治療前列腺肥大的淫羊藿提取物及其在製備藥物中的應用的製作方法

2023-07-05 20:39:36 2

專利名稱：治療前列腺肥大的淫羊藿提取物及其在製備藥物中的應用的製作方法
技術領域：
本發明涉及治療前列腺肥大的淫羊藿提取物及其在製備藥物中的應用，具體為淫羊藿黃酮和多糖類成份與載體或其它中藥提取物組配，製備治療前列腺肥大及前列腺炎的藥物。
背景技術：
淫羊藿為小檗科(Berberidaceae)淫羊藿屬(Epimedium)植物，有淫羊藿Epimedium brevicornum，箭葉淫羊藿E.sagittatum，柔毛淫羊藿E.pubescens，烏山淫羊藿E.wushanense，及朝鮮淫羊藿E.koreanum的乾燥地上部分。它具有補腎壯陽、強筋骨和祛風溼的功效，用於治療陽痿遺精、筋骨痿軟、風溼痺痛等功效。淫羊藿主要含有黃酮、多糖、木脂素和生物鹼等化學成分。臨床應用和藥理實驗報導認為，淫羊藿黃酮類成分或多糖類成分具有治療心血管疾病、增強人體免疫力、調節性功能、治療骨質疏鬆及抗衰老的作用。但是，至今這些臨床及藥理實驗均是將其黃酮與多糖分別單獨地進行研究。

發明內容
本發明要解決的技術問題是提供一種淫羊藿有效部位組配的藥用組合物，其可與常規載體和/或若干其它具有協同作用的中藥提取物組配，製備治療前列腺肥大及前列腺炎的藥物組合物，其應該療效顯著，且基本無毒副作用，尤其符合老人用藥及長期用藥的要求。
為解決上述技術問題，本發明提供下述技術方案。
一種治療前列腺肥大的藥物組合物，其特徵在於含有淫羊藿屬植物中提取的按重量比計2-8份∶8-2份的總黃酮與多糖類；總黃酮中黃酮含量為20-90％；多糖的分子量範圍為1000至700000。
所述的藥物組合物中，淫羊藿總黃酮與多糖類的配比可以為3-6份∶7-4份；總黃酮中淫羊藿甙與淫羊藿甙I的含量為10-90％；多糖的分子量範圍為45000至620000。
前述藥物組合物中的淫羊藿提取物以如下方法製備取淫羊藿藥材，用含60-95％有機溶劑的水溶液提取，提取液減壓回收有機溶劑後的殘留物上大孔吸附樹脂柱D101或D140，用水與乙醇的混合溶劑梯度洗脫，收集30-85％乙醇液部分，減壓回收，乾燥得總黃酮，總黃酮中黃酮含量為20-90％；取60-95％有機溶劑的水溶液提取過後的淫羊藿藥渣，用水提取，濃縮水提取液，加入乙醇，使含醇量達到70-85％，靜置，濾得多糖粗品；取多糖粗品溶於水後，加入氯仿∶正丁醇按體積比3-6∶1份的混合液，濾除蛋白質，濾液用分子量為1000的超濾膜超濾，除去分子量1000以下的成分，濃縮液繼續濃縮乾燥，得淫羊藿多糖，其分子量範圍為1000至700000；將淫羊藿總黃酮與多糖類按重量比計2-8份∶8-2份的配比混合。
所述藥物組合物中的淫羊藿提取物的製備方法中，淫羊藿提取所用的60-95％有機溶劑的水溶液，其中有機溶劑為乙醇、丙酮、異丙醇和/或甲醇；淫羊藿總黃酮與多糖類的配比為3-6份∶7-4份。
所述藥物組合物中的淫羊藿提取物的製備方法中，總黃酮中淫羊藿甙與淫羊藿甙I的含量為10％-90％；淫羊藿多糖製備方法中，多糖粗品可再次溶於水，加入乙醇，使含醇量達到70-85％，靜置，濾取多糖粗品，多糖的分子量為45000至620000。
前述藥物組合物，其特徵在於淫羊藿總黃酮與多糖類的配比為3∶8份、4∶6份、5∶5份、6∶4份或7∶3份；其可與藥學上可接受載體或輔料混合。
一種治療前列腺肥大及前列腺炎的藥物組合物，其特徵在於含人參、花粉、黃芪、黃柏和淫羊藿總黃酮和/或淫羊藿多糖類。
該複方藥物組合物，其特徵在於按重量比計，含6-10％人參皂甙的人參提取物1-6份、含10-20％黃酮的花粉或花粉提取物1-8份、含3-5％黃芪皂甙及20-30％黃芪多糖的黃芪提取物1-4份與含10-15％小檗鹼的黃柏提取物1-6份，黃酮含量為20-90％的淫羊藿總黃酮和/或淫羊藿多糖類4-16份。
所述複方藥物組合物，其特徵在於含人參提取物1-2份，花粉或花粉提取物2-4份，黃芪提取物1-2份，黃柏提取物1-2份，淫羊藿總黃酮和/或淫羊藿多糖類5-10份。
前述複方藥物組合物，其特徵在於可以與藥學上可接受的載體或輔料混合，按常規製成各種口服製劑。
淫羊藿提取物較詳細的製備方法描述如下。
將淫羊藿葉粗粉用60-95％有機溶劑的水溶液提取1-4次，每次提取溶劑的用量為6-10ml/g，提取時間1-3小時，過濾合併提取液，減壓回收有機溶劑，水溶液加入大孔吸附樹脂柱(如D101或D140)中，用水及乙醇的混合溶劑洗脫，收集30％-85％乙醇液部分，減壓回收，乾燥得A部分。A部分提取物為總黃酮(即粗黃酮，或黃酮粗品)，其中黃酮含量為20-90％，總黃酮中淫羊藿甙及淫羊藿甙I的含量為10-90％。
取淫羊藿葉粗粉用60-95％有機溶劑的水溶液提取後的藥渣，用水提取3次，水的用量為6-10ml/g，提取時間1-2小時，過濾合併濾液，濃縮，加入乙醇，使含醇量達到70-85％，攪勻，靜止12-24小時，過濾得到沉澱物。如需要可重複精製3次，得棕紅色多糖粗品。粗多糖溶於500毫升水中，加入氯仿∶正丁醇(3～6∶1)混合溶劑100-200毫升，濾除蛋白質，該水溶液用分子量為1000的超濾膜超濾，除去分子量1000以下的成分，濃縮液繼續濃縮乾燥，得精製淫羊藿多糖部分B。多糖分子量在1000至700000，多糖部分按常規測定方法鑑定了EPS-1及EPS-2兩個組分，其分子量分別為45000及620000；多糖由巖藻糖、鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖七種單糖組成。另外，本發明還鑑定了四個多糖組分，其分子量分別為3400、25000、45000及520000。
A部分黃酮類與B部分多糖類按一定比例混合，得到所需淫羊藿提取物，實驗證明具有良好療效的A部分與B部分的比例為2∶8；3∶7；4∶6；5∶5；6∶4；7∶3以及8∶2。
臨床實驗研究表明本發明的含淫羊藿黃酮與淫羊藿多糖一定配比的藥物組合物具有治療良性前列腺肥大疾病，其對於良性前列腺肥大，總有效率達93.7％。本組患者臨床症狀積分下降顯著(P＜0.01)，生活質量顯著提高，主要表現為夜尿次數減少，排尿改善。尿流率顯著提高(P＜0.01)，提示梗阻有所減輕。膀胱殘餘尿量減少(P＜0.01)。PSA(前列腺特異性抗原)值治前(3.31±3.68μg/L)及治後(3.03±3.84μg/L)有所下降，但無統計學意義。
臨床實驗研究表明本發明的淫羊藿提取物與人參提取物、花粉及花粉提取物、黃芪提取物及黃柏提取物組成的複方，對治療前列腺肥大兼慢性前列腺炎疾病亦有顯著療效。該組方對良性前列腺肥大及慢性前列腺炎，總有效率達75.0％。本組患者臨床症狀積分下降顯著(P＜0.01)，生活質量顯著提高，主要表現為夜尿次數減少，排尿改善。尿流率顯著提高(P＜0.01)，提示梗阻有所減輕。膀胱殘餘尿量減少(P＜0.01)。PSA(前列腺特異性抗原)值治前(4.41±5.28μg/L)及治後(1.84±1.07μg/L)顯著下降(P＜0.01)。
本發明的淫羊藿提取物製備工藝簡單，有效組分簡單明確，且有效組分黃酮與多糖之間具有協同治療作用，黃酮與多糖相應的配比增進了此種協同療效，用於治療良性前列腺肥大療效顯著。
下面結合實例描述淫羊藿提取物的製備方法及其在製備治療良性前列腺肥大藥物中的應用，以及淫羊藿提取物、人參提取物、花粉及花粉提取物、黃芪提取物及黃柏提取物組成的複方，在製備治療前列腺肥大兼慢性前列腺炎藥物中的應用。
具體實施例方式
實例1、不同種淫羊藿植物的黃酮及多糖含量測定製備淫羊藿提取物的植物包括淫羊藿Epimedium brevicornum，箭葉淫羊藿E.sagittatum，柔毛淫羊藿E.pubescens，烏山淫羊藿E.wushanense，及朝鮮淫羊藿E.koreanum的乾燥地上部分。分別採集於四川、陝西、湖南、湖北、貴州及遼寧等省。其中的總黃酮用UV方法測定，淫羊藿甙(icarrin)及淫羊藿甙I(icarisid I)用HPLC法測定及多糖含量採用苯酚-硫酸法測定。
測定結果顯示，其中總黃酮的含量6-20％，總多糖含量為13-26％。


實例2、淫羊藿提取物的製備淫羊藿(陝西採集)葉粗粉用500g，用3升60％乙醇溶液提取3次(60℃)，提取時間2小時，過濾合併提取液，減壓回收有機溶劑，水溶液加入大孔吸附樹脂(D101或D140柱，溼重1000g)，用3升水洗脫，再用30％-85％乙醇液洗脫，減壓回收乙醇洗脫液，乾燥得A部分20g提取物(得率3％，黃酮含量45.8％，主要成分為淫羊藿甙和次淫羊藿甙)。將過濾後的藥渣用3升水煮提50分鐘，提取3次，過濾合併濾液，濃縮至1升，過濾，加入95％的乙醇，使含醇量達到75％，攪勻，靜止12小時，過濾得到沉澱物。重複水溶醇沉精製2次，得棕紅色粗多糖(56g)。粗多糖溶於500ml水中，用氯仿正丁醇(5∶1)有機溶劑100ml混合，振蕩混勻，除去蛋白質，水溶液用分子量為1000的超濾膜超濾，除去分子量1000以下的成分，濃縮液繼續濃縮乾燥，得精製淫羊藿多糖部分B(36.5g)。多糖的分子量在1000至700000。鑑定了EPS-1及EPS-2兩個多糖組分，分子量分別為45000及620000。多糖由巖藻糖、鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖七種單糖組成。另外，還鑑定了四個多糖組分，其分子量分別為3400、25000、45000及520000。
A部分與B分別按2∶8；3∶7；4∶6；5∶5；6∶4；7∶3以及8∶2的比例混合，得到所需淫羊藿提取物。
製備淫羊藿提取物的植物包括淫羊藿Epimedium brevicornum，箭葉淫羊藿E.sagittatum，柔毛淫羊藿E.pubescens，烏山淫羊藿E.wushanense，及朝鮮淫羊藿E.koreanum的乾燥地上部分。每種植物用量為500g，按上述工藝製備。總黃酮中黃酮含量為20-90％。各部分得率結果如下


實例3、淫羊藿提取物及人參、花粉、黃芪及黃柏的複方製備該複方由以下五類組分混合組成淫羊藿提取物(總黃酮中黃酮為40％，總黃酮中淫羊藿甙為20％；多糖為40％)5份；人參提取物(人參皂甙含量6-10％)1份；花粉或花粉提取物(黃酮含量10％-20％)2份；黃芪提取物(黃芪皂甙3-5％以上，黃芪多糖20-30％)1份；黃柏提取物(小檗鹼10-15％)1份。
淫羊藿提取物按實例2中方法製備。
人參提取物(人參皂甙含量6-10％)製備方法如下500克人參粗粉，用70％的乙醇水溶液1-2L加熱回流提取2-3次，減壓回收乙醇，過濾，蒸乾濾液，得人參提取物160克。
花粉或花粉提取物(黃酮含量10-20％)製備方法如下500克花粉，用75％的乙醇水溶液1-2L加熱回流提取2-3次，減壓回收乙醇，過濾，蒸乾濾液，得花粉提取物126克。
黃芪提取物(黃芪皂甙3-5％以上，黃芪多糖20-30％)製備方法如下500克黃芪粗粉，用75％的乙醇水溶液2-4L加熱回流提取2-3次，減壓回收乙醇，過濾，濾液上大孔吸附樹脂(D101，1公斤)，用水和乙醇水溶液梯度洗脫，收集30％-85％的乙醇液，濃縮乾燥，得提取物67克(含黃芪皂甙4.7％)。用75％乙醇液洗脫後的藥渣用水(1L)煮3次，過濾濃縮至1L，加入乙醇使乙醇含量為75-85％，沉澱精製得多糖部分克。皂甙部分與多糖部分按7∶3的比例混合，得黃芪提取物。
黃柏提取物(小檗鹼10％-15％)製備方法如下500克黃柏粉碎，用75％的乙醇水溶液1-2L加熱回流提取2-3次，減壓回收乙醇，過濾，蒸乾濾液，得黃柏提取物96克。
實例4、急性毒性研究淫羊藿提取物動物選用SD小鼠(昆明種)40隻，體重20±2g，雌雄各半，實驗前禁食16小時，讓其自由飲水。均分2組(n＝20)，第一組一次性灌服淫羊藿提取物I(A∶B為4∶6份；A、B混合後測得黃酮含量40％，淫羊藿甙10％，多糖60％)6g/kg，第二組一次性灌服淫羊藿提取物I 9g/kg，觀察7天，記錄動物給藥後食慾、自發活動、糞便、生長發育及死亡情況。同樣實驗操作，相同的劑量，我們觀察了淫羊藿提取物II(A∶B為6∶4份；A、B混合後測得黃酮含量40％，淫羊藿甙20％，多糖40％)及淫羊藿提取物III(A∶B為7∶3份；A、B混合後測得淫羊藿甙60％，多糖30％)及實例3淫羊藿複方(淫羊藿、人參、黃芪、花粉及黃柏)對小鼠的急性毒性。
結果顯示，淫羊藿提取物I、II、III及實例3淫羊藿複方經口服灌胃的LD50未能測出，因此，口服用藥的LD50大於9g/kg。
實例5、臨床實驗研究結果1、臨床實驗研究的目的1)觀察淫羊藿提取物對良性前列腺肥大確切療效及毒副反應；2)觀察及前述實例3中的淫羊藿組方(淫羊藿、人參、黃芪、花粉及黃柏)對前列腺肥大兼慢性前列腺炎的療效及毒副作用。
2、病人納入標準1)凡符合單純性前列腺肥大，年齡在50歲以上，2)前列腺肥大伴前列腺炎，年齡在30歲以上，3)症狀及體徵計分≥6分，並伴相應理化檢測不同程度異常者，4)前列腺肥大伴陽萎、早洩者。
病人統計資料如下


*良性前列腺肥大組用淫羊藿提取物；**前列腺肥大伴慢性前列腺炎用淫羊藿提取物組方(人參、黃芪、花粉及黃柏)3、治療方法良性前列腺肥大組用淫羊藿提取物(A∶B為6∶4份；混合後測得黃酮含量40％，淫羊藿甙20％，多糖40％)。劑量250mg/粒×3粒×2次/天。
前列腺肥大兼慢性前列腺炎組用實例3淫羊藿提取物複方。劑量250mg/粒×3粒×2次/天。
4、觀察方法積分≥6分作為觀察對象。平分見下表前列腺肥大臨床症狀體徵計分方法症狀體徵0分1分 2分 3分排尿狀況正常 尿細或線狀尿流斷續成線 尿點滴而下，不狀 成線小腹症狀無 滿悶感脹滿感 脹滿痛排尿時間＜40秒 40-50秒 51-60秒 ＞60秒尿流率 ＞15ml/秒 11-15ml/秒6-10ml/秒＜6ml/秒殘留尿量10ml 10-50ml 50-100ml ＞100ml前列腺肥大 正常 I度增生 II度增生 III度增生注前列腺肥大增生分度，參考文獻吳賽珠，性激素與老年疾病，第一版，北京中國科學技術出版社1998.171-189。
5、療效標準臨床控制主要症狀和體徵消失，積分率降低90％以上，理化指標恢復正常。
顯效主要症狀和體徵大部分消失，積分減少60-89％，理化指標基本恢復正常。
有效主要症狀及體徵部分減輕或消失，積分減少15-59％，理化指標有所好轉。
無效主要症狀和體徵無變化，甚至加重。
6、毒副反應觀察血常規觀察治療前後RBC、Hb、WBC及Plt變化尿常規觀察治療前後尿蛋白及RBC的變化肝功能觀察治療前後ALT及AST的變化腎功能觀察治療前後BUN及Cr的變化。
7、統計處理對計量資料用X±SD表示，配對t-test處理；組簡處理用Ridit檢驗。
8、結果1)良性前列腺肥大與前列腺肥大兼慢性前列腺炎兩組治療前後臨床症狀積分變化如下表所示。
表1、兩組前列腺肥大臨床症狀積分變化(X±SD)

2)膀胱殘餘尿量。兩組治療前後的尿殘餘量顯著減少。
表2、兩組膀胱殘餘尿量變化(單位mL，X±SD)

3)尿流率。兩組治療前後的尿流率顯著增加。
表3、兩組尿流率變化(單位mL/秒，X±SD)

4)前列腺特異性抗原(PSA)測定。前列腺肥大兼慢性前列腺炎組PSA顯著下降。
表4、兩組PSA變化(單位μg/L，X±SD)

5)良性前列腺肥大與前列腺肥大兼慢性前列腺炎組總體療效評價表5良性前列腺肥大與前列腺肥大兼慢性前列腺炎組總體療效評價

兩組療效比較採用Ridit分析處理，結果P＜0.05，表明良性肥大組總總體療效優於良性前列腺肥大伴炎症組。
良性前列腺肥大與前列腺肥大伴兼慢性前列腺炎組改善性功能療效評價在良性前列腺肥大與前列腺肥大兼慢性前列腺炎組病人中，服用實例3淫羊藿複方，劑量250mg/粒×3粒×2次/天。總體療效評價為28.6％病人的陽痿症狀得到改善；50％的早洩病人得到改善。
臨床實驗研究表明，淫羊藿提取物對於良性前列腺肥大，總有效率達93.7％。本組患者臨床症狀積分下降顯著(P＜0.01)，生活質量顯著提高，主要表現為夜尿次數減少，排尿改善。尿流率顯著提高(P＜0.01)，提示梗阻有所減輕。膀胱殘餘尿量減少(P＜0.01)。PSA(前列腺特異性抗原)值治前(3.31±3.68μg/L)及治後(3.03±3.84μg/L)有所下降，但無統計學意義。
臨床實驗研究表明，淫羊藿提取物與人參提取物、花粉及花粉提取物、黃芪提取物及黃柏提取物組成的複方對前列腺肥大兼慢性前列腺炎，總有效率達75.0％。本組患者臨床症狀積分下降顯著(P＜0.01)，生活質量顯著提高，主要表現為夜尿次數減少，排尿改善。尿流率顯著提高(P＜0.01)，提示梗阻有所減輕。膀胱殘餘尿量減少(P＜0.01)。PSA(前列腺特異性抗原)值治前(4.41±5.28μg/L)及治後(1.84±1.07μg/L)顯著下降(P＜0.01)。該組病人中拌有陽痿及早洩性功能的病人有效率分別為28.6％及50.0％。
在臨床實驗研究中，全部患者未出現任何毒副反應，治療前後所有血常規、肝功能、腎功能及尿常規無一例出現異常。
淫羊藿提取物有效組分簡單明確，製備方法簡單，工藝適合工業化生產，用於製備良性前列腺肥大的藥物，臨床效果顯著。
權利要求
1.一種治療前列腺肥大的藥物組合物，其特徵在於含有淫羊藿屬植物中提取的按重量比計2-8份∶8-2份的總黃酮與多糖類；總黃酮中黃酮含量為20-90％；多糖的分子量範圍為1000至700000。
2.根據權利要求1所述的藥物組合物，其特徵在於淫羊藿總黃酮與多糖類的配比為3-6份∶7-4份；總黃酮中淫羊藿甙與淫羊藿甙I的含量為10％-90％；多糖的分子量範圍為45000至620000。
3.根據權利要求1或2所述的藥物組合物，其特徵在於淫羊藿提取物以如下方法製備，取淫羊藿藥材，用含60-95％有機溶劑的水溶液提取，提取液減壓回收有機溶劑後的殘留物上大孔吸附樹脂柱D101或D140，用水與乙醇的混合溶劑梯度洗脫，收集30％-85％乙醇液部分，減壓回收，乾燥得總黃酮，總黃酮中黃酮含量為20-90％；取60-95％有機溶劑的水溶液提取過後的淫羊藿藥渣，用水提取，濃縮水提取液，加入乙醇，使含醇量達到70-85％，靜置，濾得多糖粗品；取多糖粗品溶於水後，加入氯仿∶正丁醇按體積比3-6∶1份的混合液，濾除蛋白質，濾液用分子量為1000的超濾膜超濾，除去分子量1000以下的成分，濃縮液繼續濃縮乾燥，得淫羊藿多糖，其分子量範圍為1000至700000；將淫羊藿總黃酮與多糖類按重量比計2-8份∶8-2份的配比混合。
4.根據權利要求3所述的藥物組合物，其特徵在於淫羊藿提取所用的60-95％有機溶劑的水溶液，其中有機溶劑為乙醇、丙酮、異丙醇和/或甲醇；淫羊藿總黃酮與多糖類的配比為3-6份∶7-4份。
5.根據權利要求4所述的藥物組合物，其特徵在於總黃酮中淫羊藿甙與淫羊藿甙I的含量為10％-90％；淫羊藿多糖製備方法中，多糖粗品可再次溶於水，加入乙醇，使含醇量達到70-85％，靜置，濾取多糖粗品，多糖的分子量為45000至620000。
6.根據權利要求5所述的藥物組合物，其特徵在於淫羊藿總黃酮與多糖類的配比為3∶8份、4∶6份、5∶5份、6∶4份或7∶3份；其可與藥學上可接受載體或輔料混合。
7.一種治療前列腺肥大及前列腺炎的藥物組合物，其特徵在於含人參、花粉、黃芪、黃柏和淫羊藿總黃酮和/或淫羊藿多糖類。
8.根據權利要求7所述的藥物組合物，其特徵在於按重量比計，含6-10％人參皂甙的人參提取物16份、含10-20％黃酮的花粉或花粉提取物1-8份、含3-5％黃芪皂甙及20-30％黃芪多糖的黃芪提取物1-4份與含10-15％小檗鹼的黃柏提取物1-6份，黃酮含量為20-90％的淫羊藿總黃酮和/或淫羊藿多糖類4-16份。
9.根據權利要求8所述的藥物組合物，其特徵在於含人參提取物1-2份，花粉或花粉提取物2-4份，黃芪提取物1-2份，黃柏提取物1-2份，淫羊藿總黃酮和/或淫羊藿多糖類5-10份。
10.根據權利要求7-9之一所述的藥物組合物，其特徵在於可以與藥學上可接受的載體或輔料混合，按常規製成各種口服製劑。
全文摘要
本發明用淫羊藿屬植物中提取的淫羊藿黃酮和多糖類成份按重量比計2－8份:8－2份,製備治療前列腺肥大的藥物；總黃酮中黃酮含量為20－90%；多糖的分子量範圍為1000至700000；或者將淫羊藿黃酮和多糖類成份與人參、花粉、黃芪、黃柏提取物組配,製備治療前列腺肥大及前列腺炎的藥物,臨床實驗均療效顯著,且未出現任何毒副反應。
文檔編號A61K36/481GK1422622SQ0214857
公開日2003年6月11日 申請日期2002年12月18日 優先權日2002年12月18日
發明者董輝 申請人:董輝