一種複方丹參滴丸溶出度的測定方法
2023-05-24 17:00:56
一種複方丹參滴丸溶出度的測定方法
【專利摘要】本發明公開了一種複方丹參滴丸溶出度測定方法，包括對照品溶液的製備、供試品溶液的製備、採用小杯法進行試驗使用，然後採用超高效液相色譜測定溶出量，計算各個時間點溶出度。本方法具有很好的專屬性、精密度、穩定性和耐用性，線性關係良好，有助於更好地控制複方丹參滴丸的治療。
【專利說明】一種複方丹參滴丸溶出度的測定方法
【技術領域】:
[0001]本發明屬於中藥【技術領域】，特別涉及中藥的檢測方法，具體涉及一種複方丹參滴丸溶出度的測定方法。
【背景技術】:
[0002]固體製劑口服給藥後，藥物的吸收取決於藥物從製劑中的溶出或釋放、藥物在生理條件下的溶解以及在胃腸道的滲透。由於藥物的溶出和溶解對吸收具有重要影響，因此，體外溶出度試驗有可能預測其體內行為。基於上述考慮，建立口服固體製劑體外溶出度試驗方法，有下列作用:
[0003]( I)評價製劑批間質量的一致性；
[0004](2)指導新製劑的研發；
[0005](3)在產品發生某些變更後(如處方、生產工藝、生產場所變更和生產工藝放大)，確認藥品質量和療效的一致性。
[0006]在確定溶出度質量標準時，應考慮到藥物的溶解性、滲透性、溶出行為及藥代動力學特性等因素，以保證藥品批間質量的一致性、變更以及工藝放大前後產品質量的一致性。
[0007]複方丹參滴丸為天士力公司開發的活血化瘀、理氣止痛中藥，用於胸中憋悶、心絞痛，其主要成分為丹參、三七、冰片，其藥理作用包括I增加冠脈血流量，2增加心肌耐缺氧保護缺血心肌,3抗血小板聚集防止血栓形成，4改善微循環。
[0008]複方丹參滴丸中丹參味苦，性微寒，具有活血化瘀，養血安神，涼血排癰和排毒生肌的功效，是中藥活血化瘀的常用藥物。丹參藥材主含脂溶性的二萜類成分和水溶性的酚酸類成分，尚含有黃酮類、三萜類、留醇等其他成分。二萜類成分中屬醌、酮型結構的有丹參酮1、II Α、ΙΙ κ、V、VI，隱丹參酮，異丹參酮1、I1、IIb，二氫丹參酮I等。水溶性的酚酸類成分有丹參素、原兒茶醛、原兒茶酸、咖啡酸及丹參素與咖啡酸的衍生物或二聚物酯化而成的縮酚酸。
[0009]作為一種固體口服製劑，複方丹參滴丸溶出度的測定具有重要意義，但由於中藥成分的複雜性，如何準確測定其有效成分的溶出度需要進行多方面的考察，本發明為了更好地考察複方丹參滴丸在體內的溶出、吸收情況，對多種實驗方法進行了考察，建立了一種靈敏度高，準確度高，重複性好的溶出度測定方法。
【發明內容】
:
[0010]為了 了解複方丹參滴丸體外釋放的特性，本發明對複方丹參滴丸的溶出度情況進行系統研究尋找一種合適的溶出度測定方法。
[0011]複方丹參滴丸主要包括兩組活性成分(水溶性丹參酚酸類成分和人參皂苷類成分)，根據溶出度測定方法在口服用藥後的胃腸道吸收及體內藥代動力學基本特徵，水溶性丹參酚酸類成分中，丹參素和原兒茶醛能較好的經胃腸道吸收。故確定以丹參素為指標成分，測定複方丹參滴丸的溶出度。[0012]根據本發明的複方丹參滴丸溶出度測定方法，包括如下步驟:
[0013](I)對照品溶液的製備:取對照品，加0%_100%甲醇-水製成溶液，即為對照品溶液；
[0014](2)供試品溶液的製備:取複方丹參滴丸，置量瓶中，加水，超聲處理使溶解，加水至刻度，搖勻，用微孔濾膜濾過，即得供試品溶液；
[0015](3)取5-15粒複方丹參滴丸，以150-250ml純化水、ρΗ4.5或ρΗ6.8的緩衝溶液作為溶出介質，採用小杯法進行試驗；
[0016](4)採用超高效液相色譜測定溶出量，計算各個時間點溶出度。
[0017]根據本發明的實施方式之一，所述步驟(I)對照品溶液的製備為:取丹參素鈉，力口水製成溶液，即為對照品溶液。
[0018]根據本發明的另一實施方式，所述步驟(2)為供試品溶液的製備:取複方丹參滴丸5-15粒，置量瓶中，加水，超聲處理使溶解，加水至刻度，搖勻，用0.22 μ m微孔濾膜濾過，即得供試品溶液。
[0019]根據本發明的再一實施方式，所述步驟(3)的溶出介質為純化水。
[0020]分別考察了 PH4.5、PH6.8的緩衝溶液和純化水3種不同的溶出介質，3種介質中，丹參素的溶出基本無差異，由於純化水做介質操作簡便，省時易得，故選用純化水做介質。
[0021]特別優選的，所述純化水的體積為250ml。
[0022]分別考察了 150ml、200ml、250ml純化水的溶出結果，在三種不同溶質體積下，丹參素溶出曲線基本一致，但考慮溶質量越小，則受體積影響越大，越易造成六個杯的不平行，故在線性允許範圍內，優選溶出介質為250ml。
[0023]根據本發明實施方式之一，所述步驟(3)的溶出介質的溫度為36_38°C。
[0024]根據本發明另一實施方式，所述步驟(3)的小杯法的攪拌槳轉速為50-150轉/min0
[0025]優選的，所述步驟(3)的小杯法的攪拌槳轉速為100轉/min。
[0026]考察了攪拌槳的速度分別為50、75、100、150轉/min時的測定結果。轉速過快，易造成水動力學紊亂而致使6個溶出杯平行性差，且不宜區分不同製劑的溶出行為；而取樣時間一般設置在溶出曲線的拐點附近或略靠後，50轉/min時溶出拐點出現在45min，75轉/min時溶出拐點出現在30min，100轉/min時溶出拐點出現在15min，故為體現產品快速釋放的特點，優選轉速為100轉/min，取樣時間設在20min。
[0027]根據本發明的再一實施方式，所述步驟(4)的超高效液相色譜測定所用色譜條件如下:採用C18色譜柱，流動相A相為磷酸溶液-乙腈、流動性B相為磷酸溶液，梯度洗脫，檢測波長為280nm，柱溫40°C。
[0028]優選的，所述流動相A相為含0.02%磷酸的80%乙腈，所述流動相B相為0.02%的磷酸水溶液，所述梯度洗脫的梯度為:
[0029]0-1.6 分鐘，9% — 22%A 相；
[0030]1.6-1.8 分鐘，22% — 26%A 相；
[0031 ] 1.8-8.0 分鐘，26% — 39%A 相；
[0032]8.0-8.4 分鐘，39% — 9%A 相；
[0033]8.4-10.0 分鐘，9%A 相。[0034]根據本發明，在20min時，複方丹參滴丸中丹參素的溶出度不低於80%。
[0035]本發明的方法是經過篩選獲得的，篩選過程如下:
[0036]1.0實驗材料
[0037]1.1試劑與試藥
[0038]丹參素鈉對照品:中國藥品生物製品檢定所批號:110855-200809
[0039]複方丹參滴丸: 天士力製藥集團股份有限公司
[0040](批號:111208、120104、120105,120109 )
[0041]乙腈: 德國默克批號:1599630131
[0042]超純水: 公司自製
[0043]磷酸:天津市風船化學試劑科技有限公司(分析純)批號:20110901
[0044]1.2 儀器
[0045]智能藥物溶出儀:天大天發公司型號:ZRS-8G儀器編號:QC-M_026
[0046]超高效液相色譜儀:美國Waters公司型號:H-class儀器編號:QC_M_259
[0047]色譜柱:WatersAqucity UPLC? HSS T3 ( 2.I X 100mm，1.8 μ m)，SN:01173935115593
[0048]1.3色譜條件
[0049]Waters Aqucity UPLC? HSS T3 (2.I X 100mm，1.8 μ m)色譜柱，以含 0.02% (ml/ml)磷酸的80%乙腈為流動相A，以0.02% (ml/ml)的磷酸水溶液為流動相B，按以下進行梯度洗脫；流速為每分鐘0.4ml ;檢測波長為280nm ;柱溫40°C ;記錄時間為10分鐘。
[0050]0-1.6 分鐘，9% — 22%A 相；
[0051 ] 1.6-1.8 分鐘，22% — 26%A 相；
[0052]1.8-8.0 分鐘，26% — 39%A 相；
[0053]8.0-8.4 分鐘，39% — 9%A 相；
[0054]8.4-10.0 分鐘，9%A 相。
[0055]2溶出度的測定
[0056]2.1對照品溶液製備
[0057]取丹參素鈉對照品適量，精密稱定，加水製成每1ml含64μ g的溶液(相當於每1ml含丹參素57.6 μ g)，即得。
[0058]2.2供試品溶液製備
[0059]取複方丹參滴丸10粒，精密稱定，置IOml量瓶中，加水適量，超聲處理(功率120W，頻率40kHz) 15分鐘使溶解，放冷，加水至刻度，搖勻，用0.22 μ m微孔濾膜濾過，即得。
[0060]2.3溶出度的測定
[0061]取10粒複方丹參滴丸，以250ml純化水作為溶出介質，採用小杯法進行試驗，測定複方丹參滴丸的溶出度。
[0062]2.4溶出度的計算
[0063]分別在5、10、15、20、30、45、60分鐘吸取溶液2ml (手動補液)，立即經0.22 μ m微
孔濾膜濾過，取續濾液2μ I注入超高效液相色譜儀(H-class)測定，算出每10丸樣品丹參素的溶出量，與樣品的實際含量比較，計算各個時間點溶出度。典型溶出樣品色譜圖見圖1。
[0064] 溶出介質的選擇[0065]考察了 PH4.5、PH6.8的緩衝溶液和純化水3種不同的溶出介質，如表1所示，三種介質中，丹參素的溶出基本無差異，見圖2，考慮純化水做介質操作簡便，省時易得，故選用純化水做介質。
[0066]表1不同溶出介質對丹參素溶出測定的影響
【權利要求】
1.一種複方丹參滴丸溶出度測定方法，其特徵在於包括如下步驟: (1)對照品溶液的製備:取對照品，加0%-100%甲醇-水製成溶液，即為對照品溶液； (2)供試品溶液的製備:取複方丹參滴丸，置量瓶中，加水，超聲處理使溶解，加水至刻度，搖勻，用微孔濾膜濾過，即得供試品溶液； (3)取5-15粒複方丹參滴丸，以150-250ml純化水、pHl.2、pH4.5或pH6.8的緩衝溶液作為溶出介質，採用小杯法進行試驗； (4)採用超高效液相色譜測定溶出量，計算各個時間點溶出度。
2.根據權利要求1的測定方法，其中，所述步驟(1)對照品溶液的製備為:取丹參素鈉，加水製成溶液，即為對照品溶液。
3.根據權利要求1的測定方法，其中，所述步驟(2)為供試品溶液的製備:取複方丹參滴丸5-15粒，置量瓶中，加水，超聲處理使溶解，加水至刻度，搖勻，用0.22 μ m微孔濾膜濾過，即得供試品溶液。
4.根據權利要求1的測定方法，其中，所述步驟(3)的溶出介質為純化水。
5.根據權利要求4的測定方法，其中，所述純化水的體積為250ml。
6.根據權利要求1的測定方法，其中，所述步驟(3)的溶出介質的溫度為36-38°C。
7.根據權利要求1的測定方法，其中，所述步驟(3)的小杯法的攪拌槳轉速為50-150轉 /min0
8.根據權利要求1的測定方法，其中，所述步驟(4)的超高效液相色譜測定所用色譜條件如下:採用C18色譜柱，流動相A相為磷酸溶液-乙腈、流動性B相為磷酸溶液，梯度洗脫，檢測波長為280nm，柱溫40°C。
9.根據權利要求8的測定方法，其中，所述流動相A相為含0.02%磷酸的80%乙腈，所述流動相B相為0.02%的磷酸水溶液，所述梯度洗脫的梯度為: 0-1.6 分鐘，9% — 22%A 相；
1.6-1.8 分鐘，22% — 26%A 相；
1.8-8.0 分鐘，26% — 39%A 相；
8.0-8.4 分鐘，39% — 9%A 相；
8.4-10.0 分鐘，9%A 相。
10.根據權利要求1-9任一項所述的測定方法，其中，在20min時，複方丹參滴丸中丹參素的溶出度不低於80%。
【文檔編號】G01N30/02GK103913520SQ201310002839
【公開日】2014年7月9日 申請日期:2013年1月5日 優先權日:2013年1月5日
【發明者】闞紅玉, 侯春蓮, 葛丹丹, 邊寧, 孫玉俠, 曹鳳蘭 申請人:天士力製藥集團股份有限公司