一種黑牛肝菌優良性狀馴化方法
2023-07-13 03:59:56
一種黑牛肝菌優良性狀馴化方法
【專利摘要】本發明涉及食用菌菌種馴化領域，特別涉及黑牛肝菌優良性狀馴化方法，包括以下步驟：(a)選擇性狀優良的黑牛肝菌子實體作為馴化菌株；(b)將菌肉組織接種於營養瘠薄型基質，置於26-30℃，暗光培養，至菌絲長滿；(c)挑取前端菌絲體，轉接於營養瘠薄型基質，至菌絲長滿；(d)重複步驟(c)2-3次，將得到的菌絲栽培出菇，得到成熟子實體；(e)重複步驟(b)-(d)2-4次，得到的子實體即為黑牛肝菌的菌種。該黑牛肝菌優良性狀馴化方法，增強黑牛肝菌分解利用木質素、纖維素的能力，提高抗雜能力，從而提高出菇率、出菇整齊度和成熟率，提高了黑牛肝菌栽培的生物學效率，得到的黑牛肝菌性狀優良。
【專利說明】
—種黑牛肝菌優良性狀馴化方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及食用菌菌種馴化領域，具體而言，涉及一種黑牛肝菌優良性狀馴化方法。
【背景技術】
[0002]黑牛肝菌(Phlebopus portentosu),也名暗褐網柄牛肝菌,主要分布於斯裡蘭卡、越南、印度尼西亞、泰國、巴西、墨西哥、澳大利亞、紐西蘭及我國雲南、廣西和海南等地，是熱帶地區珍貴的、最受消費者喜愛的食用菌，也是目前牛肝菌科(Boletaceae)脈柄牛肝菌屬(Phlebopus)中唯一一種可以用腐生栽培方法培養的牛肝菌。黑牛肝菌品質鮮嫩、味道鮮美、營養價值豐富、高蛋白、低脂肪，富含17種人體必需胺基酸及豐富的磷、鉀、鈣、鎂、鐵、鋅等人體必須的礦質元素，是較好的健康食品並具有很好的藥用價值，深受消費者喜愛。目前已可用栽培腐生菌的方式進行人工栽培，以及接種鳳凰木、咖啡、柚子、芒果寄主樹等寄主樹進行仿生栽培。
[0003]牛肝菌科菌類是一種外生菌根菌，其子實體的形成、出菇及生活史的完成必須與其共生樹種形成共生菌根關係後才能完成。雖然黑牛肝菌(Phlebopus portentosu)的營養方式獨特，與牛肝菌科其他屬種有所不同，那就是可以脫離共生樹種營腐生生活，但黑牛肝菌的腐生能力不強，原因主要是黑牛肝菌不能分解利用木質素、纖維素或其分解利用木質素、纖維素的能力較弱，因此，從野生子實體收集獲得的菌株，可以出菇的菌株僅佔3% -5%,而在出菇的菌株中，具備一定的抗雜菌力，使覆土後不汙染，菌袋出菇率及出菇菌袋成熟率達75%，成熟子實體平均單菇重達80g的菌株僅佔1% _3%，因此，從野生黑牛肝菌菌株中篩選到I個具備商業栽培性狀的菌株特別困難，這制約了黑牛肝菌的擴大栽培、規模栽培以及產業化。因此，進行黑牛肝菌人工馴化獲得優良菌株，提高黑牛肝菌的出菇率、出菇整齊度、抗雜菌能力及生物學效率迫在眉捷，也是實現黑牛肝菌產業化栽培的首要保障。
【發明內容】
[0004]本發明的目的在於提供一種黑牛肝菌優良性狀馴化方法，以解決上述的問題。
[0005]在本發明的實施例中提供了一種黑牛肝菌優良性狀馴化方法，包括以下步驟:(a)、選擇性狀優良的黑牛肝菌子實體作為馴化菌株；
[0006](b)、將所述馴化菌株的菌肉組織接種於營養瘠薄型基質，置於26_30°C，暗光培養，至菌絲長滿營養瘠薄型基質；
[0007](C)、挑取長滿營養瘠薄型基質的前端菌絲體，轉接於營養瘠薄型基質，至菌絲長滿營養瘠薄型基質；
[0008](d)、重複步驟(C) 2-3次，將得到的菌絲栽培出菇，得到成熟子實體；
[0009](e)、重複步驟(b)-(d)2_4次，得到的子實體即為黑牛肝菌的菌種；
[0010]其中，所述營養瘠薄型基質包括下列組分，按重量份計:鋸木屑500-1000份，木片1000-2000 份，土壤 100-300 份，穀粒 100-300 份，水含量為 55-65%，pH 調至 4.5-6.0。
[0011]本發明實施例提供的黑牛肝菌優良性狀馴化方法，將性狀優良的黑牛肝菌子實體作為馴化菌株，將馴化菌株的菌肉組織接種在營養瘠薄型基質，得到牛肝菌菌絲，使牛肝菌菌絲在富含木質素、C、N營養瘠薄型基質中反覆進行菌絲腐生能力誘導、馴化，誘發黑牛肝菌對木質素、纖維素的分解利用能力，增強黑牛肝菌分解利用木質素、纖維素的能力，提高抗雜能力，從而提高出菇率、出菇整齊度和成熟率，提高了黑牛肝菌栽培的生物學效率，得到的黑牛肝菌性狀優良。
[0012]其中，營養瘠薄型基質的鋸木屑可以選用橡膠木，鳳凰木、柚子樹、芒果樹等的鋸木屑；木片可以選用橡膠木，鳳凰木、柚子樹、芒果樹等，其大小為0.5-1.0cmX0.2-0.5cmX0.1-0.3cm ;穀粒為常見的穀粒，如高粱粒、大米粒、小麥粒、小米粒、玉米粒等；土壤採用栽培真菌所用的一般土壤即可。
[0013]營養瘠薄型基質通過以上方法製得，將鋸木屑和木片預溼，穀粒用水浸泡7-9小時，然後與木屑、木片和土壤混勻；調PH ;然後分裝於500ml塑料瓶中，每瓶裝培養基量450ml, 121°C滅菌 50_70min 冷卻即得。
[0014]優選地，所述性狀優良的黑牛肝菌子實體由以下方法製得:
[0015](I)、採集野生黑牛肝菌子實體，切取子實體菌蓋與菌柄交界處的菌肉組織接種於母種培養基，於28°C -30°C恆溫培養，培養25-30d獲得母種菌絲；
[0016](2)、將所述母種菌絲接種於菌袋或菌瓶的固體培養基質中，培養菌絲長滿固體培養基質，然後在菌袋或菌瓶的表面覆土，培養菌絲長滿覆土層，出菇，至子實體發育成熟；
[0017](3)、對發育成熟的子實體進行挑選，得到所述性狀優良的黑牛肝菌子實體。
[0018]野生黑牛肝菌，菌體較大，肉肥厚，柄粗壯，食味香甜可口，營養豐富，是極富美味的野生食用菌之一。野生黑牛肝菌具有這些優良的性狀，也是其優良性狀的來源，使用野生黑牛肝菌作為馴化菌株的來源，能夠很好的保留其自身的營養價值以及其他的優良性狀。
[0019]切取野生黑牛肝菌的菌肉組織(長寬厚為
0.5-1.0cmX0.2-0.5cmX0.15-0.25cm)將其培養(暗培養)獲得子實體，是為了在擴繁的同時，進一步純化野生黑牛肝菌，將得到的發育成熟的子實體進行挑選，以獲得性狀優良的黑牛肝菌子實體，保證後續馴化的有效進行。
[0020]為了保證後續馴化菌株的優良性狀，進一步地，所述野生黑牛肝菌子實體單菇重200g-500g,菌柄粗壯不中空，菌肉肥厚，中等成熟菌，孔未開，無蟲蛀及雜菌，新鮮。
[0021]為了得到的性狀優良的黑牛肝菌子實體具有更優的性狀，優選地，所述野生黑牛肝菌子實體為50-100個。將每個野生黑牛肝菌子實體分別切取菌肉組織進行培養獲得菌株，繼續栽培每個菌株生長子實體，從眾多成熟的子實體中挑選性狀優良的黑牛肝菌子實體來進行馴化。
[0022]具體地，所述性狀優良的黑牛肝菌子實體符合以下標準:
[0023](I)袋栽40d內菌絲長滿固體培養基質；瓶栽30d內菌絲長滿固體培養基質；
[0024](2)覆土至菌絲長滿覆土層在1d以內；
[0025](3)覆土菌袋或菌瓶的出菇率達75%以上；
[0026](4)菌袋或菌瓶出菇的成熟率達75%以上；
[0027](5)發育成熟的子實體的單菇重為80g_130g ；
[0028](6)覆土至開始出燕不超過15d,收燕開始至結束4d ；
[0029](7)菌蓋及菌柄顏色為黃褐色或橄欖褐色，形態完整。
[0030]為了使菌肉組織在營養瘠薄型基質上正常的生長，保證馴化的正常進行，經驗證，優選地，在所述步驟(b)中，所述菌肉組織的長寬厚為0.8-1.2cmX0.4-0.7cmX0.15-0.25cm。
[0031]優選地，在所述步驟(b)中，菌肉組織接種時按壓菌肉組織使菌肉組織與營養瘠薄型基質緊密接觸。菌肉組織與營養瘠薄型基質緊密接觸，以利於菌絲萌發、吃料及生長。
[0032]優選地，所述營養瘠薄型基質佔其培養器皿體積的1/4-1/2。在保證提供營養成分的同時，留有一定的空間，以利於菌絲的生長。其中，一般選用盛裝營養瘠薄型基質的培養器皿為25mmX 200mm規格的試管或250ml規格的三角瓶。
[0033]優選地，所述母種培養基包括以下組分，按重量份計:
[0034]馬鈴薯100-200份，葡萄糖10-20份，酵母浸出汁1_2份，硝酸銨1_2份，MgS04l_2份，KH2PO41-2 份，ZnSO40.5-1 份，MnSO40.01-0.05 份，瓊脂粉 18-22 份，水 900-1100 份，pH調至4.5-6.5。採用常用的高溫高壓滅菌即可，如121°C滅菌30-60min，冷卻即得。在該母種培養基上生長得到的母種菌絲性能更為優良。
[0035]有選地，所述固體培養基質包括下列組分，按重量份計:
[0036]鋸木屑100000-200000份，麥粒10000-20000份，蔗糖100-200份，酒石酸銨100-200 份，蛋白腖 200-400 份，MgS04100-200 份，KH2P04100-200 份，水含量為 55-65%，pH調至4-6。
[0037]其製備方法為:將橡膠木或其他雜木的鋸木屑預溼，麥粒用水浸泡7-9小時，過濾與木屑混勻；蔗糖，酒石酸銨、蛋白腖、MgS04、KH2P04溶於水，噴灑入木屑中，調pH;然後分裝於500ml塑料瓶中，每瓶裝培養基量450ml，121°C滅菌50_70min冷卻待用。
[0038]在該固體培養基質對菌絲先進行預誘導，以便於使得到子實體能更好的適應在營養瘠薄型基質中生長。
[0039]本發明實施例提供的黑牛肝菌優良性狀馴化方法，將性狀優良的黑牛肝菌子實體作為馴化菌株，將馴化菌株的菌肉組織接種在營養瘠薄型基質，得到牛肝菌菌絲，使牛肝菌菌絲在富含木質素、C、N營養瘠薄型基質中反覆進行菌絲腐生能力誘導、馴化，誘發黑牛肝菌對木質素、纖維素的分解利用能力，增強黑牛肝菌分解利用木質素、纖維素的能力，提高抗雜能力，從而提高出菇率、出菇整齊度和成熟率，提高了黑牛肝菌栽培的生物學效率，得到的黑牛肝菌性狀優良。
【具體實施方式】
[0040]下面通過具體的實施例子對本發明做進一步的詳細描述。
[0041]實施例1
[0042]1.野生黑牛肝菌子實體收集
[0043]採集野生黑牛肝菌子實體50個，子實體要求單菇重400-500g，菌柄粗壯不中空，菌肉肥厚，中等成熟菌孔未開，無蟲蛀及雜菌，新鮮；
[0044]用組織分離法切取子實體菌蓋與菌柄交界處的菌肉組織接種於母種培養基中，於30°C恆溫培養，25d獲得母種菌絲；
[0045]其中，母種培養基包括以下組分，按重量份計:馬鈴薯200份，葡萄糖20份，酵母浸出汁2份，硝酸銨2份，MgS042份，KH2P042份，ZnSO4I份，MnSO40.05份，瓊脂粉22份，水1100 份，pH 調至 6.5。
[0046]2.對收集的野生黑牛肝菌擴繁
[0047]將上述「I」收集的野生黑牛肝菌的菌株培養得到的母種菌絲接種於菌袋或菌瓶的固體培養基質中，培養菌絲長滿固體培養基質，然後在菌袋或菌瓶的表面覆土，培養菌絲長滿覆土層，出菇，至子實體發育成熟；
[0048]其中，固體培養基質包括下列組分，按重量份計:
[0049]鋸木屑200000份，麥粒20000份，蔗糖200份，酒石酸銨200份，蛋白腖400份，MgS04200 份，KH2P04200 份，水含量為 65%，pH 調至 6。
[0050]3.選擇馴化菌株
[0051]選擇上述「2」出菇及子實體發育成熟的菌株。
[0052]選擇標準:
[0053](I)袋栽40d內菌絲長滿固體培養基質；瓶栽30d內菌絲長滿固體培養基質；
[0054](2)覆土至菌絲長滿覆土層在1d以內；
[0055](3)覆土菌袋或菌瓶的出菇率達75%以上；
[0056](4)菌袋或菌瓶出菇的成熟率達75%以上；
[0057](5)發育成熟的子實體平均單菇重為120_130g ；
[0058](6)覆土至開始出燕不超過15d,收燕開始至結束4d ；
[0059](7)菌蓋及菌柄顏色為黃褐色或橄欖褐色，形態完整。
[0060]4.優良性狀馴化
[0061](b)、將上述「3」篩選到的馴化菌株的菌肉組織接種於營養瘠薄型基質，菌肉組織的長寬厚為1.2cmX0.7cmX0.25cm，接種時稍按壓接種菌絲塊，使菌絲塊與固體基質緊密接觸，菌絲萌發、吃料及生長；置於30°C，暗光培養，至菌絲長滿營養瘠薄型基質；
[0062](c)、挑取長滿營養瘠薄型基質的前端菌絲體,轉接於營養瘠薄型基質,30d後菌絲長滿營養瘠薄型基質；
[0063](d)、重複步驟(C) 3次，將得到的菌絲栽培出菇，得到成熟子實體；
[0064](e)、重複步驟(b)_(d)4次，即對營養瘠薄型基質馴化培養的菌絲轉進行栽培出菇培養成熟子實體進行菌株復壯，最後得到的子實體即為黑牛肝菌的菌種；
[0065]其中，所述營養瘠薄型基質包括下列組分，按重量份計:橡膠樹的鋸木屑1000份，橡膠樹的木片2000份，土壤300份，穀粒300份，水含量為65%，pH調至6.0 ;營養瘠薄型基質佔其培養器皿體積的1/2。
[0066]實施例2
[0067]1.野生黑牛肝菌子實體收集
[0068]採集野生黑牛肝菌子實體100個，子實體要求單菇重200_250g，菌柄粗壯不中空，菌肉肥厚，中等成熟菌孔未開，無蟲蛀及雜菌，新鮮；
[0069]用組織分離法切取子實體菌蓋與菌柄交界處的菌肉組織接種於母種培養基中，於28°C恆溫培養，30天獲得母種菌絲；
[0070]其中，母種培養基包括以下組分，按重量份計:馬鈴薯100份，葡萄糖10份，酵母浸出汁I份，硝酸銨I份，MgSO4I份，KH2PO4I份，ZnSO40.5份，MnSO40.01份，瓊脂粉18份，水900 份，pH 調至 4.5。
[0071]2.對收集的野生黑牛肝菌擴繁
[0072]將上述「I」收集的野生黑牛肝菌的菌株培養得到的母種菌絲接種於菌袋的固體培養基質中，培養菌絲長滿固體培養基質，然後在菌袋的表面覆土，培養菌絲長滿覆土層，出菇，至子實體發育成熟；
[0073]其中，固體培養基質包括下列組分，按重量份計:
[0074]橡膠樹和芒果樹的鋸木屑100000份，麥粒10000份，蔗糖100份，酒石酸銨100份，蛋白腖200份，MgSO410份，KH2PO410份，水含量為55%，pH調至4。
[0075]3.選擇馴化菌株
[0076]選擇上述「2」出菇及子實體發育成熟的菌株。
[0077]選擇標準:
[0078](I)袋栽40d內菌絲長滿固體培養基質；
[0079](2)覆土至菌絲長滿覆土層在1d以內；
[0080](3)覆土菌袋或菌瓶的出菇率達75%以上；
[0081](4)菌袋或菌瓶出菇的成熟率達75%以上；
[0082](5)發育成熟的子實體平均單菇重為80g以上；
[0083](6)覆土至開始出燕不超過15d,收燕開始至結束4d ；
[0084](7)菌蓋及菌柄顏色為黃褐色或橄欖褐色，形態完整。
[0085]4.優良性狀馴化
[0086](b)、將上述「3」篩選到的馴化菌株的菌肉組織接種於營養瘠薄型基質，菌肉組織的長寬厚為0.8cmX0.4cmX0.15cm,接種時稍按壓接種菌絲塊，使菌絲塊與固體基質緊密接觸，菌絲萌發、吃料及生長；置於26°C，暗光培養，至菌絲長滿營養瘠薄型基質；
[0087](c)、挑取長滿營養瘠薄型基質的前端菌絲體,轉接於營養瘠薄型基質，40d後菌絲長滿營養瘠薄型基質；
[0088](d)、重複步驟(C) 2次，將得到的菌絲栽培出菇，得到成熟子實體；
[0089](e)、重複步驟(b)_(d)2次，即對營養瘠薄型基質馴化培養的菌絲轉進行栽培出菇培養成熟子實體進行菌株復壯，最後得到的子實體即為黑牛肝菌的菌種；
[0090]其中，所述營養瘠薄型基質包括下列組分，按重量份計:橡膠樹和芒果樹的鋸木屑500份，橡膠樹和芒果樹的的木片1000份，土壤100份，穀粒100份，水含量為55%，pH調至4.5 ;營養瘠薄型基質佔其培養器皿體積的1/4。
[0091]實施例3
[0092]1.野生黑牛肝菌子實體收集
[0093]採集野生黑牛肝菌子實體80個，子實體要求單菇重300_350g，菌柄粗壯不中空，菌肉肥厚，中等成熟菌孔未開，無蟲蛀及雜菌，新鮮；
[0094]用組織分離法切取子實體菌蓋與菌柄交界處的菌肉組織接種於母種培養基中，於29°C恆溫培養，28d獲得母種菌絲；
[0095]其中，母種培養基包括以下組分，按重量份計:馬鈴薯150份，葡萄糖15份，酵母浸出汁2份，硝酸銨I份，MgS042份，KH2PO4I份，ZnSO40.8份，MnSO40.03份，瓊脂粉20份，水1000份，pH調至6。
[0096]2.對收集的野生黑牛肝菌擴繁
[0097]將上述「I」收集的野生黑牛肝菌的菌株培養得到的母種菌絲接種於菌瓶的固體培養基質中，培養菌絲長滿固體培養基質，然後在菌瓶的表面覆土，培養菌絲長滿覆土層，出菇，至子實體發育成熟；
[0098]其中，固體培養基質包括下列組分，按重量份計:
[0099]鋸木屑150000份，麥粒15000份，蔗糖150份，酒石酸銨150份，蛋白腖300份，MgS04150 份，KH2PO4150 份，水含量為 60%，pH 調至 5。
[0100]3.選擇馴化菌株
[0101]選擇上述「2」出菇及子實體發育成熟的菌株。
[0102]選擇標準:
[0103](I)瓶栽30d內菌絲長滿固體培養基質；
[0104](2)覆土至菌絲長滿覆土層在1d以內；
[0105](3)覆土菌袋或菌瓶的出菇率達75%以上；
[0106](4)菌袋或菌瓶出菇的成熟率達75%以上；
[0107](5)發育成熟的子實體平均單菇重為10g-1lOg ；
[0108](6)覆土至開始出燕不超過15d,收燕開始至結束4d ；
[0109](7)菌蓋及菌柄顏色為黃褐色或橄欖褐色，形態完整。
[0110]4.優良性狀馴化
[0111](b)、將上述「3」篩選到的馴化菌株的菌肉組織接種於營養瘠薄型基質，菌肉組織的長寬厚為1.0cmX0.5cmX0.2cm,接種時稍按壓接種菌絲塊,使菌絲塊與固體基質緊密接觸，菌絲萌發、吃料及生長；置於28°C，暗光培養，至菌絲長滿營養瘠薄型基質；
[0112](C)、挑取長滿營養瘠薄型基質的前端菌絲體，轉接於營養瘠薄型基質，35天後菌絲長滿營養瘠薄型基質；
[0113](d)、重複步驟(c)2次，將得到的菌絲栽培出菇，得到成熟子實體；
[0114](e)、重複步驟(b)_(d)3次，即對營養瘠薄型基質馴化培養的菌絲轉進行栽培出菇培養成熟子實體進行菌株復壯，最後得到的子實體即為黑牛肝菌的菌種；
[0115]其中，所述營養瘠薄型基質包括下列組分，按重量份計:橡膠樹和鳳凰樹的鋸木屑750份，橡膠樹和鳳凰樹的木片1500份，土壤200份，穀粒200份，水含量為60%，pH調至5 ;營養瘠薄型基質佔其培養器皿體積的1/3。
[0116]將實施例1-3獲得的黑牛肝菌的菌種進行試驗，同時以未經馴化的黑牛肝菌的菌株作為對照組。
[0117]在普通菇房(無淨化設施)條件下栽培實施例1-3獲得的黑牛肝菌的菌種和未經馴化的黑牛肝菌的菌株，未經馴化的黑牛肝菌的菌株分三組進行，通過觀察和數據計算，比較馴化菌株與對照菌株在養菌期時間、養菌期汙染率、出菇率、成熟率、平均子實體重、覆土至出菇時間、生物學效率(是指食用菌鮮重與所用的培養料乾重之比，常用百分數表示)參數的差異，結果見表I所示。
[0118]表I馴化菌株與對照菌株栽培性狀比較
[0119]
【權利要求】
1.一種黑牛肝菌優良性狀馴化方法，其特徵在於，包括以下步驟:(a)、選擇性狀優良的黑牛肝菌子實體作為馴化菌株； (b)、將所述馴化菌株的菌肉組織接種於營養瘠薄型基質，置於26-30°C，暗光培養，至菌絲長滿營養瘠薄型基質； (C)、挑取長滿營養瘠薄型基質的前端菌絲體，轉接於營養瘠薄型基質，至菌絲長滿營養瘠薄型基質； (d)、重複步驟(c)2-3次，將得到的菌絲栽培出菇，得到成熟子實體； (e)、重複步驟(b)-(d)2-4次，得到的子實體即為黑牛肝菌的菌種； 其中，所述營養瘠薄型基質包括下列組分，按重量份計:鋸木屑500-1000份，木片1000-2000 份，土壤 100-300 份，穀粒 100-300 份，水含量為 55-65%，pH 調至 4.5-6.0。
2.根據權利要求1所述的黑牛肝菌優良性狀馴化方法，其特徵在於，所述性狀優良的黑牛肝菌子實體由以下方法製得: (1)、採集野生黑牛肝菌子實體，切取子實體菌蓋與菌柄交界處的菌肉組織接種於母種培養基，於28°C -30°C恆溫培養，培養25-30d獲得母種菌絲； (2)、將所述母種菌絲接種於菌袋或菌瓶的固體培養基質中，培養菌絲長滿固體培養基質，然後在菌袋或菌瓶的表面覆土，培養菌絲長滿覆土層，出菇，至子實體發育成熟； (3)、對發育成熟的子實體進行挑選，得到所述性狀優良的黑牛肝菌子實體。
3.根據權利要求2所述的黑牛肝菌優良性狀馴化方法，其特徵在於，所述野生黑牛肝菌子實體單菇重200g-500g，菌柄粗壯不中空，菌肉肥厚，中等成熟菌，孔未開，無蟲蛀及雜菌，新鮮。
4.根據權利要求3所述的黑牛肝菌優良性狀馴化方法，其特徵在於，所述野生黑牛肝菌子實體為50-100個。
5.根據權利要求2所述的黑牛肝菌優良性狀馴化方法，其特徵在於，所述性狀優良的黑牛肝菌子實體符合以下標準: (1)袋栽40d內菌絲長滿固體培養基質；瓶栽30d內菌絲長滿固體培養基質； (2)覆土至菌絲長滿覆土層在1d以內； (3)覆土菌袋或菌瓶的出菇率達75%以上； (4)菌袋或菌瓶出菇的成熟率達75%以上； (5)發育成熟的子實體的單菇重為80g-130g； (6)覆土至開始出菇不超過15d，收菇開始至結束4d； (7)菌蓋及菌柄顏色為黃褐色或橄欖褐色，形態完整。
6.根據權利要求1所述的黑牛肝菌優良性狀馴化方法，其特徵在於，在所述步驟(b)中，所述菌肉組織的長寬厚為0.8-1.2cmX0.4-0.7cmX0.15-0.25cm。
7.根據權利要求1所述的黑牛肝菌優良性狀馴化方法，其特徵在於，在所述步驟(b)中，菌肉組織接種時按壓菌肉組織使菌肉組織與營養瘠薄型基質緊密接觸。
8.根據權利要求1所述的黑牛肝菌優良性狀馴化方法，其特徵在於，所述營養瘠薄型基質佔其培養器皿體積的1/4-1/2。
9.根據權利要求2所述的黑牛肝菌優良性狀馴化方法，其特徵在於，所述母種培養基包括以下組分，按重量份計: 馬鈴薯100-200份，葡萄糖10-20份，酵母浸出汁1-2份，硝酸銨1_2份，MgSO41-2份，KH2PO41-2 份，ZnSO40.5-1 份，MnSO40.01-0.05 份，瓊脂粉 18-22 份，水 900-1100 份，pH 調至4.5-6.5。
10.根據權利要求2所述的黑牛肝菌優良性狀馴化方法，其特徵在於，所述固體培養基質包括下列組分，按重量份計: 鋸木屑100000-200000份，麥粒10000-20000份，蔗糖100-200份，酒石酸銨100-200份，蛋白腖 200-400 份，MgSO4100-200 份，KH2PO4100-200 份，水含量為 55-65%，pH調至 4-6。
【文檔編號】A01G1/04GK104126416SQ201410413765
【公開日】2014年11月5日 申請日期:2014年8月21日 優先權日:2014年8月21日
【發明者】石建同, 紀光燕, 郭細龍 申請人:石泉