用於口黏膜給藥的含水液體變態反應疫苗製劑的製作方法
2023-05-15 04:36:01 2
專利名稱：用於口黏膜給藥的含水液體變態反應疫苗製劑的製作方法
技術領域：
本發明涉及含水液體變態A^疫苗製劑及其口黏膜給藥的用途，該製劑包 含Blomia屬一個種或多個種的變應原提取物。
背景技術：
變態M是接受西方生活方式的國家的主a泉問題。而且，變應性疾病 10的流^亍4這些國家增加。雖然通常不認為變態M^^生^I疾病，但哞
喘每年引起了大量的死亡。在青少年中約3oy。的異常^e率，致使仮門的生活
質量、工作天數和薪7jc受到實質損失，^H吏該疾病屬於西方世界主^tt問題 中的一類。
變態M是一種複雜的疾病。許多因素可引^t敏事件。這些因素中有還 15未充分了解的幾個基因之間的相互作用確定的^^敏感性。另一重要因素是一 定閾值^Ji的變應原暴S^觸。^!^tii程中可能重要的;L^沐免因素包括汙 染、童年感染、寄生蟲感染和腸道孩植物等等。 一旦^ : >已建立變應 性免戱答，那麼只要少量^原存在就肯沐效轉變為症狀。
變應性疾病的自然病程通常伴隨著兩個水平的加重。第一，症#疾病嚴 20重'lti^L以及疾病選艮，例如M草熱t艮到哞喘。
第二，經常發生的刺激變應原的播散導致變應性多重反應。慢性炎症導致 黏膜防雄—幾制"t^減弱，從而導致粘J^^^JL^非特異^'J^tSji^員傷。
在我們所呼吸空氣中的一定大小的最li^險中可以找到最重要的變應原 來源。逸些^l原來源非常絲，包括草;^p房塵蟎類，它們一^導致了所
25 有變態反應的大約50%。
變態M，即i型超n^，是由對外源非致病物質的不適當的免^ji
引起的。變態A^的重要臨床症狀包M喘、枯草熱、溼)^胃腸道^L這 種變應'li^^i2til，在接觸刺^t^原20^4中內ii^高峰。而且，IL^性 M^l特異f生的，含5U:特定^HW特定變應原致敏，而該個體不一定對已知 30可引起變應性疾病的其它物質顯示變應性反應。變應'll^型以把器官黏膜的顯
著炎症，和循環中以^ U巴大細^嗜鹼細胞表面上變應原特異性IgE類抗體的 存在為特徵。
變應性攻擊由外源變應原與變應原特異IgE抗體反應引發，這時^s^肥 大細#嗜鹼細#面高親和力IgE特異受體結合。肥大細#嗜鹼細胞包含 5預先形成的介質，即在兩個或多個結M體的IgE ，交聯的情況下被#^的 糹鵬、>^蛋白#其它物質。 一個變應原分子同時結合導致IgE抗體^A交聯。 肥大細M面受體結合的IgE的交聯，也導致負iNl引嗜酸性細胞、^原特 異ltT-細feL其它類型細艇^L'M^位點的信號^^。這些細胞與變 應原、IgE ;SJt^細船目互作用，導致接觸變應原後12-24小時症狀重新^^X後
io 期M)。
變應性疾病的處理包旨斷和治療，所必臺療包括預防性治療。變態A^ 診斷與變應原特異IgE的證實和^I原來源的鑑定相關。在多數情況下，詳細 的fW主病儀以診斷變態A^並鑑^'J激變應原來源物質。然而，最經常的， 診斷由^ li^測，例如^^單刺 、 jfa^檢測或'^Ul檢測來支持。
15 治療選#^主#為三類。第一^選擇是避免或者減少暴i^觸變應原。然
而，儘管變應原狄 而易見的，例如食物變應原的情況，狄可負暖困難 或昂貴的，如同對於房塵蟎類變應原。第UJ:廣泛使用的治療選擇是^^ 類似^i誠藥和類固醇的經^a狀治療藥物。症狀治療藥物^^有效；然而，
它們既不能^疾病的天然病因，也不f誠制疾病的擴散。第^治療選擇是
20特異性變態a疫苗，所述疫苗在大多數清況下能減少或減輕由所討論的U 原引起的^性症狀。
常,異1±變態^疫苗接種是對^^性疾病的病因治療。它能幹^M
免疫機制，導致患者免疫狀態辦改善。因此，與症狀藥物治療相比，特務性 變態A^疫苗糾的獄絲可延伸超出治療瓶 一些被治療的患^ifc臺愈，
25另外大多數患者會經歷疾病嚴重'1^^症狀減輕，或者至少可PiUl疾病惡化。因
敏的風M預防絲。
成功的變態A^疫苗，的潛在免疫機理的細節還未知。已知特異性免疫 應答，例如M定病原抗體的產生，是適應性免疫應答。該反應能與天然免疫
30應斜目區分，所iiA然免觸答是對病原體的非特異性A^。變態A^疫苗應
該乾向適應性免疫應答，所^疫應答包^^特異1"生細#分子，例如T-細 1&^生成私*的B-細胞。B-細a沒有相應特異T-細胞的輔助下將不肯誠熟為 M生成細胞。^AJi性免j^答刺激的T-細lfei要是Th2型的。iM/Thl 和Th2細胞間新平^i建^t特異Ii變態反應疫苗^t免疫才;Ug是有益和重要 5 的。該平衡是由Th2細胞的減少所引起，狄由Th2細髒Thl細胞的轉變所 引起，或者是由Thl細胞的上調所引起，絲在^i義。最近，iM;調節性T-細 胞對變態反應疫苗接種的枳理是重要的。4娥該模型，調節性T-細胞，即Th3 或Trl細胞，下調了相應:^^特異性的Thl和Th2細胞。雖然這些才爐不確定， ^if常認為活性疫苗必須有刺艦應原特異性T-細胞，優選TH1細胞的能力。
io 特異性變態A^疫苗^t雖ttM點^^殳有廣泛使用，主要在於兩個原
因。 一個原因是傳^ft禾l^的不方便性，所述，考I^包括幾個月的重複接 種，特別是注射。另一個更重要的原因A^變應性副反應的風險。用單個或 幾個高劑量免疫可有效實;^4十對感染因子的常艦苗接種。然而，該策略不能 用於變態A^疫苗，因為病理性免C^答已^ii行。
15 因此，常織異H變態^L疫苗糾iMJ延長時間期限的多狄下免tt
進行。該過程分為兩階段，增加劑量階,維持階敬。在增加劑量階段，應用 增加劑量，典型艦16周，以微劑量開始。當ii^絲的^^劑量時，將該劑 量在,階段4^1，通常每6周注射一次。每次注射^，由於存^Ait^: 副反應的風險，因此必須醫療看護患者30分鐘，所述副反應原則上可育^^生
20命，歸這種情況非常少見。另外，診所應該西漆以支持緊急處理。毫琉問， 基於不同給藥途徑的疫苗將消除或制氐目前基於皮下的疫苗內在的變應性副反 應的風險，以及將有助於iir泛的4^1 ，甚至可能家庭自，。
gfc^特異性變態^接種疫苗的嘗試，已經進行了 30多年，包括MM 的方法。膽方'減過#^ IgE ^，把向^原本身。其它方法則乾向給藥
25 途徑。
如上所述，房塵蟎類A^重要的室內變應原來源之一，其引發^性疾病 的作用也已經被充分了解。也發現除兩種主要的房塵蟎種類屋塵蟎
(Dermatophagoides pteronyssinus ) ^M^塵蟎(De函tophagoides farinae) "卜，Blomia屬蟎種類在世界熱帶和亞熱帶地區致敏變態反應患者中也同等重
30 要。
熱帶無;MI (Blomia tropicalis) Glycyphagida科的儲藏室蟎，
而上述提到的兩種房塵蟎屬於房塵蟎(Pyroglyphidae)科。
熱帶無爪蟎(Blomia tropicalis )的變應原性研究顯示，熱帶無^ (Blomia tropicalis )扇Ji^過20種不同的變應原，而JLtMC現熱帶無/M^ 5( Blomia tropicalis ) 與兩種房塵蟎屋塵蟎(Dermatophagoides pteronyssinus )和粉塵蟎(Dermatophagoides farinae)間的交XAJl非常 有限，參見Arlian et al. J Allergy Clin Immunol, Volume 91， No. 5， 1042 -1050 。
儘管在世界熱帶和亞熱帶地區患者對Blomia屬蟎種致樹目當"fd4,但幾乎 i o沒有出M獻記載B1 om i a屬蟎種變應原4C用於特異1±變態>^疫苗##的 應用。
Labrada et al， Vaccine 24S2 (2006 ) S2/36-S2/37 ^i這^"篇i己^4^ ,應用的文獻，包括熱帶無爪蟎(Blomia tropicalis )用於常規皮下免疫治 療。
15 Satoetal， Clin. Exp. Allergy 2002; 32: 1667—1674記載了小狄疫，
該小鼠免疫是通過皮下注射包含在含明礬的製劑中的熱帶無爪蟎(Blomia tropicalis )提J^4^, #^著給小鼠飼《^熱帶無輛(Blomia tropicalis ) 提取物，所述祠^A在皮下免疫後第6天、第7 #第8天用管飼餵小鼠。在 這些實驗中發現，先前致敏動物的口服耐受方案能下調IgE反應，it^明該免
20疫途徑可用於變態反應治療。
現已發現包含Blomia種的^il原提,和蛋白質穩定劑的含7j^t體製劑， 通過口黏膜途徑以滴劑方式將該製劑給予致敏患者可用於對Blomia種產生耐受 性。
據發明人i斤知，包含Blomia種的變應原提,和蛋白質穩定劑的含7j^t體 25製劑及該製劑口黏膜給藥的應用，i^JM殳有在文獻中B^過。
本發明含7K液體製劑與已知的熱帶無爪蟎(Blomia tr叩icalis )變應原提 糊製劑和給藥途^^目比，提供了絲注射的可能性，提供了更容易得多的給 藥方式，所i^藥可由患者在家裡進行。簡單的給藥方式H^t加了患者的治療 糾性。
發明M
因此，本發明涉及用於口黏膜給藥的包含Blomia屬一個種或多個種的變應 原提,的在舍蛋白質穩定劑的水溶M懸浮液中的^7JC液M苗製劑。
本發明也涉及Blomia屬一個種或多個種的變應原提,和舍蛋白質穩定 5劑的水溶液或懸浮液用於製備通過口黏膜給藥以在個本中預防或治療變態>^ 的^^水液體疫苗製劑的應用。
oH^卜，本發明涉及包括含有上述含7jc液體製劑的一la小Wsl^的藥盒， 這樣的小M^a，以;5L預防或治療變態反應的方法。
io 定義
術語"口黏膜給藥"是指給藥途徑，其中劑型 :在舌下或口腔的任何其 它部位，可允許活性成分接觸患者的口腔或咽的黏膜，以獲得活性成分的局部 或系^^t果。口黏膜給藥途徑的實例有舌下給藥。
術語"舌下給藥"^i旨給藥途徑，其中劑型 在舌下，以獲得活性成分 15 的局部或系皿果。
術浯"維持劑量"是指繼續治療中使用的劑量。 ^續治療期間，典型#整個治療過程中^^一個相同劑量。
曰^^劑 指在^#>'臺療期間的日劑量。
術浯"無增加劑量"是指4一^藥到以後給藥#^^!^#劑量。
20 術語"劑量增加"是指4M蹄增加的劑量，直至&'J^r劑量。
術語"^H^t^苗製劑"是指含水的^f可液^MU旨製劑，包括溶#
懸浮液。
術語"治療"是指部分或*治癒、減輕症城抑制症狀的成因。術語'預
防"^i旨^^可類型的預防治療。
25 用在本文中的術語"變應原提取物"是指通過提取生物變應原來源材料所
獲取的提l^,在"Allergenic extracts", H. Ipsen et al， chapter 20 in Allergy, principle and practise (Ed. S. Manning) 1993， Mosby-Year Book, St. Louis中有全面記栽。這種提Wb可通ii^"7Ki^^H^^ft7K^取，然後用類 似過濾的純化步驟以獲^^液即變應原提取物而獲得。接著可進一步純化變應 30原提取物和/或iM)勤以冷凍乾燥的步^t理變應原提取物，以差本去除所有水
分。通常，變應原提糊包錄白質和其它襯的;;^^。
術語"主要變應原"基於在一群對特異性變應原來源/提絲過敏的患者內， 對特定變應原致敏的^f亍所進行的統計分析。通常，只有那些來自變應原來源
中的可引勤50%患者致敏的變應原才稱為"主要變應原"。如果至少25%的患 5者顯示出強IgE結合(打*級3)瓦色少50%的患者顯示出中度結合(打分 等級2)，那麼變應原通常^f皮歸為主要變應原，所^合可通過CRIE(交狄 射免疫電泳)測定(CRIE強結合，即1 X省線膠片上可見IgE結合；CRIE 中度結合，即3A^結合；CRIE弱結合，即10A^結合)。所有其它M原， 則稱為"次要變應原"。 10術語"對象"^i旨AiL動物。
無ife^時^^發明製劑中主要變應原的^i:或M時，都是指來源於一
個蟎種的單一主要^I原的^i或M。 發明詳述
15 本發明涉;ML含蛋白質穩定劑的水皿或懸浮液中包含Blomia屬一個種
或多個種的變應原^4取物的用於口黏膜給藥的^^水液M苗製劑。
Blomia屬的種包括"1^R艮於熱帶無yMI (Blomia tropicalis)，弗^ ;fJ^(Blomia freemani)， Blomia kulagini以及Blomia tjibodas 。
包含^M^發明製劑中的變應原提,,也可以是不同蟎種的提,';^^的。 20 本發明一個優選的具體實施方式
中，製劑包含熱帶無爪蟎(Blomia
tropicalis)和/或弗^iL爪蟎(Blomia free咖ni)的變應原提取物。
包含^M^發明製劑中的^原提,可以通過如下^^C^得。
i^^,的原材料可通ii^合it^養J^^適^^下培^^來製備。培養 蟎的方法在文獻中有記載，參見例如EP 1 236 394， T. Batard et al (Int Arch 25 Allergy Immunol 2006; 140:295-305)， F. C. Yi et al (Asian Pacific J. of Allergy and Immunology (1999) 17:189-194)和J. Miyamoto (Japan, J. Exp. Med. Vol, 45, 2. p. 133-138， 1975)。
當ii^ij最佳生長時，收穫殺滅蟎蟲，例如進行冷凍。
通過物理手段，例如篩分或在不同溶液中浮選，將i^^排洩物與培養基
30 分離。
然後在pH 5-9的水溶液(例如鹽水溶液，磷酸鹽緩衝鹽水溶液， 0. 05-0.125mol/L^IL銨溶液，等等)中^N^^應原原材料(i^p排洩 物)。^HlX藝，^i原蛋白質ii^在上清液中。
上清液經玻璃濾器或濾膜過濾而澄清。接著，用水或緩衝液過膜透濾 5(diafilter)含變應原的溶液，由此Ail:液中除去鹽和小分子。
接著將^^,進行無菌過濾。無菌過濾後，加入蛋白質穩定劑，例如無菌 甘油，將溶液穩定，可選棒1^TP入防腐劑。
在變應原提絲領域，沒有國際上/^H人的標準方法，賄多種不同的提取 物強度單位即生物效^#在。所用方法和所用4^i通常可測量主要變應原^f: 10 和生物效力，即生物效能。
主要變應原的量可由多種已知的合it^r法例如ELISA或RAST抑制測定。
主要變應原A^自熱帶無，(Blomia tropicalis)的Blo t 5，也可以 是Blomia屬其它種的等同主委變應原。可用合適的:^ii過ELISA適當測量Bl0 t 5和其它主要變應原的^。 15 ^j^^發明一^^的實;^r案中，主要變應原是Blo t 5。
給定提糊的生物效能，即體內^I原活性，絲"fi午多因素，其中最重 要的是提取物中主要U原的含量，該^i:隨著生物來源材料的^^而變化。
一批的生物效能不同於另一批，因jth^ii^S(o上所述的蟎原料提取後，調 整^C^的生物效^it常^:必要的。 20 根據生物效*嫩測結#主要變應原含量，通it^入無菌7K或緩衝液以及
可i^4包含防腐劑的無菌蛋白質《i^:劑，調整提:^^L
例如可以通過HEP (糹1^^價效能)測量^^^/的生物效能，其基於皿 單刺試驗，而且,A^義為產生大小相當於1 mg/ml組胺產生的風團的提取物濃 度。其它本領域已知的生物效負嫩測方法也可以使用，參見例如W0 04/047794 25第18-21頁所記栽的^t測量和控制生物效能的方法。
才M^本發明的一個具體實施方式
，製劑中主要變應原的濃度在0.05-50 jug/ml之間，0.5-25 yg/ml之間，更^J^2.5-10 pg/ml之間，最 M約5 jug/ml。
##本發明的另一*實施方式，製劑中主要變應原的濃度在0.025-25 30 pg/ml之間，>^ii^ 0. 25-12. 5 pg/ml之間，更^f^^ 1.25-5 ng/ml之間，
進一步艦約2.5 |ng/ml。
最艦製劑中的主要變應原濃度在0.2-10 jag/ml之間，更^it^ 1-5 lig/ml之間，最^i^E2-5 pg/ml之間。
主要^原的日劑量在0.01-10 jug之間，^ffcit^ 0.1-5 pg之間，更優 5 #0.08-4 jag之間，更^ffei^0.4-2 jag之間，更"tolfe 0.5-2 pg之間， 進一步 在0.8-2 jiig之間，最優選ljug，其中所述日劑量可以是日維持劑 量。
在一個M實施方式中，主要變應原的日劑量在0.01-10 Mg之間，tt 在0.1-5 Mg之間，更^^0.5-2 iag之間，最艦lpg,其中所述日劑量 10可以是日維持劑量。
在另一異體實M式中，主要變應原的日劑量在0.08-4 pg之間，更 在0.4-2 yg之間，進一步>^^0.8-2 jug之間，最絲lMg,其中所述日 劑量可以是日維持劑量。
在又一務體實施方式中，主要變應原的日劑量在0.04-2 ng之間，更to 15在0.2-l pg之間，進一步> ^0.4-1 jag之間，最她l)ig，其中所述曰 劑量可以是日維持劑量。
在一個蔣實財式中，日劑量是5滴本發明製劑，其中所述製劑主要變 應原^1在0.05—50 yg/ml之間，^ffci^ 0.5-25 pg/ml之間，進一步^f^jt 2. 5-10 jig/ml之間，或者是與所述5滴含有相同量主要^原的^f可其它滴數 20的本發明製劑。適宜地，所述5滴的日劑量是日維持劑量。
才娥本發明的另一脅實財式，曰劑量是10滴本發明製劑，其中所述制 劑主要^原^1在0. 025-25 yg/ml之間，0.25-12. 5 jig/ml之間， i^一步^f^在1. 25-5 lig/ml之間，或者是與所述10滴含有相同量主要變應原 的4^f可其它滴數的本發明製劑。適宜地，所述10滴的日劑量是日維持劑量。 25合適的日劑量是10滴主要^I原^1在0. 2-10 n g/ml之間， 4 1-5 Mg/ml之間，進一步艦在2-5 ng/ml之間的本發明的水溶絲懸浮液，或者 是與所述10滴含有相同量主要變應原的《i^其它滴數的本發明的7j^^懸浮 l適宜地，所述10滴的日劑量是日維持劑量。 5滴^H為0， 2 ml， 10滴^f^R為0. 4 ml。 30在一個M實施方式中，本發明含水液體製劑的日維持劑量是10滴(約
0.4 ml),總共包含ljag主要^i原。
在另一糾實施方式中，本發明含7jc^體製劑的日^#劑量是5滴(約0. 2 ml)，總共包含ljLig主要^^原。
本發明的液體疫苗製劑包含蛋白質穩定劑，還可包含其它適合該製劑類型 5的ji^形劑。
這種賦形劑是^^域技^A員;C^斤周知的，包,別^^劑，浮W匕劑，溼 潤劑，增塑劑，著色劑，芳射'j，》耕，防腐劑，粘度調射'J，緩衝劑，pH調 節劑，滲妙調節劑，黏膜粘附劑，等等。
本發明的製劑包舍蛋白質穩定劑，以增加皿或懸浮液的穩定性。 io 蛋白質穩定劑的實例有多糖一一例如蔗#務藻糖，一一例如賴氨
酸^"氨酸，聚乙二醇、醇和多元醇一一例:W"露醇、"^油和乙二醇。
蛋白質穩定劑她以20%-80% (v/v )的量，更她30% (v/v )-70% (v/v) 的量，進一步她40% (v/v)-60% (v/v)的量，更她40% v/v-55% v/v 的量，最to50。/。 v/v的量存在。 15 4^發明的^^糾實施方式中，蛋白質穩定劑是"^由。
^E^， ^"發明的7^^包含40-55%v/v的甘油，更to包含50%v/v 的甘油。
例如，^^本發明含水液體製劑的特異性變態A^疫苗樹可以由製劑每 日給藥組成。給予的治療(累積)維持劑量，^it^下治療的維^^劑ii午多倍。 20雖然劑量高，但口黏膜給藥不產生或僅產生輕微的副作用，主要4^L形式為口 腔癢，有時是喊和耳朵絲。
本發明製劑的給藥可通過將疫苗製劑置於舌下進行，合適地，以滴劑形式 給藥，4吏其在該處##短時間，例如30-300秒，優選45-240秒，更M 60-180 秋更m^少2^^t，最^^少3^lt，或者直到劑量完全被吸札 25 可^J I包括一^NM量增加期的劑量給予方案給予本發明的含7K^體變態反
應疫苗製劑，劑量增加^^型地是10-30天每A^藥，其中劑量，上升到維 持劑量水平，接著^^#期，在該期間患者^^#劑量。
當增加劑量進^ff^過30天時，給予含有增;^J:變應原提取物的日劑量30 天。可選擇地，可給予提,量增加的劑量的製劑15天，l天2次。 30可選擇地，當上述彬iJ的副作用例如^NL患者絲時，治療可以就增 加劑量開始，其中患者以月^I維持劑量開始。
在,階段，適當應用包括每日施用疫苗的疫苗，方案。^M^發明另一
具體實施方式
中，疫苗接種方案包括每隔一天、每隔兩天、或每隔三A^予疫 苗。M地，維持劑量每^予一次，或一周給予三次。在一個
具體實施例方式
5中，無論是每A^予，還是每隔一天、每隔兩天、每隔三^一周三次給予劑
量，"平均日劑量"^_相同的。
特異法變態反應疫苗，包M予疫苗4周以上，優選8周以上，更M 12周以上，更優選16周以上，更M20周以上，更優逸24周以上，更to 30周以上，更優選36周以上，以^S產^^^年以JiiL者超出至症狀消失或明顯
io 減少。
給藥時間段^i^續的時間段。
可選糾，給藥時間 _被一個或多個非給藥時間段間隔的非錢時間段。 ^fti^，非給藥(總)時間短於給藥(總)時間。 疫苗可以是單劑量疫苗。
15 因此，4W—個雞實施方式，本發明涉及包括一組含上述含7j^t體製劑
的小M^的藥盒。
在一個M實施方式中，藥盒包^-組小WL^，其中每小M^^含
有日維持劑量的主要絲原,其中所述日劑量在O. 01-10 ng之間，^i^0. l-5 pg之間，^^40. 08-4 jig之間，更^(fe^ 0,4-2 yg之間，^^"^i^ 0,5-2 20 ing之間，進一步更^i4^ 0.8-2 "g之間，最她l jug。
在一個M實施方式中，藥盒包^-"組小M^，其中每小M^L含
有日,劑量的主要^原，其中所iii要^原的日^#劑量在0. 01-10 m g 之間，>ffc^0.1-5 ng之間，更^i/M.5-2 iag之間，最她l "g。
在一個M實施方式中，藥盒包^-"組小^il^,其中每小M^L含 25有日維持劑量的主要嫁原，其中所iii要變應原的日維持劑量在0.08-4 iag 之間，更tt^ 0.4-2 iig之間，進一步更tt^ 0.8-2 iag之間，最絲1 Pg。
在一個M實施方式中，藥盒包括一組小絲^L，其中每小M^L含 有日^#劑量的主要變應原，其中所ii^要^原的日維持劑量在0.04-2 Mg 30之間，更^i^t 0.2-1 jag之間，進一步更^i^ 0.4-1 iag之間，最絲1
^ii一步的實^T式中，每小賊^包含5滴本發明製劑，其中所述制 劑的主要變應原濃度在0.05-50 jng/ml之間，她在O. 5-25 ng/ml之間，進 一步 ^ 2. 5-10 y g/ml之間，或者包含與所述5滴含有相同量主要^原 5的^"f^T其它滴數的^^發明製劑。
^ii一步的實施方式中，每小 1$^包含10滴本發明的水i^t或懸浮 液，其中所it7j^i^絲懸浮液的主要變應原濃度在0. 025-25 jag/ml之間，優 絲0.25-12. 5 jjg/ml之間，進一步^^i^ 1. 25-5 jig/ml之間，或者包含與
所述10滴含有相同量主要絲原的^f可其它滴數的本發明7JC^絲懸浮液。 10 ^ii—步的實施方式中，每小Mr^L包含10滴本發明的7]<皿或懸浮
液，其中所ii7X^液或懸浮液的主要變應原濃度在0.2-10 jiig/ml之間，m
在l-5 Mg/ml之間，更艦在2-5 ng/ml之間，或者包含與所述10滴含有相
同量主要變應原的^f^T其它滴數的^^發明7j^y^懸浮液。
在另一M實施方式中，藥盒包括一組小絲#,其中每小MM包 15含日劑量的變應原，所述日劑量低於主要變應原的日維持劑量。所述藥盒用於
劑辨加階段。
因此，^jiii一步的實施方式中，藥盒包括包^"個或多個小M^的一 組小M^，該組小M^包^:
(a) —個或多個包含1/10日維持劑量主要變應原的小 1安瓿， 一個或 20多個包含1/100日維持劑量主要變應原的小瓶或"^，和一個或多個包含
1/1000日維持劑量主要變應原的小M^，或者
(b) —個或多個包含1/5日維持劑量主要變應原的小M姊， 一個或多 個包含1/25日維持劑量主要變應原的小M^，和一個或多個包含1/125日 維持劑量主要^原的小M^。
25 ^ii—步的實財案中，藥盒中的每個小M^L包含^^本發明的製劑，
其中主要變應原的^1^ 0.05 -50 pg/ml，0.5-25 pg/ml, 2.5-10 Mg/ml。
^i一步的實;a^r^中，藥盒中的每個小絲魏包含才娥本發明的製劑， 其中主要變應原的^1^ 0.025 -25 ng/ml，她O. 25 -12. 5 |ag/ml，或更優 30 選1.25-5 ;ag/ml。^ii一步的實施方案中，藥盒中的每個小賊姊包含才娥本發明的製劑， 其中主要變應原的^1^ 0.2-10 jLig/ml, to 1-5 ng/ml，更M2-5 Mg/ml。
在另一個實施方案中，藥盒包括一組小M^L，其中每個小M安瓿包 5含多個日劑量，其中每個劑量中的主要變應原的量低於主要變應原的日維持劑
量。所述藥^r用於劑量增加階段。
因此，在進一步的實施方式中，所述藥盒包括
(a) —個或多個包^"個或多個劑量的小M安瓿，其中每個劑量包含 1/10日維持劑量的主要變應原； 一個或多個包^-個或多個劑量的小^il^，
0其中每^NH量包含1/100日維持劑量的主要變應原；和一個或多個包t個或 多M'J量的小Mr^，其中每個劑量包含1/1000日維持劑量的主要變應原， 或者
(b) —個或多個包^-個或多個劑量的小Mr^，其中每個劑量包含 1/5日維持劑量的主要^I原； 一個或多個包^-個或多個劑量的小絲姊，
5其中每^']量包含1/25日維持劑量的主要^I原；和一個或多個包—個或多 個劑量的小M^，其中每個劑量包含1/125日維持劑量的主要變應原
主要變應原的日維持劑量，^地，在0.01-10 iig之間，^il^ 0.1-5 Mg之間，更她在O. 08-4 pg之間，更"ifc^ 0.4-2 iig之間，更艦在0.5-2 jug之間，進一步更>^^0.8-2 jLig之間，最她lpg。 o在一個脅實施方式中，主要^原的日^#劑量在0.01-10 Mg之間， 0.1-5 yg之間，更>^4^0.5-2 pg之間，最絲l"g。 在一個M實施方式中，主要^原的日維持劑量在0.08-4 jLig之間，更 ^L^0.4-2 jag之間，進一步^i^0.8-2 jng之間，最她ljig。
^ii一步的實施方式中，主要變應原的日維持劑量在0.04-2 jLig之間，更 5 ^ii^0.2-l iig之間，進一步^i^0.4-l pg之間，最艦lpg。
如上所述，根據本發明使用的提取物在一個實施方案中是熱帶無爪蟎 (Blomia tropicalis )提,並JL^要^^原是Bl0 t 5。
本發明也涉及包含在上述藥盒中的照這樣的^^T單個小M^。
o 實施例1
提膽製備
將原料(包括糞^^粒的純4彌組分)用pH 6. 5 ( ± 0. 5 ) 10% (w/v)的 辨^^L緩衝^^城，2—81C下餅90土15^I中。
然後將提糊在2-8。C，在約14， OOOg下離心55 ± 5 ^4中(^K 1000ml以 5 上)或在約20,000g下離心30土5^f ( JU000ml以下)。接著，將提, 用玻璃纖維濾器過濾或0. 5 jam濾膜i^慮^^清。
如果必要，檢測賴整pH至6. 5 土 0. 5。
接著通it^) pH 6. 5 ± 0. 5的無菌等^^ik緩沖^b^濾通itlHt為5 KD 的膜透濾提靴 i 0 5倍提^t^P、的^ilL緩衝、^J於透濾it^呈。
;f^r測pH JU口果必^"調整pH至6. 5 ± 0. 5後，^1膽通過0. 2 y m濾-^i^ 續2次it 慮除菌。該無菌過濾工藝在無菌區進行。
提，樣品^^Jt)慮前,以檢測生物效能，^1^￡±>慮前後，通ii^ 泡點測 查濾膜的完整性。 15 無菌過濾後，加入必要量的1. 02%的無菌甘油-苯酚溶液至終濃度50%
(v/v),以將絲穩定。 !^^^羊品以測生物效能。
辦'j楊儲存在2-8TC，直JJ^得活性分析結果。
才娥結果，如果必要，將提絲用^i:的pH6.5無菌等^^L緩衝齡 20 1. 02 %的無菌^^由-^S^整至1 HEP的終M。
還測量主要^原的^J:。
^，將皿以"^2ml的^P"填^JX菌I型玻m。 #<^糸汰大小， ^ I合適的裝填系統。
接著^W塞子SJi並用螺紋帽密封。
25
實施例2
用於增加劑量的小 1^的製備
將實施例1獲得的變應原提糊進一步用溶液稀釋以獲#^組小瓶，所述 溶液包*油(0. 5 ml/ml),氯化鈉(9 mg/ml )， ， ( 3 mg/ml)和水，所述 30 —組小瓶包括
每小瓶含1/5維持劑量的一個或多個小瓶(1 )， 每小瓶含1/25維持劑量的一個或多個小瓶(2 )， 每小瓶含1/125 ^#劑量的一個或多個小瓶(3), 以及可艦，
每小瓶含1/625維持劑量的一個或多個小瓶(4 )。
維持劑量合it^為1 jug主要^原，#^含有製劑0. 2 ml。
可選擇地，將實施例1獲得的變應原提,進一步用溶液稀釋以獲t組 小瓶，所體液包^^由(0. 5 ml/ml),氯4， ( 9 mg/ml )，錄(3 mg/ml) 和水，所述一組小瓶包掩
每小瓶含1/10絲劑量的一個或多個小瓶(1),
每小瓶含1/100維持劑量的一個或多個小瓶(2 )，
每小瓶含1/1000 ^#劑量的一個或多個小瓶(3 )，
以及可艦，
每小瓶含1/10000維持劑量的一個或多個小瓶(4 )。 ,劑量合it^為1 ug主要^I原，#^含有製劑0. 4 ml。
權利要求
1.在包含蛋白質穩定劑的水溶液或懸浮液中包含Blomia屬一個種或多個種的變應原提取物的含水液體疫苗製劑。
2、權利要求1的疫苗製劑，包含熱帶無/fJ^ (Blomia tropicalis )和/或弗^iUM^(Blomia freemani) ^原提^ 。
3、 權利要求1-2任一項的疫苗製劑，其中製劑中主要變應原的濃度為 0. 2-10pg/ml，艦l-5ng/ml，更她2-5pg/ml。
4、 ^U'J要求1-3^-項的疫苗製劑，其中主要變應原的日劑量為O. Ol-lO io jag， /f^0. l-5pg，更^i^0. 5-2jig。
5、 權利要求1-M—項的疫苗製劑，其中日劑量是10滴主要^I原狄 為0.2-10 jjg/ml， 為1-5 jug/ml，更^^i^; 2-5 ju g/ml的7jcigl^懸浮 液，或者是與所述IO滴含有相同量主要變應原的任何其它滴數的7jc^:液或懸浮 液。15
6、權矛澳求3-5 ^-"項的疫苗製劑，其中主要變應原是來自熱帶無貞 (Blomia tropicalis)的Blo t 5，或者M自Blomia屬其它種的等同主要 ^原。
7、 ^U']要求l-6^f—項的疫苗製劑，其中蛋白質穩定劑選自由多糖，例如 蔗#脊藻糖；^t^酸，例如賴^^酸^"^j睃；聚乙二醇、醇和多元醇，例如20 甘油和乙二醇組成的組。
8、 ^f，J要求7的疫苗製劑，其中蛋白質穩定劑是甘油。
9、 jM'J^求8的疫苗製劑，其中水M包含40-55% v/v的甘油， 50% v/v的賴。
10、 Blomia屬一個種或多個種的變應原提,在製備通過口黏膜給藥預防 25或治療個本變態反應的含7k液體疫苗製劑中的應用，所述製劑包含在含蛋白質穩定劑的水i^液或懸浮液中的所述變應原"^,。
11、 WJ要求10的應用，其中所述一種或多種^i原提^fcL熱帶無;M^ (Blomia tropicalis)變應原提取物和/或弗^^爪媒(Blomia freemani)^i原提絲。30
12、積為洪求10-11 ^""項的應用，其中製劑中主要變應原M為0. 2-10 jag/ml， ^il為1-5 |ig/ml， ^^i^為2—5 pg/ml。
13、 ；M'J^求10-12 4^-項的應用，其中主要變應原的日劑量為0.01-10 ^ti^0.1-5iJg,更^fei^ 0. 5-2/i g。
14、 權矛溪求10-13 <—項的應用，其中日維持劑量是10滴主要變應原濃 5 ^0，2-10 Mg/ml，艦為l-5 ]Lig/ml，更艦為2-5 jig/ml的;^i^懸浮液，或者是與所述IO滴含有相同量主要變應原的任何其它滴數的7JCJlL液或懸 浮液。
15、 ；M'j要求10-"的應用，其中主要變應原是來自熱帶無爪蟎(Blomia tropicalis)的Blo t 5,或者是來自Blomia屬其它種的等同主要變應原。10
16、前ii^禾'J^求10-15 ^-項的應用，其中口黏膜給藥是舌下給藥。
17、 前i^5U'l^求10-16 4i-項的應用，其中蛋白質穩定劑選自由多糖， 例如蔗#海藻糖；#^酸，例如賴氨酸^h氨酸；聚乙二醇、醇和多元醇， 例如甘油和乙二醇組成的組。
18、 '漆求17的應用，其中蛋白質穩定劑是甘油。15
19、 ^5U'JJMU8的應用，其中絲包含40-55 。/。v/v的甘油，微50。/。v/v的甘油。
20、 包括含有;M，J^求1-9的含7K^體製劑的一組小M^的藥盒。
21、 W'J^求20的藥盒，包:^"-組小滅安瓿，其中每小減姊包含日 絲劑量的主要^原，其中所iii要變應原的日^#劑量為0.01-10 Mg，優20 選為(U-5 pg,或者更艦為0.5-2 jjg。
22、 W'J^求20的藥盒，其中每小M^l包含10滴主要變應原^^ 0.2-10 pg/ml，她為l-5 jag/ml,更她為2-5 ng/ml的^^t或懸浮液， 或者包含與所述10滴含有相同量主要變應原的任何其它滴數的水溶液或懸浮 液。25
23、 ；l5U'J^"求20的藥盒，包^-"組小賦安瓿，其中每小絲魏包輛主要變應原的日劑量比主要變應原的日維持劑量低。
24、 ；(5U，J^求23的藥盒，其中一組小^i^^L包括 (a)含l/10日維持劑量主要變應原的一個或多個小減安瓿，含1/100 日維持劑量主要變應原的一個或多個小M"^，和含1/1000日,劑量主要30變應原的一個或多個小M"^，或者 (b)含l/5日維持劑量主要變應原的一個或多個小絲安瓿，含1/25日 維持劑量主要變應原的一個或多個小M^，和含1/125日維持劑量主要變 應原的一個或多個小M安瓿。
25、 WJ要求23-24的藥盒，其中主要^原的日維持劑量為0. 01-10 pg， 微0.1-5iag,更她O. 5-2Mg。
26、 權利要求20-25任一項的藥盒，其中主要變應原是來自熱帶無, (Blomia tropicalis)的Blo t 5，或者是來自Blomia屬其它種的等同主要變應原。
27、 權利要求20—25 ^t—項的單個小M^。
28、 預防或治療針對Blomia屬一個種或多個種的變態反應的方法，包M 過口黏膜給予對^^y^求1-9的液M苗製劑。
29、 權矛溪求28的方法，其中口黏膜給藥為舌下給藥。
全文摘要
本發明涉及包含Blomia屬一個種或多個種的變應原提取物的含水液體變態反應疫苗製劑及英口黏膜給藥的用途。
文檔編號A61P37/00GK101371922SQ200810092938
公開日2009年2月25日 申請日期2008年4月18日 優先權日2007年4月20日
發明者D·B·赫爾南德茲, F·波羅, M·斯旁福特 申請人:阿爾克-阿貝洛有限公司