膠原分子片段接枝脂肪族聚酯二元或三元共聚物及製法和應用的製作方法

2023-08-02 01:30:31

專利名稱：：膠原分子片段接枝脂肪族聚酯二元或三元共聚物及製法和應用的製作方法
技術領域：
：本發明涉及膠原分子片段接枝脂肪族聚酯二元或三元共聚物及製法和應用。技術背景天然生物高分子一膠原作為生物醫用材料，具有低抗原性、低毒性，體內可降解吸收，且降解產物無毒(參考文獻[1,2])。膠原與細胞相容性好，對細胞有較高的誘導性，可以為細胞的粘附生長提供結合位點。因此，膠原廣泛的應用在組織工程和藥物控制釋放領域中(參考文獻[3,4])。脂肪族聚酯是近來常用的合成生物醫用材料，可生物降解並且降解產物容易吸收或代謝，這一特點使得其在組織工程和藥物控制釋放領域有良好的應用前景(參考文獻[5])。但是，脂肪族聚酯類材料和膠原相比，其細胞粘附和誘導性能差，組織相容性差，不能夠提供細胞進行生長、分化的結合位點。因此，關於膠原對合成類脂肪族聚酯材料的改性研究越來越多。但是膠原分子量過大，對合成材料進行改性只能採取表面處理或者共混(參考文獻[6-8])。為了使脂肪族聚酯能充分和膠原結合，同時不喪失脂肪族聚酯和膠原的優點，將膠原降解獲得膠原分子片段，採用化學方法將兩者接枝共聚，這樣獲得的新材料在不影響脂肪族聚酯各項優越性能的同時，改善其生物相容性，擴大材料在組織工程和藥物控制釋放領域中的應用。聚乙二醇具有顯著的生物相容性，抗凝血性，無毒和低免疫性，因此被廣泛應用於生物醫藥領域(參考文獻[9，10])。用聚乙二醇對脂肪族聚酯進行改性，可增加脂肪族聚酯的溶解性，改善其作為藥物載體的穩定性。脂肪族聚酯能在生物體內被酶降解，具有很好的可生物降解性和生物相容性，廣泛用於組織工程和藥物釋放。同時具有細胞結合位點的膠原分子片段能在組織工程和藥物釋放體系中引進功能基團，兩者的結合具有重大的應用價值。目前合成脂肪族聚酯通常由羥基引發乙交酯、丙交酯以及己內酯等單體開環聚合得到(參考文獻[11-14])。
發明內容本發明所合成的脂肪族聚酯一膠原分子片段共聚物和聚乙二醇一脂肪族聚酯一膠原分子片段，綜合利用了脂肪族聚酯和膠原分子片段的性質。調節二嵌段或三嵌段膠原分子片段的比例，當膠原分子片段上面氨基的摩爾數和聚酯分子的摩爾數比例小於等於1的時候，可以得到梳型結構分子；當膠原片段的摩爾數和聚酯分子的摩爾數比例大於等於1的時候，可以得到線性結構分子。共聚物的親水/親油性，生物相容性，生物降解性等性能也可以通過調節各嵌段間的比例獲得。同時本發明所採用接枝共聚的方法，可應用在一端具有可反應功能基團為羧基的脂肪族聚酯分子和任何一個具有氨基基團的兩性聚電解質，包括蛋白質、聚胺基酸和多肽的接枝共聚。脂肪族聚酯與膠原分子片段成功的結合後，材料的生物相容性得到提高，用作組織工程材料時可以提高材料與組織間的相容性，有利於誘導細胞在材料支架上面的粘附、生長和增殖。這種材料可以綜合利用脂肪族聚酯和膠原的優良性能，在生理條件下可自行降解、崩潰和代謝，進而被生物體吸收或排出體外，對人體無毒副作用。當被用作藥物載體時，可以通過控制合成材料各部分的比例來控制降解速率，進而來調節藥物釋放速率。因此，本發明所合成的高分子材料在醫學上有很高的使用價值，有廣泛的應用前景。1)本發明的目之一是提供膠原分子片段接枝脂肪族聚酯二元或三元共聚物，所述的膠原分子片段接枝脂肪族聚酯二元共聚物，膠原分子片段的分子量為1007000，脂肪族聚酯分子量為500080000;所述的膠原分子片段接枝脂肪族聚酯三元共聚物，是甲氧基聚乙二醇-脂肪族聚酯-膠原分子片段的共聚物；其中，甲氧基聚乙二醇的分子量為7505000，膠原分子片段的分子量為1007000，脂肪族聚酯分子量為500080000。2)本發明的另一目的是給出脂肪族聚酯一膠原分子片段二元共聚物(簡寫為Polyester-DCol)的製備方法，其步驟如下(1)膠原分子片段的製備方法取膠原凍幹海綿溶解在濃度為0.52M的檸檬酸水溶液中，反應溫度為80~100°C，磁力攪拌，進行膠原的降解，膠原和0.52M的檸檬酸水溶液的質量比為0.02-0.2;經過1236h後，降解液用分子量100的透析袋進行透析，除掉分子量小於IOO的膠原分子片段後，再用分子量7000的透析袋繼續透析，取透析出來的透析液冷凍乾燥，得到分子量1007000膠原分子片段；(2)脂肪族聚酯一膠原分子片段二元共聚物(Polyester-DCol)的製備本發明採用異丙醇(IPA)引發乙交酯(GA)、L-丙交酯(L-LA)或者s-己內酯(s-CL)開環聚合成一端帶有羥基的聚酯，實驗條件參照參考文獻[11,14和15]。按脂肪族聚酯異丙醇質量比為1:1100:1投料，先把異丙醇溶於甲苯中得到重量百分數濃度為5%的甲苯溶液，在無水無，條件下加入L-LA、GA或者s-CL單體，再加入佔單體摩爾數1%。的催化劑辛酸亞錫，甲苯的質量是反應物質量的23倍，反應溫度為120士2(TC，反應48±10h後，反應液旋轉蒸發除掉過量的甲苯，之後倒入102(TC的乙醚中，不斷攪拌，沉降，得到產物，得到的產物用乙醚再沉降三次，最後真空乾燥，得到純淨的一端帶有羥基的脂肪族聚酯；然後將聚酯的羥基用琥珀酸酐進行羧化，得到一端帶有羧基的聚酯，條件參照參考文獻[16,17]。首先將聚酯與琥珀酸酐按1:1.1的摩爾比投料，同時分別加入與聚酯等摩爾的吡啶和三乙胺，用1，4—二氧六環做溶劑，溶劑的量為聚酯質量的67倍，室溫反應24士5h，磁力攪拌，產物用乙醚沉降，抽乾，得到端基為羧基的脂肪族聚酯；子然後將端基為羧基的脂肪族聚酯的端羧基活化，活化的過程參照參考文獻[1S]，先將帶有端羧基的聚酯和N-羥基琥珀醯亞胺(NHS)溶解在二氯甲烷(DCM)中攪拌，冰浴中加入N,N，-二環己基碳二亞胺(DCC)進行活化，0。C攪拌lh後，室溫反應24h;反應過程中有沉澱1,3-二環己基脲DCU)析出，說明活化成功；反應結束後過濾除去DCU沉澱後，端羧基活化後的聚酯用乙醚沉降；將等摩爾量的端羧基活化後的聚酯和膠原分子片段在153(TC分別溶解在二甲基亞碸(DMSO)中，端羧基活化後的聚酯和膠原分子片段溶液濃度相等，均為0.010.04mmol/mL，溶解後，把端羧基活化後的聚酯溶液逐滴加入到膠原分子片段溶液中，3040。C油浴中反應312h接枝，反應結束後，用二甲基亞碸和水作為透析液對反應產物進行逐級透析，然後用蒸餾水透析48~72h後，凍幹得脂肪族聚酯一膠原分子片段二元共聚物。3)本發明的第三個目的是給出甲氧基聚乙二醇一脂肪族聚酯一膠原分子片段三元共聚物的製備方法，其步驟如下首先製備甲氧基聚乙二醇一脂肪族聚酯(mPEG-Polyester)共聚物，聚合物的合成遵循經典的脂肪族聚酯的合成方法，實驗過程按照參考文獻[12和19]的方法進行，首先是將mPEG加入到甲苯中，在14(TC的條件下共沸,除去mPEG中殘留的水分，使剩餘的甲苯的體積是溶液中溶質質量的23倍，之後降低溫度至120°C，加入L-LA、GA或者s-CL單體，再加入單體摩爾數1%。的辛酸亞錫作為催化劑，反應24h;反應的後處理如下將反應液旋轉蒸發除掉過量的甲苯，之後倒入102(TC乙醚中，不斷攪拌沉降，得到的產物用乙醚再沉降三次，最後真空乾燥，得到純淨的甲氧基聚乙二醇一脂肪族聚酯二元共聚物；然後將甲氧基聚乙二醇一脂肪族聚酯的端羥基用琥珀酸酐進行羧化條件參照參考文獻[16,17]。首先將甲氧基聚乙二醇一脂肪族聚酯與琥珀酸酐按h1.1的摩爾比投料，同時分別加入與甲氧基聚乙二醇一脂肪族聚酯等摩爾的吡啶和三乙胺，用1，4一二氧六環做溶劑，溶劑的量為甲氧基聚乙二醇一脂肪族聚酯質量的67倍，室溫反應24i5h，磁力攪拌，產物用乙醚沉降，抽乾，得到端基為羧基的甲氧基聚乙二醇一脂肪族聚酯；然後將端基為羧基的甲氧基聚乙二醇一脂肪族聚酯的端羧基活化，活化的過程參照參考文獻[18]，先將帶有端羧基的甲氧基聚乙二醇一脂肪族聚酯和N-羥基琥珀醯亞胺(NHS)溶解在二氯甲烷(DCM)中攪拌，冰浴中加入N,N'-二環己基碳二亞胺(DCC)進行活化，0。C攪拌lh後，室溫反應24h;反應過程中有沉澱1,3-二環己基脲(dicyclohexylurea,DCU)析出，說明活化成功；反應結束後過濾除去DCU沉澱後，端羧基活化後的甲氧基聚乙二醇一脂肪族聚酯用乙醚沉降；將等摩爾量的端羧基活化後的甲氧基聚乙二醇一脂肪族聚酯和膠原分子片段在1530。C分別溶解在二甲基亞碸(DMSO)中，端羧基活化後的甲氧基聚乙二醇一脂肪族聚酯和膠原分子片段溶液濃度相等，均為0.010.04mmol/mL，溶解後，把端羧基活化後的甲氧基聚乙二醇一脂肪族聚酯溶液逐滴加入到膠原分子片段溶液中，304(TC油浴中反應312h接枝，反應結束後，用二甲基亞碸和水作為透析液對反應產物進行逐級透析，然後用蒸餾水透析4872h後，凍幹得甲氧基聚乙二醇一脂肪族聚酯一膠原分子片段三元共聚物。本發明的第四目的是脂肪族聚酯一膠原分子片段二元共聚物的用途，將其用於製備組織工程支架。一種製法是用電紡絲製備支架將脂肪族聚酯一膠原分子片段二元共聚物溶解在氯仿和二甲基亞醯胺的體積比9:1的混合溶液裡面，溶液裡面加入質量為脂肪族聚酯一膠原分子片段二元共聚物質量兩倍的分子量為100k的聚乳酸，最終溶液濃度為10wt%;為了增加電紡射流表面的電荷密度，防止珠狀物的形成，相對於聚合物質量的35wt。/。的苄基三乙基溴化銨鹽加入到上述溶液中成均一的紡絲溶液，將得到的紡絲溶液在高壓電場下面進行紡絲，可得到電紡纖維氈。第二種製法是熱塑成型將脂肪族聚酯一膠原分子片段二元共聚物溶在二甲基亞碸(DMSO)中，溶液裡面加入質量為脂肪族聚酯一膠原分子片段二元共聚物質量兩倍的分子量為80000~200000的聚乳酸，混溶，溶解均勻後，用乙醚沉降，真空乾燥後用熱壓的方法成型。本發明的第五個目的是甲氧基聚乙二醇一脂肪族聚酯一膠原分子片段三元共聚物的用途，將其用於製備膠束作為藥物控制釋放載體。製法是在錐形瓶中，將甲氧基聚乙二醇一脂肪族聚酯一膠原分子片段三元共聚物溶解於DMSO中，濃度為l~10mg/ml。然後逐滴勻速加入和DMSO等體積的二次蒸餾水，可形成膠束。膠束形成後，用分子量7000的透析袋對膠束水溶液進行透析，除去DMSO，定容後可得到聚合物膠束的母液，-根據實驗需要對母液進行稀釋。本發明的有益效果本發明所進行的合成脂肪族聚酯一膠原分子片段二元共聚物，以及合成甲氧基聚乙二醇一脂肪族聚酯一膠原分子片段三元共聚物，脂肪族聚酯的分子量為500080000，膠原分子片段的分子量為1007500，甲氧基聚乙二醇單分支的分子量為750~5000。共聚物的分子結構根據膠原分子片段上面氨基的數量從線形到梳型過渡。和表面固定和共混膠原的脂肪族聚酯相比，分子鏈上的膠原分子片斷可以保證材料在生物體內不斷降解的過程中保持良好生物相容性；同時，具有梳型結構的共聚物中心鏈上有大量的羧基，使這種材料具備了pH敏感的特性，在藥物緩釋領域的應用具有優勢。圖1是聚乙丙交酯(IPA-PLGA)端羥基羧化活化產物核磁圖，a峰的出現說明IPA-PLGA端羥基己經被羧化，b峰的出現說明羧基被NHS活化。圖2是IPA-PLGA、DCol禾卩IPA-PLGA-DCol共聚物紅外譜圖，和IPA-PLGA譜圖相比，IPA-PLGA-DCol譜圖上1549cm"和1662cm"附近新增了兩個峰，3336cm"附近的峰有了明顯的遷移和增強。分別對應的是DCol中醯胺II帶CN伸縮、NH彎曲振動，醯胺I帶C-O伸縮振動，和NH伸縮與醯胺II第一倍頻共振吸收，說明DCol和IPA-PLGA成功進行了接枝共聚反應。(坐標用中文！)圖3是經過lh培養後Hela細胞在聚合物表面粘附及生長形態。圖3的(a)是IPA-PLGA;圖3的(b)是IPA-PLGA-DCol。'圖4是經過6h培養後Hela細胞在聚合物表面粘附及生長形態。圖4的(a)是IPA陽PLGA;圖4的(b)是IPA-PLGA-DCol。圖5是經過12h培養後Hela細胞在聚合物表面粘附及生長形態。圖5的(a)是IPA-PLGA;圖5的(b)是IPA-PLGA-DCol。圖6是經過24h培養後Hela細胞在聚合物表面粘附及生長形態。圖6的(a)是IPA-PLGA;圖6的(b)是IPA陽PLGA-DCol。圖7的(a)和(b)是IPA-PLGA-DCol的電紡絲掃描電鏡照片。具體實施方式實施例1用檸檬酸降解，可以選擇不同分子量範圍的透析袋透析來製備分子量為5007000的膠原分子片段。取lg膠原凍幹海綿溶解在裝有20mL1M檸檬酸水溶液的支管反應器中，油浴加熱使反應溫度升高到IO(TC，磁力攪拌，使膠原發生降解反應。24h後，降解液用分子量3500的透析袋進行透析，除掉分子量小於3500的膠原分子片斷和檸檬酸後，用分子量7000的透析袋繼續透析。取透析出來的透析液冷凍乾燥，得到分子量3500~7000的膠原分子片斷(DCol)。DCol的收率為10%。製備操作相同的條件下，用分子量3500和1000的透析袋，得到分子量1000~3500的膠原分子片段，收率為5%。用分子量500和1000的透析袋，得到分子量5001000的收率為5%。設定分子量為35007000的DCol的凝膠色譜測試結果見表1。表ltableseeoriginaldocumentpage12用異丙醇(IPA)引發丙交酯(LA)開環聚合成不同分子量的聚乳酸(PLA)，PLA分子量的大小與引發劑IPA的用量直接相關。首先，根據要合成PLA的分子量計算所需丙交酯和引發劑的比例，然後將重結晶過的丙交酯裝入200mL安瓶中，氬氣保護下加入引發劑，催化劑辛酸亞錫(SnOct)和蒸餾提純的甲苯，SnOct佔LA摩爾數的千分之一。實驗中使用的是SnOct甲苯溶液，濃度根據配備的時候SnOct和甲苯的用量進行計算。反應物與催化劑加好後，將安瓶放入12(TC油浴中並磁力攪拌，氬氣保護下反應48h。產物用乙醚沉降3次，抽真空乾燥。產物的分子量用核磁進行計算若要合成20gPLA,設計分子量分別為5000，10000，15000，那麼所需甲苯40mL，IPA、LA用量及產物分子量列於表2中。表2tableseeoriginaldocumentpage13實施例3用IPA引發LA和GA開環聚合成乙丙交酯共聚物(PLGA)，PLGA分子量的大小與引發劑異丙醇的用量直接相關。根據經驗，用作生物材料的PLGA，LA:GA的比例為8:2材料性能最佳，因此，選擇此比例進行以下的實驗操作。試驗裝置和操作步驟同實施例2相同。首先，根據要合成PLGA的分子量計算所需LA、GA和引發劑的比例，然後將重結晶過的LA和GA裝入200mL安瓶中，氬氣保護下加入引發劑，催化劑辛酸亞錫(SnOct)和蒸餾提純的甲苯，SnOct佔LA和GA總摩爾數的千分之一。安瓶放入12(TC油浴中並磁力攪拌，氬氣保護下反應48h。產物用乙醚沉降3次，抽真空乾燥。產物的分子量用核磁進行計算若要合成20gPLGA，設計分子量分別為5000，10000，15000，那麼實驗所需甲苯40mL、LA、GA的用量及產物分子量列於表3中。表3tableseeoriginaldocumentpage14實施例4用甲氧基聚乙二醇(mPEG)引發丙交酯開環聚合成不同分子量的mPEG-PLA兩嵌段共聚物，mPEG-PLA分子量的大小與引發劑的分子量和用量直接相關。首先，根據要合成PLA的分子量計算所需丙交酯(LA)和引發劑mPEG的比例，然後將mPEG裝入安瓶中，與甲苯共沸除水(140°C)5個小時後，將重結晶過的丙交酯裝入安瓶中，氬氣保護下加入催化劑SnOct，補加蒸餾提純的甲苯，SnOct佔LA摩爾數的千分之一。反應物與催化劑加好後，將反應溫度降低到12(TC並磁力攪拌，氬氣保護下反應48h。產物用乙醚沉降3次，抽真空乾燥。產物的分子量用核磁進行計算若要合成20gmPEG-PLA，mPEG的分子量為2000，設計分子量分別為5000，10000，20000，80000，那麼實驗所需甲苯40mL。mPEG、LA用量及產物分子量列於表4。表4tableseeoriginaldocumentpage14tableseeoriginaldocumentpage15用甲氧基聚乙二醇(mPEG)引發乙丙交酯開環聚合成不同分子量的mPEG-PLGA兩嵌段共聚物，mPEG-PLGA分子量的大小與mPEG的分子量和用量直接相關。首先，根據要合成PLGA的分子量計算所需LA和引發劑mPEG的比例，然後將mPEG裝入安瓶中，與甲苯共沸除水(140°C)5個小時後，將重結晶過的LA和GA裝入安瓶中，氬氣保護下加入催化劑SnOct，補加蒸餾提純的甲苯，SnOct佔LA和GA總摩爾數的千分之一。反應物與催化劑加好後，將反應溫度降低到12(TC並磁力攪拌，氬氣保護下反應48h。產物用乙醚沉降3次，抽真空乾燥。產物的分子量用核磁進行計算若要合成20gmPEG-PLGA,mPEG的分子量為分別為750，2000，5000，設計分子量分別為10000，那麼實驗所需甲苯40mL。mPEG、LA和GA用量及產物分子量列於表5。表5tableseeoriginaldocumentpage15實施例6實驗所涉及到的聚酯類材料的端羥基必須羧化後才能與DCol的氨基偶聯。首先通過核磁計算出脂肪族聚酯的分子量。選擇琥珀酸酐在接枝到聚酯的羥基端，步驟是首先將聚酯與琥珀酸酐按1:1.1的摩爾比投料，同時加入等摩爾的4，4-二甲氨基吡啶(DMAP)和三乙胺，用1，4一二氧六環做溶劑，溶劑的量大約脂肪族聚酯質量的7倍。實驗過程中保持無水無氧，室溫反應24小時後，產物用乙醇沉降三次，洗淨未反應的琥珀酸酐，真空乾燥3天，用核磁和紅外表徵接枝反應進行的情況。設計合成分子量為10k的幾種聚酯的羧化過程中所用聚酯、琥珀酸酐、DMAP和三乙胺的用量列於表6。表6tableseeoriginaldocumentpage16實施例7由於DCol分子鏈上不但有氨基，而且有羧基，如果直接加入偶聯劑對端羥基羧化的聚酯與DCol進行偶聯的話，在聚酯的端羧基與DCol接枝的同時，-DCol分子間也會發生反應，而使大量的氨基喪失，有可能導致接枝反應失敗。因此，在進行偶聯以前，必須先使聚酯的端羧基活化。活化的過程是先將聚合物和偶聯劑N-羥基琥珀醯亞胺(NHS)溶解在二氯甲烷(DCM)中攪拌，冰浴中加入N,N，-二環己基碳二亞胺(DCC)，0。C攪拌lh後，室溫反應24h;DCC和NHS等量加入，為聚酯摩爾量的5倍。反應過程中有沉澱1,3-二環己基脲(dicyclohexylurea，DCU)析出，說明接枝成功；反應結束後過濾除去DCU沉澱後，產物用乙醚沉降。設計合成分子量為10k的幾種聚酯的端羧基活化過程中所用聚酯、NHS、DCC和DCM的用量列於表7。表7tableseeoriginaldocumentpage17脂肪族聚酯的端羥基經過羧化活化後可以直接與DCol偶聯。首先，計算DCol上面氨基的平均數量，然後按照一個氨基和一個羧基發生縮聚反應，計算聚合物和DCol的摩爾比，在室溫分別溶解在DMSO中，溶解後，聚合物的溶液逐滴加入到DCol溶液中，40。C油裕中反應3h接枝。反應結束後，首先用DMSO透析24小時後，用DMSO和水的混合溶液作為透析液對反應產物進行逐級透析72小時，中間更換透析液，直至然後用蒸餾水透析48h後，凍幹得PLGA/D-Co1。設計合成分子量為10k的幾種聚酯和分子量分布為35007000的DCol縮聚過程中所用聚酯、DCol和DMSO的用量見表8。表8tableseeoriginaldocumentpage18實施例9將異丙醇引發聚合的聚酯系列接枝膠原分子片段後，用作組織工程支架材料。由於膠原分子片段的接枝使得材料在有機溶劑中的溶解性能變差，但是材料對細胞的相容性得到了顯著的提高。因此可以將此系列材料與高分子量的PLA或者PCL混溶後，重新沉降，獲得的材料用熱塑成型，來製備組織工程用材料。細胞在分子量為10k的IPA-PLGA和IPA-PLGA-DCol膜表面生長的結果見圖3，統計結果列於表9。表9tableseeoriginaldocumentpage18實施例10將0.5g分子量為10k的IPA-PLGA-DCol溶解在2mL二甲基甲醯胺(DMF)中，材料溶解完全後加氯仿(CHC13)18mL，得到IPA-PLGA-DCol的CHC13和DMF混合溶液。稱取0.25g分子量為100k的PLA，加入5mL上述的混合溶液溶解後，進行電紡絲。電紡過程中所涉及到的操作參數如下噴絲口的直徑為0.4mm，所施加的靜電場的強度為1.46kV/cm，噴絲口和收集屏之間的距離為24cm，溶液流速為2-2.5ml/h。最終在收集屏上得到了乾燥IPA-PLGA-DColPLA的電紡纖維氈。IPA-PLGA-DColPLA電紡絲的電鏡照片見附圖7。實施例11將mPEG引發聚合的系列材料(包括接和未接膠原分子片段的系列材料)製備成2.5mg/mL的DMSO溶液，然後緩慢逐滴滴加和DMSO等量的水，製備膠束溶液。透析除去DMSO，過程中觀察材料成膠束的情況。通過實驗觀察發現，材料成膠束的能力和mPEG的長度有直接的關係，膠原分子片段的接枝在一定程度上可以影響材料的成膠束能力，但是不是決定因素。不同材料能膠束能力的情況列於表11。表11tableseeoriginaldocumentpage19mPEG750-PLGA10k-DCol半透明實施例12將10mgmPEG5k-PLGA5k和10mgmPEG750-PLGA10k-DCol分別溶解在4mLDMS0中，攪拌使材料充分溶解。然後在磁力攪拌過程中逐滴緩慢加水至8mL，對水進行透析3天左後，去除DMSO。兩種材料均可成膠束mPEG750-PLGA10k-Dco1。膠束的螢光實驗結果確定當聚合物濃度增大到一定值的時候，芘的最大激發波長會由333nm增大到335.2nm，最大激發波長發生了2.2nm的紅移，說明mPEG750-PLGA10k-DCol可以形成膠束。mPEG5k-PLGA5k膠束的螢光實驗結果是芘的最大激發波長由333nm增大到335nm，最大激發波長發生了2nm的紅移，也可形成膠束。通過螢光實驗得到mPEG750-PLGA10k-DCo1和mPEG5k-PLGA5k膠束的臨界膠束濃度(CMC)，可知mPEG750-PLGA10k-DCo1在較低的濃度下就可以形成膠束。測試結果見表12。其中mPEG750-PLGA10k-DCo1膠束由於在D-Col分子上有大量的羧基存在，因此mPEG750-PLGA10k-DCo1膠束具備pH敏感性。表12tableseeoriginaldocumentpage20參考文獻[I].StenzelKH,MiyataT,RubinALCollagenasaBiomaterial.AnnualReviewsinBiophysicsandBioengineering1974;3(1):231-253.[2].NimniME,CheungD,StratesB,KodamaM,SheikhK.Chemicallymodifiedcollagen:anaturalbiomaterialfortissuereplacement.JBiomedMaterRes1987;21(6):741-771.[3]FriessW.Collagen—biomaterialfordrugdelivery.EuropeanJournalofPharmaceuticsandBiopharmaceutics1998;45(2):113-136.[4].OttaniV,RaspantiM,RuggeriA.Collagenstructureandfunctionalimplications.Micron2001;32(3):251-260.[5].WebbAR,YangJ,AmeerGA.Biodegradablepolyesterelastomersintissueengineering,ebt2004;4(6):謝-812.[6].MutterD,RodeheaverGT,DiemunschP,T旨inM,MoodyDL,RaffaeliM.Anewcompositemesh(collagen-polyester)forintra-abdominallaparoscopicherniarepair.SurgEndosc1998;12:595.[7].GoSau-Brissonni￡reOA,FabreD,Leflon-GuiboutV,DiCentaI,Nicolas-ChanoineMH,CoggiaM.Comparisonoftheresistancetoinfectionofrifampin-bondedgelatin-sealedandsilver/collagen-coatedpolyesterprostheses.JournalofVascularSurgery2002;35(6):1260-1263.[8].HsuS，KuoCC，YenHJ，WhuSW,TsaiCL.TheEffectofTwoDifferentBioreactorsontheNeocartilageFormationinTypeIICollagenModifiedPolyesterScaffoldsSeededWithChondrocytes.ArtificialOrgans2005;29(6):467-474.[9].ArmaniDK,LiuC.Microfabricationtechnologyforpolycaprolactone,abiodegradablepolymer.J.Micromech.Microeng2000;10:80-84.[10].KenworthyAK,SimonSA,McintoshTJ.Structureand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