氨基吡唑化合物的製作方法

2023-05-22 15:53:31

專利名稱：氨基吡唑化合物的製作方法
氨基吡唑化合物Janus激酶2(JAD)是酪氨酸激酶家族的成員，其涉及細胞因子信號傳導。JAK2 在促紅細胞生成素(EPO)信號傳導途徑中具有關鍵作用，包括紅細胞分化和Stat5活化。近來的研究表明患有慢性骨髓增生性障礙(例如真性紅細胞增多症、原發性血小板增多和伴有骨髓外化生的骨髓硬化)以及血栓障礙(例如活化的蛋白質C抵抗、內臟靜脈血栓形成、巴-希症候群和門靜脈血栓形成)的患者通常獲得JAK2的活化突變。該突變， 在第671位胺基酸由纈氨酸置換成苯丙氨酸，通過未知的機制導致構成性的酪氨酸磷酸化活性。突變JAK2的構成性活性導致磷酸化的JAK2、pSTAT5和STAT5轉錄活性水平升高，這導致骨髓增生性障礙和白血病(例如非典型的慢性粒細胞白血病)的發病。另外，JAK2在實體和血液腫瘤中通過白介素-6-依賴性自分泌環或其它遺傳改變而活化，所述的實體和血液腫瘤例如成膠質細胞瘤、乳腺癌、多發性骨髓瘤、前列腺癌、原發和繼發的急性粒細胞白血病、T-系和B-系急性淋巴細胞白血病、脊髓發育不良症候群。已經報導了多種氨基吡唑酪氨酸激酶抑制劑。參見例如WO 06087538和WO 2007064797。但是，仍然需要抑制酪氨酸激酶例如JAK2的進一步的化合物。本發明提供了新的氨基吡唑化合物，相信其能臨床用於治療骨髓增生性障礙，其中JAK2信號傳導途徑是活化的或者其中JAK/STAT信號傳導是失調的。本發明提供了 3- (4-氯-2-氟苄基)-2-甲基-N- (5-甲基-IH-吡唑-3-基)-8-(嗎啉代甲基)咪唑並[l，2-b]噠嗪-6-胺或其可藥用鹽。本發明提供了治療哺乳動物中的慢性骨髓增生性障礙的方法，所述的慢性骨髓增生性障礙選自真性紅細胞增多症、原發性血小板增多和伴有骨髓外化生的骨髓硬化，該方法包括給需要該治療的哺乳動物施用有效量的3-(4-氯-2-氟苄基)-2-甲基-N-(5-甲基-IH-吡唑-3-基)-8-(嗎啉代甲基)咪唑並[l，2-b]噠嗪-6-胺或其可藥用鹽。本發明還提供了治療患者的成膠質細胞瘤、乳腺癌、多發性骨髓瘤、前列腺癌和白血病(例如非典型的慢性粒細胞白血病、原發和繼發的急性粒細胞白血病、T-系和 B-系急性淋巴細胞白血病、脊髓發育不良症候群和骨髓增生性障礙)的方法，該方法包括給需要該治療的患者施用有效量的3-(4-氯-2-氟苄基)-2-甲基-N-(5-甲基-IH-吡唑-3-基)-8-(嗎啉代甲基)咪唑並[l，2-b]噠嗪-6-胺或其可藥用鹽。本發明還提供了包含3- -氯-2-氟苄基)-2-甲基-N_(5-甲基-IH-吡唑-3-基)-8-(嗎啉代甲基)咪唑並[l，2-b]噠嗪-6-胺或其可藥用鹽以及可藥用載體、 稀釋劑或賦形劑的藥物組合物。本發明還提供了組合另外的治療成分的3-(4-氯-2-氟苄基)-2-甲基-N-(5-甲基-IH-吡唑-3-基)-8-(嗎啉代甲基)咪唑並[l，2-b]噠嗪-6-胺或其可藥用鹽以及可藥用載體、稀釋劑或賦形劑。本發明還提供了用作藥物的3-(4-氯-2-氟苄基)-2-甲基-N-(5-甲基-IH-吡唑-3-基)-8-(嗎啉代甲基)咪唑並[l，2-b]噠嗪-6-胺或其可藥用鹽。另外，本發明提供了 3- (4-氯-2-氟苄基)-2-甲基-N- (5-甲基-IH-吡唑-3-基)_8_ (嗎啉代甲基)咪唑並[l，2_b]噠嗪-6-胺或其可藥用鹽在製備用於治療慢性骨髓增生性障礙的藥物中的用途。 特別的是，這些慢性骨髓增生性障礙選自真性紅細胞增多症、原發性血小板增多和伴有骨髓外化生的骨髓硬化。另外，本發明提供了用於治療慢性骨髓增生性障礙的藥物組合物，所述的慢性骨髓增生性障礙選自真性紅細胞增多症、原發性血小板增多和伴有骨髓外化生的骨髓硬化，所述的藥物組合物包含作為活性成分的3-(4-氯-2-氟苄基)-2-甲基-N_(5-甲基-IH-吡唑-3-基)-8-(嗎啉代甲基)咪唑並[l，2-b]噠嗪-6-胺或其可藥用鹽。有技能的讀者應當理解，本發明化合物能夠形成鹽。本發明化合物是胺，並且因此能與任何無機和有機酸反應，形成可藥用的酸加成鹽。此類可藥用的酸加成鹽和製備這些鹽的通用方法是本領域眾所周知的。參見，例如P. Mahl等人，HANDBOOK OF PHARMACEUTICAL SALTS :PR0PERTIES, SELECTION AND USE(藥用鹽手冊性質、選擇和應用)，(VCHA/ffiIey-VCH,2002) ；L. D. Bighley，S. M. Berge, D. C. Monkhouse, "Encyclopedia of Pharmaceutical ^Technology (製藥技術百科全書)，，，編輯 J. Swarbrick 和 J. C. Boylan, 第 13 卷，Marcel Dekker, Inc.，New York, Basel, Hong Kong 1995，第 453-499 頁； S. Μ. Berge 等 Α "Pharmaceutical Salts ( M ffl ife )，，，Journal of Pharmaceutical Sciences，第 66 卷第 1 期，1977 年 1 月。以下製備和實施例是用ChemDraw Ultra 10. O版命名的。流程

圖1 製備11-(4-甲氧基苄基)-5-甲基-IH-吡唑-3-胺方法1 在IL圓底燒瓶中將5-氨基-3-甲基吡唑(22. 8g,234. 8mmol)和N-甲基吡咯烷酮QOOmL)混合。將燒瓶冷卻至0°C並且在氮氣下放置。在燒瓶中加入氫氧化鈉(9.39g， 1.0當量(equiv.))並且攪拌30分鐘(min)。在燒瓶中滴加α-氯_4_甲氧基甲苯(31mL， 1.0當量)的N-甲基吡咯烷酮(IOOmL)溶液。將反應緩慢溫至室溫(RT)過夜。將反應用水稀釋，並且用乙酸乙酯(EA)萃取。將有機物用飽和氯化鈉水溶液洗滌。真空濃縮。在矽膠填料上純化(己烷一2 1己烷EA — 3 2己烷EA — 1 1己烷EA — 1 2 己烷EA —EA)。濃縮所需的級分，得到標題化合物(10.8g，21% )。LCMS0分鐘)= 218. 0(M+1)。方法2:A. (E)-2-(4-甲氧亞苄基)胼甲酸叔丁酯在50 "C 下，歷經 20 分鐘在胼甲酸叔丁 酯(tert-butyl carbazate) (400g, 2. 94mol)的甲苯(750mL)溶液中加入4-甲氧基苯甲醛0OOg，2. 94mol)。加熱回流1小時 (h)，收集用甲苯共沸物中的水。收集不到進一步的水後，冷卻至60°C。加入己烷直至產物從溶液中沉澱。將浴槽進一步冷卻至20°C。通過過濾收集固體並且應用氮氣壓乾燥，得到標題化合物(750. 5g,91%) O1H 匪 lU400MHz，二甲亞碸-d6 (DMS0-d6)] δ 10. 6-10. 8 (bs，1H)， 7. 88-8. 0 (S, 1H)，7. 5-7. 55 (d, 2H)，6. 95-7. 0 (d, 2H)，1. 45 (s,9H)。ES/MS (m/z) :249 [M_H]。B. 2-(4-甲氧基苄基)胼甲酸叔丁酯通過真空轉移在密封的壓力反應器中加入在EA(IOOmL)中勻漿的10%鈀炭(水潤溼的，20g)。用最小量的EA衝洗轉移管路。通過真空轉移加入溶於四氫呋喃(THF，IOOOmL)中的(e)-244-甲氧基亞苄基)胼甲酸叔丁酯(320g，lj8mol)，並且用最小量的thf衝洗管路。用吐將反應器加壓至50psi，並且在20士 10°c下混合反應器中的內含物。繼續反應， 將氫氣壓維持在50psi，直至觀察不到進一步的氫氣吸收。過濾反應溶液以除去催化劑並且用thf(500ml)洗滌催化劑濾餅。將洗滌液加入至反應濾液中。真空濃縮溶液，獲得標題化合物(337g,86% )，為油狀物。1h nmr(400mhz,dms0-d6) δ 8. 1-8. 3 (s，1h)，7. 1-7. 3(d，2h)， 6. 8-6. 9 (d, 2h)，4. 4-4. 6 (bs, 1h)，3. 7-3. 8 (s, 2h)，3. 6-3. 7 (s, 3h)，1. 3-1. 5 (s,9h)。c. (4-甲氧基苄基)胼二鹽酸鹽在4n鹽酸的二烷溶液q000ml，8. oomol hcl)中歷經1小時緩慢加入溶於最小量二巧悉烷中的2- -甲氧基苄基)胼甲酸叔丁酯(3mg，1. 09mol)。逐漸形成沉澱。將溶液在20士5°c下攪拌16小時。通過過濾收集固體。將固體在庚烷qoooml)中勻漿，並且通過過濾分離固體。應用氮氣壓乾燥固體，得到標題化合物042. 3g，l. osmol，98% )。 1h nmr (400mhz, dms0_d6) δ 8. 2_9· 0 (bs，5η)，7· 3_7· 4 (d，2η)，6· 8_7· 0 (d，2η)，4· 0 (s，2η)， 3. 7(s，3h)。d. 1-(4-甲氧基苄基)-5-甲基-ih-吡唑-3-胺和1- -甲氧基苄基)_3_甲基-ih-吡唑-5-胺在22°c下，將叔丁醇鉀(191. 89g，1. 71mol)和thfqoooml)混合。混合直至獲得均勻溶液。冷卻至5°c。歷經45分鐘，在叔丁醇鉀溶液中加入乙腈(84. 25g,2. 05mol)和乙酸甲脂(u6.7g，1.71mol)的預混合溶液，將溫度維持在小於10°c。加入完成後，將反應溫至 20士5°c並且攪拌約2小時。歷經約5分鐘，在反應中分批加入甲氧基苄基)胼二鹽酸鹽o50g)，隨後以維持溫度 10。分層並且收集有機相。用dcmql)洗滌水相。合併有機相併且經無水硫酸鈉乾燥，並且真空濃縮溶液至固體，得到165g粗品。將粗品乙酸異丙酯(660ml)中加熱至回流以溶解儘可能多的固體。 冷卻至33°c並且歷經1小時緩慢加入己烷(600ml)。冷卻至10°c並且維持溫度在10°c下 10分鐘。通過過濾分離固體，用己烷oooml)洗滌，並且應用氮氣壓乾燥，得到標題化合物的混合物(91. 5g，0. 4mol,47% )。1h nmr(400mhz, dms0_d6) δ 7. 2_7· 3 (d，2h)，6· 7-6. 9 (d, 2h)，5. 1 (bs, 2h) ,5. 0(s, 1h) ,4. 9(s, 2h)，3. 6-3. 8 (s, 3h)，1· 9 (s，3h)。注意這些中間體可以通過色譜法分離，但是在這種情況中，它們作為混合物分離，並且可以用於下面的最後順序，其中涉及除去苄基保護基，產生相同的產物。製備22-氯-1- (4-氯-2-氟苯基)乙酮在il圓底燒瓶中，將4，-氯-2，-氟苯乙酮(40g，231.8mmol)、庚烷(120ml)和甲醇(16ml)混合。冷卻至0°c並且在氮氣下放置。將磺醯氯ol. 5ml, 1. 15當量)溶於庚烷(120ml)中，並且裝入加料漏鬥中。歷經60分鐘滴加至反應中。在0°c下攪拌2.5小時；在這段時間內形成白色沉澱。在加料漏鬥中裝入im碳酸氫鈉gooml),然後滴加至反應中。所有排氣停止後，過濾二相懸浮液，收集標題化合物(38. 18g，80%)，為白色針狀物。1hnmr(dmso-ci6) δ 5. 00(d,2h, j = 2. 5hz)，7· 43 (m，1h)，7· 63 (m，1h)，7· 89 (t，1h，j = 8. 4hz)。
製備3(E)-N，-(6-氯噠嗪-3-基)-N，N-二甲基乙脒(acetimidamide)在2L圓底燒瓶中，將3-氯-6-噠嗪胺2g，333. 5mmol)、甲苯(500mL)禾口 N， N-二甲基乙醯胺二甲基縮醛(67. 8mL，1.25當量)混合。裝上回流冷凝器，然後加熱至回流達2小時。冷卻至RT。真空濃縮。用己烷研磨粗品，並且過濾分離標題化合物(60. 4g， 91% ),為淡褐色固體。MS = 199. 0 (M+1)。製備4(4-氯-2-氟苯基)(6-氯-2-甲基咪唑並[l，2_b]噠嗪_3_基)甲酮在圓底燒瓶中，將(E)-N，-(6-氯噠嗪-3-基)-N，N-二甲基乙脒(36. 61g， 184. 3mmol)、2-氯-1-(4-氯-2-氟苯基)乙酮(38. 15g，1當量)和二甲基甲醯胺(150mL) 混合。在氮氣下放置，然後在120°C下加熱4小時。冷卻至RT並且攪拌過夜。用EA(IL)和水(500mL)稀釋。用水萃取有機物三次，隨後用飽和氯化鈉水溶液萃取。將有機物經無水硫酸鎂乾燥。過濾並且真空濃縮。通過矽膠填料純化(己烷一4 1己烷EA —3 1 己烷EA—2 1己烷EA—1 1己烷EA)，並且分離標題化合物(33. 8g，57% )，為淡綠色固體。LCMS (4 分鐘=324. 0,326. 0，M+1)。製備52-((6-氯U4-氯-2-氟苯甲醯基)-2-甲基咪唑並[l，2_b]噠嗪-8-基)甲基)異二氫吲哚-1，3-二酮在裝有加料漏鬥的圓底燒瓶中，將(4-氯-2-氟苯基)(6-氯-2-甲基咪唑並[1， 2-b]噠嗪-3-基)甲酮(5.6g，17. 3mmol)、N-鄰苯二甲醯基甘氨酸(6. 0g，1. 7當量)、乙腈 (60mL)、水(15mL)、三氟乙酸(0. 26mL，0. 2當量)和硝酸銀(294mg，0. 1當量)混合，並且在氮氣下放置。加熱至70°C，並且在該溫度下維持15分鐘。將過硫酸銨(7. lg，1.8當量) 溶於水(15mL)中，並且裝入加料漏鬥中。歷經約20分鐘滴加至反應燒瓶中。在70°C下加熱反應1小時。在這段時間內形成沉澱；通過布氏漏鬥過濾分離標題化合物粗品(7.3g， 87%)，為類白色固體。LCMS 0 分鐘)=483. 0、485· 0，M+1)。製備6(8-(氨基甲基)-6-氯-2-甲基咪唑並[l，2_b]噠嗪_3_基)(4_氯_2_氟苯基) 甲酮在圓底燒瓶中，將2-((6-氯-3-氯-2-氟苯甲醯基)-2-甲基咪唑並[l，2_b] 噠嗪-8-基)甲基)異二氫吲哚-1，3-二酮(7. 30g，15. lmmol)、乙醇 QOOmL)和胼(1. 45mL， 3當量)混合，並且在氮氣下放置。在RT下攪拌2天。在50°C下加熱2小時，然後真空濃縮反應。用EA稀釋。用IN HCl (水性)洗滌有機物，以將產物引入水層。用IN NaOH(水性)將水層調至鹼性，並且用EA萃取。用飽和氯化鈉水溶液洗滌EA層，並且經無水硫酸鎂乾燥。過濾並且真空濃縮，得到標題化合物粗品(1. 2g,23% )，為淡綠色固體。MS = 355. 0、 353. 0(M+1)。製備7(4-氯-2-氟苯基)(6-氯-2-甲基-8-(嗎啉代甲基)咪唑並[l，2_b]噠嗪_3_基) 甲酮在20mL微波反應器中，將(8_(氨基甲基)_6_氯_2_甲基咪唑並[l，2_b]噠嗪-3-基)(4-氯-2-氟苯基)甲酮(1. 15g，3. 3mmol)、水(12mL)、碳酸鉀(495mg, 1. 1 當量)和2-溴乙醚(0. 47mL, 1. 1當量)混合。用螺旋蓋密封，然後在微波反應器中在120°C 下加熱20分鐘。冷卻至RT並且在EA和水之間分配。用飽和氯化鈉水溶液洗滌EA層，並且經無水硫酸鎂乾燥。過濾並且真空濃縮。在矽膠上純化G 1己烷EA —2 1己烷EA — 1 1己烷EA)，得到標題化合物(0.43g，31% )，為淡黃色泡沫狀物。LCMS (4 分鐘)=423. 0,425. 0，M+1。製備8(4-氯-2-氟苯基)(6-氯-2-甲基-8-(嗎啉代甲基)咪唑並[l，2_b]噠嗪_3_基) 甲醇在圓底燒瓶中，將(4-氯-2-氟苯基)(6-氯-2-甲基-8-(嗎啉代甲基)咪唑並 [1,2-b]噠嗪-3-基)甲酮(0. 43g, 1. Ommol)和甲醇(15mL)混合。在氮氣下放置並且冷卻至0°C。一次性加入硼氫化鈉(58mg，1.5當量)。在該溫度下攪拌5分鐘，然後除去冷卻浴並且溫至RT。15分鐘後，用水猝滅反應，然後用EA萃取。用水洗滌有機物，隨後用飽和氯化鈉水溶液洗滌。經無水硫酸鎂乾燥有機物。過濾並且真空濃縮，得到標題化合物(0.4g， 93%)。LCMS0 分鐘)=425. 0、427· 0，M+1。製備94-((6-氯-3-(4-氯-2-氟苄基)-2-甲基咪唑並[l，2_b]噠嗪-8-基)甲基)嗎啉在圓底燒瓶中，將(4-氯-2-氟苯基)(6-氯-2-甲基-8-(嗎啉代甲基)咪唑並 [1,2-b]噠嗪-3-基)甲醇(0.4g，0.94mmol)、l，2-二氯乙烷(25mL)、三乙基矽燒(0. 45mL, 3當量)和三氟乙酸(0.57mL，8當量)混合，並且在氮氣下放置。在70°C下加熱過夜。真空濃縮反應。裝入VarianMegaElut 10克SCX離子交換柱中(用甲醇預洗滌)。用甲醇洗脫以除去非鹼性雜質。用2M在甲醇中的氨洗脫。真空濃縮，得到標題化合物(0.36g， 94%)。LCMS0 分鐘)=409. 0、411· 0，M+1。製備103- (4-氯-2-氟苄基)-N- (1- (4_甲氧基苄基)-5-甲基-IH-吡唑_3_基)_2_甲基-8-(嗎啉代甲基)咪唑並[l，2-b]噠嗪-6-胺在圓底燒瓶中，將4-((6-氯-3-(4-氯-2-氟苄基)-2-甲基咪唑並[l，2_b]噠嗪-8-基)甲基)嗎啉(0.36g，0.88mmol)、U4-甲氧基苄基)-5-甲基-IH-吡唑-3-胺 (0. 248g，1.3當量)、碳酸鉀(0. 30g，2. 5當量)、4，5_雙(二苯基膦基)-9，9-二甲基咕噸 (0. 076g，0. 15當量)、水(2mL)和1，4_ 二碼燒(20mL)混合。用氮氣徹底脫氣，然後加入雙 (二亞苄基丙酮)鈀(0. 1(^，0.2當量)。裝上回流冷凝器並且在氮氣下放置。在回流下加熱反應過夜。將反應通過硅藻土填料。用EA洗滌填料。轉移至分液漏鬥中並且用水洗滌。 用氯化鈉水溶液洗滌有機層，並且經無水硫酸鎂乾燥。過濾並且真空濃縮。在矽膠上純化 (EA — 10%甲醇EA)，得到標題化合物(0. 447g，86% ),為淡黃色固體。LCMS (4分鐘)= 590. 2,591. 2，M+1。實施例權利要求
1.3- (4-氯-2-氟苄基)-2"甲基-N- (5-甲基-IH-吡唑-3-基)_8_ (嗎啉代甲基)咪唑並[l，2-b]噠嗪-6-胺或其可藥用鹽。
2.權利要求1的化合物，其是3-(4-氯-2-氟苄基)-2-甲基-N-(5-甲基-IH-吡唑-3-基)-8-(嗎啉代甲基)咪唑並[l，2-b]噠嗪-6-胺。
3.權利要求1的化合物，其是3-(4-氯-2-氟苄基)-2-甲基-N-(5-甲基-IH-吡唑-3-基)-8-(嗎啉代甲基)咪唑並[l，2-b]噠嗪-6-胺鹽酸鹽。
4.治療哺乳動物中慢性骨髓增生性障礙的方法，所述的慢性骨髓增生性障礙選自真性紅細胞增多症、原發性血小板增多和伴有骨髓外化生的骨髓硬化，該方法包括給需要該治療的哺乳動物施用有效量的3-(4-氯-2-氟苄基)-2-甲基-N-(5-甲基-IH-吡唑-3-基)-8-(嗎啉代甲基)咪唑並[l，2-b]噠嗪-6-胺或其可藥用鹽。
5.治療患者中成膠質細胞瘤、乳腺癌、多發性骨髓瘤、前列腺癌和白血病例如非典型的慢性粒細胞白血病、原發和繼發的急性粒細胞白血病、T-系和B-系急性淋巴細胞白血病、 脊髓發育不良症候群和骨髓增生性障礙的方法，該方法包括給需要該治療的患者施用有效量的3-(4-氯-2-氟苄基)-2-甲基-N-(5-甲基-IH-吡唑-3-基)-8-(嗎啉代甲基)咪唑並[l，2-b]噠嗪-6-胺或其可藥用鹽。
6.藥物組合物，該藥物組合物包含權利要求1、2或3的化合物或其可藥用鹽以及可藥用載體、稀釋劑或賦形劑。
7.權利要求1、2或3的化合物或其可藥用鹽，其用作藥物。
8.權利要求1、2或3的化合物或其可藥用鹽，其用於治療成膠質細胞瘤、乳腺癌、多發性骨髓瘤、前列腺癌和白血病、T-系和B-系急性淋巴細胞白血病、脊髓發育不良症候群和骨髓增生性障礙。
9.權利要求8的化合物或其可藥用鹽，其用於治療慢性骨髓增生性障礙。
10.治療需要的患者中與突變的JAK2的活性相關的病症的方法，其包括給所述的患者施用權利要求1、2或3的化合物。
全文摘要
本發明提供了氨基吡唑化合物，其用於治療慢性骨髓增生性障礙和多種癌症，例如成膠質細胞瘤、乳腺癌、多發性骨髓瘤、前列腺癌和白血病。
文檔編號A61P25/00GK102232075SQ200980148116
公開日2011年11月2日 申請日期2009年12月8日 優先權日2008年12月16日
發明者J·R·克萊頓, L·馬, T·P·伯克霍德爾 申請人:伊萊利利公司