一種治療心衰的藥物組合物及其製備方法和用途的製作方法

2023-05-12 19:56:16

專利名稱：：一種治療心衰的藥物組合物及其製備方法和用途的製作方法
技術領域：
：本發明涉及一種治療心衰的藥物組合物，屬藥物領域。
背景技術：
：附子配伍乾薑為中醫藥古今臨床應用頻率很高的對藥，附子乾薑湯，首見於《傷寒論'太陽病篇》。附子辛溫大熱，《本草經讀》曰"味辛氣溫，火性迅發，溫裡回陽較強，可使心陽振奮。無所不到，故為回陽救逆第一品藥。"乾薑辛溫，《傷寒藥性賦》謂其"能去沉寒"。正因為附子走而不守，乾薑守而不走，兩者互補性極強，古人又有"附子無姜不熱"之說。附子、乾薑均能入心經回心陽，心陽得救則神不外越，故有回陽勿忘治心之說。近年來，現代藥理研究發現以附子、乾薑配伍為主的四逆湯具有明顯的強心、抗休克、改善微循環等作用，說明亡陽證與心力衰竭、休克、微循環障礙等有關。臨床上，附子配伍乾薑也常與其它藥加減應用治療心衰、心肌梗死、休克、竇性心動過緩、急性肺心病等。在現代臨床中，附子常用於救治急性心肌梗塞所致的休克、低血壓狀態、冠心病及風心病等，均有很好療效，這均與其具有增強心肌收縮力、抗心律失常等心血管方面的作用有關。楊帆，林樹新，張福琴，等.四川江油附子提取物抗失血性休克的作用研究[J].第四軍醫大學學報，1996，17(2):116，表明附子水溶性部分分離獲得的尿嘧啶類化合物具有抗失血性休克的作用。其主要作用機理是增強心肌收縮力，提高心輸出量與平均動脈血壓，並可提高休克後大鼠存活率。張梅，張藝，陳海紅，等.附子抗心律失常有效組分研究[J].時珍國醫國藥，2000，11(3):193-194，對附子抗心律失常有效組分的研究結果表明，附子正丁醇提取物、乙醇提取物及水提物均對氯仿所致小鼠室顫有預防作用，其中尤以水提物作用最為明顯。乾薑為溫裡之藥，具有溫經止痛、溫通血脈、回陽救逆、溫中散寒、溫肺止咳等功效，現代藥理研究其有鎮痛消炎、抗變態反應、抗栓抗凝、調節血液循環系統、抗缺氧、鎮吐、促消化、止瀉、保肝等作用。王夢，錢紅美，蘇簡單.乾薑乙醇提取物解熱鎮痛及體外抑菌作用研究.中藥新藥與臨床藥理，2001，14(5):299-301，等採用小鼠耳殼腫脹法，傷寒、副傷寒甲乙三聯菌苗導致家免發熱反應以及小鼠扭體法觀察乾薑醇提物的抗炎、解熱、鎮痛作用。朱林平。附子毒性研究概況.江西中醫藥，2004，35(6):53-55，從附子毒性的相關因素進行了總結，認為附子毒性與品種及採摘季節、炮製、劑量、煎煮方法與時間、配伍不當、蓄積性中毒等有關。附子的毒效關係非常密切。附子有明顯的常壓耐缺氧作用，附子除去毒性生物鹼後，常壓耐缺氧作用減弱，甚至消失；附子也有較強的鎮痛作用，附子除去毒性成分後，其鎮痛作用明顯減弱。附子所含烏頭鹼對心臟的毒性最為明顯，其機理一是興奮迷走神經，二是直接對心臟的毒性作用，引起心律失常。藥理試驗證實附子中所含的生物鹼毒性較大，但毒性成分遇熱能分解，較長時間的浸泡和煎煮能將其水解成毒性較小的苯甲醯烏頭原鹼(Benzoylaconine)類生物鹼，進而分解為毒性更小的烏頭原鹼(Aconine)類生物鹼(李榮宗.附子、川烏、草烏的合理炮製經驗[J].海峽藥學，2001，13(2):49)，從而降低其毒性。姜附相配，除可增強回陽救逆的功效外，傳統認為還能降低附子的毒性。歷代有關姜附配伍用於回陽救逆的方劑較多。實驗研究表明，附子具有明顯的心血管藥理作用，可強心、降壓、擴張血管、抗休克；乾薑煎劑則無明顯的強心作用。二者配伍，乾薑可使附子強心作用明顯增強(許信國.經方附子應用的探討.北京中醫雜誌，1986,(3):33)。上述報導均是含有附子、乾薑的大處方製劑，沒有僅僅使用附子、乾薑配伍的相關報導，且由於附子、乾薑中的藥效成分複雜，發揮藥效的成分的部位均不確定，目前也沒有報導將其中有效部分配伍使用，達到減毒增效的相關報導。
發明內容本發明的技術方案是提供了一種治療心衰的藥物組合物，本發明的另一技術方案是提供了該藥物組合物的製備方法和用途。本發明提供了一種治療心衰的藥物組合物，它是由下述重量配比的原料製備而成的藥劑附子總生物鹼1-5份、乾薑有效部位1-2份，所述的乾薑有效部位為乾薑提取物、乾薑揮髮油。其中，乾薑提取物，總姜酚含量以辣椒素計15%w/w;乾薑揮髮油，在矽膠薄層色譜條件下，與乾薑對照藥材揮髮油在相同位置有相同斑點。附子總生物鹼、乾薑提取物、乾薑揮髮油的提取製備方法可以按教科書或文獻公開的方法提取製備，如肖崇厚.中藥化學.上海科學技術出版社.1997;邱琴，張國英，劉辛欣,等.超臨界2流體萃取法與水蒸氣蒸餾法提取乾薑片揮髮油化學成分的比較.上海中醫藥雜誌.2005:39(3);王夢，錢紅美，蘇簡單.乾薑乙醇提取物解熱鎮痛及體外抑菌作用研究，2001;14(5):299;陳鹽生，林玉蓮.乾薑與炮姜揮髮油成分比較.南京中醫藥大學學報，1999;15(6):378;餘成浩.烏頭類有毒中藥常用配伍藥對的物質基礎研究.成都中醫藥大學2006級博士學位論文.指導教師，彭成。其中，所述的附子總生物鹼中，總生物鹼含量以烏頭鹼計為100150mg/ml。進一步優選地，所述的附子總生物鹼中，總生物鹼含量以烏頭鹼計為127.6mg/ml。進一歩優選地，它是由下述重量配比的原料製備而成的藥劑附子總生物鹼1-2份、乾薑提取物或乾薑揮髮油1份。其中，它是由下述重量配比的原料製備而成的藥劑附子總生物鹼2份、乾薑提取物1份。其中，它是由下述重量配比的原料製備而成的藥劑附子總生物鹼1份、乾薑揮髮油1份。其中，所述的藥劑是片劑、顆粒劑、膠囊劑、丸劑或口服液。本發明還提供了一種製備治療心衰的藥物組合物的方法，包括如下步驟a、附子總生物鹼1-5份、乾薑有效部位l-2份，所述的乾薑有效部位為乾薑提取物、乾薑揮髮油；b、混合，加入藥學上可接受的輔料或輔助性成分製備成藥學上常用的製劑。本發明還提供了該藥物組合物在製備治療心衰的藥物中的用途。附子總生物鹼既是附子的主要毒性組分，又是附子發揮回陽救逆功效的主要有效組分，其毒效關係異常密切。附子總生物鹼與乾薑提取物2:1配伍、附子總生物鹼與乾薑揮髮油1:l配伍時，具有減毒增效作用，藥效明確，毒性低，為臨床提供了一種新的選擇。具體實施例方式實施例1本發明藥物的製備方法取原料附子100g、乾薑100g，加至10倍量水煎煮，煮沸後煎6h傾出上清液，過濾，然後濃縮至相當於每毫升含lg附子，加入澱粉制粒，加入硬脂酸鎂，壓片，得片劑。實施例2本發明藥物的製備取原料附子500g、乾薑200g，按實施例l的方法提取，制粒，裝膠囊，得膠囊劑。實施例3本發明藥物的製備取原料附子100g、乾薑200g，按常規藥材提取方法或實施例1的方法提取，制粒，裝膠囊，得膠囊劑。實施例4本發明藥物的製備取市售附子總生物鹼500g、乾薑提取物100g，加入澱粉、糊精，制粒，裝膠囊，得膠囊劑。實施例5本發明藥物的製備取市售附子總生物鹼100g、乾薑提取物100g，加入澱粉、糊精，制粒，壓片，得片劑。實施例6本發明藥物的製備取市售附子總生物鹼500g，乾薑揮髮油200g，加入澱粉、糊精，制粒，裝膠囊，得膠囊劑。實施例7本發明藥物的製備取市售附子總生物鹼300g，乾薑揮髮油200g，加入澱粉、糊精，制粒，裝膠囊，得膠囊劑。實施例8本發明藥物的製備取市售附子總生物鹼100g，乾薑揮髮油100g，加入澱粉、糊精，制粒，壓片，得片劑。以下通過具體藥效學試驗證明本發明的有益效果。試驗例1本發明藥物中原生藥材附子乾薑配伍試驗一、左心室內壓最大上升速率的變化試驗表l心衰大鼠左心室內壓最大上升速率的變化C1士SD)tableseeoriginaldocumentpage6tableseeoriginaldocumentpage7注與空白對照組比較^P〈0.001;與模型對照組比較Ap〈0.05，AAP〈0.01，P〈0.0013.5附子千姜配伍左心室內壓最大下降速率的變化表2心衰大鼠左心室內壓最大下降速率的變化(X±SD)tableseeoriginaldocumentpage7注與空白對照組比較，PO.001;與模型對照組比較AP0.05,"P0.01,PO.0013.6附子乾薑配伍左心室內壓的變化表3心衰大鼠左心室—內壓的變化(X±SD)tableseeoriginaldocumentpage7tableseeoriginaldocumentpage8注與空白對照組比較，PO.001;與模型對照組比較ApO.05,"PO.01PO,OOl3.7附子乾薑配伍左心室舒張末期壓的變化表4心衰大鼠左心室舒張末期壓的變化(5士SD)tableseeoriginaldocumentpage8注與空白對照組比較^P〈0.001;與模型對照組比較AP0.05,"P〈0.013.8附子乾薑配伍心率的變化—表5心衰大鼠心率的變化(X±SD)tableseeoriginaldocumentpage9注與空白對照組比較，PO.001;與模型對照組比較AP0.05"P0.014.實驗結論SD大鼠於股靜脈注射鹽酸普羅帕酮注射液(16.5mg/kg)造模後，於十二指腸給藥附子和乾薑各有效組分附子乾薑各單組分，動物左心室內壓最大上升速率(dp/dtmax)、左心室內壓最大下降速率(-dp/dtmax)及心率(服)均有不同程度的升高，其中附子總鹼於十二指腸給藥藥效最好，其次是附子多糖，再次是附子水鹼。乾薑提取物和乾薑揮髮油對於SD大鼠於股靜脈注射鹽酸普羅帕酮注射液(16.5mg/kg)造模後藥效不甚顯著。上述試驗表明，附子配伍乾薑煎劑對大鼠左室內壓最大上升、下降速率均有不同程度改善，其中1:1，5:2組與急性心衰模型組比較有顯著性差異，提示附子配伍千姜可能通過增強心肌收縮力，從而起到改善心功能，增強其回陽救逆的作用；1:1，2:1，5:2組與急性心衰模型組比較，還有不同程度降低腎素、血管緊張素、醛固酮、心鈉素、內皮素的作用。試驗例2本發明附子總生物鹼與乾薑有效部位配伍減毒作用的實驗1、附子、乾薑減毒作用組分配伍的選擇從上述附子、乾薑單組分急性毒性研究結果表明附子的毒性組分主要為附子總生物鹼，附子水溶性生物鹼、附子多糖、乾薑揮髮油、乾薑提取物均未見明顯毒性。因此，在進行減毒作用的組分配伍選擇時，主要選擇毒性較大的附子總生物鹼，分別與乾薑揮髮油、乾薑提取物配伍進行減毒研究。在減毒作用組分配伍比例的選擇上，採用附子總生物鹼與乾薑揮髮油、乾薑提取物配伍l:1、2:1、1:2、5:2四個比例進行組分配伍的減毒研究，確定附子、乾薑組分配伍與附子、乾薑飲片配伍減毒作用之間的關係。2、實驗材料2.1藥物附子總生物鹼，每ml相當於原生藥lkg，總生物鹼含量為127.6mg/ml(以烏頭鹼計)；乾薑提取物，每ml相當於原生藥2g;乾薑揮髮油，每ml相當於原生藥40g。均由成都中醫藥大學中藥化學教研室提供。實驗時所有受試藥物均配成每ml相當於原生藥lg備用，然後在實驗前半小時以附子總生物鹼半數致死量與乾薑提取物、乾薑揮髮油的不同配伍比例配成1:1、1:2、2:1、5:2共8個比例的組分配伍備用。2.2動物昆明種小鼠，雌雄各半，體重1822g，由成都中醫藥大學實驗動物研究中心提供，合格證號川實動管04-11。檢疫後備用。2.3儀器PA2003電子天平，上海天平儀器廠生產。3、實驗方法取昆明種小鼠72隻，雌雄各半，隨機分為空白組(N=8)、附子總鹼與乾薑提取物配伍l:l組(N=8)、h2組(N=8)、2:l組(N=8)、5:2組(N=8)，附子總鹼與乾薑揮髮油配伍1:l組(N=8)、1:2組(N=8)、2:1組(N=8)、5:2組(N=8)。禁食不禁水12hr，附子總鹼乾薑提取物組1:1(0.25ml總鹼+0.25ml乾薑提取物)；附子總鹼乾薑提取物組2:1(0.5ml總鹼+0.25ml乾薑提取物)；附子總鹼乾薑提取物組1:2(0.25ml總鹼+0.50ml乾薑提取物)；附子總鹼千姜提取物組5:2(0.5ml總鹼+0.20ml乾薑提取物)；附子總鹼乾薑揮髮油組l:1(0.25ml總鹼+0.25ml乾薑揮髮油)；附子總鹼乾薑揮髮油組2:1;(0.50ml總鹼+0.25ml乾薑揮髮油)；附子總鹼乾薑揮髮油組l:2(0.25ml總鹼+0.50ml乾薑揮髮油)；附子總鹼乾薑揮髮油組5:2(0.50ml總鹼+0.20ml乾薑揮髮油)。所有受試藥物組均以每次最大容積0.40ml/10g.B.W的劑量灌胃，3次/d，連續14d。觀察記錄動物有無死亡及毒性反應4、實驗結果存活動物的體重逐漸增長，小鼠發育正常、被毛濃密有光澤且緊貼身體、呼吸正常、精祌萎靡、食慾欠佳，無異常分泌物，肛周潔淨，自發活動減少。昆明種小鼠在第一次給藥後，附子總鹼配伍乾薑提取物1:1(0.25ml總鹼+0.251111乾薑提取物)，1:2(0.25ml總鹼+0.5ml乾薑提取物)中，分別有2隻及1隻動物死亡；在第二次給藥後，附子總鹼配伍乾薑提取物1:1(0.25ml總鹼+0.25ml乾薑提取物，即半數致死量)，1:2(0.25ml總鹼+0.5ml乾薑提取物)中，分別又有2隻及1隻動物死亡；在第三次給藥後，附子總鹼配伍乾薑揮髮油5:2(0.50ml總鹼+0.20ml乾薑揮髮油)比例有1隻動物死亡。肉眼屍解動物普遍見腸腔充血，肉眼心、腦、肝腎及其他組織未見明顯異常。其他比例組分配伍未發現動物死亡。結束後解剖存活小鼠，各主要臟器均未見異常。各組體重變化詳見表6。表6:附子乾薑組分配伍對小鼠體重和存活的影響(I士SD)tableseeoriginaldocumentpage11上述配伍減毒試驗說明，在附子總鹼+乾薑提取物在2:l、1-5:2時，均能達到減輕附子總鹼毒性的作用；附子總鹼與乾薑揮髮油在1:1、(1-5):(1-2)配比時，均能達到減輕附子總鹼毒性的作用。試驗例3本發明附子總生物鹼與乾薑有效部位增效作用組分配伍的選擇附子對急性心衰陽虛大鼠發揮回陽救逆作用的有效組分主要為附子總生物鹼，附子水溶性生物鹼、附子多糖、乾薑揮髮油、乾薑提取物對急性心衰陽虛大鼠的回陽救逆作用不明顯。在進行增效(回陽救逆)作用的組分配伍選擇時，主要選擇回陽救逆作用明顯的附子總生物鹼，分別與乾薑揮髮油、乾薑提取物配伍進行增效(回陽救逆)研究。採用附子總生物鹼與乾薑揮髮油、乾薑提取物配伍l:1、2:1、1:2、5:2四個比例進行組分配伍的增效(回陽救逆)作用研究，探討附子、乾薑組分配伍與附子、乾薑飲片配伍增效作用之間的關係。1、實驗材料Ll藥物受試藥物附子總生物鹼，每ml相當於原生藥lkg，總生物鹼含量為127.6mg/ml(以烏頭鹼計)；乾薑提取物，每ml相當於原生藥2g;乾薑揮髮油，每ml相當於原生藥40g。均由成都中醫藥大學中藥化學教研室提供。實驗時所有受試藥物均配成每ml相當於原生藥lg備用，然後在實驗前半小時以附子總生物鹼相當於原生藥10倍量(2.5ml/kg)，分別與乾薑提取物、乾薑揮髮油配成l:1、1:2、2:1、5:2共8個比例的組分配伍備用。陽性對照藥物參附註射液雅安三九藥業有限公司生產，批號國藥準字Z51020664,規格10ml/支。造模藥物鹽酸普羅帕酮注射液廣州白雲山明興製藥廠生產，批號030501規格35mg/10ml。1.2實驗動物健康SD大鼠，雌雄均有，體重250士20g，動物生產許可證號04-11。均由成都中醫藥大學實驗動物研究中心提供，檢疫後備用。1.3實驗儀器光電分析天平:上海第二天平儀器廠提供BL-420四道生理記錄儀成都泰盟科技有限公司提供；LDR4-8.4型低速冷凍離心機北京醫用離心機廠；針狀電極；壓力換能器；塑料三通開關；心室插管；動脈夾；止血鉗；眼科剪；鑷子；手術刀；注射器；灌胃器；電子天平；秒表；濾紙。1.4實驗試劑75%乙醇成都天華科技服務股份有限公司生產，GB/T679-2002,生產批號20060017，規格250ml/瓶。肝素鈉天津化學製藥廠生產，批准文號津衛藥準字第001562號，規格6250u/ml，每支2ml。2、實驗方法附子、乾薑組分配伍對急性心衰大鼠血流動力學的實驗研究取健康SD大鼠66隻，雌雄各半，體重250士20g，隨機分成空白對照組(N=6)、模型對照組(N=6)、參附陽性對照組(N=6)、附子總生物鹼與乾薑提取物l:l組(N=6)、附子總生物鹼與乾薑提取物1:2組(N=6)、附子總生物鹼與乾薑提取物2:1組(N:::6)、附子總生物鹼與乾薑提取物5:2組(^6)、附子總鹼與乾薑揮髮油h1組(N=6)、附子總鹼與乾薑揮髮油1:2組(N二6)、附子總鹼與乾薑揮髮油2:1組(N=6)、附子總鹼與乾薑揮髮油5:2組(N=6)。急性心衰造模方法同前，給藥方法同附子、乾薑單組分回陽救逆功效的實驗研究。附子總生物鹼與乾薑提取物1:1組按0.5g/100g給予、附子總生物鹼與乾薑提取物l:2組按0.75g/100g給予、附子總生物鹼與乾薑提取物2:l組按0.375g/100g給予、附子總生物鹼與乾薑提取物5:2組按0.35g/100g給予；附子總鹼與乾薑揮髮油l:1組按0.5g/100g給予、附子總鹼與乾薑揮髮油l:2組按0.75g/100g給予、附子總鹼與乾薑揮髮油2:1組按0.375g/100g給予、附子總鹼與乾薑揮髮油5:2組按0.35g/100g給予。(受試藥物組給藥劑量相當於人用生藥量的10倍)於十二指腸給藥。陽性藥物組經股靜脈按6.67ml/kg給予參附註射液(相當於人用量10倍)。模型藥物組經十二指腸給予等量蒸餾水。分別觀察給藥後5min、10min、15min、20min、25min、30min、35min、40min、50min、60min藥物對左心室內壓最大上升速率(dp/dtmax)、左心室內壓最大下降速率(-dp/d加ax)及心率(HR)的影響。參數設定心電增益G500倍，時間常數T0.1S,濾波F300Hz，掃描速度200ms/div，左心室內壓增益G50倍，時間常數TDC，濾波F30Hz，掃描速度200ms/div，左心室微分內壓增益G100倍，時間常數TDC,濾波F10Hz，掃描速度200ms/div。實驗數據資料用SPSS12.0統計軟體包進行統計學處理。3、實驗結果乾姜組分配伍對急性心衰大鼠血流動力學的影響(1)對急性心衰陽虛大鼠心率的影響分別給予參附註射液及附子總鹼與乾薑提取物配伍、附子總鹼與乾薑揮髮油配伍l:1、2:1、1:2、5:2後，各組在各個時間段對急性心力衰竭大鼠心率均有一定程度的提高。除附子總生物鹼與乾薑提取物配伍h2組各時間段與模型組比較無統計學差異外，其餘各組在不同時間段與模型組比較均有統計學差異。其中，附子總鹼與乾薑提取物配伍2:l組於給藥後25分鐘、30分鐘、35分鐘，附子總鹼與乾薑提取物配伍5:2組於給藥後15分鐘、25分鐘、30分鐘、35分鐘、40分鐘，附子總鹼與乾薑揮髮油配伍1:l組於給藥後15分鐘、25分鐘、30分鐘，附子總鹼與乾薑揮髮油配伍2:1組於給藥後IO分鐘、15分鐘、25分鐘、30分鐘、35分鐘、40分鐘，急性心力衰竭大鼠心率與附子總鹼組比較有顯著性差異。結果詳見表7。表7對急性心衰陽虛大鼠心率的影響(X±SD)tableseeoriginaldocumentpage14注與空白組比較，<0.05，"P<0.01，"印<0.001;與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001;與附子總鹼組比較，<0.05，"P〈0.01，"<.001。(2)對左心室內壓最大上升速率的影響分別給予參附註射液及附子總鹼與乾薑提取物配伍、附子總鹼與乾薑揮髮油配伍l:1、2:1、1:2、5:2後，各組在各個時間段對急性心力衰竭大鼠左心室內壓最大上升速率(dp/dtmax)均有明顯升高。除附子總生物鹼與乾薑提取物配伍l:1組於給藥後50分鐘、60分鐘，附子總生物鹼與乾薑提取物配伍l:2組於給藥後40分鐘、50分鐘、60分鐘，附子總生物鹼與乾薑提取物配伍5:2組於給藥後15分鐘、20分鐘25分鐘、30分鐘、35分鐘、40分鐘、50分鐘、60分鐘，附子總鹼與乾薑揮髮油配伍1:l組於給藥後60分鐘，附子總鹼與乾薑揮髮油配伍2:1組於給藥後35分鐘、50分鐘、60分鐘，附子總鹼與乾薑揮髮油配伍1:2組於給藥後10分鐘、30分鐘、35分鐘、40分鐘、50分鐘、60分鐘，附子總鹼與千姜揮髮油配伍5:2組於給藥後30分鐘、40分鐘、50分鐘、60分鐘與模型組比較無統計學差異外，其餘各組在其它不同時間段與模型組比較均有統計學差異。其中，在給藥後25分鐘，附子總鹼與乾薑提取物配伍1:1組、2:1組均能顯著升高急性心力衰竭大鼠左心室內壓最大上升速率(dp/dtmax)，與附子總鹼組比較有顯著性差異。其餘各組在其它不同時間段雖也能升高急性心力衰竭大鼠左心室內壓最大上升速率(dp/dtmax)，但配伍後卻不同程度地降低了附子總生物鹼升高急性心力衰竭大鼠左心室內壓最大上升速率(dp/dtmax)的作用，其中附子總生物鹼與乾薑提取物配伍l:l組於給藥後50分鐘、60分鐘，附子總生物鹼與乾薑提取物配伍l:2組於給藥後40分鐘、50分鐘、60分鐘，附子總生物鹼與乾薑提取物配伍5:2組於給藥後5分鐘、10分鐘、15分鐘、20分鐘、40分鐘、50分鐘、60分鐘，附子總鹼與乾薑揮髮油配伍2:l組於給藥後50分鐘、60分鐘，附子總鹼與乾薑揮髮油配伍1:2組於給藥後5分鐘、10分鐘、40分鐘、50分鐘、60分鐘，附子總鹼與乾薑揮髮油配伍5:2組於給藥後40分鐘、50分鐘、60分鐘，能明顯降低附子總鹼對急性心力衰竭大鼠左心室內壓最大上升速率(dp/dtmax)的作用，與附子總鹼組比較有顯著性差異。結果詳見表8。表8對急性心衰陽虛大鼠dp/dtmax的影響(X士SD)tableseeoriginaldocumentpage16注與空白組比較，AP<0.05，"P<0.01，"^<0.001;與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001;與附子總鹼組比較，"<0.05，"<01，"<.001。(3)、對左心室內壓最大下降速率的影響分別給予參附註射液及附子總鹼與乾薑提取物配伍、附子總鹼與乾薑揮髮油配伍l:1、2:1、1:2、5:2後，各組在各個時間段對急性心力衰竭大鼠左心室內壓最大下降速率(-dp/dtmax)均有明顯升高。除附子總生物鹼與千姜提取物配伍l:l組於給藥後40分鐘、50分鐘、60分鐘，附子總生物鹼與乾薑提取物配伍2:1組、1:2組於給藥後35分鐘、40分鐘、50分鐘、60分鐘，附子總生物鹼與乾薑提取物配伍5:2組於給藥後各個時間段，附子總鹼與乾薑揮髮油配伍1:1組於給藥後60分鐘，附子總鹼與乾薑揮髮油配伍2:1組於給藥後50分鐘、60分鐘，附子總鹼與乾薑揮髮油配伍1:2組於給藥後10分鐘、15分鐘、20分鐘、30分鐘、35分鐘、40分鐘、50分鐘、60分鐘，附子總鹼與乾薑揮髮油配伍5:2組於給藥後40分鐘、50分鐘、60分鐘與模型組比較無統計學差異外，其餘各組在其它不同時間段與模型組比較均有統計學差異。其中，附子總鹼與乾薑提取物配伍2:1組在給藥後25分鐘，附子總鹼與乾薑揮髮油配伍hl組在給藥後5分鐘、25分鐘均能顯著升高急性心力衰竭大鼠左心室內壓最大下降速率(-dp/dtmax)，與附子總鹼組比較有顯著性差異。其餘各組在其它不同時間段雖也能升高急性心力衰竭大鼠左心室內壓最大下降速率(-dp/dtmax)，但配伍後卻不同程度地降低了附子總生物鹼升高急性心力衰竭大鼠左心室內壓最大下降速率(-dp/dtmax)的作用，其中附子總生物鹼與乾薑提取物配伍1:l組於給藥後40分鐘、50分鐘、60分鐘，附子總生物鹼與乾薑提取物配伍2:l組於給藥後40分鐘，附子總生物鹼與乾薑提取物配伍1:2組、5:2組於給藥後40分鐘、50分鐘，附子總鹼與乾薑揮髮油配伍2:l組於給藥後50分鐘，附子總鹼與乾薑揮髮油配伍1:2組於給藥後40分鐘、50分鐘、60分鐘，能明顯降低附子總鹼對急性心力衰竭大鼠左心室內壓最大下降速率(-dp/dtmax)的作用，與附子總鹼組比較有顯著性差異。結果詳見表9。表9對急性心衰陽虛大鼠-dp/dtmax的影響tableseeoriginaldocumentpage17tableseeoriginaldocumentpage18注與空白組比較，<0.05，"P<0.01，▲▲▲<.001;與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01，*"P<0.001;與附子總鹼組比較，"<0.05，01，"<.001。上述試驗證明，附子總生物鹼既是附子的主要毒性組分，又是附子發揮回陽救逆功效的主要有效組分，其毒效關係異常密切。結合試驗例1的結論可知，附子總生物鹼與乾薑提取物2:l配伍、附子總生物鹼與乾薑揮髮油1:l配伍時，具有減毒增效作用；附子總生物鹼與乾薑提取物5:2配伍、附子總生物鹼與乾薑揮髮油l:2、2:1、5:2配伍時，具有減毒減效作用；附子總生物鹼與乾薑提取物l:l配伍時，具有增毒增效作用；附子總生物鹼與乾薑提取物h2配伍時，具有增毒減效作用。針對上述試驗，將本發明藥物進行作用機理研究，試驗如下試驗例4本發明附子總生物鹼與乾薑有效部位配伍增強回陽救逆作用機制的實驗1實驗材料1.1藥物受試藥物附子總生物鹼，每ml相當於原生藥lkg，總生物鹼含量為127.6mg/ml(以烏頭鹼計)；乾薑提取物，每ml相當於原生藥2g;乾薑揮髮油，每ml相當於原生藥40g.均由成都中醫藥大學中藥化學教研室提供。實驗時所有受試藥物均配成每ml相當於原生藥lg備用，然後在實驗前半小時以附子總生物鹼相當於原生藥10倍量(2.5ml/kg)，分別與乾薑提取物、乾薑揮髮油配成l:1、1:2、2:1、5:2共8個比例的組分配伍備用。陽性對照藥物參附註射液雅安三九藥業有限公司生產，批號國藥準字Z51020664,規格10ml/支。造模藥物鹽酸普羅帕酮注射液廣州白雲山明興製藥廠生產，批號030501規格35mg/10ml。1.2實驗動物健康SD大鼠，雌雄均有，體重250士20g，動物生產許可證號04-11。均由成都中醫藥大學實驗動物研究中心提供，檢疫後備用。1.3實驗儀器光電分析天平:上海第二天平儀器廠提供BL-420四道生理記錄儀成都泰盟科技有限公司提供；LDR4-8.4型低速冷凍離心機北京醫用離心機廠針狀電極；壓力換能器；塑料三通開關；心室插管；動脈夾；止血鉗；眼科剪；鑷子；手術刀；注射器；灌胃器；電子天平；秒表；濾紙。1.4實驗試劑75%乙醇成都天華科技服務股份有限公司生產，GB/T679-2002，生產批號20060017，規格250ml/瓶。肝素鈉天津化學製藥廠生產，批准文號津衛藥準字第001562號，規格6250u/ml，每支2ml;血管緊張素I放免分析藥盒由北京北方生物技術研究所提供，批號20060820。血管緊張素II放免分析藥盒由北京北方生物技術研究所提供，批號20060820。醛固酮放免分析藥盒由北京北方生物技術研究所提供，批號20050401。心鈉素放免分析藥盒由北京北方生物技術研究所提供，批號20051201。內皮素放免分析藥盒由北京北方生物技術研究所提供，批號20051201。腫瘤壞死因子放免分析藥盒由北京北方生物技術研究所提供，批號20040601A。2實驗方法2.1附子、乾薑組分配伍對急性心衰大鼠腎素-血管緊張素-醛固酮系統(RAAS)的實驗研究取健康SD大鼠66隻，雌雄各半，體重250士20g，隨機分成空白對照組(N=6)、模型對照組(N=6)、參附陽性對照組(N=6)、附子總生物鹼與乾薑提取物l:l組(N=6)、附子總生物鹼與乾薑提取物1:2組(N二6)、附子總生物鹼與乾薑提取物2:1組(N二6)、附子總生物鹼與乾薑提取物5:2組(^6)、附子總鹼與乾薑揮髮油h1組(N二6)、附子總鹼與乾薑揮髮油1:2組(N二6)、附子總鹼與千姜揮髮油2:1組(N=6)、附子總鹼與乾薑揮髮油5:2組(N二6)。急性心衰造模方法同前，給藥方法、劑量同附子、乾薑組分配伍對急性心衰大鼠的血流動力學實驗研究。各組動物均於給藥後60分鐘於股動脈取血，分離血漿，測定血漿血管緊張素I，血管緊張素II、醛固酮的含量。各組數據以I±SD表示，用SPSS12.0統計軟體包進行組間的t檢驗。(l)血管緊張素I(AI)、血管緊張素II(AII)的測定股動脈取血2ml，立即注入到預冷的酶抑制劑抗凝管中(含EDTA20ul、二巰基丙醇10ul、羥基喹啉硫酸鹽20ul)，將管口封好後上下顛倒數次，混勻後即刻放入冰水浴種l小時，取出後2500r/分，離心7分鐘，分離血眾，-2(TC保存待測。測定前，將樣品置於室溫放置15分鐘，3500r/分，離心15分鐘，吸棄上清夜，測個沉澱管的放射性計數(按分析盒說明檢測)。(2)醛固酮的測定股動脈取血lml，立即注入到預冷的含肝素鈉離心管中(肝素鈉0.1mg/ml血液)，搖勻，在2000r/min離心5分鐘，分離血漿，-2(TC保存待測。測定前，將樣品置於室溫放置15分鐘，3500r/分，離心15分鐘，吸棄上清夜，測個沉澱管的放射性計數(按分析盒說明檢測)。2.2附子、乾薑組分配伍對急性心衰大鼠心鈉素的實驗研究取健康SD大鼠66隻，雌雄各半，體重250土20g，隨機分成空白對照組(N=6)、模型對照組(N=6)、參附陽性對照組(N二6)、附子總生物鹼與乾薑提取物hl組(N=6)、附子總生物鹼與乾薑提取物1:2組(N二6)、附子總生物鹼與乾薑提取物2:1組(N二6)、附子總生物鹼與乾薑提取物5:2組(N二6)、附子總鹼與乾薑揮髮油1:1組(N二6)、附子總鹼與乾薑揮髮油1:2組(N二6)、附子總鹼與乾薑揮髮油2:1組(N=6)、附子總鹼與乾薑揮髮油5:2組(N二6)。急性心衰造模方法同前，給藥方法、劑量同附子、乾薑組分配伍對急性心衰大鼠的血流動力學實驗研究。各組動物均於給l^後60分鐘於股動脈取血，分離血漿，測定血漿心鈉素的含量。各組數據以i士SD表示，用SPSS12.0統計軟體包進行組間的t檢驗。心鈉素(ANP)的測定股動脈取血lml,立即注入到準備好的取血管中(含EDTA20ul、抑肽酶10ul)，將管口封好後上下顛倒數次，混勻後2000r/分，離心5分鐘，分離血漿，-20匸保存待測。測定前，將樣品置於室溫放置15分鐘，3500r/分，離心15分鐘，吸棄上清夜，測個沉澱管的放射性計數(按分析盒說明檢測)。2.3附子、乾薑組分配伍對急性心衰大鼠內皮素的實驗研究取健康SD大鼠66隻，雌雄各半，體重250士20g，隨機分成空白對照組(N二6)、模型對照組(N:6)、參附陽性對照組(N二6)、附子總生物鹼與乾薑提取物l:l組(N二6)、附子總生物鹼與乾薑提取物1:2組(N=6)、附子總生物鹼與乾薑提取物2:1組(N二6)、附子總生物鹼與乾薑提取物5:2組(^6)、附子總鹼與乾薑揮髮油1:1組(N=6)、附子總鹼與乾薑揮髮油1:2組(N=6)、附子總鹼與乾薑揮髮油2:1組(N=6)、附子總鹼與乾薑揮髮油5:2組(N=6)。急性心衰造模方法同前，給藥方法、劑量同附子、乾薑組分配伍對急性心衰大鼠的血流動力學實驗研究。各組動物均於給藥後60分鐘於股動脈取血，分離血漿，測定血漿內皮素的含量。各組數據以f士SD表示，用SPSS12.0統計軟體包進行組間的t檢驗。內皮素(ET)的測定股動脈取血lml，立即注入到準備好的取血管中(含EDTA15ul)，將管口封好後上下顛倒數次，混勻，室溫放置l小時後，3000r/分，離心10分鐘，分離血漿，-2(TC保存待測。測定前，將樣品置於室溫放置15分鐘，3500r/分，離心15分鐘，吸棄上清夜，測個沉澱管的放射性計數(按分析盒說明檢測)。2.4附子、乾薑組分配伍對急性心衰大鼠腫瘤壞死因子的實驗研究取健康SD大鼠66隻，雌雄各半，體重250士20g，隨機分成空白對照組(N=6)、模型對照組(N=6)、參附陽性對照組(N=6)、附子總生物鹼與乾薑提取物l:l組(N=6)、附子總生物鹼與千姜提取物1:2組(N二6)、附子總生物鹼與乾薑提取物2:1組(N二6)、附子總生物鹼與乾薑提取物5:2組(N二6)、附子總鹼與乾薑揮髮油1:1組(N=6)、附子總鹼與乾薑揮髮油1:2組(N=6)、附子總鹼與乾薑揮髮油2:1組(N=6)、附子總鹼與乾薑揮髮油5:2組(N=6)。急性心衰造模方法同前，給藥方法、劑量同附子、乾薑組分配伍對急性心衰大鼠的血流動力學實驗研究。各組動物均於給藥後60—分鐘於股動脈取血，分離血槳，測定血漿腫瘤壞死因子的含量。各組數據以^士SD表示，用SPSS12.0統計軟體包進行組間的t檢驗。腫瘤壞死因子(TNF)的測定股動脈取血2ml，立即注入到準備好的取血管中(含EDTA6ul)，混勻，立即在2000r/分，離心5分鐘，分離血漿，立即取0.8ml血漿，加入8ul抑肽酶，搖勻，-20"條件保存待測。測定前，將樣品置於室溫放置15分鐘，3500r/分，離心15分鐘，吸棄上清夜，測個沉澱管的放射性計數(按分析盒說明檢測)。3、實驗結果3.1附子、乾薑組分配伍對急性心衰大鼠腎素-血管緊張素-醛固酮系統的影響(1)血管緊張素I(AI)含量的變化模型組大鼠給予鹽酸普羅帕酮(16.5mg/kg)造模後，血管緊張素I(AI)水平顯著升高，與空白組比較有顯著性差異。分別給予參附註射液及附子總鹼與乾薑提取物配伍、附子總鹼與乾薑揮髮油配伍1:1、2:1、1:2、5:2後，除陽性對照組、附子總鹼與千姜提取物l:l、2:1組升高血管緊張素I夕卜，其餘各組均能降低急性心衰大鼠血管緊張素I(AI)的水平，其中尤以附子總鹼與乾薑提取物1:2組降低較為明星，但與模型組比較，均無顯著性差異。結果詳見表IO。_表IO對急性心衰陽虛大鼠AI的影響(I土SD)tableseeoriginaldocumentpage22注與空白組比較，*P<0.05，**P<0.01。(2)、血管緊張素II(All)含量的變化分別給予參附註射液及附子總鹼與乾薑提取物配伍、附子總鹼與乾薑揮髮油配伍l:1、2:1、1:2、5:2後，除附子總鹼與乾薑提取物配伍1:2、5:2，附子總鹼與乾薑揮髮油配伍l:2對急性心力衰竭大鼠血管緊張素n(An)有降低作用外，其餘各組對急性心衰大鼠血管緊張素n(aii)均有一定程度的升高。其中附子總鹼與乾薑提取物配伍2:l組、附子總鹼與乾薑揮髮油配伍1:1組能明顯升高急性心力衰竭大鼠血管緊張素II(All)水平，經統計學處理，其結果有顯著性差異。結果詳見表ll。表11對急性心衰陽虛大鼠AII的影響(Z±SD)tableseeoriginaldocumentpage23注與空白組比較，*P<0.05;與模型組比較，命P〈0.05，^^P〈0.01。(3)、醛固酮(Aid.)含量的變化分別給予參附註射液及附子總鹼與乾薑提取物配伍、附子總鹼與乾薑揮髮油配伍l:1、2:1、1:2、5:2後，陽性對照組、附子總鹼與千姜提取物配伍l:1、2:1、1:2組、附子總鹼與乾薑揮髮油配伍2:1、5:2組均能降低急性心力衰竭大鼠血漿醛固酮(Aid.)水平，但與模型組比較，均無顯著性差異。其餘各組對急性心力衰竭大鼠血漿醛固酮(Aid.)水平有一定升高作用，經統計學分析，也無顯著性差異。結果詳見表12。表12對急性心衰陽虛大鼠Ald.的影響(J土SD)tableseeoriginaldocumentpage23注與空白組比較，*P<0.05;與模型組比較，^P〈0.05。3.2附子、乾薑組分配伍對急性心衰大鼠心鈉素的影響分別給予參附註射液及附子總鹼與乾薑提取物配伍、附子總鹼與乾薑揮髮油配伍1:1、2:1、1:2、5:2後，除附子總鹼與乾薑揮髮油配伍5:2組外，其餘各組均能降低急性心力衰竭大鼠血漿心鈉素(ANP)水平，經與模型組比較，除附子總鹼與乾薑提取物配伍2:l組有顯著性差異外，其餘各組差異無顯著性。結果詳見表13。_表13對急性心衰陽虛大鼠ANP的影響(I±SD)tableseeoriginaldocumentpage24注與空白組比較，*P<0.05;與模型組比較，^P〈0.05。3.3附子、乾薑組分配伍對急性心衰大鼠內皮素的影響分別給予參附註射液及附子總鹼與乾薑提取物配伍、附子總鹼與乾薑揮髮油配伍1:1、2:1、1:2、5:2後，除附子總鹼與乾薑揮髮油配伍5:2組對急性心力衰竭大鼠血漿內皮素(ET)水平有升高作用(無統計學差異)外，其餘各組均能降低急性心力衰竭大鼠血漿內皮素(ET)水平，經與模型組比較，均無顯著性差異。結果詳見表14。—表14對急性心衰陽虛大鼠ET的影響(i士SD)tableseeoriginaldocumentpage24注與空白組比較，*P<0.05;與模型組比較，<.05。3.4附子、乾薑組分配伍對急性心衰大鼠腫瘤壞死因子的影響分別給予參附註射液及附子總鹼與乾薑提取物配伍、附子總鹼與乾薑揮髮油配伍h1、2:1、1:2、5:2後，各組均能不同程度地降低急性心力衰竭大鼠血漿腫瘤壞死因子(TNF)水平，經與模型組比較，差異均無顯著性。結果詳見表15。—表15對急性心衰陽虛大鼠TNF的影響(7±SD)tableseeoriginaldocumentpage25注與空白組比較，*P<0.05;與模型組比較，"<0.05。上述試驗證明，附子總生物鹼與乾薑提取物、乾薑揮髮油配伍發揮回陽救逆功效的機理，可能與其能降低急性心力衰竭大鼠血漿ANP、ET、TNF水平，調控RAAS有關。權利要求1、一種治療心衰的藥物組合物，其特徵在於它是由下述重量配比的原料製備而成的藥劑附子1-5份、乾薑1-2份。2、根據權利要求1所述的治療心衰的藥物組合物，其特徵在於它是由附子有效部位、乾薑有效部位為活性成分製備而成的藥劑附子總生物鹼l-5份、乾薑有效部位l-2份，所述的乾薑有效部位為乾薑提取物或乾薑揮髮油，其中，乾薑提取物，總姜酚含量以辣椒素計15。/。W/W;乾薑揮髮油，在矽膠薄層色譜條件下，與乾薑對照藥材揮髮油在相同位置有相同斑點。3、根據權利要求2所述的治療心衰的藥物組合物，其特徵在於所述的附子總生物鹼中，總生物鹼含量以烏頭鹼計為100150mg/ml。4、根據權利要求3所述的治療心衰的藥物組合物，其特徵在於所述的附子總生物鹼中，總生物鹼含量以烏頭鹼計為127.6mg/ml。5、根據權利要求l-4任一項所述的治療心衰的藥物組合物，其特徵在於它是由下述重量配比的原料製備而成的藥劑附子總生物鹼1-2份、乾薑提取物或乾薑揮髮油1份。6、根據權利要求5所述的治療心衰的藥物組合物，其特徵在於它是由下述重量配比的原料製備而成的藥劑附子總生物鹼2份、乾薑提取物l份。7、根據權利要求5所述的治療心衰的藥物組合物，其特徵在於它是由下述重量配比的原料製備而成的藥劑附子總生物鹼1份、乾薑揮髮油1份。8、根據權利要求1-7任一項所述的治療心衰的藥物組合物，其特徵在於所述的藥劑是片劑、顆粒劑、膠囊劑、丸劑或口服液。9、一種製備權利要求1所述的治療心衰的藥物組合物的方法，包括如下步驟a、附子總生物鹼l-5份、乾薑有效部位1-2份，所述的乾薑有效部位為乾薑提取物、乾薑揮髮油；b、混合，加入藥學上可接受的輔料或輔助性成分製備成藥學上常用的製劑。10、權利要求1所述的藥物組合物在製備治療心衰的藥物中的用途。全文摘要本發明提供了一種治療心衰的藥物組合物，它是由下述重量配比的原料製備而成的藥劑附子總生物鹼1-5份、乾薑有效部位1-2份，所述的乾薑有效部位為乾薑提取物、乾薑揮髮油。本發明還提供了該藥物組合物的製備方法和用途。附子總生物鹼既是附子的主要毒性組分，又是附子發揮回陽救逆功效的主要有效組分，其毒效關係異常密切。附子總生物鹼與乾薑提取物2∶1配伍、附子總生物鹼與乾薑揮髮油1∶1配伍時，具有減毒增效作用，藥效明確，毒性低，為臨床提供了一種新的選擇。文檔編號A61K36/9068GK101185752SQ20071018776公開日2008年5月28日申請日期2007年11月23日優先權日2006年11月23日發明者餘蔥蔥,唐勁松,成彭,曹小玉,曾代文,力郭申請人:成都中醫藥大學