一種誘導黃瓜抗根結線蟲的製劑及其製備方法
2023-05-25 20:31:41
專利名稱：一種誘導黃瓜抗根結線蟲的製劑及其製備方法
技術領域：
本發明涉及一種誘導黃瓜抗根結線蟲的製劑及其製備方法。
背景技術：
由根結線蟲(Meoidogyne spp.)引起的黃瓜根結線蟲病是一種世界性病害,病害發生時，一般每年造成10%_15%的經濟損失，發病嚴重時經濟損失可達30%_40%，甚至絕產。近年來大棚黃瓜的迅猛發展，重茬種植現象普遍，使得土壤中根結線蟲日益累積，為害逐年加重。對於黃瓜根結線蟲的防治，目前主要依賴於化學殺蟲劑，但其只能短期內控制線蟲的數量，同時還存在汙染環境、農產品殘留超標和抗藥性等弊端。因此，急需開發安全、有效的無公害生物農藥來控制黃瓜根結線蟲的危害，同時大幅度降低化學殺蟲劑的使用量。殼聚糖是一種由幾丁質通過脫乙醯化而生產的半合成衍生物。近年來發現殼聚糖 的水解產物-殼寡糖(特別是聚合度在20以下的部分)具有誘導植物產生免疫力、防治病蟲害、促進生長和增產的效果，已引起國內外科技界的高度重視，認為其具有極高的研究價值和應用價值。但現有的殼寡糖對植物寄生線蟲病的防治效果與化學殺蟲劑相比仍有較大差距，存在誘導強度不高的問題，從而限制了殼寡糖在黃瓜根結線蟲病防治上的應用。
發明內容
本發明的目的是針對現有技術的不足，提供一種可在不使用化學殺蟲劑前提下能有效地控制黃瓜根結線蟲病的誘抗劑，以能夠誘導黃瓜產生對根結線蟲病抗性的殼寡糖和水楊酸鈉為激發子，進行合理的混配，互為補充，能最大限度地提高殼寡糖的誘導免疫活性、克服單用的不足，可使黃瓜獲得對根結線蟲病的持久抗性，解決了黃瓜根結線蟲無公害防治的問題，同時不會造成對土壤環境的汙染。本發明的上述目的可通過以下技術方案得以實現。本發明的一種誘導黃瓜抗根結線蟲的製劑，它是由殼寡糖溶液和水楊酸鈉配製而成，其中殼寡糖和水楊酸鈉的重量比例為10 100 :1 10。本發明製劑的製備方法如下
I、殼聚糖酶發酵液的製備以下列成分及按重量百分比配製液體培養基殼聚糖0. 5%-2%、酵母提取物0. 01-0. 1%、NH4Cl O. 05-0. 2%、葡萄糖0. 05-0. 2%、KH2PO4
O.05-0. 2%、MgSO4 · 7H20 0. 05-0. 2%、MnSO4 :0. 05-0. 2%、其餘為水，pH 自然，121°C滅菌 30分鐘，按3%-10%接種量接種產殼聚糖酶的擬青黴屬真菌iPaecilomyces sp.),在28°C條件下培養2天，板框過濾發酵液，濾液為殼聚糖酶發酵液；
2、殼寡糖溶液的製備以1%_3%的冰乙酸溶液為溶劑，配製3%-8%的殼聚糖溶液100L,攪拌下加入殼聚糖酶發酵液1-4L，在40°C _60°C下攪拌反應2_5h，板框過濾得殼寡糖溶液，其中殼寡糖的平均分子量為2000-10000 ；
3、取步驟(2)殼寡糖溶液O.6-0. 8L，與濃度為O. 25%的水楊酸鈉溶液O. 2-0. 4L攪拌混合均勻，得到誘導黃瓜抗根結線蟲的製劑。
本發明的製劑為天然來源的，對動物和農作物無毒性的分子量範圍為2000-10000
的殼寡糖和無植物毒性的水楊酸鈉的農用組合物，具有促進黃瓜根的生長，生態修復土壤，防治黃瓜根結線蟲作用。
具體實施例方式下面將通過實施例對本發明作進一步地說明。其製備方法如下
I、殼聚糖酶發酵液的製備以下列成分及按重量百分比配製液體培養基殼聚糖15g、酵母提取物0. 5g、NH4Cl 1. 5g、葡萄糖:1. 0g、KH2P04 :1. 0g、MgS04 · 7H20 :0. 5g、MnS04 0.5g、水980g，pH自然，121°C滅菌30分鐘，按3%_10%接種量接種產殼聚糖酶的擬青黴屬真菌iPaecilomyces sp.)，在28°C條件下培養2天，板框過濾發酵液,濾液為殼聚糖酶發酵液；
2、殼寡糖溶液的製備以I. 5%的冰乙酸溶液為溶劑，配製濃度為4%的殼聚糖溶液100L，攪拌下加入殼聚糖酶發酵液2L，50°C下攪拌反應3h，板框過濾得殼寡糖溶液，殼寡糖溶液中含有少量NH4C1、KH2P04、MgSO4和MnSO4物質，這些物質對植物生長無害而有益，這些物質不需要分離；
3、誘導黃瓜抗根結線蟲的製劑的製備取上述殼寡糖溶液O. 6L，與濃度為O. 25%的水楊酸鈉溶液O. 4L攪拌混合均勻，即得到誘導黃瓜抗根結線蟲的製劑。為了說明本發明的效果，並對黃瓜根結線蟲的誘抗效果進行了對照檢測
選擇河北科技師範學院生命科技學院農場根結線蟲發病嚴重的蔬菜溫室大棚，種植黃
瓜品種為大葉三(遼寧省新民市金明蔬菜種子站生產)。實驗採用隨機區組試驗，共設三個區組，每個區組設4個小區(處理)，每個小區的面積為20平方米。在黃瓜移栽7天後，將供試藥劑採用灌根處理的方法，試驗期間採用常規方法進行黃瓜管理。施藥後60天，挖出黃瓜的根，統計各處理各重複中各級(0-10級)病株數目，計算病情指數及防治效果，結果見下表。結果表明，使用本發明的製劑後對黃瓜上的根結線蟲有一定程度的誘抗效果，與空白對照相比能夠顯著降低根結線蟲的危害，防治效果與目前生產上常規藥劑阿維菌素相當。根結線蟲分級調查指標0級代表沒有根結；I級代表1-10%的根上有根結；2級代表11-20%的根上有根結；3級代表21-30%的根上有根結；4級代表31-40%的根上有根結；5級代表41-50%的根上有根結；6級代表51-60%的根上有根結；7級代表61-80%的根上有根結；8級代表71-80%的根上有根結；9級代表81-90%的根上有根結；10級代表91-100%的根上有根結。病情指數=IOOX Σ (各級病株數X各級代表值)/調查總株數X最高代表值； 誘抗效果=100%X (空白對照的病情指數-處理後的病情指數)/空白對照的病情指
數；
各處理及藥劑如下
處理I :不施任何藥劑(空白對照)
處理2 :本實施例的製劑I :500倍稀釋，每株用200ml ；
處理3 :本實施例的製劑I :1000倍稀釋，每株用200ml ；
處理4 :1. 8%阿維菌素乳油I 1000倍稀釋，每株用200ml ；處理I病情指數I防治效果(％)
處理I (空白對照)_92.7 + 3.1 —_
^Ell 2 (本實施例製劑 I :500)23. 4±4. 3 74. 8
3 (本實施例製劑 I :1000) 32. 3 ±2. 6 65. 2 M 4 (對照藥劑阿維菌素)|26·0±4·8 |71.9
注表中數值為各重複的平均值。
權利要求
1.一種誘導黃瓜抗根結線蟲的製劑，其特徵是由殼寡糖溶液和水楊酸鈉配製而成，其中殼寡糖和水楊酸鈉的重量比例為10 100 :1 10。
2.根據權利要求I所述的誘導黃瓜抗根結線蟲的製劑，其特徵是，其中，水楊酸鈉濃度為 O. 05% O. 1%。
3.一種用於權利要求I的製備方法，其製備方法是 (O殼聚糖酶發酵液的製備以下列成分及按重量百分比配製液體培養基殼聚糖0. 5%-2%、酵母提取物0. 01-0. 1%、NH4Cl O. 05-0. 2%、葡萄糖0. 05-0. 2%、KH2PO4 O.05-0. 2%、MgSO4 · 7H20 0. 05-0. 2%、MnSO4 :0. 05-0. 2%、其餘為水，pH 自然，121°C滅菌 30分鐘，按3%-10%接種量接種產殼聚糖酶的擬青黴屬真菌，在28°C條件下培養2天，板框過濾 發酵液，濾液為殼聚糖酶發酵液； (2)殼寡糖溶液的製備以1%_3%的冰乙酸溶液為溶劑，配製3%-8%的殼聚糖溶液100L,攪拌下加入殼聚糖酶發酵液1-4L，在40°C _60°C下攪拌反應2_5h，板框過濾得殼寡糖溶液； (3)取步驟(2)殼寡糖溶液O. 6-0. 8L，與濃度為O. 25%的水楊酸鈉溶液O. 2-0. 4L攪拌混合均勻，得到誘導黃瓜抗根結線蟲的製劑。
全文摘要
一種誘導黃瓜抗根結線蟲的製劑，其特徵是由殼寡糖溶液和水楊酸鈉配製而成，其中殼寡糖和水楊酸鈉的重量比例為10～1001～10。製備時以殼聚糖、酵母提取物、NH4Cl、葡萄糖、KH2PO4、MgSO4·7H2O、MnSO4、水為培養基，發酵培養能生產殼聚糖酶的真菌，製備含有殼聚糖酶的發酵液，用此發酵液酶解殼聚糖獲得殼寡糖溶液，再與水楊酸鈉配製而成。本發明的製劑用於防治黃瓜根結線蟲，防治效果可達50%-70%，同時還能促進黃瓜根的生長，對土壤的生態修復具有顯著的作用。
文檔編號A01N43/16GK102870780SQ20121035816
公開日2013年1月16日 申請日期2012年9月25日 優先權日2012年9月25日
發明者史鳳玉, 朱英波 申請人:河北科技師範學院