竹節參皂苷Ⅳa製備方法以及在製備保肝降酶藥物中的應用的製作方法

2023-04-27 22:44:51

專利名稱：竹節參皂苷Ⅳa製備方法以及在製備保肝降酶藥物中的應用的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種中藥單體的製備方法及其醫藥用途，具體涉及珠子參中一種齊墩 果酸型三萜皂苷-竹節參皂苷IVa的製備方法及其在製備保肝降酶藥物中的應用。
背景技術：
珠子參系五加科植物珠子參[Panaxjaponicus C. A. Mey. var. major (Buck. )C. Y. Wu et K. Μ. Feng]或羽葉三七[Panax jap Onicus C. A. Mey. var. bipinnatif idus (Seem.) C. Y. Wu et K. Μ. Feng]的乾燥串珠狀根莖。主要分布在我國陝西、 四川、湖北、雲南等省。具有補肺、養陰、活絡、止血的功效，用於氣陰兩虛、煩熱口渴、虛勞咳 嗽、跌扑損傷、關節疼痛、咳血、吐血、外傷出血等。其地上部分習稱參葉或漢中參葉，具有清 熱解毒、滋補強壯等功效，民間多以其葉泡茶飲用以保護嗓音。珠子參根莖中皂苷成分主要 為齊墩果烷型三萜皂苷，也含有少量達瑪烷型三萜皂苷。通過對皂苷成分進行分析，結果表 明珠子參皂苷成分從苷元結構上可分為兩大類一類是齊墩果烷型皂苷，如人參皂苷Ro， 竹節參皂苷IVa等；另一類是達瑪烷型皂苷，該類按其達瑪烷氧化類型可分為三種類型，即 原人參二醇型(如人參皂苷Rbl，Rd等)；原人參三醇型(如人參皂苷Re，Rg1等)；奧可提 羅型(如假人參皂苷F11,珠子參皂苷ig等。目前，有關珠子參化學成分的研究報導較多，但主要集中於總皂苷的研究。張國 明等研究了珠子參有效成分製劑及製備方法，並申請了國家專利(珠子參有效成分製劑及 製備方法00115425. 7)。該發明專利提供了高含量珠子參總皂甙製劑及製備方法，克服了 由生藥或粗浸膏所製得的製劑質量不穩定諸因素，提高了珠子參製劑內在質量，從而保證 藥物的臨床使用安全和療效能確保藥物使用安全並提高療效。但該專利沒有涉及珠子參總 皂苷及有關單體成分的進一步分離、藥理作用及相關製劑製備的研究。

發明內容
本發明提供了一種竹節參皂苷IVa製備方法，以解決現有技術工藝複雜，製備的 竹節參皂苷IVa單體純度不高等問題。該製備方法包括以下步驟(1)將珠子參原料藥材破碎，將破碎物料用5-40倍量(V/V)水或親水性有機溶劑 溶解提取，得到提取液；( 收集提取液，過濾，將濾液濃縮，濃縮比例為1 2-1 3，即每毫升濃縮液含 原藥材0. 5-0. 33克；(3)將步驟( 濃縮處理後的濾液經高分子材料吸附，先後以2-20倍量的水、 30-10倍量的濃度為20-70% (V/V)的醇-水混合溶液洗脫(具體選擇時，高倍量對應於低 濃度)，收集醇-水混合溶液洗脫得到醇-水洗脫液；(4)對得到的醇-水洗脫液-0. 04 -0. 06MPa, 55°C 80°C的條件下濃縮、乾燥，得到總皂苷；(5)將總皂苷按1 10-90倍量進行吸附柱色譜分離，再以三氯甲烷-甲醇梯度 (20-5 1，V/V)洗脫；將同一梯度多次洗脫得到的洗脫液合併，得到多組不同濃度的竹節 參皂苷IVa粗品；(6)將竹節參皂苷IVa粗品經葡聚糖凝膠LH-20開口柱純化，再以三氯甲烷-甲醇 梯度O0-5 1，V/V)洗脫，收集洗脫液，減壓回收，乾燥得到竹節參皂苷IVa粉末；(7)將竹節參皂苷IVa粉末經過丙酮和/或醇類等親水性有機溶劑反覆重結晶得 到竹節參皂苷IVa結晶純品。上述步驟(1)的溶解提取過程是對所述破碎物料用5-40倍量水或脂肪族低級醇 或酮加熱回流提取1-3次，每次1-3小時。上述步驟(3)中所述高分子材料為大孔吸附樹脂，樹脂與待吸附的原藥材之質量 比為1 0. 1-1 (即每克樹脂吸附原藥材的量為0. 1到1克)。上述步驟C3)所述醇-水混合溶液中的醇為甲醇或乙醇。上述步驟(5)中所述吸附柱色譜分離是採用矽膠吸附柱，總皂苷與矽膠之比為 1 10-90 (g/g)；然後以三氯甲烷-甲醇按20-5 1(V/V)梯度洗脫，進行等份收集，通過薄 層層析檢測，將同一梯度多次洗脫得到的洗脫液合併，得到多組不同濃度的竹節參皂苷IVa 粗品。竹節參皂苷IVa的結構式為
權利要求
1.竹節參皂苷IVa的製備方法，其特徵在於，包括以下步驟(1)將珠子參原料藥材破碎，將破碎物料用5-40倍量(V/V)水或親水性有機溶劑溶解 提取，得到提取液；(2)收集提取液，過濾，將濾液濃縮，濃縮比例為1 2-1 3，即每毫升濃縮液含原藥 材 0. 5-0. 33 克；(3)將步驟(2)濃縮處理後的濾液經高分子材料吸附，先後以2-20倍量的水、30-10倍 量的濃度為20%-70% (V/V)的醇-水混合溶液洗脫，收集醇-水混合溶液洗脫得到醇-水 洗脫液；(4)對得到的醇-水洗脫液在-0.04 -0. 06MPa, 55°C 80°C的條件下濃縮、乾燥，得 到總皂苷；(5)將總皂苷按1 10-90倍量進行吸附柱色譜分離，再以三氯甲烷-甲醇梯度 (20-5 1，V/V)洗脫；將同一梯度多次洗脫得到的洗脫液合併，得到多組不同濃度的竹節 參皂苷IVa粗品；(6)將竹節參皂苷IVa粗品經葡聚糖凝膠LH-20開口柱純化，再以三氯甲烷-甲醇梯度 (20-5 1，V/V)洗脫，收集洗脫液，減壓回收，乾燥得到竹節參皂苷IVa粉末；(7)將竹節參皂苷IVa粉末經過丙酮和/或醇類親水性有機溶劑反覆重結晶得到竹節 參皂苷IVa結晶純品。
2.根據權利要求1所述的竹節參皂苷IVa的製備方法，其特徵在於步驟(1)的溶解 提取過程是對所述破碎物料用5-40倍量水或脂肪族低級醇或酮加熱回流提取1-3次，每次 1-3小時。
3.根據權利要求2所述的竹節參皂苷IVa的製備方法，其特徵在於步驟(3)中所述 高分子材料為大孔吸附樹脂，樹脂與待吸附的原藥材之質量比為1 0.1-1。
4.根據權利要求3所述的竹節參皂苷IVa的製備方法，其特徵在於步驟(3)所述 醇_水混合溶液中的醇為甲醇或乙醇。
5.根據權利要求4所述的竹節參皂苷IVa的製備方法，其特徵在於步驟(5)中所述 吸附柱色譜分離是採用矽膠吸附柱，總皂苷與矽膠之比為1 10_90(g/g)；然後以三氯甲 烷-甲醇按20-5 1(V/V)梯度洗脫，進行等份收集，通過薄層層析檢測，將同一梯度多次 洗脫得到的洗脫液合併，得到多組不同濃度的竹節參皂苷IVa粗品。
6.竹節參皂苷IVa在製備保肝降酶藥物製劑中的應用。
7.根據權利要求6所述的藥物製劑，其特徵在於該藥物製劑是由竹節參皂苷IVa與 一種或多種醫藥上可接受的載體/輔料混合製成。
8.根據權利要求7所述的藥物製劑，其特徵在於所述藥物製劑包括固體口服製劑、液 體口服製劑。
9.如權利要求8所述的固體口服製劑的製備方法，其特徵在於竹節參皂苷IVa按 1 0.25-11. 5重量比與常規藥物固體賦形劑混合，以常規製劑製備工藝製成固體口服制 劑。
10.如權利要求8所述的液體口服製劑的製備方法，其特徵在於將竹節參皂苷IVa按 1 10-50重量比與常規藥物液體賦形劑混合，以常規製劑製備工藝製成液體口服製劑。
全文摘要
本發明公開了一種以珠子參為原料製備竹節參皂苷IVa方法，並指出竹節參皂苷IVa在製備保肝降酶藥物中的應用。其製備方法步驟主要有珠子參原料藥材破碎，用水或親水性有機溶劑提取，將提取液過濾，濃縮；濃縮液經大孔吸附樹脂色譜柱富集總皂苷，先後以水、醇-水混合液洗脫，收集醇-水洗脫液，低溫減壓濃縮、乾燥得到總皂苷；總皂苷經色譜分離，溶劑洗脫，減壓回收溶劑、乾燥，得到竹節參皂苷IVa粗品；粗品用有機溶劑反覆重結晶得竹節參皂苷IVa結晶純品。經驗證，竹節參皂苷IVa具有保肝降酶生物活性，可與一種或多種醫藥上可接受的載體/輔料混合製成具有保肝降酶藥效的固體和液體口服製劑。
文檔編號C07J63/00GK102134268SQ201110008170
公開日2011年7月27日 申請日期2011年1月14日 優先權日2011年1月14日
發明者馮改利, 劉越, 唐志書, 宋小妹, 宋蓓, 崔九成, 晁旭, 王薇, 蒙躍龍, 鄧翀 申請人:陝西中醫學院