一種治療癌症的中藥口服液的製作方法

2023-05-04 22:48:46 3

專利名稱：一種治療癌症的中藥口服液的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種治療癌症的中藥口服液，所述口服液包含紅參、黃芪、甘草、斑蝥和蟾酥的提取物作為有效成分。
背景技術：
現有癌症治療有許多方法，大都採用中西藥結合的方式進行。例如，鎖骨下靜脈穿刺的方法給患者以靜脈注射，所使用的藥劑大都是通常所用的普通藥劑，其療效較差，腫瘤消退緩慢，病情穩定差，甚至惡化；另外，採用純化學治療，患者的疼痛難以得到緩解，睡眠改善較小，食慾不見增加。從醫學上講，惡性腫瘤的發生、發展與人體的免疫功能有著十分密切的關係，經調查研究表明，惡性腫瘤患者的免疫功能、尤其是細胞免疫功能受到抑制，本領域的技術人員致力於尋找各種能夠改善生物反應的調劑(BRM)，以加強調整或保護腫瘤患者的免疫功能， 現已研製成的能夠改善生物反應的調劑(BRM)有很多，但是對腫瘤患者的治療效果較差。另外，現有腫瘤治療中的放療和多數化學藥物都可引起相當的骨髓抑制，這在一定程度上限制了有效治療的持續進行和治療強度的增加。現有技術已知由紅參、黃芪、斑蝥和蟾酥製成的中藥產品(得力生注射液)具有抗癌活性；在《中國藥物專利資料庫》中的檢索結果如下
i己錄1 I發明名稱(Ti)—種抗腫瘤的中藥凍乾粉針劑及其製備方法/—種新製劑得力生凍乾粉計劑，用於治療中晚期原發性肝癌文摘(AB)一種新製劑得力生凍乾粉針劑。將人參、黃芪醇提水沉，將濾液濃縮，得幹浸膏A; 將人參、黃芪的藥渣水提醇沉，將沉澱加乙醇攪拌，過濾，醇洗，乾燥，與幹浸膏A 合併得人參、黃芪提取物；將斑蝥用NAOH溶液提取，將濾液濃縮；將蟾酥加乙醇提取；合併斑蝥和蟾酥提取液，乾燥，得斑蝥、蟾酥提取物，用環糊精包含；將上述原料混合，製成凍乾粉針劑。該製劑具有穩定性好、刺激性和毒副作用小等優點。該組合物具有益氣扶正、消瘤散結、抗腫瘤的作用，用於治療中晚期原發性肝癌氣虛瘀滯證，症見右肋腹積塊、疼痛不移、腹脹食少、倦怠乏力等。公開號_1682826公告日期OjD) 記錄22005-10-19申請號(AP)200710198471發明名稱(Tl)具有抗肝癌活性的藥物組合物文摘(AB)一種新的中藥組合物，由人參、賢芪、蟾酥和去甲斑蝥素組成。其製備方法包括·,將人參用乙醇提取，提取液過濾，濾液回收乙醇，濃縮成清膏1備用，藥渣用水提取， 提取液過濾，濃縮成清膏，加入乙醇使沉澱，乾燥，得乾粉1備用；將黃芪用水提取， 提取液過濾，濃縮，加入乙醇使沉澱，過濾，濾液回收乙醇，濃縮成清膏2備用，沉澱乾燥，得千粉2備用；將蟾酥用乙醇提取，提取液過濾，濾液回收乙醇，得纖眘3 備用混合上述清膏1至3和千粉1至2以及去甲斑螫素，即可。該組合物真有拔肝癌活性。 ,公開號(PN)CN101181342公告曰期(PD) EJ: 32008-5-21 ■申請號(AP)94101456發明名稱(TI>含有人參和黃芪成分的注射液文摘(AB)一種含有人參和黃芪成分的注射液。取人參用稀醇回流提取，揮收乙醇；與·芪、斑蝥 (斑蝥)分別水煎煮提取，提取液液加入CA (OH) 2使ra值為1 2,然後通入SO 2 至PH值為3. 5-7. 0,過濾，濃縮；；蟾酥用乙醇浸泡2 4小時以上，過濾，棄去殘渣，然後揮發盡乙醇；上述各種藥液混合後滅菌即得本注射液.本發明主要用於提高人體免疫功能，抗腫瘤治療及其它免疫系統低下或免疫失調疾病的治療。公開號(ra)111056
發明內容
本發明提供一種治療癌症的中藥口服液，所述口服液能夠加強調整腫瘤患者的免疫功能，緩解患者的疼痛，改善患者的狀況，抑制腫瘤的發展，提高患者對化療的耐受性；該口服液包含紅參、黃芪、甘草、斑蝥、蟾酥的提取物作為有效成分。本發明還提供所述中藥口服液的製備方法，包括將紅參、黃芪、甘草、斑蝥、蟾酥先用乙醇回流提取，殘渣再用水煎煮提取；該製備方法可將主要抗癌成分斑蝥素、吲哚類、蟾酥毒基、皂苷、多糖等基本提取完全。本發明還提供所述中藥口服液的有效成分含量測定方法，包括總皂苷、多糖、華蟾酥毒基與脂蟾毒配基、斑蝥素、水溶性吲哚類的含量測定方法。因此，本發明涉及(1) 一種治療癌症的中藥口服液，其有效成分由紅參60-240重量份、黃芪345-1380重量份、甘草96-384重量份、斑蝥1_4重量份、蟾酥0. 5-2重量份製成；(2)根據(1)的中藥口服液，其有效成分由紅參120重量份、黃芪690重量份、甘草 192重量份、斑蝥2重量份、蟾酥1重量份製成；(3)如(1)所述中藥口服液的製備方法，包括將紅參、黃芪、甘草、斑蝥、蟾酥先用乙醇回流提取，殘渣再用水煎煮提取；(4)根據(3)的製備方法，包括將紅參、黃芪、甘草粉碎，加入75%乙醇回流提取， 得到提取液A ；殘渣加水煎煮提取，向提取液加入稀鹼調節pH > 8，過濾，濾液用稀酸調節 PH 6. 5-7. 0，減壓濃縮，得到提取液B ；將斑蝥、蟾酥粉碎，加入95%乙醇回流提取，得到提取液C;殘渣加水煎煮提取，過濾，濾液減壓濃縮，得到提取液D ；將以上提取液A、B、C、D混合均勻，製成口服液；(5)根據(4)的製備方法，包括將紅參、黃芪、甘草粉碎為粗粉，加入8倍量75%乙醇，回流提取3次，每次1. 5小時，合併醇提取液，過濾，濾液回收乙醇至無醇味，得到提取液 A ；向殘渣加入8倍量水煎煮3次，每次20分鐘，合併水煎液，加入氫氧化鈣乳調節pH 8. 0， 加入10%氫氧化鈉溶液調節pH 9.0，過濾，濾液用稀鹽酸調節pH 6. 5-7.0，濾液減壓濃縮， 得到提取液B ；將斑蝥粉碎為粗粉，蟾酥粉碎為細粉，混合，加入7倍量95%乙醇，回流提取3次， 每次20分鐘，合併醇提取液，減壓濃縮，得到提取液C ；向殘渣加入7倍量水煎煮3次，每次 20分鐘，合併水煎液，靜置2小時，過濾，濾液減壓濃縮，得到提取液D ；將以上提取液A、B、C、D混合，攪拌均勻，調整體積灌封於輸液瓶，100°C滅菌30分鐘，靜置1周以上，過濾，向濾液加入蔗糖混勻，加水稀釋至2倍，灌封於口服液瓶，滅菌，即得；(6)如(1)所述中藥口服液的有效成分含量測定方法，包括總皂苷、多糖、華蟾酥毒基與脂蟾毒配基、斑蝥素、水溶性吲哚類的含量測定方法；(7)根據(6)的含量測定方法，包括a、總皂苷的含量測定方法照紫外分光光度法(中國藥典2000版一部附錄V A)測定；對照品溶液的製備精密取紅參皂苷Re對照品8. Omg,精密稱定，置5ml容量瓶中， 加甲醇適量使溶解，並稀釋至刻度，搖勻即得，每毫升含紅參皂苷Re 1. 6mg ；標準曲線的製備精密量取對照品溶液20、40、60、80、100111，分別置IOml具塞試管中，置水浴中揮盡溶劑，立即取出，冷卻；精密加入5%香草醛的冰醋酸溶液0. anl，高氯酸 0. 8ml搖勻，置60°C水浴中加熱15分鐘取出，立即以流動水冷卻2分鐘；再精密加入冰醋酸溶液5ml，搖勻，以相應試劑為空白，照分光光度法《中華人民共和國藥典》2000年版一部附錄33頁，在M4nm的波長處測定吸收度，以吸收度為縱坐標，濃度為橫坐標繪製溶液的標準曲線；供試品溶液的製備精密吸取紅參、黃芪、甘草半成品濃縮液0.5ml，置IOOml量瓶中，加水稀釋至刻度，密塞、搖勻；再精密吸取上述溶液10ml，置分液漏鬥中，用水飽和正丁醇萃取三次，每次20ml，合併正丁醇萃取液，用水洗兩次，每次IOml，棄去水液，正丁醇液水浴上蒸乾，殘渣用甲醇溶解置5ml量瓶中，並稀釋至刻度，搖勻、即得；
測定法精密吸取供試品溶液40ul，置IOml具塞試管中，置水浴中揮盡溶劑， 立即取出冷卻，照標準曲線製備項下的方法自「精密加入5%的香草醛冰醋酸溶液
0. 2ml......」起，依法測定吸收度，從標準曲線上讀出供試品溶液中紅參總皂苷的含量，計
算，即得；b、多糖的含量測定方法照分光光度法(中國藥典2000年版一部附錄V)測定；對照品溶液的製備精密稱取經80°C乾燥至恆重的無水葡萄糖80mg，置IOOml容量瓶中，加水溶解，並稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置50ml容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻即得，每1毫升含無水葡萄糖0. OSmg ；標準曲線的製備精密量取對照品溶液0. 2,0. 4,0. 6,0. 8,1. Oml,分別置IOml具塞試管中，各管精密加水使成1ml，在冰浴中分別加入硫酸蒽酮溶液細1，搖勻，置沸水浴中加熱10分鐘，取出，放置室溫後，以相應試劑為空白，照分光光度法《中華人民共和國藥典》 2000年版一部附錄，在625nm的波長處測定吸收度，以吸收度為縱坐標，濃度為橫坐標繪製溶液的標準曲線；所述硫酸蒽酮溶液是這樣製備的取蒽酮50mg，加水25ml及硫酸75ml使溶解，即得，臨用時新配製；供試品溶液的製備取紅參、黃芪、甘草醇提殘渣的水煎煮液，過濾，精密量取續濾液1ml，置IOOml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得；測定法精密取供試品溶液1. 0ml，置IOml具塞試管中，照標準曲線製備項下的方
法自「在冰浴中精密加入硫酸蒽酮溶液細1......」起，依法測定吸收度，從標準曲線上讀出
供試品溶液中總多糖的含量，即得；C、華蟾酥毒基、脂蟾毒配基的含量測定方法照高效液相色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI D)測定；色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；0. 5%磷酸二氫鉀溶液-乙腈50 50，用磷酸調節pH 3.2;檢測波長為四611111;柱溫401;理論板數按華蟾酥毒基峰、脂蟾毒配基峰計算分別不低於4000 ；對照品溶液的製備取華蟾酥毒基對照品、脂蟾毒配基對照品適量，精密稱定，加甲醇分別製成Iml各含華蟾酥毒基、脂蟾毒配基50ug的溶液，即得；供試品溶液的製備分別取各批次蟾酥、斑蝥水煎煮濃縮液半成品，精密量取 20. 0ml，置分液漏鬥中，用乙醚萃取3次，每次30ml，合併乙醚液，用少量無水硫酸鈉脫水， 減壓濃縮回收乙醚，水浴蒸乾，殘渣用甲醇定容至5ml量瓶中，搖勻，即得；臨用前0. 45ul濾膜過濾；測定法分別精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各10ul，注入高效液相色譜儀，測定，即得；d、斑蝥素的含量測定方法照液相色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI D)測定；色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；以乙腈-水 80 20為流動相；檢測波長為209nm;理論板數按斑蝥素峰計算不低於1500;對照品溶液的製備取斑蝥素對照品適量，精密稱定，加甲醇製成每Iml含0. 5mg的溶液，即得；
供試品溶液的製備分別取各批蟾酥、斑蝥水煎煮濃縮液半成品，精密量取20. Oml, 置分液漏鬥中，用水飽和氯仿萃取3次，每次30ml，合併氯仿液，用少量無水硫酸鈉脫水，減壓濃縮回收氯仿，水浴蒸乾，殘渣用甲醇定容至2ml量瓶中，搖勻，即得；臨用前0. 45ul濾膜過濾；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，計算，即得；e、蟾酥中水溶性吲哚類生物鹼含量測定方法照分光光度計法(中國藥典2000年版一部附錄V)測定；對照品溶液的製備精密稱取置五氧化二磷乾燥器中真空乾燥24h後的5-羥色按對照品，加水製成每毫升含33ug的溶液，即得；供試品溶液的製備分別取各批次斑蝥、蟾酥水煎煮濃縮液半成品，精密量取 10. 0ml，加水至100ml，即得；測定法精密吸取供試品溶液0. 5ml置IOml容量瓶，加水使成5ml ；精密加入15% 對二甲氨基苯甲醛鹽酸溶液5ml，搖勻，室溫放置30分鐘，用水做空白對照，在波長555nm處測定吸收度，從標準曲線上讀出樣品溶液中吲哚類總生物鹼的量，計算含量。在本發明的中藥口服液中，紅參、黃芪大補元氣、扶正固本、健脾益氣；黃芪多糖更有利於消腫作用，可防止肝糖原減少，提高單核巨噬細胞和白細胞的吞噬能力，增強免疫功能；人參更可造成癌細胞的死亡。斑蝥軟堅散結、活血祛淤，通過上述工藝所提取的藥劑含有大量斑蝥素，用來治療各種腫瘤患者；脂蟾毒配基具有止痛開竅的作用，是蟾酥破血散結、去脅肋疼痛等功效的物質基礎，因此能夠明顯增強NK細胞的活性，對腫瘤具有明顯的抑制作用。本發明用於中晚期原發性肝癌氣虛瘀滯證，症見右肋腹積塊，疼痛不移，腹脹食少，倦怠乏力等。臨床前動物試驗結果提示本發明的中藥口服液促進癌細胞再分化及癌細胞凋亡；在體內、體外均能抑制多種癌細胞的生長；對化療、放療不敏感的腺型癌細胞，也有很強的抑制作用；能使癌組織cAMP/cGMP比值加大，提高免疫功能，有效清除體內自由基。本發明與現有技術得力生注射液相比(1)得力生注射液由於是注射劑，因此對注射劑中雜質及熱源的除去必須徹底，其工藝採用氫氧化鈣、二氧化硫除去雜質。藥液加氫氧化鈣至PH 12，在強鹼性水溶液中才能有效除去熱源，導致有效成分總皂苷、總多糖的損失量也很大。本發明口服液不必考慮熱源，人參皂苷、黃芪皂苷以乙醇提取，無需進一步以強鹼性氫氧化鈣除去雜質及熱源，僅多糖提取液用微量氫氧化鈣PH 8. O除去雜質，因此有效成分的提取純化損失量極少。得力生注射液多糖的提取量15%，損失量達85%;人參、黃芪總皂苷的提取量僅20%，損失量可達80%。而本發明口服液的人參、黃芪總皂苷、總多糖提取純化後可達85%以上，損失量僅 15% ；(2)得力生注射液中的蟾酥僅用乙醇提取脂溶部分，水溶部分棄去，而蟾酥水溶部分中蟾酥生物鹼有更好的抗癌作用，目前市面所售華蟾素口服液、華蟾素注射液均是以水溶部分蟾酥生物鹼為主要抗癌有效成分。得力生注射液中由於水溶部分與脂溶部分同時存在導致藥液不穩定，因此只能棄去水溶部分；(3)原料中甘草是一味很重要的藥；得力生注射液配伍甘草會導致藥液不穩定，滅菌後即產生沉澱，滅菌後PH降低，甘草酸在pH低於5. 5時即沉澱析出；而甘草酸有抗癌作用，可加強人參、黃芪、蟾酥、斑蝥的抗癌作用，同時甘草有解百毒作用，配伍甘草對斑蝥引起的尿痛、尿頻、尿急可明顯減少，對胃腸道不良反應可基本消失，小鼠毒性實驗表明本發明口服液若不加甘草的小鼠LD5tl為54. 25g/kg，加甘草後的LD5tl為61. 86g/kg，表明毒性明顯降低。
具體實施例方式實施例1一、原料來源1、紅參本品來源於黑龍江省富錦縣參場，購於樂山市中藥材公司。經鑑定本品為五加科植物紅參Panax ginseng C. A. Mey.的栽培品(習稱「園參」)經蒸製後的乾燥根及根莖。符合《中國藥典》2000年版一部第121頁紅參項下的有關規定。2、黃芪經鑑定本品為豆科植物蒙古黃芪Astragalusmembranaceus(Fisch)Bge. Var. mongholicus (Bge. ) Hsiao 或膜莢黃苗 Astragalus membranaceus (Fisch) Bge..的乾燥根。符合《中國藥典》2000年版一部第249頁黃芪項下的有關規定。3、甘草經鑑定本品為豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch脹果甘草 Glycyhisa inf lata. Bat或光果甘草Glycyrrhiza glabru L.的乾燥根及根莖。符合《中國藥典》2000年版一部第59頁甘草項下的有關規定。4、斑蝥經鑑定本品為芫青科昆蟲南方大斑蝥Mylabris phaleratapallas或黃黑小斑蝥Mylabris cichorii Linnaeus的乾燥體。符合《中國藥典》2000年版一部第273 頁斑蝥項下的有關規定。5、蟾酥經鑑定為蟾蜍科動物中華大蟾蜍Bufo bufo gargarizansCantor或黑框蟾蜍Bufo melanostictus Schneider的乾燥分泌物。符合《中國藥典》2000年版一部第 316頁蟾酥項下的有關規定。二、藥材的前處理及加工1、紅參進行清洗、挑選、除去雜質，晾乾、切片、粉碎過40目篩、稱重。2、黃芪進行清洗、挑選、除去雜質，晾乾、切片、粉碎過40目篩、稱重。3、甘草進行清洗、挑選、除去雜質，晾乾、切片、粉碎過40目篩、稱重。4、斑蝥挑選、除去雜質，粉碎過20目篩、稱重。5、蟾酥挑選、除去雜質，粉碎過40目篩、稱重。三、製備工藝1、取紅參120克、黃芪690克、甘草192克、斑蝥2克、蟾酥1克。2、將紅參、黃芪、甘草粉碎為粗粉，加入8倍量75%乙醇，回流提取3次，每次1. 5 小時，合併醇提取液，過濾，濾液回收乙醇至無醇味，得到提取液A ；向殘渣加入8倍量水煎煮3次，每次20分鐘，合併水煎液，加入氫氧化鈣乳調節PH 8.0，加入10%氫氧化鈉溶液調節pH 9.0，過濾，濾液用稀鹽酸調節pH 6. 5-7.0，濾液減壓濃縮，得到提取液B。3、將斑蝥粉碎為粗粉，蟾酥粉碎為細粉，混合，加入7倍量95 %乙醇，回流提取3 次，每次20分鐘，合併醇提取液，減壓濃縮，得到提取液C ；
向殘渣加入7倍量水煎煮3次，每次20分鐘，合併水煎液，靜置2小時，過濾，濾液減壓濃縮，得到提取液D。4、將以上提取液A、B、C、D混合，攪拌均勻，調整體積灌封於輸液瓶，100°C滅菌30 分鐘，靜置1周以上，過濾，向濾液加入蔗糖混勻，加水稀釋至2倍，灌封於口服液瓶，滅菌， 即得。實施例2採用紅參60克、黃芪345克、甘草96克、斑蝥1克、蟾酥0. 5克，餘同實施例1。實施例3採用紅參240克、黃芪1380克、甘草384克、斑蝥4克、蟾酥2克，餘同實施例1。
權利要求
1.一種治療癌症的中藥口服液，其有效成分由紅參60-240重量份、黃芪345-1380重量份、甘草96-384重量份、斑蝥1-4重量份、蟾酥0. 5-2重量份製成。
2.根據權利要求1的中藥口服液，其有效成分由紅參120重量份、黃芪690重量份、甘草192重量份、斑蝥2重量份、蟾酥1重量份製成。
3.如權利要求1所述中藥口服液的製備方法，包括將紅參、黃芪、甘草、斑蝥、蟾酥先用乙醇回流提取，殘渣再用水煎煮提取。
4.根據權利要求3的製備方法，包括將紅參、黃芪、甘草粉碎，加入75%乙醇回流提取， 得到提取液A ；殘渣加水煎煮提取，向提取液加入稀鹼調節pH > 8，過濾，濾液用稀酸調節 PH 6. 5-7. 0，減壓濃縮，得到提取液B ；將斑蝥、蟾酥粉碎，加入95 %乙醇回流提取，得到提取液C ；殘渣加水煎煮提取，過濾， 濾液減壓濃縮，得到提取液D ；將以上提取液A、B、C、D混合均勻，製成口服液。
5.根據權利要求4的製備方法，包括將紅參、黃芪、甘草粉碎為粗粉，加入8倍量75% 乙醇，回流提取3次，每次1. 5小時，合併醇提取液，過濾，濾液回收乙醇至無醇味，得到提取液A ；向殘渣加入8倍量水煎煮3次，每次20分鐘，合併水煎液，加入氫氧化鈣乳調節pH 8. 0，加入10%氫氧化鈉溶液調節pH 9. 0，過濾，濾液用稀鹽酸調節pH 6. 5-7. 0，濾液減壓濃縮，得到提取液B;將斑蝥粉碎為粗粉，蟾酥粉碎為細粉，混合，加入7倍量95%乙醇，回流提取3次，每次 20分鐘，合併醇提取液，減壓濃縮，得到提取液C ；向殘渣加入7倍量水煎煮3次，每次20分鐘，合併水煎液，靜置2小時，過濾，濾液減壓濃縮，得到提取液D ；將以上提取液A、B、C、D混合，攪拌均勻，調整體積灌封於輸液瓶，100°C滅菌30分鐘， 靜置1周以上，過濾，向濾液加入蔗糖混勻，加水稀釋至2倍，灌封於口服液瓶，滅菌，即得。
6.如權利要求1所述中藥口服液的有效成分含量測定方法，包括總皂苷、多糖、華蟾酥毒基與脂蟾毒配基、斑蝥素、水溶性吲哚類的含量測定方法。
7.根據權利要求6的含量測定方法，包括a、總皂苷的含量測定方法照紫外分光光度法(中國藥典2000版一部附錄V A)測定；對照品溶液的製備精密取紅參皂苷Re對照品8. Omg，精密稱定，置5ml容量瓶中，加甲醇適量使溶解，並稀釋至刻度，搖勻即得，每毫升含紅參皂苷Re 1. 6mg ；標準曲線的製備精密量取對照品溶液20、40、60、80、100ul，分別置IOml具塞試管中，置水浴中揮盡溶劑，立即取出，冷卻；精密加入5%香草醛的冰醋酸溶液0. anl，高氯酸 0. 8ml搖勻，置60°C水浴中加熱15分鐘取出，立即以流動水冷卻2分鐘；再精密加入冰醋酸溶液5ml，搖勻，以相應試劑為空白，照分光光度法《中華人民共和國藥典》2000年版一部附錄33頁，在M4nm的波長處測定吸收度，以吸收度為縱坐標，濃度為橫坐標繪製溶液的標準曲線；供試品溶液的製備精密吸取紅參、黃芪、甘草半成品濃縮液0. 5ml，置IOOml量瓶中，加水稀釋至刻度，密塞、搖勻；再精密吸取上述溶液10ml，置分液漏鬥中，用水飽和正丁醇萃取三次，每次20ml，合併正丁醇萃取液，用水洗兩次，每次IOml，棄去水液，正丁醇液水浴上蒸乾，殘渣用甲醇溶解置5ml量瓶中，並稀釋至刻度，搖勻、即得；測定法精密吸取供試品溶液40ul，置IOml具塞試管中，置水浴中揮盡溶劑，立即取出冷卻，照標準曲線製備項下的方法自「精密加入5%的香草醛冰醋酸溶液0. 2ml......」起，依法測定吸收度，從標準曲線上讀出供試品溶液中紅參總皂苷的含量，計算，即得；b、多糖的含量測定方法照分光光度法(中國藥典2000年版一部附錄V)測定；對照品溶液的製備精密稱取經80°C乾燥至恆重的無水葡萄糖80mg，置IOOml容量瓶中，加水溶解，並稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置50ml容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻即得，每1毫升含無水葡萄糖0. OSmg ；標準曲線的製備精密量取對照品溶液0. 2,0. 4,0. 6,0. 8,1. 0ml，分別置IOml具塞試管中，各管精密加水使成1ml，在冰浴中分別加入硫酸蒽酮溶液細1，搖勻，置沸水浴中加熱10 分鐘，取出，放置室溫後，以相應試劑為空白，照分光光度法《中華人民共和國藥典》2000年版一部附錄，在625nm的波長處測定吸收度，以吸收度為縱坐標，濃度為橫坐標繪製溶液的標準曲線；所述硫酸蒽酮溶液是這樣製備的取蒽酮50mg，加水25ml及硫酸75ml使溶解， 即得，臨用時新配製；供試品溶液的製備取紅參、黃芪、甘草醇提殘渣的水煎煮液，過濾，精密量取續濾液 lml，置IOOml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得；測定法精密取供試品溶液1.0ml，置IOml具塞試管中，照標準曲線製備項下的方法自「在冰浴中精密加入硫酸蒽酮溶液細1......」起，依法測定吸收度，從標準曲線上讀出供試品溶液中總多糖的含量，即得；c、華蟾酥毒基、脂蟾毒配基的含量測定方法照高效液相色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI D)測定； 色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；0. 5%磷酸二氫鉀溶液-乙腈50 50，用磷酸調節pH 3.2;檢測波長為四611111;柱溫401;理論板數按華蟾酥毒基峰、脂蟾毒配基峰計算分別不低於4000 ；對照品溶液的製備取華蟾酥毒基對照品、脂蟾毒配基對照品適量，精密稱定，加甲醇分別製成Iml各含華蟾酥毒基、脂蟾毒配基50ug的溶液，即得；供試品溶液的製備分別取各批次蟾酥、斑蝥水煎煮濃縮液半成品，精密量取20. 0ml，置分液漏鬥中，用乙醚萃取3次，每次30ml，合併乙醚液，用少量無水硫酸鈉脫水，減壓濃縮回收乙醚，水浴蒸乾，殘渣用甲醇定容至5ml量瓶中，搖勻，即得；臨用前0. 45ul濾膜過濾；測定法分別精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各10ul，注入高效液相色譜儀，測定，即得；d、斑蝥素的含量測定方法照液相色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI D)測定；色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；以乙腈-水80 20 為流動相；檢測波長為209nm ；理論板數按斑蝥素峰計算不低於1500 ；對照品溶液的製備取斑蝥素對照品適量，精密稱定，加甲醇製成每Iml含0. 5mg的溶液，即得；供試品溶液的製備分別取各批蟾酥、斑蝥水煎煮濃縮液半成品，精密量取20. 0ml，置分液漏鬥中，用水飽和氯仿萃取3次，每次30ml，合併氯仿液，用少量無水硫酸鈉脫水，減壓濃縮回收氯仿，水浴蒸乾，殘渣用甲醇定容至2ml量瓶中，搖勻，即得；臨用前0. 45ul濾膜過濾；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，計算，即得； e、蟾酥中水溶性吲哚類生物鹼含量測定方法 照分光光度計法(中國藥典2000年版一部附錄V)測定；對照品溶液的製備精密稱取置五氧化二磷乾燥器中真空乾燥24h後的5-羥色按對照品，加水製成每毫升含33ug的溶液，即得；供試品溶液的製備分別取各批次斑蝥、蟾酥水煎煮濃縮液半成品，精密量取10. 0ml，加水至100ml，即得；測定法精密吸取供試品溶液0. 5ml置IOml容量瓶，加水使成5ml ；精密加入15%對二甲氨基苯甲醛鹽酸溶液5ml，搖勻，室溫放置30分鐘，用水做空白對照，在波長555nm處測定吸收度，從標準曲線上讀出樣品溶液中吲哚類總生物鹼的量，計算含量。
全文摘要
本發明提供一種治療癌症的中藥口服液，包含紅參、黃芪、甘草、斑蝥、蟾酥的提取物作為有效成分；本發明還提供所述中藥口服液的製備方法和有效成分含量測定方法。
文檔編號G01N21/33GK102302542SQ20111027750
公開日2012年1月4日 申請日期2011年9月19日 優先權日2011年9月19日
發明者謝媛媛 申請人:謝媛媛