一種利用雞胚製作雞傳染鼻炎等細菌的培養基的製作方法

2023-04-28 13:23:31

專利名稱：一種利用雞胚製作雞傳染鼻炎等細菌的培養基的製作方法
技術領域：
本發明涉及細菌培養基，準確說是一種利用雞胚製作雞傳染鼻炎等細菌的培養基，即利用雞胚浸出液製作細菌培養基。
現在廣泛製作細菌培養基的原料，一般採用牛肉、牛心、豬肉、豬心等。本領域的傳統觀念認為，雞胚不適於製作細菌培養基，因而，雞胚只用作病毒傳代、增殖的材料，在病毒學的研究和疫苗生產中起重要作用。特別是部分實驗室在利用雞胚傳毒或病毒增殖後，將其丟掉，造成浪費，並易造成病毒的擴散。本發明經檢索，未發現利用雞胚浸出液製作細菌培養基的報導。
本發明的目的是，提供一種利用雞胚製作雞傳染鼻炎等細菌的培養基，利用雞胚浸出液製作細菌培養基，從而具有使雞胚增加新的用途，並可減少浪費，不使病毒擴散等優點。
本發明為完成發明目的，提出的技術方案是，提供一種利用雞胚製作雞傳染鼻炎等細菌的培養基，利用雞胚浸出液製作細菌培養基。細菌培養基是指對副雞嗜血桿菌、大腸桿菌和沙氏菌的培養。製作雞胚浸出液冷藏待用，再製作培養基將菌株分離為副雞嗜血桿菌株、沙門氏菌菌株、大腸桿菌菌株保存待用，然後製備種子液，進行固體培養，進行液體培養，最後測定培養產物的細菌量。所述雞胚浸出液，利用11日齡SPF雞胚，與無菌蒸餾水按1∶2比例浸泡過夜，快速煮沸後，再溫火煮1小時，冷卻後，離心取上清即為實驗所用雞胚浸出液。採用雞胚浸出液副雞嗜血桿菌培養基用日本半合成培養基加10％雞胚浸出液和2％雞血清，普通副雞嗜血桿菌培養基則去掉雞胚浸出液，普通肉湯培養基和普通瓊脂平板培養基按常規方法製備，雞胚浸出液培養和雞胚浸出液瓊脂平板培養基用雞胚浸出液代替牛肉湯，即氯化鈉0.5g、蛋白質1.0g，雞胚液100ml，調P小時7.2-7.5，高壓後分裝試管備用，所述種子液的製備，將凍存的副雞嗜血桿菌卵黃接種7日齡SPF雞胚，孵化24小時後，取卵黃液按1％接種於半合成液體培養基中，37℃培養18小時作為種子液，大腸桿菌和沙門氏菌菌種則接種麥康凱瓊脂平板，37℃培養24小時，挑取曲型菌落，接種普通瓊脂斜面，37℃培養24小時，再接種於普通肉湯培養基，37℃培養18小時後即為大腸桿菌種子液和沙門氏菌種子液。
本發明用雞胚浸出液製作細菌培養中的固體培養是將副雞嗜血桿菌、大腸桿菌和沙門氏菌的種子液，分別接種於雞胚浸出液固體培養基和普通固體培養基，37℃培養24小時，用生理鹽水洗下菌苔，重複三次，並測其細菌含量。液體培養是將雞胚浸出液培養基和普通培養基接每管5ml分別加入到各試管中，按每管0.5ml分別加入副雞嗜血桿菌、大腸杆和沙門氏菌種子液，37℃培養24小時重複三次，測其細菌含量。本發明所述培養產物細菌量的測定方法，均採用本領域公知方法。
本發明經試驗證明，雞胚完全可以製作細菌培養的基礎培養基或某些細菌的特殊培養基，這就使雞胚增加了新的用途，減少了雞胚的浪費，並可以避免病毒的擴散。本發明通過副雞嗜血桿菌、大腸桿菌和沙門氏菌分別在雞胚浸出液和普通培養基上的培養發現，副雞嗜血桿菌、大腸桿菌和沙門氏菌均可在雞胚浸出液培養基上生長良好，與普通培養基相比，大腸桿菌在這兩種培養基中生長無明顯差異(P＞0.05)，副雞嗜血桿菌在雞胚浸出液半合成培養基上生長的數量是普通半合成培養基的3倍以上，差異顯著(P＜0.05)；而在沙門氏菌的生長上，雞胚浸出液培養基則是普通培養基的20倍以上，差異極為顯著(P＜0.01)，雞胚浸出液培養效果明顯優於普通培養基培養效果。
權利要求
1.一種利用雞胚製作雞傳染鼻炎等細菌的培養基，其特徵在於利用雞胚浸出液製作細菌培養基。
2.按照權利要求1所述的一種利用雞胚製作雞傳染鼻炎等細菌的培養基，其特徵在於所述的細菌培養基是指對副雞嗜血桿菌、大腸桿菌和沙氏菌的培養。
3.利用雞胚浸出液製作細菌培養基的方法，其特在於製作雞胚浸出液冷藏待用，再製作培養基將菌株分離為副雞嗜血桿菌株、沙門氏菌菌株、大腸桿菌菌株保存待用，然後製備種子液，進行固體培養，進行液體培養，最後測定培養產物的細菌量。
4.根據權利要求3所述的利用雞胚浸出液製作細菌培養基的方法，其特徵在於所述雞胚浸出液利用11日齡SPF雞胚，與無菌蒸餾水按1∶2比例浸泡過夜，快速煮沸後，再溫火煮1小時，冷卻後，離心取上清即為實驗所用雞胚浸出液。
5.根據權利要求3所述利用雞胚浸出液製作細菌培養基的方法，其特徵在於所述培養基，採用雞胚浸出液副雞嗜血桿菌培養基用日本半合成培養基加10％雞胚浸出液和2％雞血清，普通副雞嗜血桿菌培養基則去掉雞胚浸出液，普通肉湯培養基和普通瓊脂平板培養基按常規方法製備，雞胚浸出液培養和雞胚浸出液瓊脂平板培養基用雞胚浸出液代替牛肉湯，即氯化鈉0.5g、蛋白質1.0g，雞胚液100ml，調P小時7.2-7.5，高壓後分裝試管備用。
6.根據權利要求3所述利用雞胚浸出液製作細菌培養基的方法，其特徵在於所述種子液的製備，將凍存的副雞嗜血桿菌卵黃接種7日齡SPF雞胚，孵化24小時後，取卵黃液按1％接種於半合成液體培養基中，37℃培養18小時作為種子液，大腸桿菌和沙門氏菌菌種則接種麥康凱瓊脂平板，37℃培養24小時，挑取曲型菌落，接種普通瓊脂斜面，37℃培養24小時，再接種於普通肉湯培養基，37℃培養18小時後即為大腸桿菌種子液和沙門氏菌種子液。
全文摘要
本發明涉及細菌培養基,準確說是一種利用雞胚製作雞傳染鼻炎等細菌的培養基,即利用雞胚浸出液製作細菌培養基。提供一種利用雞胚製作雞傳染鼻炎等細菌的培養基,利用雞胚浸出液製作細菌培養基。細菌培養基是指對副雞嗜血桿菌、大腸桿菌和沙氏菌的培養。利用雞胚浸出液製作細菌培養基,從而具有使雞胚增加新的用途,並可減少浪費,不使病毒擴散等優點。
文檔編號C12N1/20GK1297041SQ99112569
公開日2001年5月30日 申請日期1999年11月23日 優先權日1999年11月23日
發明者宋敏訓 申請人:山東省農業科學院家禽研究所