 IgA和產生IgE的細胞、和微型褶皺上皮細胞(M細胞)。胃溶組合物。被配製用於在胃中釋放其50%-100%活性組 分，以及用於在腸中釋放其餘活性組分(即使有的話)的口服藥物組合 物。腸溶組合物。被配製用於是在胃中釋放其0-50%活性組分， 以及在通過胃之後在小腸中釋放其餘活性組分的口服藥物組合物。腸 溶組合物可以包含被合併成單獨的口服組合物的較小單元(小丸)。腸 溶組合物包括具有腸溶包衣的組合物和延遲釋放組合物、或其組合。腸溶組合物包括被包封在兩個或更多個層中的組合物，用於提供兩種 或更多種活性組分的受控的多步驟釋放。所述多步驟釋放可以在腸中 發生或者部分在胃中且部分在腸中發生。腸溶包衣。使所述組合物的活性組分的胃釋放阻斷至少 90%的口服藥物組合物的包衣層(塗層)。在通過胃之後，所述腸溶包衣 在小腸中釋放所述組合物的活性組分。腸溶包衣可用於塗覆單獨的丸 劑、片劑、膠嚢形式的組合物，或用於塗覆被合併成包含若干個較小 單元的單獨口服組合物的較小單元(顆粒)。延遲釋放組合物。被配製用於連續釋放其活性組分的口服 藥物組合物。所述持續釋放在胃中開始並且持續至少30分鐘的時間 段。延遲釋放組合物包括設計用於部分在胃中和部分在腸中以受控的 多步驟釋放成分的具有兩個或更多個層的組合物。%(百分數)。在％是指化合物在溶液中的濃度時，它是用於 溶解所述化合物的每重量溶劑中化合物重量的百分比。炎症性病症的治療集中於受到炎症影響的位置。這些治療 並不是充分有效的，並且在一些情況中，如骨關節炎的情況中，只有 手術操作可以為患者提供顯著的(儘管僅是暫時的)緩解。本發明公開 了嚴重地影響炎症性病症的在腸中發生的過程。本公開提供炎症性病 症的基礎性的新的和更有效的治療。本發明的抗炎組合物和方法目標是腸，更具體地，為小腸 和小腸免疫系統。四環素類表示為可使用這種新方法治療炎症性病症 的化合物的實例。通過使四環素作用導向腸，腸和外周位置的炎症性 病症得到有效治療。
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在口服給藥時，四環素化合物被在胃中和在小腸的鄰近部 分中吸收到血液中。如背景技術中所評述的，四環素化合物從胃腸道 吸收進入血液被食物和多價金屬陽離子抑制約85%到15%。結果，食物 和多價陽離子增加四環素類在腸中的保留並且降低血液中的四環素水 平。在人類受試者中，將四環素化合物與蛋白餐同時給予使從禁食受 試者中測量的4. 4-4. 7Mg/ml的水平降低到1. 8 jj g/ml的血清四環素 水平，和降低到2.6 yg/ml的多西環素水平(Welling, 1977)。給予抗 酸劑(氫氧化鋁鎂))使禁食受試者中的2.7|ig/ml的多西環素血清水 平降低到0. 45 p g/ml (Depperman， 1989)。四環素吸收的抑制已經被 認為是食物和多價陽離子對四環素抗炎作用的消極影響。本發明出人意料地公開了食物和多價金屬陽離子實際上增 加口服給藥的四環素的有效性。公開了多價金屬鹽可以在本發明的組 合物和方法中用於將四環素保持在腸中和用於促進有效的抗炎治療。本發明的組合物和方法包括天然的、半合成的、和合成的 四環素類，以及四環素類的藥學可接受的鹽。本發明的組合物包括單獨的四環素化合物或四環素化合物 的混合物。本發明的組合物口服給藥，並且可以單獨使用或與其它藥 物組合4吏用。在本發明中有效的四環素化合物具有以下化學性質l)充 分的水溶性，用於在含水環境中發揮對細胞的作用，例如接近10 ji g/ml的濃度；2)與多價金屬陽離子形成複合物的能力；和3)其從胃腸 道的吸收被多價金屬陽離子抑制至少約15%。
在本發明中，多價金屬陽離子提供對四環素吸收的抑制作 用。這樣導致四環素類在腸中，更特別是在小腸中的蓄積。多價金屬 陽離子還可以通過影響細胞代謝而與四環素類協作。例如，公知的是， 鈣陽離子在細胞內信號傳導中起重要作用，包括參予白細胞T活化的 信號傳導通道(Gallin， 1999)。還已知的是，鈣陽離子通過鈣感測受 體調節腸上皮細胞的增殖和分化(Herbert, 2004)。另外，在人中的低 鎂水平與C反應蛋白(炎症的標記物)升高有關(Guerro-Romero， 2002)。四環素在腸中的蓄積可以進一步通過使用預防胃釋放並在 小腸中釋放四環素化合物的腸溶組合物而得到進一步促進。在本發明中，有效的多價金屬陽離子提供以下能力(1) 形成金屬-四環素化合物複合物；(2)抑制四環素的吸收；和(3)增加四 環素的抗炎作用的有效性。可以在本發明中使用二價或三價金屬的藥理學可接受的 鹽，例如鈣、鎂、鋅、和鐵的氯化物、乙酸鹽、葡糖酸鹽和碳酸鹽。 螯合陰離子，例如檸檬酸根或BDTA降低可用的金屬陽離子的濃度，不 應將其用在本發明的組合物中。多價金屬鹽可以是藥物組合物和/或食物的一部分。本發明 組合物中的多價金屬鹽的日劑量應該優選在對於具體金屬的推薦日劑 量標準(RDA)的限制內。由美國食品與藥物管理局計算的目前的RDA 為，鈣lg，鎂O. 4g，對於所有其它多價金屬的RDA為"Omg。例如， 鐵、鋅、錳、和銅的RDA分別為18mg、 15mg、 2mg、和2mg。為了配製本發明的組合物，重要的是考慮到日常飲食中金 屬的RM和過量金屬的潛在毒性。由於具有充分高的RDA，本發明中的有效的多價金屬陽離子是鉤和鎂。優選的陰離子是氯化物和碳酸根。 本發明最優選的陽離子是鈣，最優選鹽是碳酸鈣和氯化鈣。本發明的 鉤組合物可以補充有其它多價金屬化合物。最優選的本發明組合物包括鈣和鎂鹽。眾所周知，鈣口腔 增補劑引起便秘。向含鈣的口服組合物中添加鎂平衡鈣的這種作用。 在本發明中，鈣與鎂的優選的摩爾比為約1: 1到約3:1。優選地，本發明的四環素-鉤組合物與膳食一起給予。由於溶解的金屬陽離子在胃中的快速吸收，在本發明中不 優選包括四環素和溶解的多價金屬鹽的含水組合物。在本發明的組合物中，多價金屬鹽的有效量包括四環素的 摩爾量的超過約IO倍的摩爾量，優選多價金屬鹽的有效量比四環素的 摩爾量高大約15倍。典型地，優選的這個比例的上限為約40倍更高 摩爾量的多價金屬。超過40倍更高量的多價金屬的劑量可用於包含少 量四環素(40-60 mg)的組合物中，用於在胃和腸中提供充分量的多價 金屬陽離子，和用於抵償由包含高水平螯合劑和增強四環素類吸收的 其它化合物的食物(例如酸性的水果)或食品添加劑引起的消耗。
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美國專利2， 806， 789公開了可以由存在於食物中的物質 (例如乙烯四乙酸、檸檬酸、抗壞血酸、多磷酸、和焦磷酸和這些化合 物的鹽)通過鈣螯合而加強四環素吸收速率。植物中的另外的螯合劑是 苯酚和多酚。另外，眾所周知，磷酸根增強四環素的腸吸收，可能是 使相互作用的金屬離子沉澱(Sompolinsky， 1972)。增加四環素吸收的 其它化合物是表面活性劑。增加四環素吸收的化合物應該以少量存在，或者不被包括 在本發明的組合物內。本發明的炎症性病症的治療包括使用天然的、半合成的和 合成的四環素類化合物。如在背景技術部分中指出的， 一些四環素(例 如四環素和土黴素)比半合成的四環素類(例如米諾環素和多西環素)
對於多價陽離子的抑制作用更敏感。這種性能使得四環素和土黴素為 本發明中優選的四環素化合物。最優選的化合物是四環素，最優選的 鹽是鹽酸四環素。與半合成的四環素類和化學上修飾的非抗微生物性四環素 類(CMT)例如多西環素、米諾環素和CMT-3相比，最優選的化合物四環 素、土黴素以及另一種優選的化合物金黴素具有更少的副作用。多西 環素、米諾環素和CMT-3在體外和體內抑制多種細胞型的增殖(Banack， 1979; Lokeshwar， 1998;和Bendeck， 2002)。腸上皮細胞具有高的 增殖速率。因此，半合成的或合成的四環素類的抗增殖作用可以引起 潛在的副作用，特別是在長期治療過程中。在使用人腸細胞系CCL-221 進行的試驗中，多西環素(5jig/ml)使細胞生長抑制約60°/。，而使用四 環素(5 ja g/ml)則沒有觀察到對細胞生長的抑制作用。在使用人淋巴瘤 Molt-4細胞進行的試驗中，多西環素(5 |j g/ml)使細胞生長抑制約 80%,而四環素(5iag/ml)僅抑制約20%。
另外，用米諾環素長期治療(用於痤瘡)已經表現出誘導被 稱為"藥物誘導的狼瘡"的綜合症。胃溶組合物。本發明的胃溶組合物被配製為用於在胃中釋放四環素化合 物，同時具有多價金屬鹽。本發明的優選的胃溶組合物包括每單劑量每千克體重為約 lM摩爾到約15jL4摩爾範圍的有效量的四環素化合物。更高的四環素 類劑量是有效的，但是可能具有毒性的副作用。在與膳食一起給予且不與釣添加劑一起給予、或與鉤添加 劑一起給予但不與膳食一起給予時，優選的四環素化合物的範圍為約 每單劑量每千克體重為約0. 5ni摩爾到約10u摩爾。對於與膳食和與鈞添加劑一起給予，優選的四環素化合物 的單劑量為每千克體重約2n摩爾到約5ja摩爾。這對應於每70 kg 體重約67 mg到約168 mg鹽酸四環素的劑量。用於胃溶組合物中的多價金屬鹽應該在約pH 1到約pH 8.5為水溶性的，並且解離為能夠與四環素化合物形成複合物的陽離 子。優選的多價金屬鹽是氯化物。也可以使用其它鹽，例如乙酸鹽和 葡糖酸鹽。含鈣和/或鎂鹽的組合物可以補充有藥學可接受量的鋅和鐵 鹽，以及多價金屬微量元素。可用於本發明的一些水不溶性的或難溶性鹽或化合物在 胃的酸性環境中反應，以形成水溶性鹽。例如，實際上不溶於水的碳酸鈣在胃中與HC1反應，並且轉化為高度可溶於水的氯化鉤。解離的 氯化鈣提供鉤離子，用於在胃中的酸性的pH和在腸中的中性到鹼性 pH都與四環素化合物形成複合物。可用於本發明的水難溶性化合物的 實例是氧化鎂。氧化鎂在胃中與水合併並形成氫氧化鎂，在胃中在酸 性pH轉化為氯化鎂。不可用於本發明的鹽的實例是磷酸鈣和硫酸鈞半水合物。 硫酸鉤半水合物(熟石青)不溶於水。磷酸鉀可以至少部分地溶解於胃 的酸性pH中，但是在腸的中性pH，磷酸釣變為水不溶性的，且不是 有效的釣離子來源。另外，眾所周知，磷酸根促進四環素的腸吸收。本發明的胃溶組合物包括每單劑量每千克體重為約10 ia 摩爾到約150ji摩爾範圍的量的四環素化合物。這個範圍對應於例如 70 kg受試者的每單劑量為28-420 mg的鈣。優選的量為每單劑量每 千克體重為18-57 ja摩爾範圍的多價金屬鹽。這對應於70 kg人的每 單劑量為50 mg-160 mg的鈣。鈣的這個量安全地在鈣的1 g RDA的範 圍內。在本發明中，多價金屬添加劑可以作為四環素組合物的一 部分提供，和/或其可以作為單獨的組合物提供。如果單獨地提供，多 價金屬添加劑應該在四環素化合物給藥的約± 20分鐘內提供。在本發明的胃溶組合物中，優選金屬的總日劑量不應超過 RDA的3被以上。更優選地，存在於本發明組合物中的多價金屬的日 劑量不應超過特定金屬的RDA。在胃溶組合物中，與食物一起服用或單獨提供的低於10 H摩爾/kg/劑量的鈣的量不顯著地促進四環素的有效性。
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胃溶組合物的實例包括丸劑、片劑或膠嚢，其包括1) 150mg鹽酸四環素，300 mg碳酸鈣，50 mg氯化鈣二水合物和100 mg氧化鎂；2) 80mg多西環素，200 mg碳酸鈣，50 mg氯化鈣和75 mg氧化鎂；和3) 40mg鹽酸四環素和150mg碳酸鈣，50mg氯化鈣和75mg氧化鎂。腸溶組合物。
的組合物。腸溶組合物是廣泛使用的，並且是本領域技術人員已知的。關於腸溶組合物的綜述包括在美國專利6， 887， 492 (第40段)中，其被併入本文作為參考。腸溶包衣由在胃的胃液中不溶解的無毒的、可食用的聚合物製成。腸溶包衣在pH 〉5時具有溶解點，以抵抗胃的酸性環境和在鄰近的腸中溶解。本發明腸溶組合物為小腸遞送四環素化合物以及多價金屬鹽。在沒有多價金屬鹽的情況下被遞送到腸中的四環素組合物在本發明中不那麼有效。本發明的優選的腸溶組合物用Eudragit 100-55 (—種曱基丙酸烯聚合物，Rohm GmbH， Germany)包衣。Eudragit L100-55包衣在胃中的pH條件下(pH 2-pH 4)基本上不溶解，但是在小腸中的大於5. 5的pH時可溶解。在含多價金屬鹽的腸溶組合物中的四環素化合物的最小有效量為每單劑量每kg體重0. 3n摩爾。優選地，四環素化合物的上限是每單劑量每千克體重5n摩爾。更高的四環素劑量是有效的，但是可能具有毒性的副作用。優選的範圍為每千克體重約0. 5jj摩爾到約2. 5jj摩爾。這對應於每70 kg體重/劑量約17 ing到約84 mg鹽酸四環素的範圍。本發明的腸溶組合物中的多價金屬鹽的有效量為每單劑量每千克體重約4ja摩爾到約80m摩爾。優選的有效量為每單劑量每千克體重10-50n摩爾的範圍。這個優選的量對應於70 kg受試者的每單劑量為28 mg-140 mg的鈣。腸溶組合物的實例包括丸劑或片劑，包含1) 75 mg鹽酸四環素，200 mg碳酸鈣，50 mg氯化鈣和50 mg氯化鎂；和2) 40mg鹽酸四環素和200 mg碳酸鈣，50 mg氯化鈣和50 mg氯化鎂。碳酸鉀實際上不溶於水。然而，碳酸釣的釣陽離子可以被螯合化合物溶解。在我們的試驗中，每毫升含7， 5mg碳酸鈣的水懸浮液(75 mM)在pH 7. 5時通過添加等摩爾量的EDTA鈉或三倍摩爾過量的檸檬酸鈉而完全溶解。因此，與在胃溶組合物中一樣，在腸溶組合物中使用碳酸釣來平衡多價金屬的螯合，特別是被植物食物的組分所螯合。在本發明的腸溶組合物中，碳酸鈣起到鈣緩衝性化合物的作用。食用的食物中的螯合能力的增加被衍生自碳酸鈣的被溶解的鈣陽離子所中和。過量的鈣保持不溶解並且通過腸。使用碳酸鈣的另外的優點在於碳酸根離子對於存在於腸中的抗微生物肽的抗菌活性來說是關鍵的(Dorschner， 2006)。優選可用於沒有多價金屬的腸溶組合物中的四環素化合物的量為每千克體重約2摩爾到約8摩爾。本發明的胃釋放組合物和腸釋放組合物可以每天給予一次、兩次或三次，優選與膳食一起給予。如有必要，它們可以每天給予四次。優選地，本發明的組合物可以在治療的第一個4到8周每天給予2次或3次，接下來在隨後的3到6周時間內每天給予一次，作為治療的維持劑量。對於70 kg受試者的優選的維持劑量為50 mg到40 fflg的四環素化合物(對於胃溶組合物)和30到20 mg四環素化合物(對於腸溶組合物)。維持劑量的實施例在實施例4和8中提供。四環素化合物的日劑量和本發明的治療方案取決於炎症的嚴重程度。對於患有晚期炎症性病症的70 kg受試者，優選的劑量是>100 mg的四環素化合物(對於胃溶組合物)或>60 mg(對於腸溶組合物)，每天給予3次，持續1周，接下來在隨後的4-7周每天給予兩次。對於患有輕度炎症性病症的70kg受試者，有效治療的優選劑量是〈100mg的四環素化合物(對於胃溶組合物)或〈60mg(對於腸溶組合物)，每天給予2次，持續4-6周。本發明的在一個實施方案中，患有輕度紅斑痤瘡(少於10個面部丘瘮-膿皰)的70 kg受試者每天給予2個丸劑，每個胃溶組合物中包含75 mg的四環素化合物。對於嚴重的紅斑痤奄，每天給予2個丸劑，每個胃溶組合物中包含160 mg的四環素化合物。本發明的含四環素化合物的組合物可以形成為丸劑、片劑、膠嚢和藥物組合物的其它形式。除了四環素化合物和多價金屬之外，組合物可以包括其它藥學活性化合物和非活性賦形劑。可以被包括在本發明的組合物中作為附屬的活性組分的藥學活性化合物包括例如抗生素、類固醇和非類固醇抗炎藥、免疫抑制藥和激素。附屬的活性化合物的實例包括紅黴素、氫化可的松、阿司匹林、環孢素、氫化可的松、曱氨蝶呤、和細胞因子IL-IO。其它附屬的活性組分包括保健增補劑、維生素和微量元素。附屬的活性組分可以是用於在胃或在腸中釋放的單級釋放組合物的一部分，或是部分在胃中部分在腸中釋放其組分的多級釋放組合物。
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本發明的方法包括可以將附屬的活性組分作為單獨的組合物給予，與本發明的組合物同時給予或與其在不同的時間給予。本發明的組合物的非活性組分包括賦形劑、載體、粘結劑和用於促進四環素化合物的溶解和遞送到小腸中的壓片助劑。本發明的組合物包括作為金屬陽離子源和作為溶解試劑(dissolution agent)添加的氯化鉤和氯化鎂。優選地，向本發明的組合物中僅加入少量的表面活性劑性化合物，例如潤溼劑、硬脂酸鎂或硬脂酸鉤(每個劑量小於25 mg)。已知表面活性劑促進四環素的吸收。本發明包括通過針對腸和腸免疫系統有效利用抗炎藥來治療外周位置的炎症性病症的方法。不限於實施例，通過包括四環素和多價金屬的抗炎組合物的用途來舉例說明所述新的方法。本發明的四環素-多價金屬組合物的抗炎作用引起炎症性病症的顯著減少或消除。炎症性病症是影響人類和動物群體的最常見疾病之一。炎症性疾病的實例包括糖尿病、肥胖症、動脈粥樣硬化、白內障、再灌注損傷、癌症、肉狀瘤病、感染後腦膜炎、風溼熱(rheumatic fewer)、風溼性疾病(包括系統性紅斑狼瘡、骨關節炎和類風溼性關節炎)、皮膚病(包括各種形式的痤瘡和紅斑痤瘡)、自身免疫腦炎、葡萄膜炎、甲狀腺炎、肌無力、非自身免疫疾病(例如哮喘、變態反應、結腸炎和中風)、腸炎症性病症(包括腸易激症候群和克羅恩氏病)、和CNS病症(包括癲癇症、腦外傷、多發性硬化、帕金森氏病和阿爾茨海默氏病)。炎症性病症的另外的實例包括在以下參考文獻中Gallin， 1999;Hansson， 2005; Wellen， 2005; Karin, 2005; Popovic， 2005;美國專利7， 122, 578和美國公布的專利申請2006/0194773。本發明的組合物和方法允許更有效地治療炎症和炎症性病症。例如，患有關節炎和骨關節炎的受試者在服用實施例1的組合物(150mg四環素)6周之後可以發現疾病症狀顯著減輕，並且疼痛和不適緩解。患有炎症性紅斑痤瘡的受試者在服用實施例5的組合物4周之後可以消除這種疾病的所有面部症狀。在本發明的另一個實施方案中，患有類風溼性關節炎的受試者每天兩次服用如實施例1中所述的包括150 mg鹽酸四環素的丸劑，所述疾病顯著減輕，如患者和醫生測量的綜合的評價，包括關節的腫脹和觸痛、紅細胞沉降率、和患者的疼痛評價。在治療骨關節炎時觀察到本發明的四環素-多價金屬治療具有相似的有利作用。作為另一個優點，本發明的組合物對胃腸道沒有刺激。這些胃腸副作用的消除是因為本發明組合物中多價金屬的存在。本發明的另 一個優點在於四環素組合物和膳食是同時服用的。這有助於減少胃腸刺激。另外，不需要在膳食和四環素攝取之間等待1-2個小時。這在早晨是特別方便的。如果需要，本發明的組合物可以在沒有膳食的情況下給予。本發明的給藥方案的靈活性增加了受試者對治療的順從性。抗生素的延長使用改變胃腸道的微生物群落。這種副作用在本發明的治療中被最小化。多價金屬(特別是鈣和鎂)的存在減弱了四環素類對腸中共生細菌的抗菌作用。對於一些細菌，在鈣和鎂鹽的存在下，四環素的效力降低超過30倍(D ' Amato, 1975)。在鉀和鎂的存在下，四環素對於敏感性細菌林的亞抗菌濃度比預期的高得多，例如在美國專利7， 008， 631和7， 014， 858中。另外，本發明的組合物和方法包括使用薄荷腦。在本文中公開了薄荷腦減輕在服用本發明的組合物的一些受試者中觀察到的副作用，例如胃腸氣體過多和胃氣脹。薄荷腦是已知的驅風劑。在新的申請中，薄荷腦用於本發明來預防腸中氣體的產生。薄荷腦的最小有
效量是每天3 mg的單劑量，並且該最小有效量在約4 mg-約8 mg/劑 量/天的範圍內。薄荷腦可以是本發明的組合物的一部分，或者作為單 獨的組合物獨立給予。薄荷腦還可以用於減輕由各種試劑和治療(不限 於本發明的組合物和治療)誘導的與氣體和胃氣脹有關的不適。不限於所提出的機制，提出四環素類對外周位置的炎症性 病症的治療作用是通過四環素類對腸免疫系統與食物組分和/或細菌 的相互作用的影響而實現的。提出了四環素化合物的抗炎作用影響特 化白細胞和腸免疫系統的合作細胞的功能。眾所周知，食物組分和細菌構成了腸內的抗原性負載。口 服抗原給藥的後果包括對於有害抗原的系統和/或局部免疫耐受性的 形成(口服耐受性)。在口服耐受性中，細胞介導的反應和體液(IgE、 IgG和IgM)反應變得被耐受。在口服耐受性和自身免疫病症的試驗中， 口服給予過量的蛋白質抗原，例如膠原蛋白和卵白蛋白。這些試驗的 結果顯示，對於包括關節炎、1型糖尿病、和阿爾茨海默氏病模型在 內的哺乳動物自身免疫疾病僅有輕微的抑制(Worbs， 2006; Faria， 2005; Toussirot， 2002;美國專利6, 010, 722)。到目前為止，基於 這些發現的治療尚未得以實踐。本發明公開了另一個食物誘導的現象。某些食物組分的長 時間過度攝取不是治療性的，但是可能引起促炎症性變化。這可以在 例如患有炎症性紅斑痤瘡的人中觀察到。日常飲食包括約150 g番茄 醬的人在這種飲食3周之後發展為對番茄產品的永久性敏感。在另一 個實例中，兩個月過度咖啡攝取(每天達到6杯)使人對咖啡敏感。在 兩個案例中，響應於引發劑例如番茄產品或咖啡的食用，獲得的敏感 作為丘瘮和膿皰形式的皮膚中的炎症性變化出現。這些觀察結果對於 長時間給予過量的膠原蛋白和卵白蛋白的優點提出了置疑。在本發明公開了食物誘導的炎症性變化可以由四環素組合物來阻斷，優選通過 四環素-多價金屬組合物來阻斷。阻斷食物誘導的紅斑痤瘡的日劑量為
在包括釣和鎂的組合物中的50 mg-150 mg的四環素或多西環素(實施 例1-3和5-7)。本文中公開了四環素化合物阻斷腸免疫系統對食物刺激 的病理性響應，並且由此減輕外周位置的炎症性病症。本發明公開的 四環素的作用可以被稱作在患有炎症性病症的受試者中誘導腸免疫系 統對促炎症性食物組分的耐受性。本文中還公開了在外周位置具有病 理性症狀的炎症性病症實際上是腸免疫系統的病症並且應該據此進行 治療。在這種機制中，在發炎的外周位置檢測到的各種病理性刺激物 和微生物是促進炎症性病症的繼發性因素。集中在外周位置的治療可 能減輕但不能實質上抑制或治癒嚴重地受到腸免疫系統影響的病症。腸的免疫活性經常是未得到充分理解。但是它是體內具有 最多淋巴組織的器官。人的腸每米包含10"個淋巴樣細胞(F aria， 2005)。腸淋巴組織位於派伊爾氏淋巴集結和腸繫膜腺體中，特化的淋 巴細胞位於腸壁中。腸免疫系統對於某些食物組分的病理性響應可以 引起活化的B和/或T細胞的快速累積，和血液和目標位置中(例如紅 斑痤瘡的皮膚中或風溼性關節炎的關節中)IgG、 IgE和/或IgM水平的 升高。在健康受試者中，由UV誘導的皮膚的小的病理變化或在關節中 的細菌感染喚起正常免疫響應，並且所述變化得以減輕。在具有過度 響應性免疫系統的受試者中，與紅斑痤瘡或類風溼性關節炎一樣，相 似的變化引起在受影響位置中的白細胞增加積累、腫脹和其它炎症症 狀。抗微生物治療可以通過減輕炎症位置的炎症性過程而為受試者帶 來一些緩解。然而，炎症的潛在原因，過度反應性的腸免疫系統可以 通過使抗炎化合物例如四環素類靶向腸而得以有效治療。腸在炎症中的控制作用解釋了針對通過用靜脈注射代替口服給藥來改善四環素有效性的試驗未獲成功的原因，如在Pillemer 2003和St. Clair， 2001所述的試驗中。如背景技術部分中指出的， 四環素的靜脈內給藥經常是這些藥物作為抗炎藥的推薦遞送途徑。另 一個實例是美國專利5， 919， 775 (第IO歹iJ，第10段)。靜脈注射顯 著地限制腸對四環素類的暴露，因此，根據本發明，減弱了這些藥物 的抗炎作用。對於炎症性病症的發病機理缺乏了解已經阻止了更有效 的抗炎治療的利用，並使患者接受不必要的治療。本發明描述了四環素類的抗炎作用。其不涉及這些化合物 在治療由細菌和微生物引起的感染性病症的用途。感染性病症的治療 可能需要四環素類的口服給藥或靜脈內給藥而無需共同給予多價金屬 組合物。
實施例在實施例中描述的本發明的胃溶和腸溶丸劑組合物每天 給予2-3次，優選隨膳食(早餐、午餐和晚餐)一起給予。在給藥這些 組合物4-8周之後，炎症性病症顯著減輕。在以下實施例中列舉的組合物的組分根據美國食品與藥 物管理局規章配製為丸劑。USP、 NF級組分得自Spectrum, Gardena， CA; Eudragit L100 55得自Rhom GmbH. KG, Darmstadt, Germany。 腸溶丸劑組合物使用每平方釐米丸劑表面為3mg的Eudragit LlOO 55 包衣。實施例1.胃溶丸劑組合物。150mg鹽酸四環素，300 mg CaC03， 50 mg CaCl2 二水合物，100 mg氧化鎂，5 mg交聯羧甲纖維 素，15 mg硬脂酸，5 mg硬脂酸鎂。
實施例2.胃溶丸劑組合物。80mg鹽酸多西環素，200 mg CaC03， 50mgCaCl2 二水合物，75 mg氧化鎂，5 mg交聯羧甲纖維素， 15 mg硬脂酸，5 mg硬脂酸鎂。實施例3.胃溶丸劑組合物。50mg鹽酸多西環素，150mg 碳酸鉤，50 mg CaCh 二水合物，75 mg氧化鎂，5 mg交聯羧甲纖維 素，15 mg硬脂酸，5 mg硬脂酸鎂。實施例4.胃溶維持丸劑組合物。40mg鹽酸四環素，150 mg碳酸鈣，50 mg CaCh 二水合物，75 mg氧化鎂，5 mg交聯羧甲 纖維素，15 mg硬脂酸，5 mg硬脂酸鎂。實施例5.腸溶丸劑組合物。75 mg鹽酸四環素，200 mg CaC03， 50 mg CaCl2 二水合物，50 mg氯化鎂，50 mg微晶纖維素， 4 mg交聯羧甲纖維素，12 mg硬脂酸，4 mg硬脂酸鎂.實施例6.腸溶丸劑組合物。40 mg鹽酸四環素，200 mg CaC03, 50 mg CaCl2 二水合物，50 mg氯化鎂，85 mg微晶纖維素， 4 mg交聯羧甲纖維素，12 mg硬脂酸，4 mg硬脂酸鎂。實施例7.腸溶丸劑組合物。40mg鹽酸多西環素，200 mg CaC03， 50 mg CaCl2 二水合物，50 mg氯化鎂，85 mg微晶纖維素， 4 mg交聯羧曱纖維素，12 mg硬脂酸，4 mg硬脂酸鎂。實施例8.腸溶維持丸劑組合物。30mg鹽酸四環素，200 mg CaC03， 50 mg CaCl2 二水合物，50 mg氯化鎂，50 mg微晶纖維 素，4 mg交聯羧甲纖維素，12 mg硬脂酸，4 mg硬脂酸鎂。
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權利要求
1.用於口服給藥的藥物組合物，包括一種或多種四環素化合物和一種或多種有效的四環素化合物吸收抑制劑。
2. 權利要求l的組合物，包括選自天然四環素類、半合成四環素 類、合成四環素類的四環素化合物及其組合物。
3. 權利要求2的組合物，包括每劑量為約0. 5亳摩爾到約4亳摩 爾的四環素化合物。
4. 權利要求2的組合物，包括每劑量為約0. 2毫摩爾到0. 5毫摩 爾的四環素化合物。
5. 權利要求2的組合物，包括每劑量為約0.02亳摩爾到0.2毫 摩爾的四環素化合物。
6. 權利要求1的組合物，其中四環素吸收抑制劑包括一種或多種 無毒的多價金屬，其中所述多價金屬為鹽的形式或為可以在胃或腸中 轉化為鹽的化合物的形式。
7. 權利要求6的組合物，其中多價金屬的摩爾比例相對於每一摩 爾四環素化合物為高於約IO摩爾且低於約75摩爾的所述金屬。
8. 權利要求6的組合物，其中多價金屬的摩爾比例相對於每一摩 爾四環素化合物為約15摩爾到約40摩爾。
9. 權利要求6的組合物，其中多價金屬包括鈣、鎂及其組合物。
10. 權利要求9的組合物，另外包括無毒量的鐵、鋅、及其組合物。
11. 權利要求l的組合物，另外包括藥學活性的附屬組分。
12. 權利要求11的組合物，其中所述活性的附屬組分選自抗生 素、類固醇抗炎化合物、非類固醇抗炎化合物、激素、保健增補劑、 維生素、微量元素、薄荷腦、及其組合物。
13. 權利要求l的組合物，另外包括選自載體、粘結劑、潤滑劑、 崩解劑、製片劑、及其組合物的賦形劑。
14. 權利要求l的組合物，為固體、糊劑、粉末、凝膠、懸浮液 或溶液的形式。
15. 權利要求l的組合物，被配製為胃溶組合物。
16. 權利要求l的組合物，被配製為腸溶組合物。
17. 權利要求16的組合物，其中四環素化合物和多價金屬的腸中 釋放是pH依賴性的，並且在約5-約7的pH範圍啟動。
18. 用於治療外周位置的炎症性病症的方法，包括給予非蛋白的 抗炎化合物，使得其在小腸中發揮其抗炎活性。
19. 權利要求18的方法，其中所述炎症性病症是由存在於腸中的 衍生自食物或細菌的化合物而誘導或促進的。
20. 用於治療外周位置的炎症性病症的方法，包括給予包括四環素化合物和所述四環素化合物的胃吸收抑制劑的組分，以便促進四環 素化合物在腸中的抗炎活性。
21. 權利要求20的方法，其中所述組分是口服給藥的胃溶組合物 或口服給藥的腸溶組合物的一部分。
22. 權利要求20的方法，其中四環素化合物是包括四環素化合物 胃吸收抑制劑的口服組合物的一部分。
23. 權利要求20的方法，其中所述四環素化合物選自天然四環素 類、半合成四環素類、合成四環素類及其組合物。
24. 權利要求23的方法，其中所述四環素化合物選自四環素、土 黴素、金黴素、多西環素、其藥學可接受的鹽、及其混合物。
25. 權利要求20的方法，其中四環素吸收抑制劑包括一種或多種 無毒的多價金屬，為鹽的形式或為可以在胃或腸中轉化為鹽的化合物 的形式。
26. 權利要求20的方法，其中所述組分與膳食一起給予。
27. 權利要求20的方法，其中所述組分不與膳食一起給予。
28. 權利要求20的方法，其中治療的病症選自糖尿病、肥胖症、 動脈粥樣硬化、白內障、再灌注損傷、癌症、感染後腦膜炎、風溼熱、 系統性紅斑狼瘡、類風溼性關節炎、痤瘡、紅斑痤瘡、自身免疫腦炎、 葡萄膜炎、甲狀腺炎、肌無力、哮喘、變態反應、結腸炎、中風、癲 癇症、腦外傷、多發性硬化、帕金森氏病、阿爾茨海默氏病、腸易激 症候群、和克羅恩氏病。
全文摘要
本發明涉及通過將四環素化合物與有效的四環素吸收抑制劑(例如多價金屬)一起給藥而用於治療各種炎症性病症的改進的方法。還教導了用於所述方法的藥物組合物。
文檔編號A61K33/06GK101678108SQ200880016401
公開日2010年3月24日 申請日期2008年3月20日 優先權日2007年3月23日
發明者P·喬姆科辛斯奇 申請人:分子研究中心公司