一種同時檢測卡馬西平和丙戊酸鈉的雙通道檢測卡的製作方法

2023-05-01 20:43:16

專利名稱：一種同時檢測卡馬西平和丙戊酸鈉的雙通道檢測卡的製作方法
技術領域：
本實用新型涉及一種檢測抗癲癇藥物血藥濃度的器具，特別是涉及一種同時檢測 卡馬西平和丙戊酸鈉的雙通道檢測卡，屬於抗癲癇藥物血藥濃度檢測技術領域。
背景技術：
卡馬西平(CBZ)為亞氨基二苯乙烯衍生物，化學結構與三環類抗抑鬱藥丙咪嗦相 似。1962年Bolm首次用於治療三叉神經痛，療效滿意，繼而用於治療癲癇等多種疾病。其 抗癲癇作用類似於苯妥英鈉，能增強細胞膜電位的穩定性，阻止腦部異常電位活動向周圍 腦組織擴散，因而阻止癲痛的發作。為廣譜抗癲癇藥，廣泛用於治療各型癲癇，尤其對癲癇 大發作、神經運動性發作療效較好，是目前治療神經運動性發作的首選藥物。卡馬西平口服 吸收慢且不完全，達峰時間2 8 h，血漿蛋白結合率約80%。常見的不良反應有眩暈、嗜睡 及皮疹等。卡馬西平達峰時間、峰值血藥濃度、消除半衰期的個體差異大，有效血藥濃度與中毒 濃度接近甚至重疊。因此，應及時監測其血藥濃度，力求個體化給藥，避免不良反應，以達安 全、合理用藥的目的。丙戊酸鈉是臨床常用的廣譜抗癲癇藥物，尤其對單純失神發作、全身性強直-陳 攣發作、肌陳攣發作療效顯著，對單純部分性發作、複雜部分性發作也有良好療效，有效血 藥濃度範圍為50-100 μ g/mL。但丙戊酸鈉體內過程和療效個體差異大，劑量與血藥濃度的 相關性不穩定，且血藥濃度過高易引起噁心、嘔吐及肝功能損害等不良反應，因而通過監測 血藥濃度來調整劑量，是確保療效和用藥安全的必要手段。測定體內抗癲癇藥物血藥濃度最常用的方法為螢光偏振免疫法，也有採用填充柱 氣相色譜法，前者需用專用的試劑盒，價格昂貴，也不能分離和排除丙戊酸代謝產物和內源 性雜質的幹擾，後者分離效果欠佳、靈敏度低，測定低濃度樣品誤差較大，影響結果的準確 性。而且這些方法普遍存在操作繁瑣，對實驗儀器設備要求高，需要專門技術人員操作等缺 點ο為此，本實用新型擬發明一種基於卡馬西平、丙戊酸鈉這些小分子物質與蛋白質 偶聯後從而具備抗原性的免疫學檢測方法，採取免疫學競爭法的原理，結合膠體金標記技 術和免疫層析法設計的一種快速檢測試劑，可快速特異地檢測血清中的卡馬西平和丙戊酸 鈉含量。根據檢測卡樣品測試線(T)和對照線(C)的有無來判定血清中的卡馬西平和丙戊 酸鈉含量。反應是利用小分子物質與蛋白質偶聯後具有抗原性而建立的一種檢測方法，具 有特異性強的優點，可避免其它檢測方法的假陽性導致的誤檢問題。同時檢測卡操作簡單 快速，無需特殊的儀器設備，結果準確，準確率大於95%。
發明內容本實用新型的目的在於提供一種能同時檢測卡馬西平和丙戊酸鈉的器具，克服現 有技術操作繁瑣、專業要求高的缺陷，用於檢測血藥濃度，保證用藥安全。本實用新型的技術方案一種同時檢測卡馬西平和丙戊酸鈉的檢測卡，在長條扁
3平薄殼狀的檢測卡外殼1中設置測試條2，檢測卡外殼表面有檢測窗孔3和加樣孔4，測試 條是由支承背板5上粘貼五種元件組成支承背板中部粘貼硝酸纖維素膜6，支承背板一端 部上疊置粘貼吸水膜10，另一端部上疊置粘貼樣品墊9，吸水膜內端與樣品墊內端各自分 別與硝酸纖維素膜一端搭接，在樣品墊與硝酸纖維素膜的搭接部，兩者之間夾置粘貼兩段 膠體金膜7、8，膠體金膜7、8依次是含抗卡馬西平及抗丙戊酸鈉單克隆抗體膠體金標記物 的玻璃纖維膜；硝酸纖維素膜上橫向有三條間隔開的顯示印跡帶一條是含卡馬西平蛋白 質偶聯物的檢測帶11，另一條是含丙戊酸鈉蛋白質偶聯物的檢測帶12，第三條是含抗兔抗 體或抗鼠抗體的質控帶13 ；測試條置入檢測卡外殼內，樣品墊正對加樣孔，硝酸纖維素膜 正對檢測窗孔。同時檢測卡馬西平和丙戊酸鈉的檢測卡的檢測方法，應用免疫學的方法直接檢測 樣品卡馬西平和丙戊酸鈉的含量；在患者連續服藥一周以後，於早晨服藥前抽取靜脈血2mL，3000r/min離心lOmin， 分離血清，立即處理或於-20°C下48h以內保存；反應的結果有以下5種情況檢測帶11、12和質控帶13同時顯現棕紅色印跡帶，表示被檢測樣品中卡馬西平和 丙戊酸鈉含量均低於一定值。檢測帶11、12不顯示顏色，只有質控帶13顯現棕紅色印跡，表明被檢測樣品中卡 馬西平和丙戊酸鈉含量均高於一定值。檢測帶11不顯示顏色，檢測帶12和質控帶13同時顯現棕紅色印跡，表明被檢測 樣品中卡馬西平高於一定值，而丙戊酸鈉低於一定值。檢測帶12不顯示顏色，檢測帶11和質控帶13同時顯現棕紅色印跡，表明被檢測 樣品中丙戊酸鈉高於一定值，而卡馬西平低於一定值。檢測帶11、12和質控帶13均不顯色，則表明檢測試條失效。本實用新型的優點是能同時檢測出患者血清樣品中的卡馬西平和丙戊酸鈉，易於 製備且節省檢測費用，使用方便，檢測快速，靈敏度高，結果準確。

圖1卡馬西平和丙戊酸鈉的雙通道檢測卡及測試條在外殼內的安置圖。1、外殼， 2、測試條，3、檢測窗孔，4、加樣孔。圖2測試條的硝酸纖維素膜上顯示印跡示意圖。6、硝酸纖維素膜，11、檢測帶(含 卡馬西平蛋白質偶聯物)，12、檢測帶(含丙戊酸鈉蛋白質偶聯物)，13、質控帶。圖3卡馬西平和丙戊酸鈉的雙通道檢測卡的檢測試條結構示意圖。5、支承背板， 6、硝酸纖維素膜，7、膠體金膜(含抗卡馬西平抗體膠體金標記物的玻璃纖維膜)，8、膠體金 膜(含抗丙戊酸鈉單克隆抗體膠體金標記物的玻璃纖維膜)，樣品墊9，吸水膜10。
具體實施方式
本實用新型結合具體實施例參見附圖進一步說明如下實施例1一種卡馬西平和丙戊酸鈉的雙通道檢測卡，它是在檢測卡外殼1中設置測試條2，檢測卡外殼1的結構及測試條2的設置參見附圖1和附圖3，檢測卡外殼1為長條扁平薄殼 狀殼體，長7cm，寬2cm，厚0. 5cm，薄殼壁厚0. Icm,由工程塑料製成。檢測卡外殼1由殼蓋 與殼座兩半聯接構成，在檢測卡外殼1殼蓋上有檢測窗孔3和加樣孔4。測試條2放置在檢 測卡外殼1的殼座內。測試條2是多層結構的窄條薄片，片長約6. 0cm，片寬約0. km，厚度小於2. 5mm。 測試條2是多層結構底層是支承背板5，為聚氯乙烯塑料薄片，厚約0. 5mm,長6. Ocm,寬 0. 4cm ；支承背板5中部疊置粘貼硝酸纖維素膜6，硝酸纖維素膜厚0. 5mm，長2_2. 5cm,寬 0. 4cm0硝酸纖維素膜6上有三條間隔開的橫向顯示印跡帶，參見附圖2，三條顯示印跡帶 中，一條是檢測帶11，含卡馬西平蛋白質偶聯物，另一條是檢測帶12，含丙戊酸鈉蛋白質偶 聯物，第三條是質控帶13，含抗鼠抗體。支承背板5 —端部上疊置粘貼吸水膜10，支承背板 5另一端部上疊置粘貼樣品墊9，吸水膜10內端與樣品墊9內端各自分別與硝酸纖維素膜6 一端搭接，在樣品墊9與硝酸纖維素膜6的搭接部，兩者之間夾置粘貼兩段膠體金膜7、8，膠 體金膜7是含抗卡馬西平抗體膠體金標記物的玻璃纖維膜，膠體金膜8是含抗丙戊酸鈉抗 體膠體金標記物的玻璃纖維膜。膠體金膜7和膠體金膜8各為厚0. 5-0. 8mm,長0. 5-0. 6cm, 寬 0. 4cmο 樣品墊 9 厚 0. 5-0. 8mm,長 2cm,寬 0. 4cm。吸水膜 10 厚 0. 5-0. 8mm,長 1. 6_2cm， 寬0. 4cm0膠體金膜7、8、樣品墊9及吸水膜10與硝酸纖維素膜搭接長度為0. 1-0. 2cm。吸 水膜10材料是吸水紙，樣品墊9材料是吸水玻璃纖維膜。測試條2置入外殼1內，樣品墊9正對加樣孔4，硝酸纖維素膜6正對檢測窗孔3。實施例2樣品的處理方法是在患者連續服藥一周以後，於早晨服藥前抽取靜脈血2mL，3000r/min離心lOmin， 分離血清，立即處理或於-20°C下48h以內保存；檢測卡的主要反應是免疫學的抗原和抗體反應，在硝酸纖維素膜上遷移的膠體金 標記的抗體，在測試帶上分別與含卡馬西平蛋白質偶聯物、丙戊酸鈉蛋白質偶聯物，以及質 控帶抗鼠抗體反應，形成棕紅色條帶。若樣品中有相應的待檢卡馬西平和丙戊酸鈉都高於 允許值，當樣品加入後即與相應的抗體發生反應，而不會與相應的檢測帶所含的卡馬西平 蛋白質偶聯物、丙戊酸鈉蛋白質偶聯物反應，從而不顯色。主要反應的結果有以下5種情 況1、檢測帶11、12和質控帶13同時顯現棕紅色印跡帶，表示被檢測樣品中卡馬西平 和丙戊酸鈉均低於一定值。2、檢測帶11、12不顯示顏色，只有質控帶13顯現棕紅色印跡，表明被檢測樣品中 卡馬西平和丙戊酸鈉均高於一定值。3、檢測帶11不顯示顏色，檢測帶12和質控帶13同時顯現棕紅色印跡，表明被檢 測樣品中卡馬西平高於一定值，而丙戊酸鈉低於一定值。4、檢測帶12不顯示顏色，檢測帶11和質控帶13同時顯現棕紅色印跡，表明被檢 測樣品中丙戊酸鈉高於一定值，而卡馬西平低於一定值。5、檢測帶11、12和質控帶13均不顯色，則表明檢測試條失效。
權利要求1. 一種同時檢測卡馬西平和丙戊酸鈉的檢測卡，其特徵在於在長條扁平薄殼狀的檢測 卡外殼(1)中設置測試條(2)，檢測卡外殼表面有檢測窗孔(3)和加樣孔(4);測試條是由支 承背板(5)上粘貼五種元件組成支承背板中部粘貼硝酸纖維素膜(6)，支承背板一端部上 疊置粘貼吸水膜(10)，另一端部上疊置粘貼樣品墊(9)，吸水膜內端與樣品墊內端各自分 別與硝酸纖維素膜一端搭接，在樣品墊與硝酸纖維素膜的搭接部，兩者之間夾置粘貼兩段 膠體金膜(7)、(8)，膠體金膜(7)是含抗卡馬西平單克隆抗體膠體金標記物的玻璃纖維膜， 膠體金膜(8)是含抗丙戊酸鈉單克隆抗體膠體金標記物的玻璃纖維膜；硝酸纖維素膜上橫 向有三條間隔開的顯示印跡帶一條是含卡馬西平蛋白質偶聯物的檢測帶(11)，另一條是 含丙戊酸鈉蛋白質偶聯物的檢測帶(12)，第三條是含抗鼠抗體或抗兔抗體的質控帶(13)； 測試條置入檢測卡外殼內，樣品墊正對加樣孔，硝酸纖維素膜正對檢測窗孔。
專利摘要一種同時檢測卡馬西平和丙戊酸鈉的雙通道檢測卡，屬於抗癲癇藥血藥濃度監測技術領域。該檢測卡外殼表面有檢測窗孔和加樣孔,殼內有測試條，測試條由支承背板中部粘貼硝酸纖維素膜，支承背板一端粘貼吸水膜，另一端粘貼樣品墊，兩者之間夾置粘貼兩段膠體金膜,膠體金膜分別是含抗卡馬西平和抗丙戊酸鈉單克隆抗體膠體金標記物的玻璃纖維膜；硝酸纖維素膜上橫向有三條間隔開的顯示印跡帶一條是含卡馬西平蛋白質偶聯物的檢測帶，另一條是含丙戊酸鈉蛋白質偶聯物的檢測帶，第三條是含抗兔抗體或抗鼠抗體的質控帶，樣品墊正對加樣孔，硝酸纖維素膜正對檢測窗孔。本檢測卡能同時檢測血清樣品中的兩種抗癲癇藥成分,節省檢測費用，使用方便，檢測快速，靈敏度高，結果準確。
文檔編號G01N33/558GK201917574SQ20112002622
公開日2011年8月3日 申請日期2011年1月27日 優先權日2011年1月27日
發明者吳文曄, 周堅, 熊曉芳 申請人:無錫安迪生物工程有限公司