用於預防和治療痤瘡的局部製劑的製作方法

2023-07-19 16:47:41

專利名稱：用於預防和治療痤瘡的局部製劑的製作方法
技術領域：
本發明涉及通過以下途徑預防或治療痤瘡的局部製劑該製劑的抗致痤瘡菌，痤瘡丙酸桿菌(Propionibacterium acnes)的抗菌活性；通過抑制5α-還原酶來抑制過量皮脂的產生；抑制粉刺、角質層分離和抗炎作用。所述局部製劑包含得自至少一種選自刀豆(Cavaliagladiata)、側柏(Biota orientalis)和黃連(Coptis chinensis)的東方醫藥的提取物。
相關技術領域描述痤瘡在青少年中的發病率為90％，但也偶而見於20或30多歲的成人。痤瘡(或尋常痤瘡)是一種慢性炎症或在皮脂腺和毛囊中形成的疾病，其中發病機理包括過量分泌皮脂，毛囊表皮角化異常，厭氧皮膚移生細菌、痤瘡丙酸桿菌的過度生長和其它原因。痤瘡一般見於臉、胸、背、頸和臂，最顯著的皮膚部位，特徵為粉刺、膿皰、狼瘡、微結或疤痕。
在痤瘡早期，過度分泌的皮脂積聚在毛囊，而毛囊由於皮脂的壓力進而腫脹，導致發生粉刺，其中毛囊關閉的粉刺成為白色痤瘡(白頭粉刺)，而毛囊尖端輕微打開的粉刺成為黑色痤瘡(黑頭粉刺)。當痤瘡進一步發展時，細菌引起炎症，從而導致發生二種不同類型的症狀呈現微紅色皮膚和微小粉刺的丘疹類型與呈現膿的膿皰類型。青少年和成人的痤瘡之間存在一些差別，如表1總結。
表1.青少年和成人痤瘡之間的差別

如表1所示，在春天和夏天當皮脂分泌活躍時，青少年痤瘡在額和臉的所有部位形成，且它們非常可能在油性皮膚上形成。相比之下，成年人痤瘡趨於在全年中於有限的部位形成，並已知與脂質含量的相關性很小或沒有。這種形成受身體的生理和心理狀況，例如激素不平衡、壓力、飲食習慣無規律和弱身體狀況影響，因此意味著其病因學的複雜性。即使在相當好地治療成人痤瘡之後，也非常可能發生色素沉積產生雀斑，而且受影響的皮膚表面有時在該部位凹陷形成痤瘡內陷。已知造成成人痤瘡的引起很大關注的激素是通過刺激皮脂腺來分泌皮脂的雄激素和雌激素，雄激素的拮抗劑。當二種激素的平衡被破壞時，導致過量皮脂分泌，結果形成痤瘡。
已努力研製出不同的藥物用於治療痤瘡，它們包括用於抑制致痤瘡菌的增殖的抗生素如紅黴素和過氧化二苯和用於調節皮脂分泌的雌激素，但是它們中大部分一般都有不良反應。在化妝品中，已研製和試驗了用於除去角蛋白的維生素A衍生物和用於抑制致痤瘡茵的增殖的三氯酸和水楊酸。但是，這些活性成分表現的作用小，並且一般與不良作用如皮膚燒灼、皮膚過敏和光過敏有關。而且，在用這些活性成分給藥時通常觀察到痤瘡復發。因此，不存在能夠預防和治療痤瘡的真正產品。
發明概述為努力研製出一種用於治療或預防痤瘡的新局部製劑，本發明者已根據與東方醫藥有關的不同出版物的內容，用據說已知涉及痤瘡治療機理(抗菌活性、抑制過量皮脂產生、角質層分離、抗炎作用等)的活性成分進行廣泛的實驗。結果，本發明者發現，刀豆、側柏和黃連非常有效地預防和治療痤瘡，並且其刺激性很小或沒有。
因此，本發明的一個目的是提供一種用於預防或治療痤瘡的局部製劑，它包含得自至少一種選自刀豆、側柏和黃連的東方醫藥的提取物。
本發明的另一目的是提供一種對痤瘡表現治療效果且刺激性很小或沒有的東方醫藥組合物。
發明詳述本發明涉及一種用於預防或治療痤瘡的局部製劑，它包含得自至少一種選自刀豆、側柏和黃連的東方醫藥的提取物。
下面更為詳細地描述本發明本發明涉及一種通過以下途徑預防或治療痤瘡的局部製劑抗致痤瘡菌，痤瘡丙酸桿菌的抗菌活性，通過抑制5α-還原酶來抑制皮脂的過量產生，抑制粉刺形成、角質層分離和抗炎作用。所述製劑包含得自至少一種選自刀豆、側柏和黃連的東方醫藥的提取物。
刀豆是一種一年生植物，並屬於豆科。由於它的豆殼看起來象切草機，因此它一般稱為刀豆。它一般在韓國南部和中國的江河區域及南部栽培。它的根和外殼也用作醫藥。已知刀豆包含維生素A和C、水解酶脲酶、血球凝集素和刀豆氨酸。它古代以來已在中國被用作高質量食物和東方醫藥，例如用於治療由冷汗導致的打嗝、嘔吐和胃痛的醫藥的原料。目前，在民間治療領域，已知刀豆有效地治療化膿性疾病，例如臭鼻和痔。
黃連是多年生草本植物，屬於毛莨科，從最初起其根莖用作東方醫藥的原料。已知它是一種安全的植物，因為它不導致對皮膚和黏膜的刺激。已報導黃連包含生物鹼，例如小檗鹼、黃連鹼、黃連寧、巴馬亭和非洲防己鹼以及黃柏酮和黃柏內酯。它在中國用於治療燙傷、化膿性感染、感染性皮炎，臭鼻、顎炎症、滲出性多形性紅斑、並用作胃腸和腸疾病的醫藥的原料。
側柏是金鐘柏的種子，屬於柏科。新鮮的側柏看起來呈淺黃色或黃白色，而陳久的側柏看起來呈黃褐色並滲漏油。通常，側柏在中國的不同地區栽培，其種子包含大約14％的油和少量的皂苷。它已用於治療焦慮和便秘，並還用作治療炎症和脫毛的醫藥的原料以及鎮靜劑。
本發明的提取物可以通過以下步驟製備分別粉化刀豆、側柏和黃連，在至少一種選自以下的提取溶劑中熱提取該粉末蒸餾水、甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、甘油、丙二醇、1，3-丁二醇、乙酸甲酯、乙酸乙酯、苯、己烷、二乙醚和二氯甲烷，將提取物過濾，在減壓下濃縮並凍乾產物。
刀豆、側柏和黃連的混合提取物是通過以下方法製備的分別粉化刀豆、側柏和黃連，將粉末混合，並提取混合的粉末；或者分別粉化刀豆，側柏和黃連，提取各粉末並將提取物混合。
當使用混合提取物時，本發明的製劑包含來自二種不同種類的東方醫藥的提取物，其中各提取物包含0.01-10wt％刀豆和0.01-10wt％側柏；0.01-10wt％刀豆和0.001-5wt％黃連；或0.01-10wt％側柏和0.001-5wt％黃連。此外，該製劑包含得自三種不同的種類的東方醫藥的提取物，其中各提取物包含0.01-10wt％刀豆和0.01-10wt％側柏和0.001-5wt％黃連。如果濃度低於上述範圍，則效力可以忽略；在濃度超出上述範圍的情況下，出現對皮膚的不良作用和與製劑有關的技術問題。
優選來自至少一種選自刀豆、側柏和黃連的東方巨藥的提取物的含量為0.001wt％-20.0wt％。如果含量低於0.001wt％，則治療效力非常低；在超出20.0wt％的情況下，出現對皮膚的不良作用和與製劑有關的技術問題本發明的製劑可以是同時含有藥學上可接受的載體或賦形劑的乳劑、凝膠、填塞物、化妝液或化妝皂或者藥用軟膏或貼劑的形式。各特定的製劑可以根據常規方法製備。
用於局部給藥的本發明製劑的有效劑量可以根據形狀、大小、發病部位和患者的年齡而變，且一般每天應用二次至多次。
包含至少一種選自刀豆、側柏和黃連的東方醫藥的本發明的局部製劑非常有效地預防和治療痤瘡。
以下特定的實施例意在例示本發明，不應將其理解為對所附的權利要求定義的本發明保護範圍的限定。
實施例1製備刀豆、側柏和黃連的提取物用於本發明的得自刀豆、側柏和黃連的提取物如下製備分別用蒸餾水洗滌200g刀豆、側柏和黃連，乾燥並用為東方醫藥特別設計的粉碎機粉化，並往產物中加入大約10倍體積的80％乙醇溶劑。80℃下加熱8小時進行提取，使用配備冷凝器的設備以防止溶劑蒸發。
用400目濾布過濾提取物，並將剩餘物過濾一次。將各東方醫藥提取物冷卻至室溫，用Whatman 2號濾紙過濾，並在48℃和減壓下使用配備冷凝器(Buchi Rotavapor R-124，Water Bath B-480，瑞士製造，Eyela A-3S Tokyo rikakikai)的蒸餾儀器回收蒸發的溶劑來濃縮濾液，然後凍幹，最後得到15.8g刀豆提取物、8.9g側柏提取物和14.6g黃連提取物，為乾重。
實施例2評價對5α-還原酶的抑制作用在4℃以下的溫度下製備用於測定得自東方醫藥的提取物的抗睪酮5α-還原酶活性的抑制作用的睪酮5α-還原酶。通過吸入二乙醚來麻醉8周齡的白色雌性Sprague-Dawley大鼠，並斷頸處死，然後進行肝切除。用PBS(磷酸鹽緩衝鹽水)將提取的肝洗滌三次，並加入3體積冰冷的緩衝液(50mM磷酸鈉，pH6.8，0.25M蔗糖，1mM二硫蘇糖醇)，然後用單元均化器(Polytron Homogenizer)粉碎，得到均化的懸浮液。為從如此得到的懸浮液中分離5α-還原酶，將該懸浮液超聲波處理5分鐘並離心(15,000rpm，4℃，5分鐘)以製備蛋白層。
將上清液再懸浮在上述的緩衝液中，並在-80℃下儲存。根據Bradford法對如此得到的蛋白懸浮液進行蛋白定量，並用ELISA讀數器測定其精確的值。
為評價對5α-還原酶活性的抑制作用，往50μl反應溶液中加入10μl抑制劑或受試樣品的乙醇溶液(包含東方醫藥提取物的70％乙醇溶液)，並將蛋白懸浮液加到體積為100μl的反應溶液。該反應溶液包含50mM Na2HPO4(pH6.8)、25mM KCl、500mM NADPH和50mM(3H)睪酮。反應混合物在37℃水浴中反應10分鐘，並加入250μl反應終止試劑(70％環己烷和30％乙酸乙酯的混合物)以終止反應。為從終產物中獲得甾族化合物，將反應物離心以製備上清液，並將上清液在通風櫥中放置1天以蒸發反應溶劑，然後將所得的剩餘物溶於20μl氯仿。將產物點在TLC板上，並用顯影溶液(甲苯∶丙酮＝4∶1)在TLC室內顯色30分鐘，將顯影板與hyperfilm接觸3天。用密度計測定接觸區域，並如下式1所示計算抗睪酮5α-還原酶的抑制率。結果總結於表2和3中。
式1抗睪酮5α-還原酶的抑制率(％)＝[(A-B)/A]×100其中A為不加入樣品時睪酮至二氫睪酮的轉化率，而B為加入樣品時睪酮至二氫睪酮的轉化率。
表2

表3

如表2所示，三種不同種類提取物(刀豆、側柏和黃連)中的每一種都表現抗5α-還原酶活性的抑制作用。此外，當至少二種不同種類的提取物經適宜的比率混合併溶於70％乙醇以製備0.1、0.05和0.01％(w/v)提取物時，與包含單一種類的提取物的提取物相比，待測定的提取物即使在低濃度下也表現出明顯較高的抗5α-還原酶活性的抑制作用。這些結果表明適宜比率的混合提取物表現出協同抗5α-還原酶活性的抑制作用。本領域技術人員理解，表現出協同抗5α-還原酶活性的抑制作用的本發明組合物不限於前述的組合物。
實施例3評價抗痤瘡病原體的抗菌活性以這樣的方式測定三種提取物(刀豆、側柏和黃連)的抗菌活性用預定濃度的凍乾粉化的提取物處理在液體培養基中培養的痤瘡病原體(痤瘡丙酸桿菌)，然後在無氧培養箱中培養，然後測定抗痤瘡病原體(痤瘡丙酸桿菌)的最小抑制濃度(MIC)。
全部過程如下在強化的梭菌培養基中於37℃下將痤瘡病原體(痤瘡丙酸桿菌)培養3天，然後繼續傳代培養直至表現出顯著活性。
第一，在液體培養方法中，將10ml強化梭菌培養基引入帶螺旋蓋的管中，並在121℃下滅菌20分鐘。滅菌後，往液體培養基中滴加0.5ml單獨滅菌的液體石蠟以避免與氧的接觸。冷卻培養基，然後接種微生物至培養基，並在37℃下培養72小時以上。
第二，在固體培養方法中，通過將0.1％瓊脂加到強化的梭菌培養基而製備的10ml固體培養基引入帶螺旋蓋的管中，並在121℃下滅菌20分鐘。冷卻培養基，然後使用接種鉑圈接種微生物至培養基，並在37℃下穿刺培養72小時。
第三，在平皿培養方法中，將如固體培養方法製備和滅菌的瓊脂培養基傾入平皿並冷卻。完全冷卻和凝固後，將平皿置於厭氣瓶，將10ml水引入複合氣體(CO210.5％，H29.6％，N279.9％)，並保持蓋住瓶蓋，然後在37℃下培養72小時。
取1ml包含充分傳代培養的痤瘡丙酸桿菌的培養基，將其接種於包含9ml強化梭菌培養基的培養基中，藉此得到10倍稀釋的培養基。重複相同的過程得到10-1和10-5倍稀釋的培養基。
將包含刀豆、側柏、黃連的各均勻溶液和至少兩種它們的組合充分溶於10ml 70％乙醇以得到2倍稀釋的溶液。通過0.2μm膜過濾器將溶液過濾以除去細菌。將強化的梭菌-瓊脂培養基滅菌，冷卻至50℃，並往其中加入過濾除菌的提取物至濃度為10μg/ml-0.1mg/ml。將1ml稀釋培養基(稀釋至10-1-10-5的進行傳代培養的痤瘡丙酸桿菌培養基)分散在陪替氏培養皿中，並分散具有一定濃度的每種瓊脂培養基，然後混合併保持靜置以凝固瓊脂培養基。凝固後，將培養基放置在進一步配備gas-pak的厭氧瓶中。在37℃下培養3天後，對形成的落數進行計數，與對照組比較，並根據結果計算抑制率。抗痤瘡丙酸桿菌的抑制率如表4和5所示。
表4

*生長抑制**假陽性***陽性如表明抗痤瘡丙酸杆的抗菌活性的表4所示，可以觀察到低濃度(0.03％)提取物的抗菌活性，而致痤瘡菌在高濃度(大於0.1％)下完全殺死，同時各提取物在其抗痤瘡丙酸桿菌的MIC方面表現很小的差異。因此，可以認為本發明的東方醫藥的提取物即使在極低濃度下也對痤瘡丙酸桿菌表現出顯著的殺菌作用。
表5

如結果所示，與包含單一提取物的組合物相比，包含至少兩種一定比率的得自刀豆、側柏和黃連的提取物的組合物表現輕微提高的抗菌活性。特別是，觀察到包含一定比率的三種不同的得自刀豆、側柏和黃連的提取物的組合物在各種濃度下表現優良的抗菌活性和抗50α-還原酶的抑制作用。
實施例4評價對過度角化的抑制活性所有的皮膚細胞通過適宜的代謝過程，控制它們的增殖和剝落而有助於保持皮膚穩態。因此，皮膚的再生率可以間接通過觀察角質層剝落率來測定，所述角質層剝落率一般評價與角質層分離有關的皮膚變色水平來測定。
在提取物效力的評價中，使用裸鼠進行用於促進角質層分離的第一篩選。各提取物樣品通過以下方法製備將在實施例1中製備的乾燥粉末化提取物溶於70％乙醇，並如上述製備包括乙醇酸和乳酸的陽性對照。實驗如下進行用10％SDS將裸鼠的皮膚洗滌30分鐘，然後讓皮膚乾燥以進行實驗。用山坡狀小室覆蓋0.4ml乙酸銀水溶液，並用密封貼劑處理30分鐘，然後用光顯影溶液浸潤以用乙酸銀使部分貼劑變黑。進一步用各提取物樣品在變黑的部分處理密封貼劑，並在大約24小時後除去。應用提取物前的著色指數和除去提取物之後24小時的變色指數是通過比色計測定的(變色指數越高，則角質層分離作用越大)。
表6

1)明顯變色，
2)變色，3)輕微變色，4)無變化通過使用至少二種不同的已在第一篩選中表明具有效力的得自溶於70％乙醇溶液的刀豆、側柏和黃連的提取物來完成促進角質層分離的第二定量作用。將通常用作自動曬黑產品的皮膚變色劑的二羥基丙酮用作著色劑。實驗過程如下選擇20名20出頭至35歲左右的人，並選擇它們的前臂的內部作為試驗部位。在著色前測定內部的皮膚亮度，然後用在山坡狀小室內的10％二羥基丙酮著色。24小時後，用比色計觀察著色部分，並且每天將0.4ml濃度分別為0.05％、0.1％和0.2％的包含至少二種溶於70％乙醇的提取物的各樣品應用30分鐘，然後每天用比色計觀察應用部分。將在二羥基丙酮應用24小時後用比色計測定的值設為100，並將日變色水平轉化成％。評價變色部分恢復至正常顏色的時間。
式2對過度角化的抑制率＝[(對照組-試驗組)/對照組]×100表7

如表7所示，包含至少二種提取物的混合組合物在濃度為0.2％時表現的抑制率為47.4-52.6，表明本發明的提取物能夠在短時間內將二羥基丙酮導致的皮膚變色變回正常皮膚顏色。包含至少二種提取物的混合組合物表現比包含單一提取物的組合物更高的角質層分離作用，特別是包含三種提取物，刀豆、側柏和黃連的混合組合物表現最高的抗過度角化的抑制活性。
實施例5抗炎作用1)使用SD大鼠進行的角叉菜膠足水腫方法分別腹膜內施用30mg/kg量的在實施例1中製備的刀豆、側柏、黃連提取物和它們的混合物。1小時後，將0.5ml 0.1％角叉菜膠溶液注射至後足底以引起炎症。在注射角叉菜膠時和給藥4小時測定大鼠足體積變化，並根據式3計算抑制率。結果如表8所示。
式3抑制率(％)＝[(1-ΔV處理組)/ΔV對照組)]×100(ΔV足體積變化)表8

2)Balb.c耳水腫試驗為測定提取物的抗炎作用，將引起刺激的物質，5.0％苯扎氯銨、2.5％巴豆油和3000iu/g視黃酸(陰性對照)溶於70％乙醇溶液，並將它以0.3mg/耳局部應用於小鼠耳(6隻小鼠/組)，以引起水腫。在分別引起水腫之後的15分鐘和6小時，將各提取物和對照物(0.3mg/耳)局部應用於小鼠耳。在應用引起刺激的物質24小時後，用鑽孔器切下小鼠的應用部分，並將其稱重。根據測微計測定的平均值來評價水腫程度。如果如表9所示。
表9

式4抑制率(％)＝[(A-B)/A]×100A對照組耳厚度的平均值(陰性對照處理後的耳厚度-沒有處理的耳厚度)B樣品組耳厚度(樣品處理後的耳厚度-沒有處理的耳厚度)如表8和9所示，用提取物處理的組表現出類似於作為陽性對照的甘草酸和消炎痛的抗水腫抑制活性。特別是刀豆的提取物以及刀豆、側柏和黃連的混合提取物表現優良的抗水腫抑制作用，它比陰性對照溶液的作用高110-200％。
實施例6使用白兔的耳評價對粉刺的減輕作用試驗系統-此試驗一般被採納用於評價處理。購得4月齡和重2-3kg的紐西蘭白色雄兔，使熟悉1周，其中僅選擇用裸眼確定的健康兔。
試驗材料-關於試驗組，分別使用溶於70％乙醇溶液的刀豆、側柏、黃連的粉末化的提取物(0.1％(w/v))和它們的混合物，使用溶於70％乙醇溶液的1.0％壬二酸作為陽性對照，並將70％乙醇溶液本身用作陰性對照。
試驗系統的分類-每天將肉豆蔻酸異丙酯(Sigma)應用於兔子的雙耳，持續2周，以引起粉刺。選擇裸眼觀察表現典型粉刺的兔子，並進行分組，其中考慮到粉刺嚴重程度每組包含6隻兔子。在IPM給藥2周後，觀察兔耳外觀表現為毛囊和粉刺形成的嚴重擴大、表皮和毛囊的嚴重過度角化，以及焦痂形成和嚴重炎症。
受試材料的給藥方法-給試驗組和陽性對照兔的右耳以及對照兔的左耳每天施用一次0.5ml的數量，並用拭子鋪開，持續2周。2周後，評價雙耳。
裸眼觀察
將裸眼測定的標準分成7個等級，0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5和3.0。評價粉刺的面積。粉刺治療時間為2周，測定粉刺的惡化和減輕。結果如表10所示。
裸眼測定標準
0與對照組比無差別0.10和1之間的症狀1表現充血、毛細管出血、毛囊的輕微角化和擴大1.51和2之間症狀2中等程度的毛囊角化和擴大2.52和3之間的症狀3過度嚴重的毛囊角化和擴大，表現出曲型的粉刺表10

用圖像分析觀察
用裸眼觀察之後，用戊巴比妥鈉麻醉各試驗組，並切下它的雙耳，然後在基底上分離大小為大約2.5×1.5cm的組織，並將其在溫水(50℃)中浸泡3分鐘。分離組織上的表皮，將其內側向上放置在玻片上，固定並在室溫下乾燥。用實體顯微鏡(×20)觀察圖像，並用圖像分析器計算組織上的粉刺數和它的面積。結果如表11所示。
表11

如表11所示，表現比作為陽性對照的壬二酸(40.0％)更高的粉刺減少率(面積/計數比率)的提取物是刀豆(46.7％)、黃連(43.3％)和包含至少二種提取物的組合物。特別是包含刀豆∶側柏∶黃連(70∶20∶10)的提取物表現出比陽性對照高1.6倍的粉刺減少率。顯示粉刺減少率的這個實驗表明裸眼和圖像分析所觀察的結果彼此類似。
根據痤瘡形成機理總結實驗，表明本發明提取物表現出抗致痤瘡菌，痤瘡丙酸桿菌的抗菌活性，過量皮脂產生的抑制作用，粉刺溶解作用，過度角化抑制作用和抗炎作用，而且對皮膚是安全的。
實施例7評價對人皮膚的刺激為測試皮膚安全性，將據說表現出抗痤瘡的治療和預防功效的包含刀豆、側柏和黃連的提取物和至少二種不同東方醫藥的混合提取物製成乳劑的形式，並用它們進行人皮膚刺激試驗(人貼劑試驗)。將20μl製備的受試材料(10％貼劑基質)滴加到finn室內，用70％乙醇洗滌並乾燥，將其置於試驗部位，30名年齡為20-30的健康人的前臂內部，然後用多微孔帶固定。應用貼劑24小時後，揭下貼劑，並用油筆標記受試部位。觀察在應用30分鐘和24小時後的皮膚反應並根據如下標準進行評價在表12中，將平均反應分為±(1點)、+(2點)、++(3點)和+++(4點)。測定標準為排列在1以下的1級(無刺激範圍)，排列在3以下的2級(輕微刺激範圍)，排列在5以下的3級(中度刺激範圍)和排列在5以上的4級(強刺激範圍)。
表12

*刀豆**側柏***黃連如表12所示，痤瘡乳劑基質表現安全範圍的刺激水平，除了刀豆(1級)之外的所有東方醫藥表現大於2級的刺激水平。黃連由於色素沉著因而在低濃度下測定。
實施例8和對比實施例1製備乳劑將表現最高粉刺溶解和減少作用的刀豆、側柏和黃連的混合提取物製成乳劑，其成分和它們的用量如表13所述。製備過程如下
表13

將油相中存在的原料(成分1-5)精確精重，引入附加的油相槽並通過在75℃下加熱來溶解。將存在於水相的原料(成分6-9)稱重，並引入乳化槽中。將原料(成分10-11)稱重，用蒸餾水弄溼，並引入乳化槽中。
在75℃下加熱來溶解乳化槽中的成分。在真空下將油相中的成分引入乳化槽，並在75℃下使用均化器(3500rpm)和踏板混合器(25rpm)乳化5分鐘。往槽中加入成分12，並分散3分鐘。
將成分13和14溶解並分散在少量蒸餾水中，將其引入槽中以進行中和。在真空下去除泡沫並冷卻至50℃以後，加入香料，分散並冷卻至35℃，將所得的組合物熟化以製備乳劑。
實施例9和對比實施例2製備貼劑表14

將成分1-6稱重，引入溶解槽，並在室溫下均勻攪拌以製備粘性溶液。將成分7-10在室溫下溶解，引入溶解槽並均勻攪拌。將成分11-13加熱至60℃，溶解並以等分試樣的少量體積引入，由此得到貼劑用凝膠。使用帶有塗料器帽的包衣裝置將包含所述成分的貼劑用凝膠以700g/m2的數量均勻塗布在具有大小為1m×1m的矽化處理粘合劑層的聚酯薄膜上，以製備無孔聚乙烯薄膜。將該多層層壓材料切成直徑為1.5cm的圓形貼劑形式，並將其引入陷凹層壓的薄膜紙，低密度聚乙烯和鋁，由此最終製備臨床貼劑。
實施例10乳劑和貼劑的臨床試驗評價實施例8和對比實施例1(15人的試驗組和15人的對照組)，以及實施例9和對比實施例2(15人的試驗組和15人的對照組)對痤瘡的減輕作用。給60名年齡為10-20歲的有痤瘡症狀健康人局部應用該乳劑每天兩次(在早上和晚上)，應用貼劑每天一次(在晚上應用並在第二天早上除去)，持續1個月，評價痤瘡的治療和預防作用。試驗前，給試驗的皮膚和痤瘡症狀打分並照相。應用乳劑和貼劑1個月後，根據照相和裸眼觀察確定痤瘡的預防和治療程度。測定標準見表15。
表15

根據表15的測定標準確定等級，其中如果受試者的痤瘡症狀等級下降3個以上等級，則評價為效力優越；如果等級下降1-2個等級，則評價為效力中等；如果等級沒有下降，則評價為無效力；如果等級升高，則評價為惡化。表16表示根據測定標準使用本發明的乳劑和貼劑痤瘡預防和治療的臨床結果。
表16

總結表16的結果，包含刀豆、側柏和黃連的乳劑和貼劑與不含它們的乳劑和貼劑相比表現出抗痤瘡的預防和治療作用的改善。
實施例11毒性試驗如下測定刀豆、側柏和黃連的提取物的毒性用水稀釋溶於二甲亞碸(DMSO)的提取物，並以100mg/kg的量對各只小鼠(每組10隻)給藥，然後觀察7天。沒有小鼠死亡。
如前述，包含得自至少一種選自刀豆、側柏和黃連的東方醫藥的提取物的本發明局部製劑通過抑制5α-還原酶活性、抗痤瘡丙酸桿菌的抗菌活性、抗炎作用、抑制粉刺形成和角質層分離而非常有效地預防和治療痤瘡。
權利要求
1.一種用於預防或治療痤瘡的局部製劑，所述製劑包含得自至少一種選自刀豆、側柏和黃連的東方醫藥的提取物。
2.根據權利要求1的製劑，其中得自該東方醫藥的該提取物在該局部製劑中的含量為0.001-20.0wt％。
3.根據權利要求1或2的製劑，其中該製劑包含得自二種不同種類的東方醫藥的提取物，其中該提取物包含0.01-10wt％刀豆和0.01-10wt％側柏；0.01-10wt％刀豆和0.001-5wt％黃連；或0.01-10wt％側柏和0.001-5wt％黃連。
4.根據權利要求1或2的製劑，其中該製劑包含得自三種不同種類的東方醫藥的提取物，其中該提取物包含0.01-10wt％刀豆和0.01-10wt％側柏和0.001-5wt％黃連。
5.根據權利要求1的製劑，其中該提取物的製備包括(a)分別粉化刀豆、側柏和黃連，(b)在至少一種選自以下的提取溶劑中熱提取該粉末蒸餾水、甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、甘油、丙二醇、1，3-丁二醇、乙酸甲酯、乙酸乙酯、苯、己烷、二乙醚和二氯甲烷，(c)將該提取物過濾，和(d)在減壓下濃縮並凍乾產物。
6.根據權利要求5的製劑，其中該提取物可以通過以下方法製備分別粉化刀豆、側柏和黃連，將粉末混合併提取該混合粉末；或者分別粉化刀豆、側柏和黃連，提取各粉末並混合該提取物。
7.根據權利要求1的製劑，其中該製劑的劑型為乳劑、凝膠、填塞物、化妝液或化妝皂、藥用軟膏或貼劑。
全文摘要
公開一種用於預防或治療痤瘡的局部製劑，特別是通過以下途徑預防或治療痤瘡的局部製劑該製劑的抗致痤瘡菌，痤瘡丙酸桿菌的抗菌活性；通過抑制5α－還原酶來抑制過量皮脂的產生；抑制粉刺、角質層分離和抗炎作用。所述局部製劑包含得自至少一種選自刀豆、側柏和黃連的東方醫藥的提取物。
文檔編號A61K36/14GK1674864SQ03819056
公開日2005年9月28日 申請日期2003年8月12日 優先權日2002年8月14日
發明者李淳根, 郭義宗, 韓昌均, 金周玄 申請人:Sk化學株式會社