從連翹葉中複合提取連翹苷、連翹酯苷a和蘆丁的方法

2023-05-03 09:06:06

專利名稱：從連翹葉中複合提取連翹苷、連翹酯苷a和蘆丁的方法
技術領域：
本發明涉及一種屬於連翹葉分離技術領域，特別是一種從天然植物連翹葉中連續提取有效成分連翹酯苷A、連翹苷和蘆丁的方法。
背景技術：
連翹為木犀科連翹屬落葉灌木，是常用藥材，傳統以果實入藥，但民間調查顯示，連翹葉有消除便秘，預防感冒，降血脂，降血壓等作用。國內己有研究者對連翹葉的化學成分進行了初步分析，並利用連翹葉製成茶葉作為滋補調理飲料應用。連翹葉常作為保健茶使用，化學研究證明，連翹葉與常用藥材連翹果實的化學成分有較好一致性，主要含有木質素類、苯丙素苷類、三萜酸類、黃酮類和揮髮油類等，並且葉子中的有效生物活性成分如連翹苷、連翹酯苷的含量遠高於連翹果實。連翹苷和連翹酯苷A是國家藥典2010年版規定的連翹質量控制指標成分。連翹苷有較好的抗菌、降血脂和減肥作用；連翹酯苷有較好的抗病毒和抗氧化作用，對金黃色葡萄球菌等多種致病菌具有抑制作用，還能抑制磷酸二酯酶、真菌以及活性氧；蘆丁具有抗炎、抗病毒、抗氧化、降低毛細血管脆性和通透性等作用。三者在醫藥和食品領域作為天然藥物、天然防腐劑、天然抗氧化劑均具有很廣泛的應用前景。目前各種文獻資料中，從連翹果實或連翹葉中只單獨提取一種活性成分或者兩種，沒有合理利用連翹資源，造成資源的嚴重浪費。如中國專利200610148179.0，200810176773.X, 201010235729.9等都是針對一種活性成分進行工藝研究，中國專利201110209731.3公開了一種從連翹葉提取連翹苷和連翹酯苷A的方法，其先通過熱水提取，沉澱分離，再用有機溶劑萃取，乙醇重結晶等製備連翹苷和連翹酯苷A，但耗時太長，得率比較低，而且大量蘆丁被丟棄。現有技術採用的方法直接水提或水提後有機溶劑萃取，或鹼水提取，或酸水提取，沒有綜合考慮其他活性物質的活性，而且操作複雜，成本較高。目前尚未見到從連翹葉中同時提取分離連翹苷、連翹酯苷A和蘆丁的相關報導。

發明內容
為了解決現有技術中提取分離連翹苷、連翹酯苷A所存在的技術問題，本發明提供了一種方法簡單，原料利用率高、可從連翹葉中連續提取分離出連翹苷、連翹酯苷A和蘆丁的方法。解決上述技術問題所採用的技術方案是由以下步驟組成:( 1)提取將連翹葉粉碎至40 60目，60 75°C用體積濃度為55%的乙醇浸提40 60分鐘，每Ig連翹葉對應添加15 40mL的乙醇，優選20 30mL，提取2 3次，合併浸提液，靜置，過濾，50 60°C減壓濃縮回收乙醇，按照每IOOmL濃縮液中添加3 6mL的量向濃縮液中添加無水乙醇，優選4 5mL，室溫靜置，過濾，得到連翹葉提取液；(2)樹脂分離
將連翹葉提取液用大孔吸附樹脂吸附，連翹葉與大孔吸附樹脂的質量比為1:
1.6 2，優選1:1.8，水洗雜質，用體積濃度為30%的乙醇洗脫，洗脫流速為I 3BV/h，洗脫體積為5 8BV，得到餾分I，用濃度為50%的乙醇洗脫，洗脫流速為I 3BV/h，洗脫體積為5 8BV，得到餾分II ；(3)沉澱分離將餾分I減壓濃縮回收乙醇，室溫靜置至沉澱物與水分離，得到沉澱物為蘆丁粗品，水層為連翹酯苷A粗提液，用水飽和的正丁醇萃取I 3次，回收正丁醇，餘液乾燥，得到連翹酯苷A粗品；將餾分II減壓濃縮回收乙醇，室溫靜置，分離沉澱，得到連翹苷粗品；(4)純化將步驟(3)中所得的連翹苷粗品和蘆丁粗品分別用無水乙醇重結晶2 4次，乾燥，分別得到連翹苷和蘆丁 ；將連翹酯苷A粗品用體積濃度為30%的甲醇溶解，用C18反相矽膠柱層析分離，體積濃度為30%的甲醇平衡，體積濃度為40%的甲醇洗脫，35 40°C減壓濃縮回收甲醇，餘液冷凍乾燥，得連翹酯苷A。上述大孔吸附樹脂的型號是AB-8或DlOl。上述步驟(4)中將連翹苷粗品和蘆丁粗品分別用無水乙醇重結晶2 4次，乾燥，分別得到連翹苷和蘆丁 ；將連翹酯苷A粗品用體積濃度為30%的甲醇溶解，用C18反相矽膠柱層析分離，3倍柱床體積的濃度為30%的甲醇平衡，體積濃度為40%的甲醇洗脫，35 40 V減壓濃縮回收甲醇，冷凍乾燥，得連翹酯苷A。本發明從連翹葉中複合提取連翹苷、連翹酯苷A和蘆丁的方法是利用連翹葉中的連翹苷為非極性化合物，易溶於甲醇、乙醇等有機溶劑，難溶於水，連翹酯苷A為極性化合物，易溶於水、甲醇、乙醇等，蘆丁易溶於甲醇、熱乙醇，不易溶於水的特性，綜合考慮，通過乙醇浸提、大孔吸附樹脂分離、反相矽膠柱層析連續提取工藝，從連翹葉中複合提取連翹苷、連翹酯苷A和蘆丁，能把連翹葉的有效活性成分提取完全，合理利用了連翹葉資源；同時，本發明使用大孔吸附樹脂的吸附和解吸附，可分離連翹苷、連翹酯苷A和蘆丁，用反相矽膠純化連翹酯苷A，分離完全，而且純度較高，工藝條件簡單，適合工業化生產。


圖1為連翹酯苷A、蘆丁和連翹苷的標準品混合樣與實施例1提取的連翹酯苷A、蘆丁和連翹苷製品的高效液相色譜圖。圖2為實施例1提取的連翹酯苷A與標準品的紫外掃描對比圖。圖3為實施例1提取的蘆丁與標準品的紫外掃描對比圖。圖4為實施例1提取的連翹苷與標準品的紫外掃描對比圖。
具體實施例方式現結合具體的實施例對本發明進行進一步的說明，但本發明的不僅限於下屬的實施例。實施例1 以原料連翹葉40g為例，從連翹葉中連續提取連翹苷、連翹酯苷A和蘆丁的方法，由以下步驟組成:
(1)提取將40g連翹葉粉碎至50目，用IOOOmL體積濃度為55%的乙醇70°C浸提50分鐘，連翹葉與乙醇的料液比為1:25g/mL，過濾，濾渣再加入800mL體積濃度為55%的乙醇70°C浸提50分鐘，合併2次的浸提液，靜置12小時，過濾，55°C減壓濃縮回收乙醇，得濃縮液665mL,按照每IOOmL濃縮液中添加5mL無水乙醇的量向濃縮液中加入33.25mL無水乙醇，室溫靜置12小時，過濾，得到連翹葉提取液。(2)樹脂分離將連翹葉提取液通過72g體積為2.6cm (直徑)X 25cm (柱高)的AB_8大孔吸附樹脂柱吸附，連翹葉與AB-8大孔吸附樹脂的質量比為1: 1.8，用10001^水洗雜質，用7251^體積濃度為30%的乙醇洗脫，洗脫流速為2BV/h，得到餾分I，用700mL體積濃度為50%的乙醇洗脫，洗脫流速為2BV/h，得到餾分II。(3)沉澱分離將餾分I 50°C減壓濃縮回收乙醇，得餾分I濃縮液70mL，室溫靜置至沉澱物與水層分離，沉澱物為0.282g蘆丁粗品，水層為70mL連翹酯苷A粗提液，用水飽和的正丁醇萃取2次，回收正丁醇，餘液在50°C烘箱乾燥，得到4.76g連翹酯苷A粗品；將餾分II 50°C減壓濃縮回收乙醇，得餾分II濃縮液70mL，室溫靜置，分離沉澱得到0.735g連翹苷粗品。(4)純化將0.735g連翹苷粗品和0.282g蘆丁粗品分別用無水乙醇重結晶3次，乾燥，得到純度95%的0.128g連翹苷和94%的0.149g蘆丁 ；將4.76g連翹酯苷A粗品用8cm (直徑)X50cm (柱高)的C18反相矽膠柱層析分離，用體積濃度為30%的甲醇溶解粗品，用3倍反相矽膠柱柱床體積的濃度為30%的甲醇平衡，用體積濃度為40%的甲醇洗脫，經薄層層析法確定，當洗脫到7000mL時開始收集連翹酯苷A洗脫峰，收集體積為3360mL，38°C減壓濃縮回收甲醇，餘液冷凍乾燥，得2.557g純度為93%的連翹酯苷A。實施例2以原料連翹葉40g為例，從連翹葉中連續提取連翹苷、連翹酯苷A和蘆丁的方法，由以下步驟組成:( 1)提取將40g連翹葉粉碎至50目，用1200mL體積濃度為55%的乙醇70°C浸提50分鐘，連翹葉與乙醇的料液比為1: 30g/mL，過濾，濾渣再加入800mL體積濃度為55%的乙醇70°C浸提50分鐘，合併2次的浸提液，靜置12小時，過濾，55°C減壓濃縮回收乙醇，得濃縮液，按照每IOOmL濃縮液中添加5mL無水乙醇的量向濃縮液中加入無水乙醇，室溫靜置12小時，過濾，得到連翹葉提取液。(2)樹脂分離將連翹葉提取液通過2.6cm (直徑)X 25cm (柱高)的AB-8大孔吸附樹脂柱吸附，連翹葉與大孔吸附樹脂的質量比為1:1.6，用IOOOmL水洗雜質，用765mL體積濃度為30%的乙醇洗脫，洗脫流速為lBV/h，得到餾分I，用700mL體積濃度為50%的乙醇洗脫，洗脫流速為lBV/h，得到餾分II。(3)沉澱分離將餾分I 50°C減壓濃縮回收乙醇，得餾分I濃縮液60mL，室溫靜置至沉澱物與水層分離，沉澱物為0.295g蘆丁粗品，水層為70mL連翹酯苷A粗提液，用水飽和的正丁醇萃取2次，回收正丁醇，餘液在50°C烘箱乾燥，得到4.453g連翹酯苷A粗品；將餾分II 50°C減壓濃縮回收乙醇，得餾分II濃縮液IOOmL,室溫靜置，分離沉澱得到0.919g連翹苷粗品。(4)純化將0.919g連翹苷粗品和0.295g蘆丁粗品分別用無水乙醇重結晶3次，乾燥，得到純度95%的0.160g連翹苷和93%的0.182g蘆丁 ；將4.453g連翹酯苷A粗品用8cm (直徑)X50cm (柱高)的C18反相矽膠柱層析分離，用體積濃度為30%的甲醇溶解粗品，用3倍反相矽膠柱柱床體積的濃度為30%的甲醇平衡，用體積濃度為40%的甲醇洗脫，經薄層層析法確定，當洗脫到7000mL時開始收集連翹酯苷A洗脫峰，收集體積為3145mL，38°C減壓濃縮回收甲醇，餘液冷凍乾燥，得2.261g純度為93%的連翹酯苷A。實施例3 以原料連翹葉40g為例，從連翹葉中連續提取連翹苷、連翹酯苷A和蘆丁的方法，由以下步驟組成:( I)提取將40g連翹葉粉碎至50目，用1600mL體積濃度為55%的乙醇70°C浸提50分鐘，連翹葉與乙醇的料液比為1: 40g/mL，過濾，濾渣再加入600mL體積濃度為55%的乙醇70°C浸提50分鐘，合併2次的浸提液，靜置12小時，過濾，55°C減壓濃縮回收乙醇，得濃縮液，按照每IOOmL濃縮液中添加5mL無水乙醇的量向濃縮液中加入無水乙醇，室溫靜置12小時，過濾，得到連翹葉提取液。(2)樹脂分離將連翹葉提取液通過2.6cm (直徑)X 25cm (柱高)的AB-8大孔吸附樹脂柱吸附，連翹葉與大孔吸附樹脂的質量比為1: 2，用IOOOmL水洗雜質，用780mL體積濃度為30%的乙醇洗脫，洗脫流速為3BV/h，得到餾分I，用780mL體積濃度為50%的乙醇洗脫，洗脫流速為3BV/h，得到餾分II。(3)沉澱分離將餾分1 50°C減壓濃縮回收乙醇，得餾分I濃縮液70mL，室溫靜置至沉澱物與水層分離，沉澱物為0.319g蘆丁粗品，水層為70mL連翹酯苷A粗提液，用水飽和的正丁醇萃取2次，回收正丁醇，餘液在50°C烘箱乾燥，得到4.528g連翹酯苷A粗品；將餾分II 50°C減壓濃縮回收乙醇，得餾分II濃縮液70mL，室溫靜置，分離沉澱得到0.984g連翹苷粗品。(4)純化將0.984g連翹苷粗品和0.319g蘆丁粗品分別用無水乙醇重結晶3次，乾燥，得到純度95%的0.168g連翹苷和93%的0.181g蘆丁 ；將4.528g連翹酯苷A粗品用8cm (直徑)X50cm (柱高)的C18反相矽膠柱層析分離，用體積濃度為30%的甲醇溶解粗品，用3倍反相矽膠柱柱床體積的濃度為30%的甲醇平衡，用體積濃度為40%的甲醇洗脫，經薄層層析法確定，當洗脫到7000mL時開始收集連翹酯苷A洗脫峰，收集體積為3280mL，38°C減壓濃縮回收甲醇，餘液冷凍乾燥，得2.304g純度為92%的連翹酯苷A。實施例4以原料連翹葉40g為例，從連翹葉中連續提取連翹苷、連翹酯苷A和蘆丁的方法，由以下步驟組成:
( I)提取將40g連翹葉粉碎至50目，用800mL體積濃度為55%的乙醇70°C浸提50分鐘，連翹葉與乙醇的料液比為1: 20g/mL，過濾，濾渣再加入800mL體積濃度為55%的乙醇70°C浸提50分鐘，合併2次的浸提液，靜置12小時，過濾，55°C減壓濃縮回收乙醇，得濃縮液，按照每IOOmL濃縮液中添加5mL無水乙醇的量向濃縮液中加入無水乙醇，室溫靜置12小時，過濾，得到連翹葉提取液。其它的步驟與實施例1相同，連續提取出連翹苷、蘆丁、連翹酯苷A。實施例5以原料連翹葉40g為例，從連翹葉中連續提取連翹苷、連翹酯苷A和蘆丁的方法，由以下步驟組成:( I)提取 將40g連翹葉粉碎至50目，用600mL體積濃度為55%的乙醇70°C浸提50分鐘，連翹葉與乙醇的料液比為1: 15g/mL，過濾，濾渣再加入600mL體積濃度為55%的乙醇70°C浸提50分鐘，合併2次的浸提液，靜置12小時，過濾，55°C減壓濃縮回收乙醇，得濃縮液，按照每IOOmL濃縮液中添加5mL無水乙醇的量向濃縮液中加入無水乙醇，室溫靜置12小時，過濾，得到連翹葉提取液。其它的步驟與實施例1相同，連續提取出連翹苷、蘆丁、連翹酯苷A。實施例6在上述實施例1 5的從連翹葉中連續提取連翹苷、連翹酯苷A和蘆丁的方法中，在步驟(I)中，將連翹葉粉碎至40目，60°C用體積濃度為55%的乙醇浸提60分鐘，提取3次，合併浸提液，靜置，過濾，50°C減壓濃縮回收乙醇，按照每IOOmL濃縮液中添加4mL的量向濃縮液中添加無水乙醇，室溫靜置，過濾，得到連翹葉提取液。在步驟(2)中，將連翹葉提取液用大孔吸附樹脂吸附，水洗雜質，用體積濃度為30%的乙醇洗脫，洗脫流速為3BV/h，得到餾分I，用體積濃度為50%的乙醇洗脫，洗脫流速為3BV/h，得到餾分II。在步驟(3)中，將餾分I減壓濃縮回收乙醇，室溫靜置至沉澱物與水分離，得到沉澱物為蘆丁粗品，水層為連翹酯苷A粗提液，用水飽和的正丁醇萃取I次，回收正丁醇，餘液乾燥，得到連翹酯苷A粗品；將餾分II減壓濃縮回收乙醇，室溫靜置，分離沉澱，得到連翹苷粗品。在步驟(4)中，將連翹苷粗品和蘆丁粗品分別用無水乙醇重結晶2次，乾燥，分別得到連翹苷和蘆丁 ；將連翹酯苷A粗品用體積濃度為30%的甲醇溶解，用C18反相矽膠柱層析分離，3倍反相矽膠柱柱床體積的濃度為30%的甲醇平衡，體積濃度為40%的甲醇洗脫，35°C減壓濃縮回收甲醇，餘液冷凍乾燥，得連翹酯苷A。其它的操作與相應的實施例相同。實施例7在上述實施例1 5的從連翹葉中連續提取連翹苷、連翹酯苷A和蘆丁的方法中，在步驟(I)中，將連翹葉粉碎至60目，75°C用體積濃度為55%的乙醇浸提40分鐘，提取3次，合併浸提液，靜置，過濾，60°C減壓濃縮回收乙醇，按照每IOOmL濃縮液中添加4mL的量向濃縮液中添加無水乙醇，室溫靜置，過濾，得到連翹葉提取液。在步驟(2)中，將連翹葉提取液用大孔吸附樹脂吸附，水洗雜質，用體積濃度為30%的乙醇洗脫，洗脫流速為3BV/h，得到餾分I，用體積濃度為50%的乙醇 洗脫，洗脫流速為3BV/h，得到餾分II。在步驟(3)中，將餾分I減壓濃縮回收乙醇，室溫靜置至沉澱物與水分離，得到沉澱物為蘆丁粗品，水層為連翹酯苷A粗提液，用水飽和的正丁醇萃取3次，回收正丁醇，餘液乾燥，得到連翹酯苷A粗品；將餾分II減壓濃縮回收乙醇，室溫靜置，分離沉澱，得到連翹苷粗品。在步驟(4)中，將連翹苷粗品和蘆丁粗品分別用無水乙醇重結晶4次，乾燥，分別得到連翹苷和蘆丁 ；將連翹酯苷A粗品用體積濃度為30%的甲醇溶解，用C18反相矽膠柱層析分離，3倍反相矽膠柱柱床體積的濃度為30%的甲醇平衡，體積濃度為40%的甲醇洗脫，40°C減壓濃縮回收甲醇，餘液冷凍乾燥，得連翹酯苷A。其它的操作與相應的實施例相同。實施例8在上述的實施例1 I的從連翹葉中連續提取連翹苷、連翹酯苷A和蘆丁的方法中，在步驟(I)中，按照每IOOmL濃縮液中添加3mL的量向濃縮液中添加無水乙醇，室溫靜置，過濾，其它的操作與相應的實施例相同，得到連翹葉提取液。其它的步驟與相應的實施例相同，分別提取出連翹苷、連翹酯苷A和蘆丁。實施例9在上述的實施例1 I的從連翹葉中連續提取連翹苷、連翹酯苷A和蘆丁的方法中，在步驟(I)中，按照每IOOmL濃縮液中添加6mL的量向濃縮液中添加無水乙醇，室溫靜置，過濾，其它的操作與相應的實施例相同，得到連翹葉提取液。其它的步驟與相應的實施例相同，分別提取出連翹苷、連翹酯苷A和蘆丁。實施例10在上述的實施例1 I的從連翹葉中連續提取連翹苷、連翹酯苷A和蘆丁的方法中，在步驟(2)中所用的AB-8大孔吸附樹脂可以用型號為DlOl的大孔吸附樹脂來替換。其它的操作與相應的實施例相同。為了進一步確定本發明所提取分離的產物就是連翹酯苷A、連翹苷和蘆丁，發明人將實施例1所提取的產物與標準製品通過高效液相色譜法(HPLC)進行檢測，具體結果如下:1、色譜條件:大連依利特色譜柱Hypersil BDS C18柱(4.6_X 250mm, 5 ii m);流動相為甲醇(A)-水(含0.2%冰醋酸)(B)，梯度洗脫:0 3分鐘，32%A ;3 25分鐘，32% 55%A ;25 30分鐘，55%A，測定波長235nm，流速lmL/min，柱溫30°C，進樣量10 Ul。2、標準對照品溶液的製備:精密稱取連翹酯苷A標準品、蘆丁標準品和連翹苷標準品，適量，加適量50%甲醇，分別製成每ImL含連翹酯苷A0.2mg、蘆丁 0.1mg和連翹苷
0.24mg的溶液。3、發明產物溶液的製備:精密吸取一定量製備所得的最終產物的置於容量瓶中，用50%甲醇定容，再經0.45 ii m微孔濾膜過濾，濾液待用。先將製備好的連翹酯苷A、蘆丁和連翹苷標準對照品溶液取等量混合後通過色譜分析，再將各個發明產物溶液分別通過色譜分析，色譜峰的理論板數按連翹酯苷峰計算在5000以上，結果見色譜圖1。由圖1可知，按照本實驗的色譜條件，標準品混合樣中的連翹酯苷A、蘆丁和連翹苷能夠得到很好的分離，見洗脫曲線I。與洗脫曲線I相比較，實施例1所提取的連翹酯苷A (洗脫曲線2)、蘆丁 (洗脫曲線3)和連翹苷(洗脫曲線4)的純度很高，連翹酯苷A的相對含量為93%，蘆丁的相對含量為94%，連翹苷的相對含量為95%。再將製備好的連翹酯苷A 、蘆丁和連翹苷標準對照品溶液與實施例1提取的連翹酯苷A、蘆丁和連翹苷分別通過紫外掃描進行比對，掃描結果分別見圖2、圖3和圖4。由圖2可見，連翹酯苷A標準對照品的紫外掃描圖曲線(曲線1)和實施例1的連翹酯苷A製品的紫外掃描圖曲線(曲線2)峰形和吸收峰波長完全吻合，進一步說明發明製品確為連翹酯苷A。由圖3可見，蘆丁的標準對照品紫外掃描圖曲線(曲線1)和實施例1提取的蘆丁製品的紫外掃描圖曲線(曲線2)峰形和吸收峰波長完全吻合，進一步說明發明製品確為蘆丁。由圖4可見，連翹苷標準對照品的紫外掃描圖曲線(曲線1)和實施例1提取的連翹苷製品的紫外掃描圖曲線(曲線2)峰形和吸收峰波長完全吻合，進一步說明發明製品確為連翹苷。
權利要求
1.一種從連翹葉中複合提取連翹苷、連翹酯苷A和蘆丁的方法，其特徵在於該方法由以下步驟組成: (1)提取 將連翹葉粉碎至40 60目，60 75°C用體積濃度為55%的乙醇浸提40 60分鐘，每Ig連翹葉對應添加15 40mL的乙醇 ，提取2 3次，合併浸提液，靜置，過濾，50 60°C減壓濃縮回收乙醇，按照每IOOmL濃縮液中添加3 6mL的量向濃縮液中添加無水乙醇，室溫靜置，過濾，得到連翹葉提取液； (2)樹脂分離 將連翹葉提取液用大孔吸附樹脂吸附，連翹葉與大孔吸附樹脂的質量比為1:1.6 2，水洗雜質，用體積濃度為30%的乙醇洗脫，洗脫流速為1 3BV/h，洗脫體積為5 8BV，得到餾分1，用濃度為50%的乙醇洗脫，洗脫流速為1 3BV/h，洗脫體積為5 8BV，得到餾分II ; (3)沉澱分離 將餾分I減壓濃縮回收乙醇，室溫靜置至沉澱物與水分離，得到沉澱物為蘆丁粗品，水層為連翹酯苷A粗提 液，用水飽和的正丁醇萃取I 3次，回收正丁醇，餘液乾燥，得到連翹酯苷A粗品；將餾分II減壓濃縮回收乙醇，室溫靜置，分離沉澱，得到連翹苷粗品； (4)純化 將步驟(3)中所得的連翹苷粗品和蘆丁粗品分別用無水乙醇重結晶2 4次，乾燥，分別得到連翹苷和蘆丁 ；將連翹酯苷A粗品用體積濃度為30%的甲醇溶解，用C18反相矽膠柱層析分離，體積濃度為30%的甲醇平衡，體積濃度為40%的甲醇洗脫，35 40°C減壓濃縮回收甲醇，餘液冷凍乾燥，得連翹酯苷A。
2.根據權利要求1所述的從連翹葉中連續提取連翹苷、連翹酯苷A和蘆丁的方法，其特徵在於:所述步驟(I)中將連翹葉粉碎至40 60目，60 75°C用體積濃度為55%的乙醇浸提40 60分鐘，每Ig連翹葉對應添加20 30mL的乙醇，，提取2 3次，合併浸提液，靜置，過濾，50 60°C減壓濃縮回收乙醇，按照每IOOmL濃縮液中添加4 5mL的量向濃縮液中添加無水乙醇，室溫靜置，過濾，得到連翹葉提取液。
3.根據權利要求1所述的從連翹葉中連續提取連翹苷、連翹酯苷A和蘆丁的方法，其特徵在於:所述步驟(2)中將連翹葉提取液用大孔吸附樹脂吸附，連翹葉與大孔吸附樹脂的質量比為1:1.8，水洗雜質，用體積濃度為30%的乙醇洗脫，洗脫流速為I 3BV/h，洗脫體積為5 8BV，得到餾分I，用體積濃度為50%的乙醇洗脫，洗脫流速為I 3BV/h，洗脫體積為5 8BV，得到餾分II。
4.根據權利要求3所述的從連翹葉中連續提取連翹苷、連翹酯苷A和蘆丁的方法，其特徵在於:所述大孔吸附樹脂的型號是AB-8或D101。
5.根據權利要求1所述的從連翹葉中連續提取連翹苷、連翹酯苷A和蘆丁的方法，其特徵在於:所述步驟(4)中將連翹苷粗品和蘆丁粗品分別用無水乙醇重結晶2 4次，乾燥，分別得到連翹苷和蘆丁 ；將連翹酯苷A粗品用體積濃度為30%的甲醇溶解，用C18反相矽膠柱層析分離，3倍柱床體積的濃度為30%的甲醇平衡，體積濃度為40%的甲醇洗脫，35 .40 V減壓濃縮回收甲醇，冷凍乾燥，得連翹酯苷A。
全文摘要
本發明涉及一種從連翹葉中複合提取連翹苷、連翹酯苷A和蘆丁的方法，其是利用連翹葉中的連翹苷為非極性化合物，易溶於甲醇、乙醇等有機溶劑，難溶於水，連翹酯苷A為極性化合物，易溶於水、甲醇、乙醇等，蘆丁易溶於甲醇、熱乙醇，不易溶於水的特性，綜合考慮，通過乙醇浸提、大孔吸附樹脂分離、反相矽膠柱層析連續提取工藝，從連翹葉中複合提取連翹苷、連翹酯苷A和蘆丁，能把連翹葉的有效活性成分提取完全，合理利用了連翹葉資源；同時，本發明使用大孔吸附樹脂的吸附和解吸附，可分離連翹苷、連翹酯苷A和蘆丁，用反相矽膠純化連翹酯苷A，分離完全，而且純度較高，工藝條件簡單，適合工業化生產。
文檔編號C07H1/08GK103102375SQ20131005219
公開日2013年5月15日 申請日期2013年2月18日 優先權日2013年2月18日
發明者楊建雄, 李忠岐, 劉偉霞, 顏禮有 申請人:陝西師範大學