一種抗SARS－CoV免疫球蛋白抗體及其製備方法
2023-05-07 16:29:36 1
專利名稱：一種抗SARS－CoV免疫球蛋白抗體及其製備方法
技術領域：
本發明涉及一種用於治療、預防及診斷SARS-CoV的抗SARS-CoV免疫球蛋白抗體，屬於生物製藥領域。
背景技術：
世界衛生組織在今年3月12日發出關於非典型肺炎(atypicalpneumonia)的全球性警告之後，隨後命名為嚴重急性呼吸症候群(SevereAcute Respiratory Syndrome，SARS)。在WHO的高度重視、協調和組織下，引起SARS的病原體很快被確認為一種新的或變異的冠狀病毒，並相應命名為SARS-CoV。自SARS爆發後很快在全球傳播，現已蔓延到世界30多個國家和地區，嚴重地影響人們的健康和生命，成為21世紀初最危害人類的頭號大敵。馬抗血清(又叫馬抗免疫球蛋白)自古以來是用於重要病原體感染的一種有效的應急治療措施，至今至少有7種抗血清在臨床廣泛應用，發揮重要的治療和預防傳染病的作用。馬抗血清發展經歷了傳統的整個抗體分子，發展到今天有效去掉能引起毒副作用的Fc段抗體分子和其它血漿雜蛋白分子，獲得具有與病原體抗原特異結合的高純度F(ab′)2治療抗體，達到消滅病原體的效果。基於香港、新加坡和我國大陸報導針對SARS恢復期病人的血清具有治療SARS的作用，但SARS恢復期病人血清的廣泛應用存在一定的問題，並且人們對SARS-CoV的認識還很浮淺，特別是在安全性等方面存在一定的問題，制約其應用和發展。
因此，研製有治療與預防SARS的馬抗SARS-CoV免疫球蛋白，是非常有價值的治療性和預防性抗體藥物。
發明內容
本發明的一個目的在於公開一種新型的用於治療、預防及診斷SARS-CoV的抗SARS-CoV免疫球蛋白F(ab′)2抗體；本發明的另一個目的在於公開製備馬抗SARS-CoV免疫球蛋白F(ab′)2抗體的方法。
一種用於治療、預防及診斷SARS-CoV的抗SARS-CoV免疫球蛋白抗體，是馬抗SARS-CoV免疫球蛋白F(ab′)2抗體。
本發明馬抗SARS-CoV免疫球蛋白F(ab′)2抗體的製備包括以下步驟1)滅活純化SARS-CoV加入不完全福氏佐劑乳化製備免疫原，採用皮下、肌肉、腹股溝淋巴結多點免疫經檢疫符合生物製品要求的馬匹，免疫四次、間隔10天免疫一次，試血測抗體效價對流電泳1∶128、間接酶聯免疫1∶12800，測抗體中和效價細胞病變法1∶12800、空斑減數法1∶12800，並不同SARS-CoV標準株免疫馬產生的中和抗體均與其它SARS-CoV毒株呈現一致的中和抗體活性；2)採集馬抗SARS-CoV血漿，用無熱源2倍蒸餾水稀釋加入21％飽和度硫酸銨混勻、離心棄沉澱纖維蛋白和白蛋白，上清再加入9％飽和度硫酸銨混勻離心要沉澱免疫球蛋白G(IgG)，用無熱源蒸餾水恢復原體積再用30％飽和度硫酸銨混勻、離心要沉澱IgG，先加入一定量的無熱源蒸餾水、後加入無熱源0.9％氯化鈉鹽水用6萬超濾器超濾除鹽、濃縮和去雜蛋白，超濾液為純化馬抗SARS-CoV IgG；3)純化的馬抗SARS-CoV IgG用鹽酸調PH至3.2後胃蛋白酶切割，再用氫氧化鈉調PH至7.4，加熱58℃、30min，用帆布過濾去Fc段，濾液為初步純化馬抗SARS-CoV免疫球蛋白F(ab′)2抗體；4)初步純化的馬抗SARS-CoV免疫球蛋白F(ab′)2抗體過苯基蔬水層析(Phenyl Sepharose 6 Fast Flow)，用200mmol/L pH7.0磷酸緩衝液、1mol/L硫酸銨上柱，20mmol/L pH7.0磷酸緩衝液收集F(ab′)2抗體流出液，再用6萬超濾器超濾除鹽、濃縮，為純化馬抗SARS-CoV免疫球蛋白F(ab′)2抗體。
本發明製備的純化的馬抗SARS-CoV免疫球蛋白F(ab′)2抗體可製備成馬抗SARS-CoV免疫球蛋白注射劑型和黏膜噴霧劑型成品。
本發明所用純化的滅活SARS-CoV可以通過如下步驟製得1)綠猴腎細胞(Vero細胞)的復甦、培養，取細胞種子庫凍存Vero細胞株，用DMEM培養基並加入10％小牛血清培養，提供培養SARS-CoV的Vero細胞；2)SARS冠狀病毒(SARS-CoV)滴定，對培養的Vero細胞加入經鑑定凍存的SARS-CoV，擴增培養SARS-CoV，採用組織培養半數感染量(TCID50)測定SARS-CoV的毒力(106-108)，對滴定的SARS-CoV分裝凍存；3)用長滿單層的Vero細胞加入滴定的SARS-CoV，用無血清DMEM培養SARS-CoV，生產SARS-CoV；4)Vero細胞完全病變後收集SARS-CoV培養液，反覆凍融三次(冰凍-37℃)或不凍融，收集SARS-CoV細胞培養液；5)向SARS-CoV培養液加入1/2000-1/8000的β-丙內酯，4℃過夜、37℃2h滅活SARS-CoV，取滅活的SARS-CoV培養液在Vero細胞上連傳三代，檢測SARS-CoV滅活效果；6)滅活的SARS-CoV培養液，4℃、離心12000rpm/min 30min，棄沉澱雜蛋白，上清為SARS-CoV液；7)用分子量30萬超濾柱超濾SARS-CoV液，濃縮和去雜蛋白，濾液為粗製滅活SARS-CoV；8)對粗製滅活SARS-CoV上Sepharose 4 Fast Flow分子篩柱，開始緩衝液是0.1MPBS PH7.0緩衝液，用100mM PBS PH7.0洗脫，收集SARS-CoV，合併濃縮收集初步純化SARS-CoV；9)對初步純化的SARS-CoV液上DE52陰離子柱層析，用100mM PB，PH7.2液平衡並將病毒吸附在柱上、用100mM PB，PH7.2，0.35M NaCl洗脫，收集SARS-CoV峰，合併濃縮收集純化SARS-CoV；10)對超濾濃縮後SARS-CoV液的效果分析，用雙抗體夾心法測得抗原回收率平均為55％、用改良Lowry法測得雜蛋白去除率平均為92％；11)對凝膠過濾純化SARS-CoV的效果分析，用雙抗體夾心法測得抗原回收率平均為85％、採用改良Lowry法測得雜蛋白去除率平均為94.5％、用電鏡觀察病毒顆粒完整、用斑點雜交測定Vero細胞殘留DNA含量小於10.0ng/ml、用血凝抑制實驗測定病毒殘餘牛血清含量小於12.5ng/ml；12)對離子交換純化SARS-CoV的效果分析，用雙抗體夾心法測得蛋白抗原由純化前的9.4ng/U，降低到0.8ng/U，HPLC顯示病毒純度為97％；採用改良Lowry法測得雜蛋白去除率平均為98.5％；用電鏡觀察病毒顆粒完整、用斑點雜交測定Vero細胞殘留DNA含量小於1.0ng/ml；SDS-PAGE顯示有SARS-CoV的S、N、M、主要蛋白條帶，並與恢復期SARS病人的血清發生反應，純化滅活SARS-CoV分裝放-70℃保存。
本發明利用分離的SARS-CoV經培養、滅活、純化後免疫健康馬匹，產生高效價中和SARS-CoV的抗血清，去除能引起副作用的Fc片段，製備馬抗SARS-CoV免疫球蛋白F(ab′)2抗體，能特異消滅SARS-CoV，對非典型肺炎的治療和預防有很好的效果；純化馬抗SARS-CoV免疫球蛋白抗體對SARS-CoV具有很好的特異性及靈敏性。
以下實驗例進步說明本發明。
實驗例1精製馬抗SARS-CoV免疫球蛋白F(ab′)2抗體的鑑定1)精製馬抗SARS-CoV免疫球蛋白F(ab′)2抗體和純化馬抗SARS-CoV免疫球蛋白抗體，採用對流電泳抗體效價達到1∶128以上、間接酶聯免疫抗體效價高達1∶12800以上；2)精製馬抗SARS-CoV免疫球蛋白F(ab′)2抗體的中和效價的滴定，是首先在Vero細胞上對SARS-CoV滴定確定滴度為106-8，選擇200TCID50按抗體稀釋方法檢測馬抗SARS-CoV血漿、精製馬抗SARS-CoV免疫球蛋白F(ab′)2抗體的中和效價。或用蝕斑減數中和實驗方法檢測馬抗SARS-CoV血漿、精製馬抗SARS-CoV免疫球蛋白F(ab′)2抗體的中和效價在1∶10000以上；實驗例2精製馬抗SARS-CoV免疫球蛋白治療和預防效果的評價1)建立SARS-CoV感染Vero-6細胞模型，在16孔細胞培養板加入4×105/孔Vero-6，培養24h加入100CTID50BJ01 SARS-CoV200ul，24h後加入0.1mg/100mL馬抗SARS-CoV免疫球蛋白治療SARS-CoV感染的細胞，觀察48h經細胞病變法、MTT法和空斑減數法檢測馬抗SARS-CoV免疫球蛋白具有很好治療SARS-CoV的效果；2)馬抗SARS-CoV免疫球蛋白0.1mg/100mL加入4×105/孔Vero-6細胞/16孔細胞培養板，12h用100CTID50BJ01 SARS-CoV200ul感染Vero-6細胞，觀察72h經細胞病變法、MTT法和空斑減數法檢測精製馬抗SARS-CoV免疫球蛋白具有很好預防SARS-CoV的效果；3)通過對每隻恆河猴1×108滴鼻感染BJ01株SARS-CoV建立了感染模型，感染後6h、12h、24h、48h分別肌肉注射2mg/2mL(100IU)，觀察15天解剖，從症狀表現治療組減輕到無、白細胞及免疫細胞逐漸恢復正常。從病原學觀察到治療組肺、肝、腎、腦、胸腺、脾臟、淋巴結、拭胭子、血液、糞便等部位分離病原體，及PCR檢測S、N、M、E和X4主要病原體蛋白基因，經病毒培養和PCR擴增病原體均為陰性。從病理改變觀察到治療組肺、肝組織病理改變有不同程度的好轉，並產生有效的抗SARS-CoV抗體。說明馬抗SARS-CoV免疫球蛋白在SARS-CoV感染的動物有明顯治療SARS的效果；4)馬抗SARS-CoV免疫球蛋白黏膜噴霧劑3mg/3mL(150IU)給藥，每12h一次，共用4次給恆河猴預防，再用1×108滴鼻感染BJ01株SARS-CoV感染攻擊恆河猴，觀察30天預防組恆河猴沒有出現症狀、不發燒、血細胞正常，發病。從病原學觀察到預防組肺、肝、腎、腦、胸腺、脾臟、淋巴結、拭胭子、血液、糞便等部位分離病原體，及PCR檢測S、N、M、E和X4主要病原體蛋白基因，經病毒培養和PCR擴增病原體均為陰性。從病理改變觀察到治療組肺、肝組織病理改變有不同程度的好轉，並產生具有中和活性的抗SARS-CoV抗體。說明馬抗SARS-CoV免疫球蛋白在SARS-CoV感染的動物有明顯預防SARS的效果。
下述實施例均能達到上述實驗例的效果。
實施例1馬抗SARS-CoV免疫球蛋白F(ab′)2抗體製備1、SARS-CoV的培養、滅活及純化1)綠猴腎細胞(Vero細胞)的復甦、培養，取細胞種子庫凍存Vero細胞株，用DMEM培養基並加入10％小牛血清培養，提供培養SARS-CoV的Vero細胞；2)SARS冠狀病毒(SARS-CoV)滴定，對培養的Vero細胞加入經鑑定凍存的SARS-CoV，擴增培養SARS-CoV，採用組織培養半數感染量(TCID50)測定SARS-CoV的毒力(106-108)，對滴定的SARS-CoV分裝凍存；3)用長滿單層的Vero細胞加入滴定的SARS-CoV，用無血清DMEM培養SARS-CoV，生產SARS-CoV；4)Vero細胞完全病變後收集SARS-CoV培養液，反覆凍融三次(冰凍-37℃)或不凍融，收集SARS-CoV細胞培養液；5)向SARS-CoV培養液加入1/4000的β-丙內酯(1/2000-1/8000均可)，4℃過夜、37℃2h滅活SARS-CoV，取滅活的SARS-CoV培養液在Vero細胞上連傳三代，檢測SARS-CoV滅活效果；6)滅活的SARS-CoV培養液，4℃、離心12000rpm/min 30min，棄沉澱雜蛋白，上清為SARS-CoV液；7)用分子量30萬超濾柱超濾SARS-CoV液，濃縮和去雜蛋白，濾液為粗製滅活SARS-CoV；8)對粗製滅活SARS-CoV上Sepharose CL-2B分子篩純化，對粗製滅活SARS-CoV上Sepharose CL-2B柱層析，0.01Mtris-HCl PH7.4緩衝液洗脫，收集SARS-CoV，合併濃縮收集初步純化SARS-CoV；9)對初步純化的SARS-CoV液上DE52陰離子柱層析純化，用0.03MNacl、50mMTris PH8.0緩衝液洗脫，收集SARS-CoV峰，合併濃縮收集純化SARS-CoV；10)對超濾濃縮後SARS-CoV液的效果分析，用雙抗體夾心法測得抗原回收率平均為55％、用改良Lowry法測得雜蛋白去除率平均為92％；11)對凝膠過濾純化SARS-CoV的效果分析，用雙抗體夾心法測得抗原回收率平均為85％、採用改良Lowry法測得雜蛋白去除率平均為94.5％、用電鏡觀察病毒顆粒完整、用斑點雜交測定Vero細胞殘留DNA含量小於10.0ng/ml、用血凝抑制實驗測定病毒殘餘牛血清含量小於12.5ng/ml；12)對離子交換純化SARS-CoV的效果分析，用雙抗體夾心法測得蛋白抗原由純化前的9.4ng/U，降低到0.8ng/U，HPLC顯示病毒純度為97％；採用改良Lowry法測得雜蛋白去除率平均為98.5％；用電鏡觀察病毒顆粒完整、用斑點雜交測定Vero細胞殘留DNA含量小於1.0ng/ml；SDS-PAGE顯示有SARS-CoV的S、N、M、主要蛋白條帶，並與恢復期SARS病人的血清發生反應，純化滅活SARS-CoV分裝放-70℃保存。
2、馬抗SARS-CoV免疫球蛋白F(ab′)2抗體製備1)選用的SARS-CoV是我們所分離並經國家生物製品檢定所鑑定的標準毒株，所用Vero細胞是來自細胞生產工廠，進行SARS-CoV培養、滅活和純化，製備滅活純化SARS-CoV抗原；2)滅活純化SARS-CoV加入不完全福氏佐劑乳化製備免疫原，採用皮下、肌肉、腹股溝淋巴結多點免疫經檢疫符合生物製品要求的馬匹，免疫四次、間隔10天免疫一次，試血測抗體效價對流電泳1∶128、間接酶聯免疫1∶12800，測抗體中和效價細胞病變法1∶12800、空斑減數法1∶12800，並不同SARS-CoV標準株免疫馬產生的中和抗體均與其它SARS-CoV毒株呈現一致的中和抗體活性；3)採集馬抗SARS-CoV血漿，用無熱源2倍蒸餾水稀釋加入21％飽和度硫酸銨混勻、離心棄沉澱纖維蛋白和白蛋白，上清再加入9％飽和度硫酸銨混勻離心要沉澱免疫球蛋白G(IgG)，用無熱源蒸餾水恢復原體積再用30％飽和度硫酸銨混勻、離心要沉澱IgG，先加入一定量的無熱源蒸餾水、後加入無熱源0.9％氯化鈉鹽水用6萬超濾器超濾除鹽、濃縮和去雜蛋白，超濾液為純化馬抗SARS-CoV IgG；4)純化的馬抗SARS-CoV IgG用鹽酸調PH至3.2後胃蛋白酶切割，再用氫氧化鈉調PH至7.4，加熱58℃、30min，用帆布過濾去Fc段，濾液為初步純化馬抗SARS-CoV免疫球蛋白F(ab′)2抗體；5)初步純化的馬抗SARS-CoV免疫球蛋白F(ab′)2抗體過苯基蔬水層析(Phenyl Sepharose 6 Fast Flow)，用200mmol/L pH7.0磷酸緩衝液、1mol/L硫酸銨上柱，20mmol/L pH7.0磷酸緩衝液收集F(ab′)2抗體流出液，再用6萬超濾器超濾除鹽、濃縮，為純化馬抗SARS-CoV免疫球蛋白F(ab′)2抗體；6)純化的馬抗SARS-CoV免疫球蛋白F(ab′)2抗體加入適量硫柳汞防腐劑，用生理鹽水稀釋所需含量0.22um除菌分裝，分別製備馬抗SARS-CoV免疫球蛋白注射劑型和黏膜噴霧劑型成品；7)馬抗SARS-CoV免疫球蛋白成品用2％蛋白濃度做瓊脂糖電泳檢測，沒有白蛋白成分、通過10％SDS-PAGE檢測F(ab′)2純度在90％以上，抗體中和效價細胞病變法、空斑減數法1∶2000/mg蛋白，按現有國家對人抗SARS-CoV免疫球蛋白注射液1∶40/mg為1個治療單位(1IU)，則馬抗SARS-CoV免疫球蛋白成品50IU/mg；8)馬抗SARS-CoV免疫球蛋白成品的理化性質檢測，蛋白含量3.0g/L、PH值6.8、氯化鈉含量8.5g/L、硫酸銨含量0.5g/L、硫柳汞0.06g/L、凍幹製劑水分含量2.0％，均符合生物製品的規定；9)馬抗SARS-CoV免疫球蛋白成品在兔和小鼠體內進行熱源、異常毒性觀察，實驗證實馬抗SARS-CoV免疫球蛋白無熱源、異常毒性；10)馬抗SARS-CoV免疫球蛋白成品放4℃、37℃觀察穩定性，實驗證實馬抗SARS-CoV免疫球蛋白放置6個月以上中和效價不減，有很好的穩定性；11)馬抗SARS-CoV免疫球蛋白成品，通過免疫組化證實與正常人心、肝、肺、腎、腦、脾、淋巴結、腸組織器官沒有交叉反應，證實馬抗SARS-CoV免疫球蛋白沒有抗人的組織成分，用於人的防治是安全的。
權利要求
1.一種用於治療、預防及診斷SARS-CoV的抗SARS-CoV免疫球蛋白抗體，其特徵在於該抗體是的製備方法包括如下步驟1)滅活純化SARS-CoV加入不完全福氏佐劑乳化製備免疫原，採用皮下、肌肉、腹股溝淋巴結多點免疫經檢疫符合生物製品要求的馬匹，免疫四次、間隔10天免疫一次，試血測抗體效價對流電泳1∶128、間接酶聯免疫1∶12800，測抗體中和效價細胞病變法1∶12800、空斑減數法1∶12800，並不同SARS-CoV標準株免疫馬產生的中和抗體均與其它SARS-CoV毒株呈現一致的中和抗體活性；2)採集馬抗SARS-CoV血漿，用無熱源2倍蒸餾水稀釋加入21％飽和度硫酸銨混勻、離心棄沉澱纖維蛋白和白蛋白，上清再加入9％飽和度硫酸銨混勻離心要沉澱免疫球蛋白G，用無熱源蒸餾水恢復原體積再用30％飽和度硫酸銨混勻、離心要沉澱IgG，先加入一定量的無熱源蒸餾水、後加入無熱源0.9％氯化鈉鹽水用6萬超濾器超濾除鹽、濃縮和去雜蛋白，超濾液為純化馬抗SARS-CoV IgG；3)純化的馬抗SARS-CoV IgG用鹽酸調PH至3.2後胃蛋白酶切割，再用氫氧化鈉調PH至7.4，加熱58℃、30min，用帆布過濾去Fc段，濾液為初步純化馬抗SARS-CoV免疫球蛋白F(ab′)2抗體；4)初步純化的馬抗SARS-CoV免疫球蛋白F(ab′)2抗體過苯基蔬水層析，用200mmol/L pH7.0磷酸緩衝液、1mol/L硫酸銨上柱，20mmol/L pH7.0磷酸緩衝液收集F(ab′)2抗體流出液，再用6萬超濾器超濾除鹽、濃縮，為純化馬抗SARS-CoV免疫球蛋白F(ab′)2抗體。
2.如權利要求1所述的免疫球蛋白抗體，其特徵在於製備該抗體所用的純化的滅活SARS-CoV是由如下方法製得的1)綠猴腎細胞的復甦、培養，取細胞種子庫凍存Vero細胞株，用DMEM培養基並加入10％小牛血清培養，提供培養SARS-CoV的Vero細胞；2)SARS冠狀病毒滴定，對培養的Vero細胞加入經鑑定凍存的SARS-CoV，擴增培養SARS-CoV，採用組織培養半數感染量測定SARS-CoV的毒力106-108，對滴定的SARS-CoV分裝凍存；3)用長滿單層的Vero細胞加入滴定的SARS-CoV，用無血清DMEM培養SARS-CoV，生產SARS-CoV；4)Vero細胞完全病變後收集SARS-CoV培養液，反覆凍融三次，冰凍-37℃或不凍融，收集SARS-CoV細胞培養液；5)向SARS-CoV培養液加入1/2000-1/8000的β-丙內酯，4℃過夜、37℃2h滅活SARS-CoV，取滅活的SARS-CoV培養液在Vero細胞上連傳三代，檢測SARS-CoV滅活效果；6)滅活的SARS-CoV培養液，4℃、離心12000rpm/min 30min，棄沉澱雜蛋白，上清為SARS-CoV液；7)用分子量30萬超濾柱超濾SARS-CoV液，濃縮和去雜蛋白，濾液為粗製滅活SARS-CoV；8)對粗製滅活SARS-CoV上Sepharose CL-2B分子篩純化，對粗製滅活SARS-CoV上Sepharose CL-2B柱層析，0.01Mtris-HCl PH7.4緩衝液洗脫，收集SARS-CoV，合併濃縮收集初步純化SARS-CoV；9)對初步純化的SARS-CoV液上DE52陰離子柱層析純化，用0.03MNacl、50mMTris PH8.0緩衝液洗脫，收集SARS-CoV峰，合併濃縮收集純化SARS-CoV；10)對超濾濃縮後SARS-CoV液的效果分析，用雙抗體夾心法測得抗原回收率平均為55％、用改良Lowry法測得雜蛋白去除率平均為92％；11)對凝膠過濾純化SARS-CoV的效果分析，用雙抗體夾心法測得抗原回收率平均為85％、採用改良Lowry法測得雜蛋白去除率平均為94.5％、用電鏡觀察病毒顆粒完整、用斑點雜交測定Vero細胞殘留DNA含量小於10.0ng/ml、用血凝抑制實驗測定病毒殘餘牛血清含量小於12.5ng/ml；12)對離子交換純化SARS-CoV的效果分析，用雙抗體夾心法測得蛋白抗原由純化前的9.4ng/U，降低到0.8ng/U，HPLC顯示病毒純度為97％；採用改良Lowry法測得雜蛋白去除率平均為98.5％；用電鏡觀察病毒顆粒完整、用斑點雜交測定Vero細胞殘留DNA含量小於1.0ng/ml；SDS-PAGE顯示有SARS-CoV的S、N、M、主要蛋白條帶，並與恢復期SARS病人的血清發生反應，純化滅活SARS-CoV分裝放-70℃保存。
3.如權利要求1所述的免疫球蛋白抗體，其特徵在於純化的馬抗SARS-CoV免疫球蛋白F(ab′)2抗體可製備成馬抗SARS-CoV免疫球蛋白注射劑型和黏膜噴霧劑型成品。
全文摘要
本發明涉及一種用於治療、預防及診斷SARS－CoV的抗SARS－CoV免疫球蛋白F(ab′)2抗體，特徵在於該抗體為馬抗SARS－CoV免疫球蛋白F(ab′)2抗體，同時本發明公開該抗體的製備方法。本發明抗體能特異消滅SARS－CoV，對非典型肺炎的治療和預防有很好的效果。
文檔編號C07K16/08GK1621415SQ200310113790
公開日2005年6月1日 申請日期2003年11月25日 優先權日2003年11月25日
發明者王希良, 杜新安, 石辛甫, 張松樂, 劉建源, 李巖, 趙光宇, 田光, 周華 申請人:中國人民解放軍軍事醫學科學院微生物流行病研究所