一種酶解法在石榴皮中提取鞣花酸的方法
2023-04-29 09:40:16 4
專利名稱：一種酶解法在石榴皮中提取鞣花酸的方法
技術領域：
本發明涉及中藥有效成分的提取方法，具體涉及從石榴皮中提取鞣花酸的提取方法。
背景技術：
石榴皮提取鞣花酸的方法
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『<石榴皮為石榴科植物石榴Punica Granatum L.的乾燥果皮，具有澀腸止瀉、止血、 驅蟲等功效，石榴皮中富含鞣質類成分，主要有沒食子酸、鞣花酸、安石榴林、安石榴苷、石榴皮亭Α、石榴皮亭B、沒食子醯雙內酯等。其中的鞣花酸為沒食子酸的二聚衍生物，是一種多酚二內酯，分子式為C14H608，如上分子結構圖所示。現代研究證明鞣花酸表現出對化學物質誘導癌變及其他多種癌變有明顯的抑制作用，特別是對結腸癌、食管癌、肝癌、肺癌、舌及皮膚腫瘤等有很好的抑制作用，具有抗腫瘤、抗氧化、抗菌和抗病毒等作用。[Angelika. Rommel, Ronald E.ffrolstad, Ellagic acid content of red raspberry juice as influenced by cultivar, processing, andenvironmental factors, J. Agric. Food Chem.，1993，41 (11)，ppl951_1960[郭增軍， 譚林，徐穎，吳楠.鞣花酸類化合物在植物界的分布及其生物活性天然產物研究與開發， 2010,22 519-524,540]
發明內容
本發明的一個目的是為解決上述現有技術提取時間長，轉化率低，技術操作複雜等問題，提供一種操作便捷、轉化的可靠性、產品回收率高，可達到工業化生產要求的鞣花酸的提取方法。—種石榴皮中提取鞣花酸的提取方法，採用如下工藝步驟1)原料的處理；2)水解提取；3)氧化脫氫；4)純化。更進一步的，該方法採用如下工藝步驟所述原料的處理為炒炭將經去除雜質，洗淨，切片，乾燥的石榴皮原藥用熱鍋內 200-400°C炒至表皮黑褐色，內部焦褐色，切片或粉碎待用；提取將炒焦的石榴皮切片中加入5-10倍的水，加入0. 1-0. 5份酶溶液，常溫浸泡 0. 5-6小時，然後將兩者的混合物加熱至80-100°C，保溫1-4小時，連續兩遍或兩遍以上，濾渣取液，合併濃縮，濃縮液重量比按原料比1-3 1即成，為浸膏液；氧化脫氫上述浸膏液用雙氧水水解，雙氧水與浸膏液的重量比為15-25 1，優選20 1，取雙氧水水溶液，濃縮回收液，所得液體體積為雙氧水溶液的1/6-1/10;純化濃縮液加三乙胺純化萃取2-5小時，萃取液濃縮至飽和，結晶得鞣花酸的純
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ΡΠ O在提取步驟中酶解並濃縮後，還可以將濃縮液加入2-5倍80 %丙酮在80 °C條件下保溫0. 5-2小時，連續兩遍或兩遍以上，濾渣取液，合併濃縮；得到浸膏液。所述酶溶液為複合酶溶液，濃度為0. 1-0. 5%。所述複合酶為纖維素酶與酒麴、澱粉酶、乳酸菌的混合物；纖維素酶與酒麴、澱粉酶、乳酸菌按照質量計算，比例為1 0. 1-2 0. 1-0. 5 0. 1-1 ；酶解時間為0. 5_10小時， 酶解溫度為15-70°C，酶解時Ph值4-6。所述酶解時間1-2小時，酶解溫度40_50°C。利用常用酸如鹽酸醋酸等調Ph值。本發明中除特殊指明，均為以質量計，質量份，質量倍數，質量比，質量百分含量寸。本發明的有益效果在於本發明在總結前人的工作和自己探索的基礎上，經反覆的研究改進，採用炒制後的原料酶解後經水解提取後進行氧化脫氫，然後進行提取；本方法操作簡單，避免了酸解法的強酸和溶劑大量使用，避免了微生物法需要對大量菌絲體產生導致後續分離純化難的困難，可以在沒有超聲波、柱層析等設備情況下進行，工藝簡單，三廢排放少，適合大規模的生產，產品質量很好。通過控制加熱的溫度和時間，在不影響鞣花酸性質的情況下，將石榴皮預先經炒炭後，促進石榴皮中可水解鞣質的苷鍵或酯鍵斷裂，增加在後續水解過程中游離的鞣花酸等成分，相對較大的增加鞣花酸的含量和提取效率。通過本發明的方法極大地地提高了生產效率和轉化率，促使原料中的有效物質更多的被提取出來，使得產品質量更進一步提高，且產品純度高，適合工業化生產。
具體實施例方式下面結合實施例來進一步說明本發明，但並不作為對本發明的限定。實施例1
所述原料的處理為炒炭將經去除雜質，洗淨，切片，乾燥的石榴皮原藥用熱鍋內 300°C炒至表皮黑褐色，內部焦褐色，切片或粉碎待用；提取將炒焦的石榴皮切片中加入8倍的水，加入0. 3份酶溶液，常溫浸泡2小時， 然後將兩者的混合物加熱至90°C，保溫2小時，連續兩遍或兩遍以上，濾渣取液，合併濃縮， 濃縮液重量比按原料比2 1即成，為浸膏液；氧化脫氫上述浸膏液用雙氧水水解，雙氧水與浸膏液的重量比為20 1，取雙氧水水溶液，濃縮回收液，所得液體體積為雙氧水溶液的1/8 ；純化濃縮液加三乙胺純化萃取3小時，萃取液濃縮至飽和，結晶得鞣花酸的純
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ΡΠ O所述酶溶液為複合酶溶液，濃度為0. 2%。所述雙氧水為試劑規格雙氧水，濃度為30%規格。此濃度為質量百分含量。
實施例2在提取步驟中酶解並濃縮後，取1倍體積80%丙酮，將濃縮液加入1倍體積80% 丙酮中在80°C條件下保溫1小時，濾渣，在濾渣中加入丙酮，再次保溫並過濾，然後再重複該過程，一共進行三次丙酮提取；濾渣取液，合併濃縮；得到浸膏液。實施例3所述原料的處理為炒炭將經去除雜質，洗淨，切片，乾燥的石榴皮原藥用熱鍋內 200°C炒至表皮黑褐色，內部焦褐色，切片或粉碎待用；提取將炒焦的石榴皮切片中加入5倍的水，加入0. 1份酶溶液，常溫浸泡6小時， 然後將兩者的混合物加熱至100°c，保溫4小時，連續兩遍或兩遍以上，濾渣取液，合併濃縮，濃縮液重量比按原料比3 1即成，為浸膏液；氧化脫氫上述浸膏液用雙氧水水解，雙氧水與浸膏液的重量比為20 1，取雙氧水水溶液，濃縮回收液，所得液體體積為雙氧水溶液的1/6 ；純化濃縮液加三乙胺純化萃取5小時，萃取液濃縮至飽和，結晶得鞣花酸的純
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ΡΠ O所述酶溶液為複合酶溶液，濃度為0. 1%，該濃度為質量百分含量。所述複合酶為纖維素酶與酒麴、澱粉酶、乳酸菌的混合物；纖維素酶與酒麴、澱粉酶、乳酸菌按照質量計算，比例為1 0. 1 0. 1 0.1;酶解時間為10小時，酶解溫度為 70°C，酶解時Ph值6。實施例4所述原料的處理為炒炭將經去除雜質，洗淨，切片，乾燥的石榴皮原藥用熱鍋內 400°C炒至表皮黑褐色，內部焦褐色，切片或粉碎待用；提取將炒焦的石榴皮切片中加入10倍的水，加入0. 5份酶溶液，常溫浸泡0. 5小時，然後將兩者的混合物加熱至80°C，保溫1小時，連續兩遍或兩遍以上，濾渣取液，合併濃縮，濃縮液重量比按原料比1 1，將濃縮液加入5倍80%丙酮在80°C條件下保溫0.5小時，連續5遍，濾渣取液，合併濃縮；得到浸膏液；氧化脫氫上述浸膏液用雙氧水水解，雙氧水與浸膏液的重量比為20 1，取雙氧水水溶液，濃縮回收液，所得液體體積為雙氧水溶液的1/10 ；純化濃縮液加三乙胺純化萃取2小時，萃取液濃縮至飽和，結晶得鞣花酸的純
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ΡΠ O在提取步驟中酶解並濃縮後，還可以所述酶溶液為複合酶溶液，濃度為0. 5%。所述複合酶為纖維素酶與酒麴、澱粉酶、乳酸菌的混合物；纖維素酶與酒麴、澱粉酶、乳酸菌按照質量計算，比例為1 2 0.5 1 ；酶解時間為0.5小時，酶解溫度為15°C， 酶解時Ph值4。實施例5所述酶溶液為複合酶溶液，用量為原料的0.3倍，濃度以質量百分含量計為 0. 1-0. 5%。所述複合酶為纖維素酶與酒麴、澱粉酶、乳酸菌的混合物；纖維素酶與酒麴、澱粉酶、乳酸菌按照質量計算，比例為1 1 0.3 0.5;酶解時間為4小時，酶解溫度為50°C， 酶解時Ph值5。其餘同實施例1。
實施例6-13所述複合酶為纖維素酶、澱粉酶、蛋白酶、脂肪酶和溶菌酶的複合酶以下表比例的組合；酶解溫度，酶解時間也如下表所示，其餘同實施例2。
權利要求
1.一種酶解法在石榴皮中提取鞣花酸的方法，其特徵在於，所述工藝如下原料的處理，提取；氧化脫氫；純化。
2.如權利要求1所述的一種酶解法在石榴皮中提取鞣花酸的方法，其特徵在於，所述原料的處理為炒炭將經去除雜質，洗淨，切片，乾燥的石榴皮原藥用熱鍋內200-400°C炒至表皮黑褐色，內部焦褐色，切片或粉碎待用；提取將炒焦的石榴皮切片中加入5-10倍的水，加入0. 1-0. 5份酶溶液，常溫浸泡 0. 5-6小時，然後將兩者的混合物加熱至80-100°C，保溫1-4小時，連續兩遍或兩遍以上，濾渣取液，合併濃縮，濃縮液重量比按原料比1-3 1即成，為浸膏液；氧化脫氫上述浸膏液用雙氧水水解，雙氧水與浸膏液的重量比為15-25 1，取雙氧水水溶液，濃縮回收液，所得液體體積為雙氧水溶液的1/6-1/10 ；純化濃縮液加三乙胺純化萃取2-5小時，萃取液濃縮至飽和，結晶得鞣花酸的純品。
3.如權利要求2所述的一種酶解法在石榴皮中提取鞣花酸的方法，其特徵在於在提取步驟中酶解並濃縮後，將濃縮液加入2-5倍80%丙酮在80°C條件下保溫0. 5-2小時，連續兩遍或兩遍以上，濾渣取液，合併濃縮；得到浸膏液。
4.如權利要求2所述的一種酶解法在石榴皮中提取鞣花酸的方法，其特徵在於所述酶溶液為複合酶溶液，濃度為0. 1-0. 5%。
5.如權利要求4所述的一種酶解法在石榴皮中提取鞣花酸的方法，其特徵在於所述複合酶為纖維素酶與酒麴、澱粉酶、乳酸菌的混合物；纖維素酶與酒麴、澱粉酶、乳酸菌按照質量計算，比例為1 0. 1-2 0. 1-0. 5 0. 1-1 ；酶解時間為0. 5-10小時，酶解溫度為 15-70°C，酶解時 Ph 值 4-6。
6.如權利要求5所述的一種酶解法在石榴皮中提取鞣花酸的方法，其特徵在於所述酶解時間1-2小時，酶解溫度40-50°C。
全文摘要
本發明涉及藥物製備領域，是一種酶解法在石榴皮中提取鞣花酸的方法，解決了現有技術鞣花酸的製備轉化率低，產量低，產品品質不好的問題，工藝如下原料的處理，提取；氧化脫氫；純化。本發明採取了酶解的操作，通過本發明的方法極大地地提高了生產效率和轉化率，促使原料中的有效物質更多的轉化為鞣花酸，使得產品質量更進一步提高，且產品純度高，適合工業化生產。
文檔編號C07D493/06GK102453039SQ201010529439
公開日2012年5月16日 申請日期2010年11月3日 優先權日2010年11月3日
發明者張守力 申請人:張守力