用於具有脂肪源的反芻動物飼料配給的抗氧化劑組合的製作方法

2023-05-16 01:16:56

專利名稱：：用於具有脂肪源的反芻動物飼料配給的抗氧化劑組合的製作方法
技術領域：
：本發明通常提供了一種用於反芻動物飼料配給(feedration)的抗氧化劑的組合。當所述抗氧化劑組合被餵食給反芻動物時能降低飲食中自由基的形成、提高營養素的消化、以及優化動物瘤胃內的發酵。此外，本發明還提供了提高產乳量和/或乳脂含量，改善反芻動物的抗氧化狀態以及降低與給反芻動物餵食非惰性脂肪源相關的不良瘤胃作用的方法。
背景技術：
：脂肪是能量的集中來源，在牛和其他反芻動物的飼料配給中加入脂肪已是標準操作。然而脂肪易氧化，氧化是一種降低其營養價值並產生具有不愉快氣味和味道的揮發性化合物的降解過程(即，酸敗)。氧化速率隨不飽和度(或碳碳雙鍵的數目)增加。在脂肪氧化過程中，除去雙鍵附近碳原子上的不穩定氫原子會形成自由基。得到的自由基易被氧攻擊而形成自由基過氧化物，後者然後作為進一步氧化的催化劑。因此，脂肪的氧化分解是自催化的，引起連鎖反應並形成不需要的分解產物。給反芻動物，尤其是乳牛餵食氧化脂肪可能會導致自由基在動物體內累積並加劇動物對氧化應激的敏感性。此外，大量的(氧化的和非氧化的)不飽和或不飽和脂肪會與瘤胃內的微生物群相互作用，阻斷纖維降解和微生物生長。由於某些脂肪的潛在負面影響，因此已開發了反芻動物惰性脂肪。惰性脂肪(Inertfat)是具有較高飽和度的脂肪酸、與鈣形成複合物的脂肪酸或被包裹的脂肪。然而無論如何使它們變為惰性，惰性脂肪都非常昂貴。由於詞料是反芻動物生產中的主要花費，因此需要在它們的配給中添加比較便宜的非惰性脂肪，如植物油、植物油和動物脂肪的混合物，或者餵食中高脂肪含量的成分，如酒糟。然而需要穩定這些脂肪。穩定並抑制用於反芻動物飲食中的脂肪來源氧化的一種方法是在飼料中加入抗氧化劑。一種最有效的抗氧化劑是乙氧喹(6-乙氧基-l,2-二氫-2,2，4-三甲基喹啉，以商品名AGRADO⑧出售)，它被廣泛用作詞料添加劑的抗氧化劑或防腐劑。儘管有效，但乙氧喹通常作為魚油和動物脂肪的抗氧化劑更有效，而對於控制植物衍生油類的氧化不十分有效。而且，5膳食抗氧化劑通常僅用於控制脂肪源儲存過程中的氧化，而不用來控制脂肪源被餵食給反芻動物後的氧化。因此，本領域迫切需要能有效控制各種脂肪源所衍生的脂肪和油脂氧化的新型抗氧化劑配方。
發明內容因此，本發明的各個方面涉及一種降低與餵食反芻動物脂肪源相關的不良瘤胃作用的方法。該方法包括給反芻動物餵食與包含喹啉化合物的第一抗氧化劑和不同於第一抗氧化劑的第二抗氧化劑組合的脂肪源。本發明的其他方面和特徵一部分是顯而易見的，一部分將在下文中描述。附圖簡述圖l顯示抗氧化劑摻合物能給大豆油提供提高的抗氧化保護。繪出了未添加抗氧化劑的大豆油、添加了乙氧喹(ETX)的大豆油以及添加了乙氧喹和叔丁基氫醌摻合物(ETX+TBHQ)的大豆油的油穩定性(OSI)誘導時間(方框)和過氧化值(菱形)。圖2顯示抗氧化劑慘合物能提高黃色油脂的抗氧化保護。繪出了未添加抗氧化劑的黃色油脂、添加了乙氧喹(ETX)的黃色油脂以及添加了乙氧喹和叔丁基氫醌摻合物(ETX+TBHQ)的黃色油脂的油穩定性(OSI)誘導時間(方框)和過氧化值(菱形)。圖3顯示了兩種抗氧化劑在穩定溼酒糟(WDG)時的協同活性。繪出了未添加抗氧化劑的WDG、添加了乙氧喹和叔丁基氫醌摻合物(ETX+TBHQ)的WEG、添加了乙氧喹(ETX)的WDG以及添加了叔丁基氫醌(TBHQ)的WDG的油穩定性(OSI)誘導時間。圖4顯示抗氧化劑一乙氧喹和叔丁基氫醌一能穩定摻合油(玉米油、魚油和黃色油脂的混合物)中的。-3和Q-6脂肪酸。顯示了氧化前(對照)以及不存在抗氧化劑氧化後(氧化的)和存在抗氧化劑氧化後(A)三種情況下Q-3脂肪酸(實線)和Q-6脂肪酸(柱)的百分比。圖5顯示抗氧化劑一乙氧喹和叔丁基氫醌—能穩定摻合油(玉米油、魚油和黃色油脂的混合物)中的二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)。顯示了氧化前(對照)以及不存在抗氧化劑氧化後(氧化的)和存在抗氧化劑氧化後(A)三種情況下EPA(實線)和DHA(柱)的百分比。圖6為顯示抗氧化劑一乙氧喹和叔丁基氫醌一能穩定種子中油的柱狀圖。以每千克不含抗氧化劑的穀物(灰色柱)和含抗氧化劑的穀物(黑色柱)中脂肪的過氧化物毫克當量(meq)表示過氧化物值。圖A代表亞麻子的值。圖B代表溼酒糟的值。圖7顯示抗氧化劑一乙氧喹和叔丁基氫醌一能穩定溼酒糟(WDG)中的不飽和脂肪酸。顯示了亞油酸C18:2(柱)和亞麻酸C18:3(實線)的百分比。發明詳述已發現抗氧化劑的組合能有效防止用於反芻動物飲食的不同類型脂肪(例如，植物衍生油類、植物油/脂肪和其他油/脂肪的摻合物，或酒糟)的氧化。具體說，抗氧化劑的組合防止這些脂肪氧化比單用等摩爾量的任一抗氧化劑的總活性更有效。還已經發現，如實施例中所述，本發明的抗氧化劑組合能有效削弱膳食脂肪對瘤胃內發酵的不良影響。所述抗氧化劑組合能提高反芻動物的營養素消化、纖維素消化、乾物質攝入、抗氧化狀態、產乳量和/或乳脂含量，且這些作用與膳食脂肪的氧化程度無關。有利地，本發明的抗氧化劑組合提供了給反芻動物餵食脂肪源，尤其是非惰性脂肪源的方式，同時削弱了通常與給反芻動物餵食這些脂肪相關的不良瘤胃作用。④貧就微合本發明的一個方面提供了包含至少兩種不同抗氧化劑的抗氧化劑組合。本發明的抗氧化劑組合可被製成反芻動物飼料添加劑或製成預混合料。一般地，所述組合的第一抗氧化劑是喹啉化合物，所述第二抗氧化劑不同於第一抗氧化劑。示例性的抗氧化劑組合應配製成，第一抗氧化劑能比第二抗氧化劑更有效地降低動物脂肪或魚類脂肪的氧化，而第二抗氧化劑能比第一抗氧化劑更有效地降低植物脂肪如植物油的氧化。當採用這種方式配製抗氧化劑的組合時，可將各種脂肪源，包括含有相對較高不飽和脂肪酸的脂肪源用於反芻動物飼料配給或水源而不會對瘤胃發酵產生不良影響。(a)第一抗氧化劑包含在組合內的第一抗氧化劑是喹啉化合物。一般地，該喹啉化合物將是取代的1,2-二氫喹啉。適用於本發明的取代的1，2-二氫喹啉化合物一般具有式(1):7(I)式中:R1、R2、113和114獨立選自氫或具有1至約6個碳原子的垸基；和W是具有1至約12個碳原子的垸氧基。在另一個實施方式中，所述取代的1,2-二氫喹啉將具有式(1)，式中R1、R2、113和114獨立選自氫或具有1至約4個碳原子的垸基；和RS是具有1至約4個碳原子的烷氧基。在一個優選的實施方式中，所述取代的1,2-二氫喹啉將是下式所示的6-乙氧基-1，2-二氫-2,2,4-三甲基喹啉化合物6-乙氧基-l,2-二氫-2,2，4-三甲基喹啉通常被稱為乙氧喹，以商品名agmdc^出售。本發明還包括乙氧喹和具有式(i)的其他化合物的鹽。乙氧喹和具有式(i)的其他化合物可購自諾華絲國際股份有限公司(novusinternational,inc.)或按照本領域通常已知方法製備，所述方法例如美國專利號4，772，710中描述的方法，該專利通過引用全文納入本文。(b)第二抗氧化劑所述第二抗氧化劑不同於第一抗氧化劑。各種抗氧化劑都適用於本發明的抗氧化劑組合。一般地，所述第二抗氧化劑不是表面活性劑。在一些實施方式中，所述第二抗氧化劑可以是給自由基加質子而中斷氧化反應的自由基鏈從而使它們失活的化合物。或者，所述第二抗氧化劑可以是清除活性氧中間體的化合物。在其它實施方式中，所述第二抗氧化劑可以是與金屬催化劑螯合的化合物。在其它實施方式中，所述第二抗氧化劑可以是合成化合物，半合成化合物，或天然(或源自天然的)化合物。合適的抗氧化劑包括，但不限於抗壞血酸及其鹽，抗壞血酸棕櫚酸酯，抗壞血酸硬脂酸酯，阿諾西默(anoxomer)，n-乙醯半胱氨酸，異硫氰酸節酯，間氨基苯甲酸，鄰氨基苯甲酸，對氨基苯甲酸(paba)，丁羥茴醚(bha)，丁羥甲苯(bht)，咖啡酸，角黃素(canthaxantin)，a-胡蘿蔔素，卩隱胡蘿蔔素，beta-caraotene，p-脫輔基-類胡蘿蔔酸(beta-叩o-carotenoicacid)，鼠尾草酚，香開酚，兒茶素十六烷基掊酸酯，綠原酸，檸檬酸及其鹽，丁香提取物，咖啡豆提取物，p-香豆酸，3，4-二羥基苯甲酸，n,n'-二苯基-p-苯二胺(dppd)，二月桂醇亞硫基二丙酸酯，二硬脂醇亞硫基二丙酸酯，2，6-二-叔丁基苯酚，十二烷醇掊酸酯，依地酸，柔花酸，異抗壞血酸，異抗壞血酸鈉，七葉亭，七葉苷，6-乙氧基-l,2-二氫-2,2,4-三甲基喹啉，掊酸乙酯，乙基麥芽酚，乙二胺四乙酸(edta)，桉樹提取物，丁子香酚，阿魏酸，類黃酮(例如，兒茶素，表兒茶素，表兒茶素掊酸酯(epicatechingallate)，表掊兒茶酸(egc，epigallocatechin)，表掊兒茶酸沒食子酸酯(egcg，epigallocatechingallate)，多酚表掊兒茶酸-3-沒食子酸酯，黃酮(例如，芹菜配基，白楊黃素，四羥黃酮，黃酮醇(例如，橡精，楊梅黃酮，daemfero)，黃烷酮，皮亭，延胡索酸，掊酸，龍膽提取物，葡糖酸，甘氨酸，愈創木膠、陳皮素，a-羥苄次膦酸，羥基辛可寧酸，羥基戊二酸，氫醌，n-羥基琥珀酸，羥基酪醇(hydroxytryrosol)，羥基脲，米糠提取物，乳酸及其鹽，卵磷脂，卵磷脂檸檬酸鹽，r-a-硫辛酸，葉黃素，番茄紅素，蘋果酸，麥芽酚，5-甲氧色胺，掊酸甲酯，檸檬酸甘油一酯，檸檬酸單異丙酯，桑色素,p-萘黃酮，去甲二氫愈瘡木酸(ndga),掊酸辛酯，草酸，棕櫚醯檸檬酸酯，吩噻嗪，磷脂醯膽鹼，磷酸，磷酸鹽，植酸，植基泛色烯醇(phytylubichromel)，西班牙甘椒(pimento)提取物，掊酸丙酯，多磷酸鹽，槲皮素，反-白藜蘆醇，迷迭香提取物，迷迭香酸，鼠尾草提取物，芝麻酚，水飛薊素，芥子酸，琥珀酸，硬脂醇檸檬酸酯，丁香酸，酒石酸，麝香草酚，生育酚類(即a-、p-、？和5生育酚)，生育三烯酚類(即a-、卩-、y-和s生育三烯酚)，酪醇，香蘭酸(vanilicacid)，2,6-二-叔丁基-4-羥甲基苯酚(艮卩ionox100)，2.4-(三-3，，5，-二-叔丁基-4，-羥苄基)-均三甲苯(即ionox330)，2,4,5-三羥基丁醯苯，泛醌，叔丁基氫醌(tbhq)，硫二丙酸，三羥基丁醯苯，色胺，酪胺，尿酸，維生素K及衍生物，維生素q10，小麥胚芽油，玉米黃素，或它們的組合。示例性的第二抗氧化劑包括合成的酚類化合物，如tbhq、bha、或bht;掊酸衍生物，如掊酸正丙酯；維生素C衍生物，如抗壞血酸棕櫚酸酯；卵磷脂；和維生素E化合物，如a-生育酚。在一個優選的實施方式中，所述第二抗氧化劑將是tbhq。(c)抗氧化劑組合的配方適用於本發明的合適的抗氧化劑組合包含至少一種i(a)中詳細描述的喹啉化合物和至少一種i(b)中詳細描述的第二抗氧化劑。在一些實施方式中，該組合可以僅包含兩種不同抗氧化劑。在其它實施方式中，該組合可以包含至少三種不同抗氧化劑。在其他實施方式中，該組合可以包含四種或更多不同抗氧化劑。合適的抗氧化劑組合的非限制性例子列於表a(即將第一列中的第一抗氧化劑與第二列中的第二抗氧化劑組合以形成本發明的i)t氧化劑組合)。表A第一抗氧化劑第二抗氧化劑6-乙氧基-l,2-二氫-2,2,4-三甲基喹啉抗壞血酸6-乙氧基-1,2-二氫-2,2,4-三甲基喹啉抗壞血酸6-乙氧基-l,2-二氫-2,2,4-三甲基喹啉抗壞血酸棕櫚酸酯6-乙氧基-l,2-二氫-2，2,4-三甲基喹啉抗壞血酸硬脂酸酯6-乙氧基-1，2-二氫-2,2，4-三甲基喹啉阿諾西默(anoxomer)6-乙氧基-1，2-二氫-2,2，4-三甲基喹啉N-乙醯半胱氨酸6-乙氧基-1,2-二氫-2,2,4-三甲基喹啉異硫氰酸苄酯6-乙氧基-1,2-二氫-2,2,4-三甲基喹啉間氨基苯甲酸6-乙氧基-1，2-二氫-2,2,4-三甲基喹啉鄰氨基苯甲酸6-乙氧基-1,2-二氫-2,2,4-三甲基喹啉對氨基苯甲酸(PABA)6-乙氧基-l,2-二氫-2,2,4-三甲基喹啉丁羥茴醚(BHA)6-乙氧基-l,2-二氫-2，2,4-三甲基喹啉丁羥甲苯(BHT)6-乙氧基-l，2-二氫-2,2，4-三甲基喹啉咖啡酸6-乙氧基-1，2-二氫-2,2,4-三甲基喹啉角黃素6-乙氧基-l，2-二氫-2,2,4-三甲基喹啉a-胡蘿蔔素6-乙氧基-1,2-二氫-2,2，4-三甲基喹啉P-胡蘿蔔素6-乙氧基-l,2-二氫-2,2，4-三甲基喹啉beta-caraotene6-乙氧基-l,2-二氫-2,2,4-三甲基喹啉p-脫輔基-類胡蘿蔔酸6-乙氧基-l,2-二氫-2,2，4-三甲基喹啉鼠尾草酚6-乙氧基-l,2-二氫-2,2，4-三甲基喹啉香開酚6-乙氧基-l,2-二氫-2，2,4-三甲基喹啉兒茶素6-乙氧基-1,2-二氫-2,2，4-三甲基喹啉十六垸基掊酸酯6-乙氧基-1,2-二氫-2，2,4-三甲基喹啉綠原酸6-乙氧基-l,2-二氫-2，2,4-三甲基喹啉檸檬酸6-乙氧基-l，2-二氫-2,2,4-三甲基喹啉檸檬酸鹽10tableseeoriginaldocumentpage11tableseeoriginaldocumentpage126-乙氧基-1，2-二氫-2,2，4-三甲基喹啉2,6-二-叔丁基-4-羥甲基苯酚(即Ionox100)6-乙氧基-1,2-二氫-2，2，4-三甲基喹啉2，4-(三-3，,5'-二-叔丁基-4'-羥苄基)-均三甲苯(即Ionox330)6-乙氧基-l,2-二氫-2,2，4-三甲基喹啉2,4,5-三羥基丁醯苯6-乙氧基-l，2-二氫-2,2，4-三甲基喹啉泛醌6-乙氧基-l,2-二氫-2,2,4-三甲基喹啉叔丁基氫醌(TBHQ)6-乙氧基-l，2-二氫-2,2，4-三甲基喹啉硫二丙酸6-乙氧基-l,2-二氫-2,2,4-三甲基喹啉三羥基丁醯苯6-乙氧基-l,2-二氫-2,2，4-三甲基喹啉色胺6-乙氧基-l，2-二氫-2,2,4-三甲基喹啉酪胺6-乙氧基-l，2-二氫-2,2,4-三甲基喹啉尿酸6-乙氧基-l,2-二氫-2,2,4-三甲基喹啉維生素K6-乙氧基-l，2-二氫-2,2，4-三甲基喹啉維生素QIO6-乙氧基-1,2-二氫-2,2,4-三甲基喹啉小麥胚芽油6-乙氧基-l,2-二氫-2,2,4-三甲基喹啉玉米黃素6-乙氧基-1,2-二氫-2,2，4-三甲基喹啉上述任何一種的衍生物在一個示例性實施方式中，所述抗氧化劑組合是6-乙氧基-l,2-二氫-2,2,4-三甲基喹啉與本文詳細描述的任何一種天然抗氧化劑。在進一步的示例性實施方式中，所述抗氧化劑組合是6-乙氧基-l,2-二氫-2,2，4-三甲基喹啉和BHA。再在另一個示例性實施方式中，所述抗氧化劑組合是6-乙氧基-l,2-二氫-2,2，4-三甲基喹啉和BHT。在進一步的示例性實施方式中，所述抗氧化劑組合是6-乙氧基-l，2-二氫-2，2,4-三甲基喹啉和TBHQ。如實施例中所詳述，6-乙氧基-l，2-二氫-2，2，4-三甲基喹啉與TBHQ的組合保護油類和脂肪免遭氧化的時間通常長於單用等摩爾量的任一抗氧化劑的總活性。6-乙氧基-l,2-二氫-2,2,4-三甲基喹啉和TBHQ的組合以商品名AGRADOPLUS⑧出售。熟練技術人員將了解，抗氧化劑組合中所包含的第一抗氧化劑的濃度和第二抗氧化劑的濃度可以並且將根據具體抗氧化劑、詞料配給中脂肪源的含量和類型、以及將餵食該組合的反芻動物的種類和年齡而改變。非限制性例子是，當所述反芻動物是肉牛時，餵食給動物的6-乙氧基-l,2-二氫-2，2，4-三甲基喹啉的含量可以佔其詞料配給的約50-250ppm，或者約140-160卯m。在一個示例性實施方式中，餵食給肉牛的6-乙氧基-l,2-二氫-2,2,4-三甲基喹啉將為150卯m。進一步的例子是，當所述反芻動物是乳牛時，餵食給動物的6-乙氧基-l,2-二氫-2,2,4-三甲基喹啉的含量可以佔其飼料配給的約20-250ppm，或者約55-75ppm。在一個示例性實施方式中，餵食給乳牛的6-乙氧基-l,2-二氫-2，2,4-三甲基喹啉將為6513ppm。抗氧化劑組合的其他示例性配方詳細描述於章節I(d)、(e)以及實施例中。(d)液體組合物當將本發明的抗氧化劑組合配製成組合物時，其可以是液體組合物或乾燥組合物。對於抗氧化劑組合包括液體組合物的實施方式，該組合物通常包含選自極性溶劑、非極性溶劑或兩者的組合的溶劑載體。一般來說，當組合中的抗氧化劑是水溶性抗氧化劑時採用極性溶劑。極性溶劑合適的例子包括，但不限於甘油，異丙醇，乙醇，丙二醇，赤蘚醇，木糖醇，山梨醇，麥芽糖醇，甘露醇，水，或它們的混合物。在一個實施方式中，所述極性溶劑是甘油。極性溶劑的濃度取決於組合物中抗氧化劑的組合。通常，極性溶劑的體積百分比約為5-50%。極性溶劑的體積百分比可以約為5%、10%、15%、20%或25%。液體組合物也可包含非極性溶劑。通常，當組合中的抗氧化劑是脂溶性抗氧化劑時採用非極性溶劑。非極性溶劑合適的例子包括，但不限於甘油單酯，甘油二酯，植物油，或它們的組合。甘油單酯和甘油二酯可從植物油中蒸餾得到或者可通過酯化反應合成。所述植物油可以是玉米油，大豆油，菜籽油，棉籽油，棕櫚油，花生油，紅花油，和葵花籽油。在一個實施方式中，所述非極性溶劑可以是玉米油。在另一個實施方式中，所述非極性溶劑可包含甘油單酯和玉米油。非極性溶劑的濃度將取決於組合物中抗氧化劑的組合。通常，非極性溶劑的體積百分比約為5-50%。非極性溶劑的體積百分比可以為5%、10%、15%、20%或25%。非限制性例子是，本發明的液體組合物可含有約40-75重量％的6-乙氧基-1，2-二氫-2,2,4-三甲基喹啉，約1-20重量％的叔丁基氫醌，以及約10-30重量％的至少一種溶劑載體。在另一個實施方式中，所述液體組合物可含有約60-70重量％的6-乙氧基-l，2-二氫-2,2，4-三甲基喹啉，約1-10重量％的叔丁基氫醌，以及約10-30重量％的至少一種溶劑載體。在一個示例性實施方式中，所述液體組合物可含有約65重量％的6-乙氧基-l，2-二氫-2，2，4-三甲基喹啉，約7重量％的叔丁基氫醌，約7重量°/。的檸檬酸，約19重量％的丙二醇，以及約2重量％的玉米油。(e)乾燥組合物或者，可將所述抗氧化劑組合製成乾燥組合物。一般地，當製成乾燥組合物時，可使用一種或多種載體。在一個示例性實施方式中，所述乾燥組合物是可流14動的。本文中，"可流動的"表示基本上可以自由流動且基本上不會結塊。一些無機載體適合用於本發明來配製抗氧化劑的乾燥組合物。所述無機載體將通常呈顆粒狀，它可以是多孔的，並且在生物學上通常是惰性的。本文中，如果某無機載體在給予動物後無毒且不會產生明顯的免疫反應則是生物惰性的。合適的無機載體的非限制性例子包括天然和再生礦物質。一類優選的礦物質載體是矽酸鹽類。用於本發明的矽酸鹽可選自以下矽酸鹽亞類島狀矽酸鹽、儔矽酸鹽、鏈矽酸鹽、環矽酸鹽、頁矽酸鹽和網矽酸鹽。合適的島狀矽酸鹽的例子包括矽酸鋁，鹼式矽酸鐵鎂錳鋁，鹼式硼矽酸鈣，鹼式矽酸鈹鋁，矽酸鐵，矽酸鎂，矽酸釔鐵鈹，矽酸鋁鐵，矽酸鈣鐵，矽酸鈣鋁，矽酸鎂鋁，矽酸鉻鈣，鹼式硼矽酸轉，矽酸鋁，矽酸鎂鐵，矽酸鈹，矽酸鈣鈦，矽酸鋅和矽酸鋯。合適的儔矽酸鹽的例子包括鹼式矽酸鈹，硼矽酸鈣，鹼式矽酸鋁鐵鈣鈰釔，鹼式矽酸鈣鋁，鹼式矽酸,丐鐵鋁，鹼式矽酸鈣鋁，和鹼式矽酸鈣鐵。合適的鏈矽酸鹽的非限制性例子包括矽酸鈉鈦，矽酸鈣，矽酸鈉鐵，矽酸鈣鈉鎂鋁鐵鈦，矽酸鈣鎂，矽酸鎂，矽酸鈣鐵，矽酸鎂鐵，矽酸鈉鋁鐵，矽酸鋰鋁，矽酸錳鐵鎂鈣，鹼式矽酸鈉錳鈣，鹼式矽酸銅，矽酸鈣，鹼式矽酸鈣鎂鐵，鹼式矽酸鎂鐵，鹼式矽酸鐵鎂，鹼式矽酸鉀鐵鈦，和鹼式矽酸鈣鐵錳。合適的環矽酸鹽的例子包括硼矽酸鈣鎂鐵錳鋁，矽酸鉀鋰鈣鈦鋯，矽酸鋇鈦，矽酸鈹鋁，矽酸鎂鋁，矽酸鉀鈉鐵鎂鋁，鹼式矽酸鈉鎂鋁硼，和矽酸鉀鈉鋰鐵錳鋁。合適的頁矽酸鹽的例子包括水合矽酸鉀鈉鈣，水合矽酸鈣釩，水合鹼式矽酸氫銅鋁，鹼式矽酸鐵鎂鋁，鹼式矽酸鐵鎂鋁，鹼式矽酸鋰鋁，鹼式矽酸鋁，鹼式矽酸鎂，水合鹼式矽酸鈣，氟化鹼式矽酸鉀鐵鎂鋁，氟化鹼式矽酸鉀鋰鋁，氟化鹼式矽酸鉀鋁，氟化鹼式矽酸鉀鎂鋁，鹼式矽酸鈣鋁，和鹼式矽酸鐵鎂。合適的網矽酸鹽的例子包括矽酸鈉鋁，矽酸鈉鈣鋁，矽酸鈣鋁，矽酸鈣鈉鋁，矽酸鈉鈣鋁，矽酸鉀鋁，矽酸鈉鈣，二氧化矽，碳酸矽酸鈉鈣鋁，氯化硫化硫酸矽酸鈉鈣鋁，氯化矽酸鈉鋁，硫酸碳酸氯化矽酸鈣鈉鋁，水合矽酸鈉鋁，水合矽酸鈣鋁，水合矽酸鋇鉀鋁，和水合矽酸鈉鈣鋁。在一個優選實施方式中，所述無機物是二氧化矽或膨潤土鈉。根據該實施方式，無機載體可以是化合物的混合物，如上述矽酸鹽中任何一種或多種的混合物。本領域技術人員將了解，所述無機載體的粒度以及無機載體的濃度能夠並且將是可變的。通常，無機載體的平均粒度可以為約50-1000微米。在另一個實施方式中，無機載體的平均粒度可以為約100-500微米。在另一個實施方式中，無機載體的平均粒度可以為約100-200微米。在另一個實施方式中，乾燥組合物中所含無機載體的濃度可以佔乾燥組合物乾重的約0.1-0.5%。在又一實施方式中，乾燥組合物中所含無機載體的濃度可以佔乾燥組合物乾重的約1.0-5.0%。在另一個實施方式中，乾燥組合物中所含無機載體的濃度可以佔乾燥組合物乾重的約2.5-15.0%。一個非限制性的例子是，本發明的乾燥組合物可含有佔乾重約30-70%的6-乙氧基-l，2-二氫-2，2,4-三甲基喹啉，佔乾重約1-10%的叔丁基氫醌，以及佔乾重約0.1-15%的載體。在另一個實施方式中，所述乾燥組合物可包含佔乾重約45-55%的6-乙氧基-l,2-二氫-2,2,4-三甲基喹啉，佔乾重約3-7%的叔丁基氫醌，以及佔乾重約0.1-15%的載體。在一個示例性實施方式中，該乾燥組合物由佔乾重約50%的6-乙氧基-l,2-二氫-2，2，4-三甲基喹啉、佔乾重約5%的叔丁基氫醌、佔乾重約5%的檸檬酸以及佔乾重約10%的碳酸鈣構成。仰銜鄉滯辦鄉滅本發明的另一方面包括含有本發明的抗氧化劑組合的反芻動物飼料預混合料或詞料添加劑。一般地，所述預混合料將被加入各種穀物濃縮物和草料配方以配製反芻動物飼料配給。技術人員將了解，具體的預混合料配方可以並且將根據詞料配給以及要餵食該飼料配給的動物而改變。除了本發明的抗氧化劑組合，所述預混合料可以進一步任選包含下述物質中的一種或多種天然胺基酸混合物，天然胺基酸類似物如甲硫氨酸的羥基類似物("HMTBA")，補充蛋白質，補充脂肪，維生素及其衍生物，酶，獸藥，激素，有效微生物，有機酸，防腐劑，以及調味劑。在一個實施方式中，所述飼料預混合料可包含一種或多種胺基酸。根據配方，胺基酸的合適例子包括丙氨酸、精氨酸、天冬醯胺、半胱氨酸、穀氨酸、穀氨醯胺、甘氨酸、組氨酸、異亮氨酸、酪氨酸、賴氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、色氨酸、酪氨酸、以及纈氨酸。可用作飼料添加劑的其他胺基酸包括，例如(但不限於)，N-醯基胺基酸，羥基同系化合物，以及它們的生理上可接受的鹽，如胺基酸的鹽酸鹽、硫酸氫鹽、銨鹽、鉀鹽、鈣鹽、鎂鹽和鈉鹽。在一個優選的實施方式中，所述抗氧化劑組合可與甲硫氨酸的羥基類似物("HMTBA")組合形成飼料預混合料。合適的甲硫氨酸的羥基類似物包括2-羥基-4(甲硫基)丁酸(由密蘇裡州聖路易斯的諾華絲國際股份有限公司以商品名ALIMET出售)、其鹽、酯、醯胺和寡聚物。HMTBA的代表性鹽包括銨鹽、化學計量和超化學計量的鹼土金屬鹽(例如，鎂鹽和鈣鹽)，化學計量和超化學計量的鹼金屬鹽(例如，鋰鹽、鈉鹽和鉀鹽)，以及化學計量和超化學計量的鋅鹽。HMTBA的代表性酯包括HMTBA的甲基、乙基、2-丙基、丁基和3-甲基丁基酯。HMTBA的代表性醯胺包括甲基醯胺、二甲基醯胺、乙基甲基醯胺、丁基醯胺、二丁基醯胺、和丁基甲基醯胺。HMTBA的代表性寡聚物包括其二聚體、三聚體、四聚體以及包含更多重複單元的寡聚物。在又一實施方式中，所述飼料預混合料包含補充蛋白質。補充蛋白質的例子包括大豆粉，家禽血粉，魚粉，肉粉和粗製大豆蛋白。在另一個實施方式中，所述飼料預混合料包含脂肪源。所述脂肪源可以是非惰性脂肪。所述脂肪源可以是非惰性脂肪。非惰性脂肪的非限制性例子包括植物衍生油類(例如，菜籽油、玉米油、棉籽油、棕櫚油、花生油、紅花油、大豆油和葵花籽油)，魚油(例如，鯡魚油、鳳尾魚油、長鰭金槍魚油、鱈魚肝油、青魚油、湖紅點鮭油、鯖魚油、鮭魚油、和沙丁魚油)，動物脂肪(例如，家禽脂肪、牛脂、黃油、豬油和鯨脂)，黃色油脂(即，餐館的廢棄油脂和的煉油植物的低級脂肪)，以及它們的組合。非惰性脂肪源也可以是高脂產品，如魚粉(例如，鯡魚粉、鳳尾魚粉、青魚粉、青鱈魚粉、鮭魚粉、金槍魚粉和白鮭魚粉)，含油種子(例如，油菜籽、棉籽、亞麻子、亞麻籽、皂角子、芝麻子、大豆、和葵花籽)，或酒糟(例如，幹酒糟及其可溶物(DDGS)和溼酒糟)。所述脂肪源可以是反芻動物惰性脂肪。反芻動物惰性脂肪的合適例子包括棕櫚脂肪酸的鈣鹽(例如，MEGALAC),飽和的游離脂肪酸(例如，EnergyBooster100)，或氫化牛脂(例如，ALIFET)。一些市售旁路脂肪描述於，例如，美國專利號5,182,126;5,250,307;5,391,787;5,425,963;和5,456,927，其中披露了C14-C22脂肪酸，它們的甘油酯，或它們的鹽，其中包括但不限於棕櫚酸、油酸、亞油酸、硬脂酸和月桂酸化合物。在又一實施方式中，所述飼料預混合料包含維生素或維生素衍生物。合適的維生素及其衍生物的例子包括維生素A，維生素A棕櫚酸酯，維生素A乙酸酯，(3-胡蘿蔔素，維生素D(例如，D2、D3和D4)，維生素E，亞硫酸氫鈉甲萘醌，維生素B(例如，硫胺素，鹽酸硫胺素，核黃素，煙酸，煙醯胺，泛酸鈣，17泛酸膽鹼，煙酸吡哆醇，氰鈷胺，生物素，葉酸，對氨基苯甲酸)，維生素K，維生素Q，維生素F和維生素C。在另一個實施方式中，所述飼料預混合料包含一種或多種酶。酶的合適例子包括蛋白酶、澱粉酶、脂酶、纖維素酶、木聚糖酶、果膠酶、植酸酶、半纖纖維素酶和其他生理上有效的酶。在又一實施方式中，所述飼料預混合料包含批准用於反芻動物的藥物。合適的獸藥的非限制性例子包括抗生素，如四環素類(例如，氯四環素和土黴素)，氨基糖型，離子載體(例如，莫能菌素鈉、維吉黴素和班貝黴素)和大環內酯類抗生素。在另一實施方式中，所述詞料預混合料包含激素。合適的激素包括雌激素、己烯雌酚、己雌酚、酪蛋白(tyroprotein)、糖皮質激素、胰島素、高血糖素、胃泌素、降鈣素、生長激素和高特拉廷(goitradien)。在進一步的實施方式中，所述飼料預混合料包含有效微生物。合適的有效微生物的例子包括活的和死的酵母培養物，可將其製成益生元(probiotic)。例如，這種酵母培養物包含以下一種或多種嗜酸乳酸桿菌(LactobacillusAcidophilus),嗜熱雙歧桿菌(BifedobactThermophilum)，長雙歧桿菌(BifedobatLonghum)，糞鏈球菌(StreptococcusFaecium)，釀酒酵母(Sacchromycescerevisiae)，短小芽胞桿菌(Bacilluspumilus)，枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)，蘚樣芽胞桿菌(Bacilluslicheniformis)，嗜酸乳酸桿菌(Lactobacillusacidophilus),乾酪乳酸桿菌(Lactobacilluscasei)，屎腸球菌(Enterococcusfaecium)，兩岐雙岐桿菌(Bifidobacteriumbifidium)，丙酸丙酸桿菌(Propionibacteriumacidipropionici)，費氏丙酸桿菌(Propionibacteriiumfreudenreichii)，米麴黴(Aspergillusoryzae)禾卩假長雙歧桿菌(BifidobacteriumPscudolongum)。在另一個實施方式中，所述預混合料將包含有機酸。合適的有機酸包括蘋果酸、丙酸和延胡索酸。在另一實施方式中，所述飼料預混合料包含提高飼料配給可口性的物質。這種物質的合適例子包括天然甜味劑如糖蜜，以及人工甜味劑如糖精和阿斯巴特。技術人員將了解，可包含在本發明的預混合料中的任何物質可單用或彼此聯用。這些添加物的濃度將取決於具體應用，但通常將為乾物質重量的約180.0001-10%,更優選為約0.001-7.5%,最優選為約0.01-5%。,動飾鄉絲水,本發明進一步的方面包括含有抗氧化劑組合或含抗氧化劑組合的預混合料的動物飼料配給或水源。可將所述飼料配給製成滿足各種反芻動物的營養要求。各種反芻動物的典型飼料配給的非限制性例子如下文詳細描述。(a)飼料成分可用於本發明以滿足反芻動物維持能量需求的飼料成分可包括通常提供給反芻動物消耗的飼料成分。這種飼料成分的例子包括草料、穀物、飼料粉、飼料濃縮物、維生素、礦物質等等。由於本發明的抗氧化劑組合可有效降低動物或魚衍生脂肪以及植物衍生脂肪的氧化，因此許多脂肪源都可用於本發明典型配給中。草料產品是飼料成分，如新鮮(牧草或植被)、乾燥或青貯狀態的植株，並且可偶然包含少量穀物(例如，在收穫後保留在收穫的玉米植株中的玉米粒)。草料包括在作為本發明詞料的一部分提供給反芻動物之前已經收穫和任選發酵的植株。因此，草料包括乾草、窖藏半乾草料和青貯料。乾草的例子包括收穫的草，這種草可以與所餵食的反芻動物出自相同場地或者從遙遠地點運送到餵食地點。乾草的非限制性例子包括苜蓿草、百慕達草(Bermudagrass)、巴荷草(bahiagrass)、林坡草(limpograss)、黑麥草、小麥草、牛毛草、三葉草等等，以及可能是提供反芻動物飼料配給的反芻動物當地的其他草品種。如果草料質量相對較高(即，含有相當水平的可代謝營養素，從而可在達到其消耗量之前滿足反芻動物的自身營養需要並維持能量需求)是有利的。如果草料質量低，則反芻動物不能將其充分代謝以達到所需性能效果(例如，滿足其營養需求和/或維持能量需求)，這不僅會損害草料本身的營養益處，而且還會使反芻動物感覺過飽，並有可能阻止它消耗充足的營養素。窖藏半乾草料是一種通過收穫草類作物同時使汁液保留在植株內而天然發酵的草料產品。然後以不透氣的方式儲存收穫的草或草堆以使其發酵。發酵過程將植株內的糖轉化成酸從而降低了收穫草料的pH並得以保存草料。青貯料類似於窖藏半乾草料，是一種從收穫、儲存和發酵的綠色草類作物，例如玉米和高粱植株製造的草料產品。先將這些作物的莖幹和整體碾碎，然後收穫穀物。將植物材料儲存在槽、儲存袋、料鬥內或堆放起來以使材料發酵，從而降低植物材料的pH並得以保存直到餵食。草料產品還包括高纖原料和植物廢料，如綠色碎料(greenchop)、玉米杆、植株的莖幹等等。穀物產品包括玉米、玉米谷蛋白粉、大豆、大豆粉、小麥、大麥、燕麥、高粱、黑麥、水稻、以及其他穀物和穀物粉。飼料濃縮物是高能量低粗纖維的反芻動物詞料。濃縮物還包括用來增強飼料添加混合物營養價值的一種或多種成分的來源，如維生素和礦物質。所述脂肪源可以是非惰性脂肪，如植物油，魚油，動物脂肪，黃色油脂，魚粉，含油種子，酒糟，或其混合物。非惰性脂肪的非限制性例子見第II部分。所述脂肪源也可以是如上文第II部分中詳細描述的反芻動物惰性脂肪。脂肪源通常佔全部飼料配給乾物質的約1-10%，更優選為約2-6%，最優選為約3-4%。反芻動物飼料中可任選包含其他成分以便為反芻動物提供額外營養素。任選成分的例子包括尿素、維生素、礦物質等等。尿素為瘤胃內細菌提供能用來合成細菌蛋白質的非蛋白質氮源。也可根據需要排除這些成分以便為反芻動物提供滿足它們營養需求的定製飼料配給。(b)飼料配給本發明的詞料配給通常製成能滿足特定反芻動物的營養素和能量需求。許多常見反芻動物飼料成分的營養素和能量含量已經過測量並且公眾可得。國家研究委員會(TheNationalResearchCouncil)出版的書籍中包括常見反芻動物詞料成分以及它們各自的營養素和能量含量測量值的表格。此外，提供了依據牛體重的用於牛生長和育肥(finishing)的營養素和維持能量估算值。國家科學院(NationalAcademyofSciences),肉牛的營養素需求(NutrientRequirementsofBeefCattle),附表1-19,192-214，(國家科學院出版社(NationalAcademyPress),2000);乳牛的營養素需求(NutrientRequirementsofDairyCattle)(2001)，將它們分別全文納入本文。本領域技術人員可利用這一信息來預測肉牛和乳牛生長的營養素和維持能量需求，以及決定反芻動物飼料成分的營養素和能量含量。在一個實施方式中，所述飼料配給被製成供乳牛使用。實踐中，反芻動物通常是定量餵養的，通常稱為總混合配給(TMR，totalmixedration),其由草料部分和顆粒濃縮物部分構成。可使用本文詳細描述的或本領域己知的任何材料和穀物濃縮物。技術人員將了解，乳牛的飼料配給可以並且將隨奶牛的生長階段而顯20乳牛泌乳期第0-14天的合適乳牛飼料配給的例子如下^佔總飼料組成的重量百分比験_(基於乾重)粉碎玉米^大豆粉(44%)7.5苜蓿乾草17.0玉米青貯料47.0痕量礦物質鹽_^_乳牛泌乳期第14-80天的合適乳牛飼料配給的例子如下佔總飼料組成的重量百分比成分(基於乾重)粉碎玉米15.0大豆粉(44%)13.0苜蓿乾草22.0玉米青貯料21.0酒糟8.0全棉籽10.0豆殼6.5痕量礦物質鹽4.5飼料配給也可製成滿足非乳牛，尤其是肉牛的營養需求。肉牛膳食中各類組分的百分比(即穀物與粗飼料之比)取決於具體動物的膳食需求。例如，通常餵食給中間期或生長期肉牛的飼料組合物可包含:_佔總飼料組成的重量百分比^成分_(基於乾重)_脫水苜蓿粉25.0著改變。本文中，生長階段不僅表示乳牛無奶或有奶，而且表示乳牛無乳期或泌乳期的持續時間。產奶期的標誌包括前35天無奶，稱為"前期(faroff)";後21天無奶，稱為"關閉期(close-up)";泌乳期的第0-14天稱為"初期(fresh)";泌乳期的第14-80天稱為"峰值期(peakintake)";以及泌乳期的第200-330天。乳牛的前35天無乳期、泌乳期的第0-14天以及泌乳期的第14-80天的合適配給如下。乳牛無乳期前35天的合適乳牛飼料的例子如下:_佔總詞料組成的重量百分比""~成分(基於乾重)o5力5鹽料質米杆草貯物玉秸幹青礦碎麥蓿米量p小苜玉痕21棉籽殼5.0粉碎玉米60.0大豆粉(44%)3,0碳酸鈣1.0三聚磷酸鈉0.5蔗糖糖蜜5.0痕量礦物質鹽0.5中間期膳食的能量/粗飼料之比居中，被餵食給處於生長階段的牛。中間期膳食之後將替換成能量較高的育肥膳食直到牛可以被屠宰。典型的育肥膳食可包括成分佔總飼料組成的重量百分比(基於乾重)脫水苜蓿粉5.0棉籽殼10.0粉碎玉米74.8大豆粉(44%)3.0碳酸鈣0.7三聚磷酸鈉0.3蔗糖糖蜜5.0本申請中引用的所有出版物、專利、專利申請和其他參考資料通過引用全文納入本文，這就如同已將各出版物、專利、專利申請或其他參考資料專門而單獨表明通過引用納入本文。w楚驀靜素微微遂B動欽絲婦旅本發明的再另一個方面包括使用本發明組合物餵食反芻動物的方法。具體說，提供了提高營養素消化或改進反芻動物性能參數的方法。該方法包括將章節(I)所述的抗氧化劑組合或章節(II)所述的含有抗氧化劑組合的預混合料餵食給已被餵食或可被餵食脂肪源的動物。在一個示例性實施方式中，所述脂肪源包含非惰性脂肪源。給反芻動物提供抗氧化劑組合可提高瘤胃內發酵。提高的瘤胃內發酵可提高纖維素的消化、提高蛋白質的消化以及改善微生物生長和效能。提高的纖維素消化或降解表明加入抗氧化劑組合能降低與瘤胃膳食中含有非惰性脂肪相關的副作用。本文中，當將本發明的抗氧化劑組合以飼料配給餵食給反芻動物時，其能使膳食中含有較高量的非惰性脂肪同時能減輕在餵食該類脂肪時通常觀察到的不良瘤胃作用。或者，在某些實施方式中，有可能用非惰性脂肪完全替代飼料中的惰性脂肪。餵食抗氧化劑組合還能改善乾物質攝取(DMI)。此外，由於所述抗氧化劑組合還能改善動物的抗氧化狀態，因此動物不易遭受氧化應激。給乳牛餵食抗氧化劑組合還有可能提高產乳量、乳脂含量和脂肪改良奶(fatcorrectedmilk)。定義"DM"是乾物質的縮寫。術語"脂肪源"在文中表示含有至少一種脂質的分子。術語"改善的抗氧化狀態"在文中表示動物清除其體內自由基的抗氧化能力得到改善。術語"脂質"在文中表示不溶於水但溶於有機溶劑(例如，醚、氯仿、己垸等)的物質。簡單脂質的一個例子是甘油三酯。甘油三酯主要發現於穀物、含油種子和動物脂肪。甘油三酯的基本結構是一個甘油單元和三個脂肪酸單元。術語"不良瘤胃作用"在文中表示膳食脂肪和脂肪酸通過減緩瘤胃微生物群生長和活性而對其造成的毒害作用，這種作用可導致，例如，纖維素和蛋白質的消化降低。術語"營養素"在文中表示實現反芻動物存活、生長、生產、繁殖和/或健康中的一種或多種通常所必需的化學物質。例如，營養素包括水、能量(例如，碳水化合物、蛋白質和脂質)、蛋白質(例如，含氮化合物)、礦物質和維生素。Ppm代表百萬分之一。術語"反芻動物"在文中表示具有多分隔胃的成年和未成年動物，包括但不限於牛、綿羊、鹿、山羊、麝、公牛、水牛、長頸鹿和駱駝。例如，牛和綿羊的胃有四個隔室，其中包括瘤胃、網胃、瓣胃和皺胃。由於對上述化合物、產品和方法做出的各種改變都不會背離本發明的範圍，因此上面的描述和下面的實施例中提到的所有物質都是舉例說明而非限制。實施例以下非限制性例子例舉了本發明的各種實施方式。實施例1抗氧化劑摻合物和單獨的抗氧化劑在穩定油類或脂肪中的功效該研究的目的是比較乙氧喹(ETX)和叔丁基氫醌(TBHQ)的摻合物與單獨的ETX或單獨的TBHQ在防止大豆油、黃色油脂和溼酒糟氧化中的功效。ETX和TBHQ組合以商品名AGRADOPLUS⑧購得(諾華絲國際股份有限公司；聖路易斯，密蘇裡州)。AGRADOPLUS⑧是65。/。乙氧喹、7%叔丁基氫醌、7%擰檬酸、19%丙二醇和2%玉米油的摻合物。ETX製品以商品名AGRADO⑧和SANTOQUIN⑧購得(諾華絲國際股份有限公司；聖路易斯，密蘇裡州)。旅採用活性氧法(AOM)和/或油穩定性指標(OSI)法評估脂質材料的穩定性。AOM使空氣以特定流速、溫度和濃度條件通過油或脂肪樣品鼓泡來測量油或脂肪的穩定性。這些試驗採用的溫度為98°C。在間歇期通過用碘滴定來測定處理過程中產生的過氧化物和過氧化氫。AOM值被定義為20小時後每千克脂肪中過氧化物的毫克當量(m叫/kg)。數值越低則油或脂肪越穩定。OSI法類似於AOM法，也是使空氣通過恆溫樣品。這些試驗採用的溫度為U0。C。使空氣通過樣品之後經去離子水容器鼓泡。脂質氧化產生的揮發性酸溶於水並提高其電導率。連續監測水的電導率，OSI值被定義為電導率變至預定值所需的小時數。OSI值越高則油或脂肪越穩定。，。評估了不存在抗氧化劑(對照)或存在500卯mETX或500ppmETX+TBHQ時大豆油的氧化穩定性。如圖1所示，ETX+TBHQ組合將OSI誘導時間延長至12小時，而對照和單獨ETX的誘導時間約為6小時。同樣，存在ETX十TBHQ時大豆油受到氧化應激的過氧化值(接近O)遠低於單獨存在ETX時大豆油受到的應激(約llmeq)。圖2展示了類似的數據，顯示與僅存在500ppmETX時相比，存在500ppmETX+TBHQ時黃色油脂的OSI誘導時間增加、AOM過氧化物水平降低。在存在500ppmETX、100ppmTBHQ、以及500ppmETX+100ppmTBHQ摻合物時使溼酒糟接受氧化應激。圖3顯示了ETX+TBHQ組合的協同穩定作用。用該組合處理的酒糟的OSI誘導時間遠高於單用ETX和單用TBHQ的OSI誘導時間總和。這些數據揭示，乙氧喹和TBHQ的組合在穩定脂質材料中的功效遠高於單用乙氧喹。實施例2乙氧喹和叔丁基氫醌的組合能穩定用於反芻動物飲食中的油和脂肪該研究的目的是評價乙氧喹和TBHQ的組合穩定用於牛膳食中的非惰性油和脂肪的能力。方法測定人工氧化應激前後五種不同食用油或脂肪來源的氧化程度和脂肪酸曲線。所述油或脂肪為玉米油(CO)，大豆油(SO);鯡魚魚油(fo);黃色油脂(yg);以及玉米油、魚油和黃色油脂的摻合物(bo)。各種油或脂肪的品質通過氧化程度(初始過氧化值，ipv)來確定。初始過氧化值測量的是脂質氧化最初階段形成的過氧化物和過氧化氫的濃度。用碘離子滴定測量每千克脂肪中過氧化物的毫克當量(meq/kg)。在不存在或存在500ppmagradoplus⑧時對油或脂肪施以人工氧化應激(見實施例1)。油或脂肪的穩定性採用實施例1所述的aom和osi法估算。Aom採用的溫度為鯡魚魚油55°C，其他油和脂肪為98°C。Osi法釆用的溫度為鯡魚魚油70°C，其他油和脂肪11(TC。每種油或脂肪樣品測定三次。測定不存在或存在抗氧化劑時aom人工應激之前和之後20小時的脂肪酸曲線。測定脂肪酸曲線(fap)時採用裝備有火焰電離檢測器(flameionizationdetector)和30mx0.25mm(0.2膜)supelco2380燒結二氧化矽毛細柱(supelco2380fiisedsilicacapillarycolumn)的hp5890agc(安捷倫科技有限公司(agilenttechnologies,inc.);聖克拉拉(santaclara)，加州)。注射器和檢測器溫度分別維持在250。C和260°C。載體氣為氦氣(20cm/s)，入口壓力為104kpa。柱溫編程為140°C3分鐘，然後以2。C/分升至220。C，並在220。C維持2分鐘。與內標(cl7:0)比較將峰值量化。^J參合的油、鯡魚魚油和黃色油脂的初始過氧化物水平高(數據未顯示)揭示這些脂質在施以任何人工應激之前已氧化。所有脂質來源在人工環境下易於氧化(表l)。存在抗氧化劑摻合物時，所有脂質來源顯示在人工環境下20小時後aom值顯著降低(表1)。儘管抗氧化劑能顯著降低摻合油(bo)樣品的氧化，但aom值仍舊高於20meq/kg，這是通常接受的酸敗閾值。這顯示摻合油製品比任何同系油或脂肪源更難穩定。所有測試油和脂肪的osi值顯著升高(表1)。該值從摻合油的3小時升高至魚油的41.9小時。表l:平均活性氧法和氧化應激後的油穩定性指標值活性氧法20小時(meq/kg脂肪)ETX+TBHQ對照LSMSE4.7a106.633.9a11.8a120.6。138.9b252.6b237.3b8.325油油油米合油豆玉摻魚大tableseeoriginaldocumentpage26ETX+TBHQLSMSE一行中不同字母的平均值顯著不同(p〈0.05)。氧化導致測試油和脂肪的脂肪酸曲線被顯著修飾。存在抗氧化劑時，摻合油、大豆油和黃色油脂的亞油酸(c18:2)和亞麻酸(c18:3)濃度得以維持，而氧化脂質中這些脂肪酸的濃度顯著降低(表2)。不存在抗氧化劑時摻合油、魚油、大豆油和黃色油脂中棕櫚酸(c16:0)和硬脂酸(c18:0)的濃度也顯著升高，而存在抗氧化劑時這些脂肪酸的濃度未升高(數據未顯示)。表2:用或不用抗氧化劑時氧化應激前後所選脂肪酸的百分比_tableseeoriginaldocumentpage26氧化魚油中高不飽和Q-3不飽和脂肪酸，二十二碳六烯酸(DHA;C22:6)的水平顯著降低(佔總脂肪的5.4%)。然而，抗氧化劑的存在能防止這種降低(佔總脂肪的7.4%，對照為佔總脂肪的7.5%)。氧化的摻合油/脂肪中所有Q3和Q6脂肪酸的濃度降低，而抗氧化劑使氧化部分逆轉(圖4)。同樣，氧化應激過程中摻合油/脂肪中Q-3脂肪酸，二十碳五烯酸(EPA，C20:5)和DHA的濃度降低，而抗氧化劑縮小了降低的幅度(圖5)。這些數據表明，乙氧喹和TBHQ的抗氧化劑組合顯著提高了某些油和脂肪抵抗極端氧化應激的能力。這些抗氧化劑能維持或顯著降低不飽和脂肪酸如亞麻酸和亞油酸以及高不飽和D3和脂肪酸尤其是EPA和DHA的氧化。實施例3乙氧喹和TBHQ的組合能防止固體飼料中脂肪酸的氧化牛膳食中約50%的脂質來自補充油和脂肪之外的詞料。棉籽、酒糟、大豆產品或魚粉等飼料對於總膳食脂質有顯著貢獻。來自這些成分的脂質大多含有高水平的易被氧化的不飽和脂肪酸。例如，來自乙醇工業的酒糟是非常不穩定的不飽和脂肪酸的來源。蒸餾期間的加熱處理以及溼酒糟的高含水量加劇了不飽和脂肪酸的氧化過程。最終結果是酒糟中的脂肪高度氧化且不穩定。該研究的目的是確定ETX+TBHQ組合穩定溼酒糟(WDG)或亞麻子中的脂質的功效。膽。在存在或不存在乙氧喹和TBHQ摻合物(AGRADOPLUS⑧)時採用基本如實施例1所述的活性氧法(AOM)測定WDG或亞麻子中脂肪的氧化穩定性。液體抗氧化劑製劑含有65。/。ETX、7%TBHQ、7%檸檬酸、19%丙二醇和2%玉米油。乾燥抗氧化劑植基含有50%ETX、5%TBHQ、5%檸檬酸和10%碳酸鈣。皇蜜。存在ETX+TBHQ時亞麻子中脂肪酸的氧化降低(圖6A)。同樣，ETX+TBHQ組合能降低溼酒糟中過氧化物和過氧化氫的形成(圖6B)。如實施例1所述，在不存在或存在抗氧化劑摻合物時分析氧化前後溼酒糟的脂肪酸曲線。氧化應激期間亞油酸(C18:2)和亞麻酸(C18:3)濃度降低，但抗氧化劑摻合物能防止這種下降(圖7)。通過彈式量熱法測量不存在或存在抗氧化劑時氧化的穀物的能量含量。測量時，將樣品加熱至90'C並將氧氣經樣品鼓泡。相對於新鮮脂質樣品，能量含量降低了35%，但存在抗氧化劑能量值得以保持。抗氧化劑的保護效力非常關鍵，因為氧化不僅降低了油和脂肪的能量和生物值，而且造成其他脂基成分如纖維素和色素的氧化。因此，這些發現表明可將乙氧喹和TBHQ的組合加入乳牛和肉牛27的最終膳食以防止飼料中脂肪酸和維生素的氧化。實施例4使用有或沒有抗氧化劑的新鮮或氧化脂肪膳食時瘤胃發酵期間的營養素消化自由基和氧化應激對瘤胃微生物的影響仍舊未知。該研究的目的是使用連續培養發酵罐來評價餵食不存在或存在膳食抗氧化劑的新鮮脂肪或氧化脂肪對營養素消化率的影響。縱蘑會。配製泌乳期配給以實現40kg/天的產乳量，其預計的日產乳指數為24kg/天。膳食成分和營養素組成示於表3。該膳食由52%草料和48%濃縮混合物構成，以乾物質計，所述混合物中含有3%試驗脂肪。該試驗脂肪由不穩定的不飽和脂肪的摻合物構成；該摻合物中含有33%魚油、33%玉米油、26%大豆油和7%不可食的牛脂。92。C將空氣經試驗脂肪鼓泡24小時將半數脂肪氧化，其過氧化值達到215meq/kg(表4)。表3:試驗膳食的成分和營養素組成(％)_項目FFFF+AOOFOF+AO苜蓿窖藏半乾草料4.564.564.564.56玉米青貯料28.1228.1228.1228.12混合乾草19191919大豆粉4415.5815.5815.5815.58玉米谷蛋白粉0.660.660.660.66豆殼3.83.83.83.8大麥片5.225.225.225.22玉米片17.4817.4817.4817.48新鮮脂肪3.003.000.000.00氧化脂肪0.000.003.003.00尿素0.660.660.660.66氧化鎂0.010.010.010.01磷酸二鈣0.280.280.280.28碳酸氫鈉0.970.970.970.97石灰石0.280.280.280.28TMin鹽0.190.190.190.19ADE混合物0.110.110.110.11維生素E0.060.060.060.06抗氧化劑摻合物00.0100.01粗蛋白18.318.618.818.5可溶性蛋白35.731.534.835.6(%粗蛋白)中性去汙劑纖維(neutral28.328.627.229detergentfiber)酸性去汙劑纖維(acid18.118.41817.9detergentfiber)非結構性碳水化合物31.831.131.931.6(澱粉+糖)澱粉25.825.22625.7糖65.95.95.9醚提取物5.65.55.45.5灰分6.265.86.2適量非纖維類碳水化合物41.641.442.841C12:00.090.100.100.10C14:01.232.102.161.16C14:l0.030.000.000.06C15:00.180.170.190.17C16:014.9614.8715.3515.36C16:l2.362.502.542.53C18:03.373.293.413.46順-C18:l18.8718.8419.2619.27C18:238.5738.8738.6537.94C18:35.085.115.084.99C20:00.530.540.540.56C21:00.450.450.360.38順-9，反-11C18:2(CLA)20.160.140.120.13C22:00.400.360.400.42C20:40.190.200.160.17C20:52.742.812.142.21C24:00.270.440.170.16C22:61.541.551.071.13其他脂肪酸8.987.668.319.79總脂肪酸4.514.444.124.491處理FF=新鮮脂肪；FF+AO=新鮮脂肪+抗氧化劑；OF=氧化脂肪；OF+AO=氧化脂肪+抗氧化劑.2共軛亞油酸_有四種不同膳食處理方法a)3%未添加抗氧化劑的新鮮非氧化脂肪(FF-AO);b)3。/。新鮮非氧化脂肪+100mg/kg膳食抗氧化劑^+AO);c)3%未添加抗氧化劑的氧化脂肪(OF-AO);和d)3%氧化脂肪+100mg/kg膳食抗氧化劑(OF+AO)。所述膳食抗氧化劑(AO)由65%乙氧喹、7%TBHQ、7%檸檬酸、19%丙二醇和2%玉米油的液體摻合物構成。恰在混合膳食之前在試驗脂肪中加入膳食抗氧化劑，加入量為100mg/kg。膳食在餵食之間於0。C保存，並在餵食前使其恢復室溫。用過氧化值以及脂肪酸曲線的變化(表4)來評價加入抗氧化劑前兩種試驗脂肪的品質和穩定性。表4:新鮮和氧化脂肪的過氧化值和脂肪酸曲線新鮮脂肪(FF)氧化脂肪(OF)過氧化值(meq/kg脂肪)3.5215C14:0(%)3.63.8C16:0(%)14.615.8C18:0(%)4.04.3C18:l(%)21.722.9C18:2(%)35.034.5C18:3(%)3.63.1C20:5(%)5.13.6C22:6(%)2.41.7總Q6(%)35.9634.97總Q3(%)12.389.98遂續潛養系統。採用Hoover等(J.AnimalSci.(1976)43:528-534)所述的12單元雙流連續培養系統。瘤胃接種物獲自有兩根瘤胃插管的泌乳荷爾斯坦因乳牛。將兩種樣品混合後接種到1,164-mL發酵罐內。在發酵罐內自動加入試驗膳食(經研磨可通過4-mmm篩)，每天2次，共10天，相當於每12小時一次。連續注入Weller和Pilgrim所述人造唾液(BritishJ.Nutr.(1974)32:341-350)，使培養期的液體稀釋率達到每小時12%。所有處理一式三份連續培養10天。連續培養條件如下液體稀釋率液體稀釋率:12%/小時，固體保留時間24小時，攝食量100g乾物質/天，發酵溫度39'C，pH每0.5小時記錄一次。前7天用於平衡。最後3天將流出液收集在冰浴(icebatch),混合併保留1L樣品供分析。在第10天收集最終的流出液，然後使發酵罐的內容物沉降並取上層液體用於微生物分析。眾學藩。用烘箱IOO'C乾燥飼料24小時以確定其乾物質量。將34-40g流出液樣品以30,000xg離心45分鐘(Lean等(2005)J.DairySci.88:2524-2536)以確定流出液中乾物質的量。測定消化率時將消化的乾物質(DMD)和消化的有機物(OMD)對微生物乾物質和有機物進行校正。採用標準方法(Goering禾卩VanSoest(1991)Agric.HandbookNo.379，ARS，USDA;Crawford(l983)J.DairySci.3066:1881-1890)測定飼料和連續培養流出液內中性去汙劑纖維含量和酸性去汙劑纖維含量。採用標準方法測定伺料、流出液以及細菌、氨和醚提取物的總氮。採用氣相色譜(Lean等(2005)J.DairySci.88:2524-2536)分析揮發性脂肪酸。採用Zi皿和Owens(Can丄Anim.Sci.(1986)66:157-166)描述的方法測定流出液和細菌中嘌呤的濃度。採用Smith(WisconsinAgric.Exp.Stn.Res.(1969)R印.41)描述的方法測定飼料和流出液中的糖和澱粉，但還原糖釆用鐵氰化物測定。按Kramer等(Lipids(1997)32:1219-1228)的描述將發酵罐流出樣品凍幹並用甲醇鈉/甲醇HC1轉化成甲酯。用裝備有火焰電離檢測器和30mx0.25mm(0.2jim膜)Supelco2380燒結二氧化矽毛細柱的HP5890AGC(安捷倫科技有限公司)分析發酵罐流出脂肪酸。注射器和檢測器溫度分別維持於250。C和26(TC。載體氣為氦氣(20cm/s)，入口壓力為104kpa。柱溫編程為140°C3分鐘，然後以2。C/分升至22(TC，並在22(TC維持2分鐘。與內標(C17:0)比較將峰值量化。統伊分私釆用SAS(SAS研究所(SASInstitute),2003)的GLM程序分析變量將數據以完全隨機設計進行分析。脂肪類型以及存在膳食抗氧化劑的主效應以2x2階乘陣列檢測。當p值小於0,05且p值趨勢小於或等於0.1以及高於0.05時認為有顯著差異。遂蜜。分析營養素的消化率並將結果示於表5;顯著值用黑體表示。與新鮮脂肪膳食相比，氧化脂肪膳食中粗蛋白的消化降低(PO.Ol)。然而，存在抗氧化劑能恢復氧化脂肪膳食中粗蛋白的消化。儘管脂肪源對中性去汙劑纖維的消化沒有影響，但抗氧化劑能顯著提高新鮮和氧化脂肪膳食中中性去汙劑纖維的消化(P<0.02)。氧化脂肪膳食內酸性去汙劑纖維的消化趨於高於新鮮脂肪膳食(P<0.08)。再者，在任何脂肪源內加入抗氧化劑能提高酸性去汙劑纖維的消化(P<0.04)。這些發現提示，加入抗氧化劑能降低脂肪對纖維素消化的不良影響。表5:不同膳食的營養素消化率_處理1屍-值項目^~"FF^"~5F^"""H~~"!^"AOAOAOAOXAGo73365222oc5化9467o573694665o9488517o00446力93佳銜劑%汙，質物白去化物機蛋性消幹有粗中31酸性去汙劑纖維44.050.050.954.00.080.040.53非結構性碳水化合物69.570.769.469.00.720.430.45(澱粉+糖)總碳水化合物32.233.534.834.90.470.050.534消化的/天Cg/d)_1處理FF=新鮮脂肪；FF+AO=新鮮脂肪+抗氧化劑；OF=氧化脂肪；OF+AO=氧化脂肪+抗氧化劑對揮發性脂肪酸進行分析顯示，有和沒有抗氧化劑的氧化脂肪膳食內丁酸產量升高(表6)。任何其他揮發性脂肪酸的產率或摩爾比沒有區別(表6)。同樣，平均發酵pH在任何處理下都沒有改變。表6:揮發性脂肪酸和pH分析_處理1P-值—項目FF-AOOF-AOFF+AOOF+AO脂肪~脂肪xAO1處理FF=新鮮脂肪；FF+AO=新鮮脂肪+抗氧化劑；OF=氧化脂肪；OF+AO=氧化脂肪+抗氧化劑.實施例5使用有或沒有抗氧化劑的新鮮或氧化脂肪膳食時瘤胃發酵期間的微生物效率該研究的目的是使用連續培養發酵罐評價餵食不存在或存在膳食抗氧化劑的新鮮脂肪或氧化脂肪對瘤胃發酵期間微生物效率的影響，所述效力通過氮代謝監測。總的揮發性脂肪酸(毫摩爾/天)醋酸丙酸異丁酸A-P比平均pH3853973963860.870.990.222052062072090.760.610.991091141151040.620.700.223.13.02.72.90.930.040.19535952580.020.660.9753.352.052.454.00.850.570.1728.428.829.126.90.460.620.300.790.740.690.740.990.140.1613.814.813.215.00.020.610.391.891.821.812.020.520.610.246.296.146.156.180.270.320.10酸爾酸酸丁酸丁摩醋丙異丁皿。試驗膳食、連續培養系統以及化學分析如實施例4所述。羞蜜。分析了不同處理對氮分配和微生物效率的影響，結果示於表7，顯著值用黑體表示。相比新鮮脂肪膳食，存在氧化脂肪膳食時的微生物生長顯著降低(屍<0.03)。然而，氧化脂肪膳食的旁路氮(By-passnitrogen)顯著升高，導致氧化脂肪處理中的非氨氮水平較高。加入抗氧化劑能增加新鮮和氧化脂肪膳食的微生物生長(P<0.09)。因此，新鮮脂肪膳食+抗氧化劑導致微生物氮多於任何其他處理。加入抗氧化劑能降低兩種脂肪處理的氨水平(P<0.06)。表7:處理對氮分配、微生物生長和微生物效率的影響處理1屍-值項目FF-AOOF-AOFF+AOOF+AO脂肪AO脂肪xAO消化的粗蛋白，％97.987.598.593.00.010.220.34非氨N，g/d2.592.692.682.690.010.010.01氨N，mg/d18.9317.9817.5816.620.160.060.99旁路N，g/d0.070.410.050.230.010.210.31微生物N，g/d2.522.282.632.470.030.090.66效率Mic.N/DMD237.432.738.134.80.030.390.63Mic.N/OMD343.839.243.141.80.100.540.32Mic.N/CHOD478.468.275.771.00.080.990.48飼料N，％579.778.481.381.00.260.010.49TWA/CHOD612.0111.8811.3811.080.530.060.80TVFA/MicN71531751501580.050.160.301處理FF=新鮮脂肪；FF+AO=新鮮脂肪+抗氧化劑；OF=氧化脂肪；OF+AO=氧化脂肪+抗氧化劑.2每千克消化的乾物質(DMD)產生的微生物氮(MicN)的克數。3每千克消化的總有機物(OMD)產生的微生物氮(Mic.N)的克數。4每千克消化的總碳水化合物(CHOD)產生的微生物氮(Mic，N)的克數。5轉化成微生物氮的消化的飼料氮(N)，％6每千克消化的碳水化合物(CHOD)產生的總揮發性脂肪酸(TVFA)的摩爾數。7產生的每千克微生物氮(Mic.N)所產生的總揮發性脂肪酸(TVFA)的摩爾數。_所有處理中的微生物效率菌高，可能是由於消化的碳水化合物含量低(見表5)和微生物氮的總產率高。然而，與氧化脂肪膳食相比，新鮮脂肪膳食在一定程度上導致微生物氮/消化的乾物質、有機物和總碳水化合物單位較高(表7)。儘管在統計學上不顯著，在氧化脂肪膳食中加入抗氧化劑提高了微生物效率。存在抗氧化劑時微生物氮中飼料氮的慘入顯著提高，而這與脂肪源無關。與抗氧化劑對33物生長的正面效果不同，抗氧化劑能降低兩種脂肪源下生長的微生物的氮含量(屍<0.02)(表8)。表8:處理對微生物組成的影響處理1屍-值項目FF-OF-FF+OF+脂肪AO脂肪AOAOAOAOxAO氮，％9.899.739.689.480.050.020,81灰分，％8.7610.199.0313.710.130.330.39RNA-氮，佔總氮的％10.2710.8310.0910.470.240.490.811處理FF=新鮮脂肪；FF+AO=新鮮脂肪+抗氧化劑；OF:=氧化脂肪；OF+AO=氧化脂肪+抗氧化劑.實施例6使用有或沒有抗氧化劑的新鮮或氧化脂肪時瘤胃發酵期間的脂肪酸代謝該研究的目的是使用連續培養發酵罐評價餵食不存在或存在膳食抗氧化劑的新鮮脂肪或氧化脂肪對瘤胃發酵期間脂肪酸代謝的影響。;^法。試驗膳食、連續培養系統以及化學分析如實施例4所述。^_在加熱氧化的長鏈不飽和脂肪酸期間通過空氣鼓泡進行試驗脂肪的氧化，反映為相比於新鮮脂肪，氧化脂肪中EPA(C20:5)和DHA(C22:6)濃度較低以及過氧化物水平較高(見上表4)。兩種脂肪類型脂肪酸曲線的差異反映為最終膳食中的脂肪總量和脂肪酸濃度。氧化脂肪膳食所含長鏈脂肪酸如C21:0、CLA、C20:4、C20:5、C24:0和C22:6的濃度低於新鮮脂肪膳食(見上表3)。流出液中的脂肪酸會隨脂肪膳食的類型以及存在或不存在抗氧化劑而改變，如表9詳細描述。與加入氧化脂肪膳食的發酵罐相比，加入新鮮脂肪膳食的發酵罐流出液的C16:0CP〈0.02)、C18:0(屍〈0.01)、C22:0(屍<0.08)和C24:0(屍<0.007)較低，而流出液的犮-C18:l(屍〈0.05)、EPA(屍<0.037)和其他不飽和脂肪酸(屍<0.012)較高。通常，與氧化脂肪膳食相比，新鮮脂肪膳食流出液的不飽和脂肪酸增加(屍<0.06)而流出液的飽和脂肪酸降低(P<0.01)。膳食中存在抗氧化劑能降低所有膳食中流出液的C18:3(屍<0.076)，同時降低氧化脂肪膳食中流出液的DHACP<0.01)。34表9:處理對混合瘤胃微生物連續培養的流出液中脂肪酸日流出量的影響1處理FF=新鮮脂肪；FF+AO=新鮮脂肪+抗氧化劑；OF=氧化脂肪；OF+AO=氧化脂肪+抗氧化劑。2CLA=共軛亞油酸^八=脂肪酸4不飽和FA包括C14:1，C16:1，同分異構體-Cm，C18:2,C18:3，CLA，C22:1,C20:5，和C22:65飽和FA包括C12:0，C14:。，C15:。，C16:o，C18:。，C20:0，C21:。，C22:0，和C24:0_計算從流出液中回收的膳食脂肪酸的比例時將流出液中脂肪酸的流出除以脂肪酸的日餵食量(表10)。氧化脂肪膳食中從流出液中回收的C16:0(P<0.01)、C18:0(P<0.068)、C24:0(P<0.0001)以及主要飽和脂肪酸總和(P<0.001)的比例明顯高於新鮮脂肪膳食。膳食中存在抗氧化劑降低了從流出液中回收的C18:3(屍<0.05)以及主要飽和脂肪酸總和(戶<0.033)的比例。觀察到當不同脂肪源中存在抗氧化劑時某些脂肪酸的回收率明顯不同。存在抗氧化劑時，氧化脂肪膳食中C22:0、DHA和其他脂肪酸的回收率降低，但在新鮮脂肪膳食中回收率無變化(例如，DHA)或升高(例如，C22:0和其他脂肪酸)。然而，存在抗氧化劑時，新鮮脂肪膳食中C24:0的回收率降低，但在氧化脂肪膳食中卻升高。表10:處理對混合瘤胃微生物連續培養流出液中脂肪酸回收率的影響_項目FF-OF-FF+OFAOxg/100g_AOAOAO+AOSEAO脂肪脂肪35處理項目mg/d_|^_OFFF+AOOF+AOSEC16:0677.32705.05664.78725.7213.49C!6:i59.8553.4561.3357.645.45Ci8:0192.96299.20198.63273.3926.11《-C18:11，408.291，235.121,447.661,366.7261.00/#-C18:i380.34395.03394.45426.5116.77339.70340.39329.08354.0120.17C20:019.7219.6119.4521.120.61Ci8:362.6064.3950.6152.086.16/#9-反11Ci8:2CLA217.7114.3813.5710.113.51C22:019.3821.5921.1422.520.81C20:539.7122.4236.5324.693.69C24:o16.3717.2316.8619.870.54C22:626.2234.1231.7515.093.68其他FA3846.33769.03亂52810.9514.49不飽和FA41,963.721,774.401,982.261，890.3873.39飽和FA5987.761185.39983.011130.5327.54匕曰月oA5167168728546CTJ1^Q;cScJcJcJoicscsoj838001228964oGJft5l/Jf100o372767o944952744893o6362o41ooo262o5力3991ooooC16:0100.4111.6100.7105.22.00.180.010.14C16:l56.351.255.355.74.90.890.350.96C18:0126.8212.9135.9175.917.40.440.010.22屏C18:144.749.847.249.32.00.630.100.46C18:219.521.419.120.81.20.670.170.95C20:083.088.781.384.42.60.280.130.62C18:327.330.822.323.22.70.050.450.65屏9-厄ll-C18:2(CLA)249.5298.3211.0179.360.60.230.890.53C22:0106.7132.5132.1118.24.60.260.240.01C20:5(EPA)32.125.429.324.93.10.600.120.73C24:0134.0246.885.9285.53.60.230.010.01C22:6(DHA)37.677.146.329.75.70.010.070.01其他脂肪酸208.9224.8235.7184.53.90.120.010.01不飽和脂肪酸262.662.563.861.52.40.960.620.67飽和脂肪酸397.5122.395.0110.92.70.030.010.141處理FF=新鮮脂肪；FF+AO=新鮮脂肪+抗氧化劑；OF=氧化脂肪；OF+AO=氧化脂肪+抗氧化劑.2不飽和脂肪酸包括C14:l，C16:l，同分異構體-C18:l，C18:2，C18:3，CLA，C22:l，EPA，禾BDHA.3飽和脂肪酸包括C12:0，C14:0，C15:0，C16:0，C18:0，C20:0，C21:0，C22:0禾口C24:0._這些數據表明，氧化脂肪膳食能降低粗蛋白的消化率，降低微生物蛋白質合成，同時降低不飽和脂肪酸的流出。加入抗氧化劑乙氧喹和TBHQ能逆轉或減輕這些效應。實施例7餵食存在和不存在抗氧化劑的新鮮和氧化脂肪對乳牛泌乳的影響該研究的目的是評價餵食不存在或存在膳食抗氧化劑組合的新鮮或氧化大豆油對中至晚期泌乳乳牛產乳量和抗氧化狀態的影響。給中至晚期的泌乳小母牛餵食四種膳食中的一種6周，期間監測產乳量和其他性能參數。抗氧化狀態通過測量血漿內抗氧化酶類的活性來確定。必殿/7微亂將44隻初次分娩的中至晚期泌乳荷爾斯坦因乳牛養在紐約雲杉港研究牧場(SpruceHavenResearchfacility)的隔離畜棚內，並在175泌乳曰(DIM，dayinmilk)隨機分配處理方法。研究包括以下四項處理a)在膳食中加入2n/。的新鮮的非氧化大豆油(FF);b)在膳食中加入2%新鮮的非氧化大豆油+100mg/kg膳食抗氧化劑(FF+AO);c)在膳食中加入2。/。的氧化大豆油(OF);和d)在膳食中加入2。/。的氧化大豆油+100mg/kg膳食抗氧化劑(OF+AO)。所述36膳食抗氧化劑由乙氧喹和叔丁基氫醌(AGRADOPLUS,諾華絲國際股份有限公司；聖路易斯，密蘇裡州)的液體摻合物構成。研究的前15天給所有牛隨意餵食含2。/。新鮮不穩定大豆油(FF)的對照膳食(表11)。在此此間，測量個體的日泌乳量和飼料攝取。適應期結束時記錄身體狀況評分(BCS)、體重(BW)和血樣並作為輔助變量(covariate)。然後用四種處理膳食(表12)中的一種餵食這些牛6周。處理分配時綜合考慮DIM、獲得輔助變量期間的產乳量以及身體狀況評分。試驗膳食由58%草料和42%濃縮混合物構成，所述混合物以乾物質(DM)計含有2%試驗脂肪。遵照NRC2001的推薦和目前的工業實踐用Cornell-Penn-Minor(CPM)模型配製膳食。試驗脂肪由不穩定的大豆油構成。92'C下將空氣經試驗脂肪鼓泡24小時將半數脂肪氧化，使其過氧化值達到240m叫/kg(方法Cd12-57;AOCS，1997)。新鮮脂肪的過氧化值為0.5meq/kg。恰在混合膳食之試驗脂肪中加入膳食抗氧化劑(AO)摻合物，以膳食計加入量達到最終膳食的100mg/kg。新鮮的和氧化的大豆油在餵食2天前保持冷凍。表ll:基礎膳食的組成c/o乾物質(DM)細磨玉米大豆粉49玉米酒糟SoyPlus碳酸氫鈉碳酸鈣玉米青貯料2004窖藏半乾草料，第二茬200547.0710.5110.5112.612.181.470.960.910.510.430.440.440.240.270.310.240.190.090.050.060.48.40大豆油2.00Alimet0.08表12:膳食分析，佔乾物質的％處理膳食組分FFOFFF+OF+AOAO粗蛋白(CP)17.818.018.118.2可溶性蛋白f/。CP)38.643.836.337.6中性去汙劑纖維(NDF)31.132.131.931.5酸性去汙劑纖維(ADF)18.818.719.718.8非結構性碳水化合物(NSC1)29.930.928.830.4澱粉24.525.523.324.9糖5.45.45.55.5醚提取物4.65.24.84.8灰分7.67.67.57.5非纖維類碳水化合物(NFC2)38.937.037.738.0NSC=澱粉+糖計算出的NFC絲激l膽禪^雄。每天記錄每隻奶牛的提供的飼料量以及未被吃掉的飼料量(orts)。每天記錄每隻奶牛上午和下午的產乳量。每周，根據每次擠奶時產生的奶量將24小時內取得的個體奶樣混合併通過紅外分光光度法(ND公司(NYDHIA)，伊薩卡鎮(Ithaca)，紐約)分析牛奶中的蛋白質和脂肪含量。每兩周取一次血樣以評價氧化應激狀態。餵食2小時後用肝素血漿管從每隻乳牛的尾靜脈獲得血樣，立即置於冰上，然後1,000g離心10分鐘。取血漿上清液冷凍，隨後用凱門化學製品公司(CaymanChemicalCompany,安阿伯(AnnArbor)，密西根州)提供的測定試劑盒(目錄號706002)來分析超氧化物歧化酶(SOD)，用卡爾生物化學公司(Calbiochem，達姆施塔特(Darmstadt)，德國))提供的試劑盒(目錄號615700)分析總的抗氧化狀態(TAS)，用凱門化學製品公司提供的測定試劑盒(目錄號703102)分析穀胱甘肽過氧化物酶(GPX)，以及用卡爾生物化學公司提供的測定試劑盒分析丙二醛(malondialdehyde)(MDA)。在整個研究中都對奶牛的日健康狀況進行監測。每周測量總混合配給(TMR)的乾物質含量。每兩周取一次濃縮物和青貯料樣品並每月混合一次，然後冷凍供日後分析。在整個研究期間草料來源維持穩定。如實施例4所述分析詞料樣品中的粗蛋白(CP)、中性去汙劑纖維(NDF)、酸性去38汙劑纖維(ADF)、乙醇。統將該研究被設計為是完全隨機的，並以2X2階乘處理陣列重複測量，主效應為脂肪類型(FF和OF)和存在或不存在AO。採用SAS(SAS研究所，2003)的MIXED程序重複測量，將數據作為完全隨機設計進行分析。重複測量狀態以周為單位，以處理的牛作為誤差項。分析輔助變量時使用預處理測量值。P值小於0.05以及P值趨勢小於或等於0.1及高於0.05表示有顯著差異(在表中用黑體表示)。羞蜜。數據分析顯示膳食內的脂肪類型(新鮮脂肪和氧化脂肪)幾乎未導致差異，但有或沒有抗氧化劑的膳食之間差異顯著。表13-15中的數據顯示了各種處理方法無抗氧化劑(-AO)，有抗氧化劑(+AO)，有新鮮脂肪(FF)，以及有氧化脂肪(OF)。餵食AO的乳牛的產乳量和牛奶成分顯示顯著變化(表13)。乳牛對AO的反應包括乾物質攝取(DMI)(屍-0,007)，3.5n/。脂肪改良奶(3.5FCM)(/^0.01)，以及乳脂產率(屍=0.01)顯著增加，而乳蛋白質含量降低(屍=0.03)(表13)。存在八0時乳產率有增加趨勢(屍=0.08)。餵食OF降低了DMI(屍0.04)，同時提高了乳脂肪產率(屍=0.02)。在為期6周的研究期間，產乳量(屍=0.0003)、3.5FCM(屍-0.04)、DMICP=0.003)和蛋白質產率(P=0.000l)逐漸降低，而BW(屍=0.000l)和BCS(屍=0.02)則提高，反映用於試驗的乳牛處於泌乳期的中至晚期(175DIM)。乳脂肪含量、乳脂肪產率以及乳蛋白質含量以周為單位沒有變化。以周為單位，對於除BW外的任何性能參數，未觀察到膳食處理相互作用。在試驗結束時，餵食OF的乳牛有最低BW(i^0.05)。觀察到餵食AO的乳牛的抗氧化狀態有顯著改變(表14)。餵食AO的乳牛的TAS高於未餵食AO的乳牛(屍<0.002)，且與餵食的脂肪類型無關。TAS水平在有AO時隨時間提高，但在沒有時降低(戶=0.0009)。脂肪類型對血漿TAS沒有影響，但觀察到顯著的周xAOx脂肪類型效應(屍=0.003)。在試驗結束時，餵食AO+OF的乳牛顯示TAS提高最多(0.42±0.04mM)，而餵食不含AO的OF的乳牛顯示TAS值最低(0.07±0.04mM)。39表13:處理對產乳量和牛奶成分的影響處理1戶-值項目-AO+AOFFOFSE2AO脂肪AOx脂肪周產乳量，kg/d27.3828.1227.7927.710.290.080.840.920.0003FCM，kg/d27.3228.3627.5928.100.280.010.2020.260.04DMI，kg/d20.2820.9120.8320.360.160.00730.040.350.0029BW，kg627.67631.40632.42626.653.550.4580.2550.980細1BCS3.643.573.603.610.040惡0.9040.750.02牛奶成分:脂肪％3.493.563.483.570.040.250.140.140.27脂肪產率，kg/d0.95LOO0.951.000.020.010.020.240.22蛋白質％3.032.963.002.990.030.030.680.150.15蛋白質產率，kg/d0.820.830.830.830.010.570.920.120.0011處理FF=新鮮脂肪；+八0=有抗氧化劑；OF=氧化脂肪;-AO=無抗氧化劑表14:處理對血漿參數的影響__P-值周x項目-AO+AOFFOFSE2AO脂肪AOx脂肪周脂肪0.040.230.00090.0030.050.680.170.030.040.030.210.250.1250.2030.5290.758處理FF=新鮮脂肪；+八0=有抗氧化劑OF=氧化脂肪-AO=無抗氧化劑標準差TAS=血漿的總抗氧化狀態MDA=血漿中的丙二醛GPX=穀胱甘肽過氧化物酶活性SOD=血漿中的超氧化物歧化酶TASJ，mM0.170.24MDA4，uM10.0310.21GPX5,nmol/mg蛋白質50.9175.57SOD6，U/mg蛋白質0.0230.0230.210.200.010.0020.530.279.6610.580.430.760.1440.6957.4369.064.40.0090.050.810.0210.0250扁0.5490扁70.047在試驗過程中，血漿MDA值從10.98降至9.54±0.46^M(屍=0.005)。觀察到顯著的周x脂肪類型xAO效應(P=0.03)。與其餘處理相比，試驗中餵食無AO的OF膳食的乳牛在第2周(13.27±0.9pM)和第6周(10.9±0.9pM)有最高MDA水平。餵食OF與FF時，在膳食中加入AO能升高血漿GPX活性(屍=0.009)，但該效應只在6周試驗結束時觀察到(屍=0.07)。餵食OF使血漿SOD活性升高(屍=0.0007)，餵食OF+AO時有最大值(屍=0.05)。禁論。餵食OF減少了攝食，對產乳量沒有影響，但提高了乳脂肪產率。在不存在AO時餵食6周OF提高了血漿MDA和GPX活性，但降低了乳牛的血漿抗氧化狀態。餵食AO能逆轉這些效應中的大多數並提供其他益處。餵食AO不僅提高了乾物質攝取、產乳量、乳脂肪產率和脂肪改良奶，而且改善了血槳抗氧化狀態和抗氧化酶活性，這些效應與餵食給乳牛的脂肪的氧化程度無關。權利要求1.一種降低與給反芻動物餵食非惰性脂肪源相關的不良瘤胃作用的方法，該方法包括給反芻動物餵食與包含喹啉化合物的第一抗氧化劑和不同於第一抗氧化劑的第二抗氧化劑組合的非惰性脂肪源。2.如權利要求1所述的方法，其特徵在於，所述第一抗氧化劑是取代的1,2-二氫喹啉，所述第二抗氧化劑選自合成抗氧化劑、半合成抗氧化劑或天然抗氧化劑。3.如權利要求2所述的方法，其特徵在於，所述取代的1，2-二氫喹啉是具有式(I)的化合物(I)式中R1、R2、&和!14獨立選自氫或具有1至約6個碳原子的垸基；和RS是具有1至約12個碳原子的垸氧基。4.如權利要求3所述的方法，其特徵在於，所述取代的1，2-二氫喹啉是6-乙氧基-1,2-二氫-2,2，4-三甲基喹啉。5.如權利要求l所述的方法，其特徵在於，所述第一抗氧化劑是6-乙氧基-l,2-二氫-2,2,4-三甲基喹啉，所述第二抗氧化劑是丁基化羥基苯甲醚。6.如權利要求l所述的方法，其特徵在於，所述第一抗氧化劑是6-乙氧基-l,2-二氫-2,2，4-三甲基喹啉，所述第二抗氧化劑是丁基化羥基甲苯。7.如權利要求l所述的方法，其特徵在於，所述第一抗氧化劑是6-乙氧基-l,2-二氫-2,2，4-三甲基喹啉，所述第二抗氧化劑是叔丁基氫醌。8.如權利要求1所述的方法，其特徵在於，所述第一抗氧化劑和第二抗氧化劑被配製成液體組合物。9.如權利要求8所述的方法，其特徵在於，所述液體組合物包含約40-75重量％的6-乙氧基-1,2-二氫-2，2，4-三甲基喹啉以及約1-20重量％的叔丁基氫醌。10.如權利要求8所述的方法，其特徵在於，所述液體組合物包含約60-70重量％的6-乙氧基-1,2-二氫-2,2,4-三甲基喹啉以及約1-10重量％的叔丁基氫醌。11.如權利要求8所述的方法，其特徵在於，所述液體組合物還包含約10-30重量％的至少一種溶劑載體。12.如權利要求1所述的方法，其特徵在於，所述第一抗氧化劑和第二抗氧化劑被製成乾燥組合物。13.如權利要求12所述的方法，其特徵在於，所述乾燥組合物包含約30-70重量％的6-乙氧基-l,2-二氫-2,2，4-三甲基喹啉以及約1-10重量％的叔丁基氫醌。14.如權利要求12所述的方法，其特徵在於，所述乾燥組合物包含約45-55重量％的6-乙氧基-l,2-二氫-2，2，4-三甲基喹啉以及約3-7重量％的叔丁基氫醌。15.如權利要求1所述的方法，其特徵在於，所述第一抗氧化劑是6-乙氧基-1,2-二氫-2,2，4-三甲基喹啉，所述第二抗氧化劑是天然抗氧化劑。16.如權利要求1所述的方法，其特徵在於，所述第一抗氧化劑和所述第二抗氧化劑被加入反芻動物的供水中給其餵食。17.如權利要求1所述的方法，其特徵在於，所述第一抗氧化劑和所述第二抗氧化劑被作為反芻動物詞料配給的一部分給其餵食。18.如權利要求1所述的方法，其特徵在於，所述第一抗氧化劑和所述第二抗氧化劑作為同一組合物的一部分基本同時餵食給反芻動物。19.如權利要求1所述的方法，其特徵在於，所述第一抗氧化劑和所述第二抗氧化劑作為不同組合物的一部分依次餵食給反芻動物。20.如權利要求1所述的方法，其特徵在於，以飼料配給的乾物質計，所述非惰性脂肪源約佔1-10%。21.如權利要求20所述的方法，其特徵在於，所述非惰性脂肪選自下組:植物衍生脂肪，魚衍生脂肪，動物衍生脂肪，含油種子，酒糟，以及它們的組合。22.如權利要求1所述的方法，其特徵在於，所述反芻動物選自肉牛，乳牛或綿羊。23.如權利要求1所述的方法，其特徵在於，所述反芻動物是乳牛，所述第一抗氧化劑是6-乙氧基-l,2-二氫-2，2,4-三甲基喹啉，所述第二抗氧化劑是叔丁基氫醌。24.如權利要求23所述的方法，其特徵在於，餵食所述乳牛的6-乙氧基-1,2-二氫-2,2,4-三甲基喹啉佔其飼料配給約20至約250ppm。25.如權利要求1所述的方法，其特徵在於，所述反芻動物是肉牛，所述第一抗氧化劑是6-乙氧基-l,2-二氫-2，2，4-三甲基喹啉，所述第二抗氧化劑是叔丁基氫醌。26.如權利要求25所述的方法，其特徵在於，餵食所述肉牛的6-乙氧基-1,2-二氫-2，2,4-三甲基喹啉佔其飼料配給約50至約250ppm。全文摘要本發明提供了一種能有效穩定反芻動物飲食中使用的不動類型脂肪的抗氧化劑的組合。當所述抗氧化劑組合被加入反芻動物飼料配給或水源時它通常能提高營養素如纖維和蛋白質的消化，促進瘤胃發酵，促進微生物生長，提高微生物效率，提高產乳量和/或乳脂含量，改善反芻動物的抗氧化狀態，以及削弱某些脂肪在反芻動物中的副作用。文檔編號A61K31/47GK101511363SQ200780033462公開日2009年8月19日申請日期2007年6月29日優先權日2006年7月12日發明者G·R·鮑曼,M·巴斯克斯-阿諾申請人:諾華絲國際股份有限公司