一種灰樹花多糖軟膠囊及其製備方法

2023-08-02 12:02:56

專利名稱：：一種灰樹花多糖軟膠囊及其製備方法
技術領域：
：本發明涉及一種利用灰樹花發酵菌絲體或子實體提取的水溶性活性多糖一一灰樹花P-葡聚糖製成的軟膠囊劑及其製備方法。
背景技術：
：灰樹花多糖，是以灰樹花發酵菌絲體或子實體為原料，經熱水提取或冷鹼和熱鹼提取，再經超濾濃縮乙醇沉澱，離子交換層析純化，冷凍乾燥獲得的，同時也可採用現有的其他工藝製得。灰樹花多糖含蛋白或不含蛋白，其單糖組成為葡萄糖或含有其他單糖。其中灰樹花|3-葡聚糖為|3-1-3分支的p-l-6-葡聚糖，分子中葡萄糖通過P-1-6糖苷鍵和e-l-3糖苷鍵連接而成，^-l-6連接為主鏈，p-l-3連接為支鏈，含蛋白1-2%,分子量5-35萬道爾頓。具有良好的熱穩定，其水溶液在溫度20-125匸時，生物活性不喪失；溫度不超過8(TC時，對鹼穩定。上述的灰樹花P-葡聚糖是一種生物反應調節劑，具有抑制腫瘤、免疫調節、抗輻射和抗病毒的作用，可用於各種腫瘤和免疫缺陷症治療的輔助用藥。該類多糖為水溶性物質，不溶於有機溶劑和植物油。目前，灰樹花多糖多是被製成硬膠嚢或口服液，也有製成片劑的劑型。現有灰樹花提取物中多糖的含量普遍較低，約15-20%,其中e-葡聚糖的含量更低，水中溶解度約為1°/。左右，達不到生物活性發揮的基本含量。基於上述的原因，固體製劑或口服液均存在有效成分含量低、服用量大、吸收效果差、生物利用度低的問題。因此急需一種既能減少服用量並利於吞咽，又能保證多糖攝入量的灰樹花多糖製劑，來彌補上述固體製劑或口服液的不足。
發明內容針對現有技術存在的諸多不足之處，本發明提供了一種全新的利用灰樹花發酵菌絲體或子實體提取的水溶性活性多糖一一灰樹花P-葡聚糖製成的軟膠嚢劑及其製備方法。該方法中，除利用灰樹花發酵菌絲體或子實體本身所含有的多糖作為活性成分外，又單獨添加了高含量的灰樹花p-葡聚糖，以提高整體製劑的P-葡聚糖含量，並製成軟膠嚢劑型。採用這種製劑形式的灰樹花多糖，其含量高易於吸收，且生物利用度也得到提高，可用於抗腫瘤、抗輻射和其他免疫缺陷症的輔助治療，還可用於對機體血糖、血脂和血壓的調節和對放化療治療的增效減毒。本發明所述的灰樹花多糖軟膠嚢，其配比按重量份計為灰樹花固形物30-65份，其他添加劑35-70份。這樣即可以保證膠嚢內容物在膠嚢內的流動性，又可以保證有效成分灰樹花固形物的含量，提高該軟膠嚢製劑的藥效。其中，灰樹花固形物包括灰樹花多糖和灰樹花菌絲體或灰樹花子實體，其中不管採用那種混合方式時，最好保持均含有灰樹花多糖，這樣可以保證藥物的藥效處在較好的水平。在膠嚢內容物中，灰樹花多糖的含量應該是膠嚢內容物總重量的6%-20%。本發明涉及的灰樹花多糖軟膠嚢，其中灰樹花多糖為經過提取純化的灰樹花P-葡聚糖或a-構型的多糖，主要採用的多糖為灰樹花(3-葡聚糖。灰樹花菌絲體或子實體中也含有部分P-葡聚糖。此外還含有灰樹花糖肽和糖蛋白，其中的多肽或蛋白是以結合態與糖鏈連接，可以方便人體的更好吸收。膠嚢內容物中，當灰樹花多糖全部釆用灰樹花p-葡聚糖時，其含量也應該是膠嚢內容物總重量的6%-20%，灰樹花菌絲體為發酵菌絲體，該菌絲體和灰樹花子實體經過超微粉碎，粒度大於100目即可，優選採用300-500目，以利於固形物在吸附劑中的充分懸浮。上述的灰樹花多糖可採用現有方法製得，也可在市場上直接購4曰付。灰樹花多糖軟膠嚢中的其他添加劑用量為35-70份。該添加劑由吸附劑和附加劑構成；其中，吸附劑一般採用的是食用植物油，包括大豆色拉油、食用花生油等，也可以是食用紅花籽油、米槺油或橄欖油。可以是其中的任意一種也可是兩種或三種以上組成的混合油。為了達到最佳的吸附分散效果，可將大豆色拉油、食用花生油作為一類吸附劑(I)，食用紅花籽油作為一類單獨的吸附劑(II),米糠油和橄欖油作為一類吸附劑(III),採用上述三類吸附劑的混合來達到最佳，在混合時當採用吸附劑(I)和吸附劑(II)混合時，其重量比為1-3:1;當採用吸附劑(I)、吸附劑(II)和吸附劑(III)的混合物時，其重量比為4-7:2-4:1。附加劑為乳化劑或助懸劑或增強劑或其混合物。乳化劑包括聚甘油酯、蔗糖酯、單分子蒸餾甘油酯中的一種或數種，其用量範圍是按重量計為膠嚢內容物的0.5-5%;助懸劑可以由蜂蠟、氬化大豆油、大豆乳化油和短鏈亞油酸構成，可以由其中的任意一種或數種的組合物，也可以是其全部的混合物，其含量範圍是按重量計為膠嚢內容物的0.5-5%。這些助劑的加入可以使灰樹花多糖及其它固形物在膠嚢中更好的分散，使其得到更好的利用並提高藥效，同時不影響人體吸收，對人體無危害。增強劑主要由對灰樹花多糖的活性有增效作用的物質構成，如Vc或Ve或卵磷脂中的一種或數種的混合物，也可以釆用其它真菌多糖或動物來源的多糖，如曱殼素，同時也可以是吸附劑中的一種植物油，如紅花籽油。增強劑的含量範圍是按重量計為膠嚢內容物的0.5-5%。採用了這些增強劑後，可使灰樹花多糖的活性充分發揮，並進一步增強。灰樹花多糖膠嚢的藥效有較大的提高。在上述輔料溶劑體系中，吸附劑和附加劑的重量比例為100:1-20。當水溶性多糖和其他固形物被製成足夠小的顆粒時，可均勻的分散並懸浮於油劑系統中。因此只要提取物中多糖的含量足夠高，製成的軟膠嚢就含有高於其他劑型的有效成分。藥物液體製劑，尤其是高濃度液體製劑，比固體製劑具有更多的優點。由於灰樹花多糖本身的穩定性好，在採用了上述的溶劑體系及配比後可製成體積小、含量高的軟膠嚢製劑，不僅可減少服用量和次數，而且將其製成液體狀態有利於吸收，油劑的特性更有利於灰樹花多糖在體內的運轉和藥效發揮。選用適宜的植物油作溶劑，不但能夠提高系統的穩定性，還可進一步促進灰樹花P-葡聚糖的作用效果。另外，良好的溶劑體系能保持藥物極高的均一性，軟膠嚢製劑還具有罐裝精確的特點，可嚴格控制給藥劑量。製備上述灰樹花多糖軟膠嚢的方法，包括物料混合和膠嚢成型，其特徵在於所述的物料混合包括以下步驟(1)吸附劑的配置按配方比例選取所需的食用植物油其混合比例遵從上述的原則，攪拌混合均勻；(2)溶劑體系的配置過程將吸附劑加熱到60-90°C,按照配比順次加入乳化劑、助懸劑和增強劑，持續保溫；(3)固形物的加入在60-90。C保溫狀態下，按照原料配比將灰樹花固形物混合均勻，加入上述含有乳化劑、助懸劑和增強劑的吸附劑中，邊加邊攪拌，使固形物在液相中分散均勻，輔料添加完成後，繼續攪拌30min完成物料的混合。當採用的增強劑為固體時，可將其與灰樹花固形物一起加入，而不隨乳化劑、助懸劑一起加入吸附劑中。膠嚢成型可採用現有的成型技術，具體步驟如下1、混合好的物料，在60-9(TC的保溫狀態下通過膠體磨充分研磨，並用100目的篩網過濾，磨出的料液使其重新回到膠體磨中，反覆循環進行2-3次，直到物料能全部通過IOO目的篩網。2、膠嚢壓制條件，如膠嚢壓製機，膠體溫度60-65°C,進料口溫度45-55。C，模具溫度40-45。C，轉速5-10r/min，液體石蠟作潤滑劑，空氣RH為60Yo。3、定型清洗和乾燥，壓制好的軟膠嚢在轉籠中定型，溫度25-30。C，轉籠轉速5-10r/min，時間4h;定型完成的膠嚢浸入60-85%的乙醇溶液中3-10min，輕微攪拌後瀝去乙醇，此過程重複兩遍。清洗後送入熱風室，溫度25—30°C，轉籠轉速5-10r/min,空氣溼度45%，連續乾燥18-24h。採用這種加工方法後，首先使固形物含量，尤其是有效成分灰樹花e-葡聚糖的含量大大提高，在達到有效劑量的同時減少了服用量。對固形物進行超微粉碎，加之乳化劑、助懸劑的使用，使其在油性吸附劑中更容易均勻懸浮，裝量更加精確。另外，增強劑的使用對有效成分P-葡聚糖的活性發揮有一定的協同作用。而作為軟膠嚢劑型，則具有定量準確，利於吞服，崩解時間短和生物利用度高等優點。採用本發明所述配比和加工方法製得的灰樹花多糖軟膠嚢，由灰樹花多糖、灰樹花P-葡聚糖和灰樹花菌絲體粉製成，其有效成分較之現有的灰樹花多糖製劑有了極大的提高，其利於患者的服用和吸收，可用於抗腫瘤、抗輻射和免疫缺陷症的輔助治療，還可用於對機體血糖、血脂和血壓的調節和對放化療治療的增效減毒。具體實施例方式實施例1一種抗腫瘤和免疫調節的灰樹花多糖軟膠嚢，其所用成分按重量份計灰樹花多糖和高純度p-葡聚糖8，灰樹花菌絲粉32(超微粉碎，可過300目篩)，紅花籽油38.5，橄欖油11，米糠油5.5,聚甘油酯1,蜂蠟1.45，氫化大豆油2.05，維生素C0.5;所述的灰樹花多糖為灰樹花菌絲體或子實體提取的粗多糖，其與高純度P-葡聚糖的重量比為1:9。灰樹花多糖軟膠嚢的製備過程1、按處方比例量取紅花籽油、橄欖油和米糠油，攪拌混合均勻，作為吸附劑；2、將吸附劑加熱到60-90°C,依次加入聚甘油酯、氫化大豆油和蜂蠟，攪拌使充分融化；3、按處方比例將灰樹花固形物和維生素C等固體輔料混合均勻，加入吸附劑中，邊加邊攪拌，使分散均勻。所有輔料添加完成後，繼續攪拌30min;4、混合好的物料，在60-9(TC的保溫狀態下通過膠體磨充分研磨，並用100目的篩網過濾。磨出的料液使其重新回到膠體磨中，反覆循環進行2-3次，直到物料能全部通過100目的篩網；5、按照膠嚢壓制、定型清洗和乾燥工藝條件，對製成的軟膠嚢按照
發明內容項下的製備方法，逐步進行後續處理製得膠嚢成品。實施例2一種抗肺瘤和免疫調節的灰樹花多糖軟膠嚢，其所用成分按重量份計灰樹花P-葡聚糖15,灰樹花菌絲粉25(超微粉碎，可過100目篩)，紅花籽油38,大豆色拉油12，米糠油5,聚甘油酯1，蜂蠟1.45,氫化大豆油2.05,維生素CO.5。灰樹花多糖軟膠嚢的製備過程-.1、按處方比例量取紅花籽油、橄欖油和米糠油，攪拌混合均勻，作為吸附劑；2、將吸附劑加熱到60-90°C，依次加入聚甘油酯、氬化大豆油和蜂蠟，攪拌使充分融化；3、按處方比例將灰樹花固形物和維生素C等固體輔料混合均勻，加入吸附劑中，邊加邊攪拌，使分散均勻。所有輔料添加完成後，繼續攪拌30min;4、混合好的物料，在60-9(TC的保溫狀態下通過膠體磨充分研磨，並用100目的篩網過濾。磨出的料液使其重新回到膠體磨中，反覆循環進行2-3次，直到物料能全部通過IOO目的篩網；5、按照膠嚢壓制、定型清洗和乾燥工藝條件，對製成的軟膠嚢按照
發明內容項下的製備方法，逐步進行後續處理製得膠嚢成品。實施例3一種抗腫瘤和免疫調節的灰樹花多糖軟膠嚢，其所用成分按重量份計灰樹花(3-葡聚糖10,灰樹花子實體微粉25(超微粉碎，可過500目篩)，紅花籽油45,食用花生油IO,單甘酯1,蜂蠟1.45，氬化大豆油2.05，維生素CO.5。本實施例灰樹花多糖軟膠嚢的製備工藝，採用與實施例1所述相同的製備工藝。實驗例實驗例1採用實施例1製得的灰樹花多糖軟膠嚢的抗腫瘤作用試驗動物為昆明中小白鼠，試驗動物數均為每組14隻。劑量為60、120、240mg.kg—\d，連續口服5d，接種移植型胂瘤細胞懸液，再連續服用15天後測定，結果見表l。表l灰樹花多糖軟膠嚢的抗腫瘤作用胂瘤類型劑量(mg.kg)動物數(只)體重(g)瘤重(g)抑瘤率(%)P值前後前後模型組0201914.1529.511.75±0.43肉瘤S180240202014.2529.221.03±0.2641.14<0.01模型組0202015.1531.822.03±0.46肝癌HepA240202015.2531.561.14±0.4243.84<0.01模型組0101014.6019.182.52±0.57Lewis肺癌240101014.1019.161.34±0.3638.89<0.01模型組02018.03±3.13腹水瘤EAC2402024.30±4.3434.77*<0.01*該數值為生命延長率。通過表1可知，灰樹花多糖軟膠嚢對小鼠肉瘤S180、肝癌HepA實體型和Lewis肺癌實體型移植腫瘤均有較好的抑制作用，並對EAC腹水型小鼠生命有一定程度的延長作用。實驗例2採用實施例1製得的灰樹花多糖軟膠嚢的免疫調節作用試驗動物為昆明中小白鼠，試驗動物數均為每組14隻。劑量為60、120、240mg.kg-'.d,口服，連續10天後測定，結果見表2。表2灰樹花多糖軟膠囊的免疫調節作用試驗劑量對照組試驗組P值遲髮型變態反應(證)120mg.kg-'.d足趾腫脹度(mm)xiod碳粒廓清試驗120mg.kg:d吞噬指數(a)xiod臟器/體重比值g/100g120mg.kg—'.d胸腺/體重xiod0.28±0.100.35±0.08<0.050±0.75,8±0.8<0.050.27±0.040.33±0.05<0.01tableseeoriginaldocumentpage8結果顯示，灰樹花多糖軟膠嚢經口給予小鼠IO天，能提高小鼠的足趾腫脹度、抗體生成細胞數、碳粒廓清吞噬指數和單核-巨噬細胞吞噬功能。表明灰樹花多糖軟膠嚢具有增強細胞免疫和體液免疫功能的作用。實驗例3採用實施例1製得的灰樹花多糖軟膠嚢的抗輻射作用試驗動物為昆明中小白鼠，試驗動物數均為每組34隻。灰樹花多糖軟膠嚢劑量為60、120、240mg.kg-1,d,連續口服30d,各組均以8Gy，o-y射線照射一次，照射後d2、d7每組各取一半動物作白細胞計數，另一半觀察平均存活時間和30d存活率，結果見表3、表4。表3灰樹花多糖軟膠囊對小鼠白細胞總數的影響tableseeoriginaldocumentpage8表4灰樹花多糖軟膠囊對小鼠平均存活時間和30d存活率的影響tableseeoriginaldocumentpage8結果顯示，輻照後第2-7天，服用灰樹花多糖軟膠嚢的小鼠白細胞總數均高於對照組；服用240mg.kg—1,d灰樹花多糖軟膠嚢的小鼠，30天存活率與對照相比有明顯提高，且具有差異顯著性。以上結果表明，灰樹花多糖軟膠嚢能使輻照後小鼠的30天存活率明顯增高、平均存活率延長、白細胞總數明顯增加。說明灰樹花多糖軟膠嚢對較高劑量一次性照射有拮抗作用。權利要求1.一種灰樹花多糖軟膠囊，其特徵在於:其配比按重量份計為:灰樹花固形物30-65份，其他添加劑35-70份。2.根據權利要求1所述的灰樹花多糖軟膠嚢，其特徵在於所述的其他添加劑為吸附劑和附加劑，吸附劑和附加劑的重量比為100:1-20。3.根據權利要求1所述的灰樹花多糖軟膠嚢，其特徵在於所述的灰樹花固形物為灰樹花多糖或灰樹花菌絲體或灰樹花子實體或其混合物。4.根據權利要求3所述的灰樹花多糖軟膠嚢，其特徵在於所述灰樹花多糖的含量為膠嚢內容物總含量的6-20%(w/W)。5.根據權利要求3或4所述的灰樹花多糖軟膠囊，其特徵在於所述的灰樹花多糖為灰樹花P-葡聚糖。6.根據權利要求2所述的灰樹花多糖軟膠嚢，其特徵在於所述的吸附劑為食用#_物油。7.根據權利要求2所述的灰樹花多糖軟膠嚢，其特徵在於所述的附加劑為乳化劑或助懸劑或增強劑或其混合物。8.根據權利要求3所述的灰樹花多糖軟膠嚢，其特徵在於固形物中灰樹花菌絲體或灰樹花子實體為經過超微粉碎後的超微粉末，其粒度範圍大於1003。9.製備如權利要求1所述灰樹花多糖軟膠嚢的方法，包括物料混合和膠嚢成型，其特徵在於所述的物料混合包括以下步驟(1)吸附劑的配置將食用植物油按照比例攪拌混合均勻；(2)溶劑體系的配置將吸附劑加熱到60-90°C,按照配比順次加入乳化劑、助懸劑和增強劑，持續保溫；(3)固形物的加入在60-90。C保溫狀態下，按照原料配比將灰樹花固形物混合均勻，加入上述含有乳化劑、助懸劑和增強劑的吸附劑中，邊加邊攪拌，使固形物在液相中分散均勻，輔料添加完成後，繼續攪拌30min完成物料的混合。全文摘要本發明涉及一種利用灰樹花發酵菌絲體或子實體提取的水溶性活性多糖製成的軟膠囊劑及其製備方法。本發明的製劑的溶劑體系可將水溶性多糖，如灰樹花β-葡聚糖，製成高濃度的混懸液封裝成軟膠囊，以減少服用量並利於吞咽。同時該溶劑體系對灰樹花β-葡聚糖等多糖物質的活性發揮有很強的促進作用。文檔編號A61P31/12GK101375839SQ200810138680公開日2009年3月4日申請日期2008年7月31日優先權日2008年7月31日發明者豔丁,靖張,徐澤平,戴榮華,楊傳倫,王寶琴,振門申請人:山東京博控股發展有限公司