一種雙藥物聯合支架的製作方法

2023-05-07 03:59:41

專利名稱：一種雙藥物聯合支架的製作方法
技術領域：
本發明屬於醫療器械領域，涉及一種雙藥物聯合支架，其採用孔 洞物理吸附在支架表面直接塗覆，通過雷帕黴素和普羅布考兩種藥物 的聯合作用抑制支架植入術後血管炎症引發的血管平滑肌細胞增生，
降低術後二次血栓的形成；同時避免載體基質有可能帶來的炎症及其 副作用。
背景技術：
冠心病患者目前的治療方式主要有藥物治療、經皮冠狀動脈介入 治療(pereu-taneous coronary intervention, PCI)禾口冠狀動脈搭橋手 術(coronary artery bypass graft, CABG ) 3種。PCI能夠疏通冠狀動 脈管腔、增加心肌血流灌注、改善冠心病治療效果、降低冠心病患者 的病死率，目前已成為臨床救治冠心病的重要手段，其中藥物洗脫支
架(drug eluting stent, DES )的應用成為冠心病PCI治療的新的裡程 碑，使冠心病患者PCI後的再狹窄率明顯降低，得到了冠心病患者的 肯定。
1977年9月，Gmentzig進行了世界上第1例經皮冠狀動脈腔內
成形術(percutaneous Transluminal coronary angioplasty.PTCA), 開
了介入心臟病學的新紀元。在此後的近30年來，以PTCA為基礎的 PCI技術主要經過了單純球囊擴張術、冠狀動脈支架術和DES的臨 床應用3個發展階段。PCI雖然有一定的臨床效果，但也存在著一些 尚待解決的問題，如單純球囊擴張術後急性血管閉塞、中遠期靶血管 再狹窄率高達30 50%、支架置入術後再狹窄的發生率仍達20 30%。 對於PCI術後再狹窄的發生機制目前尚無明確的定論。初步研究發 現，植入支架首先出現血管內膜增殖，金屬支架的壓迫能夠活化血小板和巨口藍細胞，同時細胞因子和生長因子也會對平滑肌細胞的增殖發 生作用，再加上基因的不正常調節和金屬蛋白酶的作用，進而引發細 胞增殖、細胞外基質重塑和平滑肌細胞遷移，這些因素的綜合作用可 能導致植入支架幾個月後出現嚴重的支架內再狹窄。
將這些影響因素作為治療目標，人們進行了很多研究，其中DES
是研究的熱點。DES不僅是擴張血管的支架、能夠阻止血管的反衝力
和負性重塑，同時也是緩釋藥物載體，可以在不同時間從不同的塗層 中釋放藥物，通過藥物的作用來抑制支架內再狹窄的發生。目前大規
模使用的DES主要有雷帕黴素洗脫支架(sirolimus-eluting stents, SES)和紫杉醇洗脫支架(paclitaxel-eluting stents, PES )。
雷帕黴素為天然的大環內酯類抗生素，具有很強的免疫抑制作用 和抗炎作用。有研究表明，血管內膜受損後，雷帕黴素可與血管平滑 肌細胞上表達上調的FK506結合蛋白(FKBP12)結合，結合後所形 成的複合物具有強烈抑制平滑肌細胞增殖和遷移的作用；此外，雷帕 黴素FKBP12複合物可增強P27活性，使細胞周期停滯於Gl-S階段。 動物研究顯示，在豬冠狀動脈內置入DES，可使局部組織內有效藥物 濃度維持28d,並較裸支架組新生內膜面積減少50%。雖然DES的 初步臨床應用的確取得了卓越效果，術後再狹窄的發生率較裸支架減 少了 60%以上；但近幾年對雷帕黴素藥物洗脫支架的臨床研究表明， 雷帕黴素與紫杉醇雖然都是通過抑制平滑肌細胞增殖而發揮作用的 藥物，但同時它們也可能阻止了血管內皮的修復。
動物實驗表明，DES的完全內皮化時間為3 6個月，反映到人類 則需2 3年。因此，DES置入後晚發血栓形成是近年來引起關注的熱 點，近年來報導了許多晚發支架血栓的病例，這些病例可在l年甚至 2年之後發生支架血栓，導致患者發生心肌梗死或猝死。2006年美國 心臟病學會(ACC)會議上報告的BASKET-LATE病理研究發現， DES置入後內皮化延遲或內皮化不完全是導致晚發血栓的原因。由於雷帕黴素的抗增生作用缺乏選擇性，藥物在抑制平滑肌細胞 增生的同時也抑制了內皮細胞的正常恢復，使損傷部位內皮化時間延 長，損傷部位難以癒合，存在後期炎症反應，從而易導致遲發性支架 內血栓形成。
因此，需要針對現有藥物洗脫支架的不足，開發一種可降低血管 損傷的炎症，促進內皮再生，並抑制平滑肌細胞增生，有效地預防術 後再狹窄的藥物洗脫支架。

發明內容
本發明的目的是提供一種雙藥物聯合支架，其具有良好生物相容 性、可降低血管損傷的炎症，促進內皮再生，並抑制平滑肌細胞增生， 有效地預防術後再狹窄。
為了實現本發明目的，本發明的一種雙藥物聯合支架，所述支架 表面附著有雷帕黴素和普羅布考。
其中，所述支架為具有納米級或微米級孔洞的支架，便於通過微
孔吸附結合藥物；其優選為納米級孔洞的支架；納米級孔洞支架及其
為了避免載體基質帶來的炎症及其副作用，所述支架為裸支架， 不含任何其他介質。
所述支架為不鏽鋼支架、鉻合金支架、鎂合金支架、高分子支架 或鈷基支架。
所述雷帕黴素和普羅布考通過噴塗或浸泡的方式附著於所述支 架上。
所述雷帕黴素和普羅布考在支架上的負載量範圍分別為雷帕黴 素為10 600ug/支，普羅布考為10 600ug/支。
所述雷帕黴素和普羅布考在本發明所述雙藥物聯合支架上的分 布可以有多種方式，可以是先塗覆雷帕黴素，揮幹後再塗覆普羅布考。
可以是，先塗覆普羅布考，揮幹後再塗覆雷帕黴素。可以是，將普羅布考和雷帕黴素溶解混合後塗覆於支架上。 可以是，將普羅布考和雷帕黴素溶解混合後塗覆於支架上，然後 塗覆普羅布考。
可以是，將普羅布考和雷帕黴素溶解混合後塗覆於支架上，然後 塗覆雷帕黴素。
可以是，先塗覆普羅布考，揮幹後再塗覆雷帕黴素和普羅布考的 混合溶液。
可以是，先塗覆雷帕黴素，揮幹後再塗覆雷帕黴素和普羅布考的 混合溶液。
所述雷帕黴素和普羅布考可採用四氫呋喃、甲醇等有機溶劑進行
溶解。 一般活性藥物的濃度可控制在1-10% (重量百分含量)。
本發明的研究人員選擇將兩種藥物聯合塗覆於支架上，即普羅布 考和雷帕黴素，來彌補單一藥物作用的不足。從術後血管損傷機理來 看，介入損傷使血管局部活性氧大量生成(超氧陰離子和過氧化氫), 直接刺激血管平滑肌細胞增殖，同時介導脂質過氧化反應，損傷血管 內皮細胞。損傷的內皮細胞與活化的巨噬細胞釋放多種生長因子、細 胞因子和其他血管活性物質，刺激血管內膜過度增生和細胞外基質分 泌，最終使血管再狹窄。
普羅布考是兼有調脂作用的強抗氧化劑，可以清除氧自由基，減
少一氧化氮滅活，防止LDL氧化，通過抑制oxLDL生成，促進內皮再 生，減少內皮細胞合成和分泌內皮素(ET)。研究還發現，普羅布考 能增強多種抗氧化物酶的生物活性(包括超氧物歧化酶、過氧化氫酶 和穀胱甘肽過氧化物酶)，降低細胞內活性氧濃度，抑制活性氧的信 號調控作用，防止血管平滑肌細胞過度增殖或凋亡。研究表明，普羅 布考能明顯抑制血小板源性生長因子A、血管黏附分子l和單核細胞化 學趨化蛋白l的基因表達，從而抑制血管平滑肌細胞增殖和局部炎症 反應。鑑於普羅布考具有上述優點，將它與雷帕黴素聯合使用，彌補單獨使用雷帕黴素抑制血管內皮修復的缺點，從而降低血管損傷的炎 症，促進內皮再生，並抑制平滑肌細胞增生，有效地預防術後再狹窄。
在提高支架生物相容性的同時，為避免載體基質可能帶來的炎症 及其副作用，優選具有孔洞的支架，將兩種藥物通過支架表面孔洞物 理作用吸附於支架表面。
本發明釆用微孔物理吸附原理在支架表面直接塗覆雷帕黴素和 普羅布考，製備具有良好生物相容性的新型雙藥物聯合支架。本發明 具有以下幾個優點
1. 利用孔洞物理吸附作用在支架表面塗覆雙藥物，該方法摒棄了 在金屬支架表面塗覆一層載體或基質，從而避免了載體和基質可能引 起的炎症和副作用。
2. 聯合使用了兩種藥物雷帕黴素和普羅布考，雷帕黴素能有效抑
制血管平滑肌細胞增生，普羅布考能快速修復內皮。兩種藥物聯合使 用可有效抑制術後再狹窄。


圖l為本發明所述帶有孔洞的支架表面掃描電鏡圖2為本發明所述帶有孔洞支架表面吸附雙藥物的掃描電鏡圖3為本發明所述雙藥物聯合支架體外釋放度曲線。
具體實施例方式
以下實施例用於說明本發明，但不用來限制本發明的範圍。 實施例1
先噴塗雷帕黴素，再噴塗普羅布考藥物的雙藥物支架製備 準備好已制好納米孔(100nm lum)的316L不鏽鋼裸支架，稱 取雷帕黴素溶解於四氫吹喃中配成2%的溶液，然後用噴塗機進行噴 塗，再稱取普羅布考溶解於四氫吹喃中配成6%的溶液，待第一次噴 塗支架的四氫呋喃揮幹後，再進行噴塗普羅布考溶液，揮幹後即製備
完成o經檢測，雷帕黴素在支架上的負載量為100士50ug/支，普羅布考 在支架上的負載量為300士50ug/支。
從圖1和圖2掃描電鏡觀察支架表面可見，支架表面孔洞對雙藥 物具有很好的物理吸附作用。 實施例2
先噴塗雷帕黴素，再噴塗雷帕黴素和普羅布考的混合溶液的雙藥 物支架製備。
準備好已制好納米孔的316L不鏽鋼裸支架，稱取雷帕黴素溶解 於四氫呋喃中配成2%的溶液，用噴塗機噴塗於支架上，待揮千後， 再稱取雷帕黴素和普羅布考，用四氫呋喃溶液溶解混合後配成4%溶 液，再噴塗於支架上，揮幹後即製備完成。
經檢測，雷帕黴素在支架上的負載量為500士80ug/支，普羅布考 在支架上的負載量為200士50ug/支。 實施例3
先浸泡雷帕黴素和普羅布考的混合溶液，再噴塗雷帕黴素的雙藥 物支架製備
準備好已制好納米孔的316L不鏽鋼裸支架，稱取雷帕黴素和普 羅布考，用四氫吹喃溶液溶解混合後配成10%的溶液，將支架浸泡該 溶液中30分鐘，取出揮幹後，再稱取雷帕黴素溶解於四氫吹喃中配 成5%的溶液，噴塗於支架上，待揮幹後即製備完成。
經檢測，雷帕黴素在支架上的負載量為600士50ug/支，普羅布考 在支架上的負載量為150士50ug/支。 實施例4
先噴塗普羅布考，再噴塗雷帕黴素藥物的雙藥物支架製備 準備好已制好納米孔(100nm lum)的鈷基裸支架，稱取普羅布 考溶解於四氫^^喃中配成8%的溶液，然後進行噴塗，再稱取雷帕黴 素溶解於四氫呋喃中配成6%的溶液，待第一次噴塗支架的四氫吹喃揮幹後，再進行噴塗雷帕黴素溶液，揮幹後即製備完成。
經檢測，雷帕黴素在支架上的負載量為250士50ug/支，普羅布考 在支架上的負載量為400士50ug/支。 實施例5
基本過程同實施例2，不同的是，先噴塗普羅布考，再噴塗雷帕 黴素和普羅布考，以製備雙藥物支架。 實施例6
基本過程同實施例3，不同的是，先噴塗雷帕黴素和普羅布考， 再噴塗普羅布考，以製備雙藥物支架。 試驗例1
本試驗例在於研究本發明雙藥物支架的體外藥物釋放度實驗。
將雙藥物支架固定到衝刷實驗裝置上，在裝置中倒入牛血清白蛋 白溶液，在模擬人體體溫37"C下以一定的流速進行衝刷，分別在6 小時、12小時、24小時、48小時、36小時、72小時取出支架(採 用的實施例1的支架)，進行雷帕黴素和普羅布考含量檢測，從而計 算出兩種藥物在體外的釋放率。由圖3所示。
從圖3的釋放度實驗的趨勢曲線上來看，雷帕黴素和普羅布考在 體外釋放效果很好。在72小時後就基本釋放完全。由於人體內的環境 與體外模擬環境差別還是很大，所以該數據僅提供一定的參考，更為 詳細或反映真實情況可以在動物實驗中進行。
雖然，上文中已經用 一般性說明及具體實施方案對本發明作了詳 盡的描述，但在本發明基礎上，可以對之作一些修改或改進，這對本 領域技術人員而言是顯而易見的。因此，在不偏離本發明精神的基礎 上所做的這些修改或改進，均屬於本發明要求保護的範圍。
權利要求
1. 一種雙藥物聯合支架，其特徵在於，所述支架表面附著有雷帕黴素和普羅布考。
2. 根據權利要求l所述的雙藥物聯合支架，其特徵在於，所述支 架為具有納米級或微米級孔洞的支架。
3. 根據權利要求1或2所述的雙藥物聯合支架，其特徵在於，所 述雷帕黴素和普羅布考通過噴塗或浸泡的方式附著於所述支架上。
4. 根據權利要求3所述的雙藥物聯合支架，其特徵在於，所述支 架表面採用先塗覆雷帕黴素，揮幹後再塗覆普羅布考。
5. 根據權利要求3所述雙藥物聯合支架，其特徵在於，所述支架 表面釆用先塗覆普羅布考，揮幹後再塗覆雷帕黴素。
6. 根據權利要求3所述雙藥物聯合支架，其特徵在於，所述支架 表面釆用先將普羅布考和雷帕黴素溶解混合後塗覆，揮幹後再塗覆普 羅布考。
7. 根據權利要求3所述雙藥物聯合支架，其特徵在於，所述支架 表面釆用先將普羅布考和雷帕黴素溶解混合後塗覆，揮幹後再塗覆雷
8. 根據權利要求3所述的雙藥物聯合支架，其特徵在於，所述支 架表面釆用先塗覆普羅布考，揮幹後再塗覆雷帕黴素和普羅布考的混 合溶液。
9. 根據權利要求3所述的雙藥物聯合支架，其特徵在於，所述支 架表面釆用先塗覆雷帕黴素，揮幹後再塗覆雷帕黴素和普羅布考的混 合溶液。
10. 根據權利要求3所述的雙藥物聯合支架，其特徵在於，其釆 用將普羅布考和雷帕黴素溶解混合後塗覆於所述支架表面上。
全文摘要
本發明提供了一種新型雙藥物聯合支架，該新型雙藥物聯合支架採用孔洞物理吸附在支架表面直接塗覆雷帕黴素和普羅布考，這種新型雙藥物聯合支架充分利用了兩種藥物在抑制支架再狹窄機理的互補作用，充分抑制術後再狹窄，並加速內皮化，同時由於未採用在支架表面塗覆載體和基質，避免了載體和基質帶來的炎症等副作用。
文檔編號A61F2/82GK101444442SQ200810240009
公開日2009年6月3日 申請日期2008年12月16日 優先權日2008年12月16日
發明者張昱昕, 張正才, 玲 王, 蒲忠傑 申請人:樂普(北京)醫療器械股份有限公司