納米香菇多糖及其注射劑的製備方法

2023-08-03 17:32:06 3

專利名稱：納米香菇多糖及其注射劑的製備方法
技術領域：
本發明涉及一種納米香菇多糖及其注射劑的製備方法，特別是涉及一種治療癌症、病毒性肝炎的納米香菇多糖及其注射劑的製備方法，屬於醫藥領域。
背景技術：
目前市售的香菇多糖注射液是由香菇子實體提取的香菇多糖水針劑，收載於衛生部新藥轉正標準(第八冊)，香菇多糖是國際上公認的療效較好的生物反應調節劑，該劑是繼手術、放療和化療三大治療手段之後的第四種治療腫瘤的辦法，它通過增強機體的抗腫瘤免疫防禦反應或改變機體對腫瘤細胞的生物學效應而產生機體或細胞介導的抗腫瘤效果，發揮間接的抗腫瘤作用。臨床主要用於胃癌、肺癌、腸癌及癌性胸腹水等惡性腫瘤的治療，另外對提高肝炎及愛滋病人的免疫功能均有較好的作用。但香菇多糖提取工藝十分複雜，日本味之素、森下製藥株式會社提取香菇多糖的工藝流程共有24步，而且過程中需用十六烷基三甲基銨、氯仿、丁醇、甲醇、丙醇等有機溶劑，國內廠家也基本上仿效日本，工藝流程複雜，消耗溶劑較多，提取工藝不科學，多糖得率低，故成本大而影響了廣泛應用，產品質量控制難度大，雜蛋白含量高而影響純化。例如中國專利CN 1153179A介紹了一種「香菇多糖新的分離純化方法」，該方法為將香菇熱水提取濃縮，乙醇沉澱，沉澱物溶介後透析，乙醇沉澱所得粗品DEAE-纖維素吸附，不同濃度鹼液洗脫，糖反應陽性的洗脫液合併酸中和，超過濾，未透過部分濃縮，凍幹得香菇多糖。由於過程中使用了乙醚作為洗滌劑，無法保證有機溶劑無殘留，增加了該藥的毒性，而且乙醚易燃燒，對生產車間的防爆要求極高；該法所得香菇多糖收率低，成本高。另一篇中國專利CN 1160538A介紹了「香菇多糖注射液及其製備方法」，將香菇多糖溶於NaOH溶液中，再用檸檬酸調節pH值，說明此香菇多糖原料溶解性差，且鹼液中增加了氧化多糖的可能性；採用了高溫消毒(120℃)，易導致多糖分解。鑑於現有的香菇多糖製劑存在上述缺點，開發一種提取工藝更先進科學，收率高、含量高、純度高的香菇多糖及新型注射劑型是必要的。

發明內容
本發明的第一個目的在於提供一種提取水溶性好，收率和純度高的納米香菇多糖的製備方法；本發明的另一目的在於提供一種納米香菇多糖注射劑的製備方法。
本發明目的是通過下述技術方案實現的。
納米香菇多糖是由如下步驟製備而成A.將香菇子實體置於提取罐中，加水並導入微波萃取，使其以20～80億次/秒的速度作極性變化運動，其微波萃取的溫度為50～70℃，時間5～10小時；將萃取液在40～60℃溫度下減壓濃縮8～16小時；將減壓濃縮液置於噴霧乾燥塔中，用超音速射流技術，在40～60℃溫度、0.05～1.0Mpa壓力下，以超音速瞬間射流乾燥，速度為500～1000米/秒，得納米香菇；B.取納米香菇，採用20～40倍的水回流2～4小時，在2000～4000轉/分的轉速下離心10～30分鐘，取上清液，加熱濃縮至稀糖漿狀為止；冷卻後，加入2～5倍體積在4℃下預冷的95％乙醇，邊加邊攪拌至混合均勻，冷藏24小時，離心除去乙醇，收集沉澱，減壓乾燥，得納米香菇多糖粗品；C.將納米香菇多糖粗品溶於35℃恆溫的蒸餾水中，趁熱過濾，邊攪拌邊加入蛋白酶，保溫2～4小時後升溫至80℃，維持10分鐘，過濾；濾液用2M NaOH溶液調pH7.4，加熱至沸，加入活性炭，保溫15分鐘，過濾；濾液調pH7，過陰離子柱，收集流出液；調pH至中性，過陽離子柱，收集流出液；最後過凝膠柱，收集流出液；向流出液中加入95％乙醇，使混合液含醇量達70％，靜置12-24小時，過濾，洗滌，低溫乾燥，得納米香菇多糖。
取上述本發明納米香菇多糖，加入常規輔料，按藥劑學常規工藝和步驟，可製備成注射製劑；所述注射製劑可以是注射液、大輸液、凍乾粉針、注射用片劑、混懸型注射劑等。
納米香菇多糖注射液的製備本發明所述的納米香菇多糖注射液的製備方法是先按上述納米香菇多糖的製備方法製備納米香菇多糖，即用香菇子實體以微波萃取、超音速射流技術製備納米香菇，納米香菇經提取精製得納米香菇多糖，然後取納米香菇多糖用適量注射用水溶解，並調節PH值至6～8，濾過，分裝，滅菌，即得。納米香菇多糖凍乾粉針劑的製備本發明所述的納米香菇多糖凍乾粉針劑的製備方法是先按上述納米香菇多糖的製備方法製備納米香菇多糖，即用香菇子實體以微波萃取、超音速射流技術製備納米香菇，納米香菇經提取精製得納米香菇多糖，然後取納米香菇多糖用適量注射用水溶解，加賦形劑製得有效成分混合液，再將有效成分混合液經冷凍乾燥製成凍乾粉針劑型。
其中所述凍乾粉針劑所用有效成分的製作工藝具體如下取納米香菇多糖用適量注射用水溶解，按每毫升加入賦形劑如甘露醇、乳糖、水解明膠或它們的混合物等0.05～0.5克，優選甘露醇，攪拌，溶解，濾過，並加注射用水適量，再調節PH值至6-8，即得該凍乾粉針劑凍幹所用的有效成分混合液。
其中所述凍乾粉針劑冷凍乾燥工藝具體如下將上述香菇多糖凍乾粉針劑凍幹所用的有效成分混合液按每瓶2ml的規格分裝後，未封口放入與凍幹箱尺寸相應的金屬盤內，對凍幹箱進行滅菌處理，並將其擱板的溫度降低至-25℃～-50℃，迅速將裝有製劑的金屬盤放入凍幹箱內，維持1～6小時，然後對凍幹箱進行真空處理，使箱內的真空度為0.2～0.5Pa，再將擱板升溫，並嚴格控制在共熔點-2℃以下，保持10～24小時，最後升溫至30℃～40℃，並保持一定時間，使製劑溫度與擱板溫度重合，放入無菌的過濾氣體，控制製劑的含水量在1～5％，迅速封口即可。
冷凍乾燥過程中可選擇的最佳物理條件是首先將擱板降溫至-30℃，維持3小時，然後使凍幹箱內的真空度為0.2Pa，將擱板升溫並嚴格控制在共熔點-2℃以下，保持18小時，將擱板升溫至40℃放入無菌氣體後，控制製劑的含水量為2％。
本發明所述的香菇多糖注射液或凍乾粉針劑每支裝1ml至2ml，含香菇多糖1mg至4mg；每支香菇多糖注射液或凍乾粉針劑含香菇多糖按無水葡萄糖計，不少於1mg。
本發明簡化了工藝流程，降低生產成本，採用納米技術使傳統香菇多糖製劑在生產、治療、創新使用上發生了革命性的變化，納米香菇多糖具有良好的溶解性，多糖收率提高，純度提高；大力投入，將節省大量的香菇資源，緩解香菇子實體生長周期長、受環境條件的影響與限制，產量低，從而導致香菇多糖的成本高、價格昂貴等問題。
以下實驗例用於進一步說明但不限於本發明實驗例1香菇多糖的工藝條件篩選研究文獻報導香菇多糖注射液中香菇多糖的提取是將香菇以蒸餾水浸出，浸出液脫蛋白，經離子交換樹脂交換，多次乙醇沉澱，精製。這種提取工藝的不足之處是水浸出，有效成分提取不完全，離子交換樹脂交換難以純化多糖，成分過於複雜，易引入致過敏物質等。為此，本實驗對香菇多糖最佳提取工藝條件進行了比較研究，現總結如下本發明提取工藝樣品的製備(1)將香菇子實體3.5kg加工成2mm左右厚的飲片，置於提取罐中，加水並導入微波萃取，使其以50億次/秒的速度作極性變化運動，其微波萃取的溫度為40℃，時間5小時；將萃取液在40℃溫度下減壓濃縮16小時；將減壓濃縮液置於噴霧乾燥塔中，用超音速射流技術，在40℃溫度、0.05Mpa壓力下，以超音速瞬間射流乾燥，速度為1000米/秒，得納米香菇；(2)取納米香菇，採用30倍的水回流3小時，在4000轉/分的轉速下離心10分鐘，取上清液，加熱濃縮至稀糖漿狀為止；冷卻後，慢慢加入2倍體積預冷(4℃)的95％乙醇，邊加邊攪拌至混合均勻，在冰箱中醇析24小時，離心除去乙醇，收集沉澱，減壓乾燥，得納米香菇多糖粗品；(3)將納米香菇多糖粗品溶於35℃恆溫的蒸餾水中，趁熱過濾，邊攪邊加入蛋白酶，保溫4小時後升溫至80℃，維持10分鐘，過濾；濾液用2MNaOH溶液調pH7.0，加熱至沸，加入活性炭，保溫15分鐘，過濾；濾液調pH7，過陰離子柱，收集流出液；調pH至中性，過陽離子柱，收集流出液；最後過凝膠柱，收集流出液；向流出液中加入95％乙醇，使混合物含醇量達70％，靜置數小時，過濾，充分洗滌，低溫乾燥，得納米香菇多糖；原提取工藝樣品的製備將香菇子實體用熱水提取，提取液減壓濃縮至小體積，攪拌下緩緩加入乙醇，使其產生沉澱，沉澱經水溶解，將其置於透析袋中透析，透析液濃縮，乙醇沉澱，沉澱再經乙醇洗滌後，真空乾燥得粗製品；所得粗香菇多糖溶於水中，經DEAE-纖維素吸附後，用水洗滌，用稀鹼溶液洗脫，洗脫液分部收集，取糖反應陽性部分，用鹽酸中和，置於超濾器上過濾，取未透過液濃縮，冷凍乾燥即得香菇多糖。
每處理重複3次，實驗結果(見表1)表明含單糖以無水葡萄糖計算，本發明提取工藝所得單糖的量均明顯低於原提取工藝所得單糖的量，說明本工藝含單糖量低，多糖純度高。
表1 提取工藝對單糖(以無水葡萄糖計算)及收率的影響

實驗例2納米香菇多糖水溶性的比較取納米香菇多糖和香菇多糖各50mg，加入1ml注射用水，振搖，結果顯示納米香菇多糖立刻溶解(＜5秒鐘)，溶液澄清透明，而香菇多糖經振搖超過15秒後溶液才澄清透明。
實驗例3香菇多糖凍乾粉針劑的賦形劑選擇向按技術方案所述提取工藝製得的每毫升有效成分提取液中加入不同種類的賦形劑，經冷凍乾燥製成凍乾粉針劑的外觀結果，見表2。
表2 不同賦形劑的影響(g/ml)

每處理重複3次，表2結果表明選用甘露醇為最佳賦形劑。
下述實施例均能達到上述實驗例的效果。
實施例1納米香菇多糖的製備A.取35kg香菇子實體置於提取罐中，加水並導入微波萃取，使其以20億次/秒的速度作極性變化運動，其微波萃取的溫度為60℃，時間3小時；將萃取液在60℃溫度下減壓濃縮8小時；將減壓濃縮液置於噴霧乾燥塔中，用超音速射流技術，在60℃溫度、0.05Mpa壓力下，以超音速瞬間射流乾燥，速度為500米/秒，得納米香菇；B.取納米香菇，採用20倍的水小火煎煮4小時，在3000轉/分的轉速下離心20分鐘，取上清液，加熱濃縮，至濃縮物為稀糖漿狀為止；冷卻後，慢慢加入5倍體積預冷(4℃)的95％乙醇，邊加邊攪拌至混合均勻，在冰箱中醇析24小時，離心除去乙醇，收集沉澱，減壓乾燥，得納米香菇多糖粗品；C.將納米香菇多糖粗品溶於35℃恆溫的蒸餾水中，趁熱過濾，邊攪邊加入蛋白酶，保溫2小時後升溫至80℃，維持10分鐘，過濾；濾液用2M NaOH溶液調pH7.0，加熱至沸，加入活性炭，保溫15分鐘，過濾；濾液調pH7，過陰離子柱，收集流出液；調pH至中性，過陽離子柱，收集流出液；最後過凝膠柱，收集流出液；向流出液中加入95％乙醇，使混合物含醇量達70％，靜置12小時，過濾，充分洗滌，低溫乾燥，得納米香菇多糖24.8克。
實施例2納米香菇多糖的製備A.取香菇子實體45kg置於提取罐中，加水並導入微波萃取，使其以30億次/秒的速度作極性變化運動，其微波萃取的溫度為40℃，時間5小時；將萃取液在40℃溫度下減壓濃縮16小時；將減壓濃縮液置於噴霧乾燥塔中，用超音速射流技術，在40℃溫度、0.05Mpa壓力下，以超音速瞬間射流乾燥，速度為1000米/秒，得納米香菇；B.取納米香菇，採用30倍的水小火煎煮3小時，在4000轉/分的轉速下離心10分鐘，取上清液，加熱濃縮，至濃縮物為稀糖漿狀為止；冷卻後，慢慢加入3倍體積預冷(4℃)的95％乙醇，邊加邊攪拌至混合均勻，在冰箱中醇析24小時，離心除去乙醇，收集沉澱，減壓乾燥，得納米香菇多糖粗品；C.將納米香菇多糖粗品溶於35℃恆溫的蒸餾水中，趁熱過濾，邊攪邊加入蛋白酶，保溫4小時後升溫至80℃，維持10分鐘，過濾；濾液用2M NaOH溶液調pH7.0，加熱至沸，加入活性炭，保溫15分鐘，過濾；濾液調pH7，過陰離子柱，收集流出液；調pH至中性，過陽離子柱，收集流出液；最後過凝膠柱，收集流出液；向流出液中加入95％乙醇，使混合物含醇量達70％，靜置16小時，過濾，充分洗滌，低溫乾燥，得納米香菇多糖28.9克。
實施例3納米香菇多糖注射液的製備香菇子實體35kg注射用水適量製成 10000ml製備方法A.將35kg香菇子實體置於提取罐中，加水並導入微波萃取，使其以30億次/秒的速度作極性變化運動，其微波萃取的溫度為60℃，時間5小時；將萃取液在60℃溫度下減壓濃縮8小時；將減壓濃縮液置於噴霧乾燥塔中，用超音射流技術，在60℃溫度、0.05Mpa壓力下，以超音速瞬間射流乾燥，速度為500米/秒，得納米香菇；B.取納米香菇，採用20倍的水小火煎煮4小時，在3000轉/分的轉速下離心20分鐘，取上清液，加熱濃縮，至濃縮物為稀糖漿狀為止；冷卻後，慢慢加入2倍體積4℃下預冷的95％乙醇，邊加邊攪拌至混合均勻，在冰箱中醇析24小時，離心除去乙醇，收集沉澱，減壓乾燥，得納米香菇多糖粗品；C.將納米香菇多糖粗品溶於35℃恆溫的蒸餾水中，趁熱過濾，邊攪邊加入蛋白酶，保溫2小時後升溫至80℃，維持10分鐘，過濾；濾液用2M NaOH溶液調pH7.0，加熱至沸，加入活性炭，保溫15分鐘，過濾；濾液調pH7，過陰離子柱，收集流出液；調pH至中性，過陽離子柱，收集流出液；最後過凝膠柱，收集流出液；向流出液中加入95％乙醇，使混合物含醇量達70％，靜置12小時，過濾，充分洗滌，低溫乾燥，得納米香菇多糖23.6克；D.取納米香菇多糖22.1克，用適量注射用水溶解，然後加水至10000ml，再調節PH值至6.5，濾過，濾過，分裝(2ml/支)，滅菌，即得納米香菇多糖注射液。
實施例4納米香菇多糖注射液的製備香菇子實體36kg注射用水適量製成 10000ml
製備方法A.將香菇子實體置於提取罐中，加水並導入微波萃取，使其以80億次/秒的速度作極性變化運動，其微波萃取的溫度為40℃，時間10小時；將萃取液在40℃溫度下減壓濃縮16小時；將減壓濃縮液置於噴霧乾燥塔中，用超音速射流技術，在40℃溫度、0.05Mpa壓力下，以超音速瞬間射流乾燥，速度為1000米/秒，得納米香菇；B.取納米香菇，採用30倍的水小火煎煮3小時，在4000轉/分的轉速下離心10分鐘，取上清液，加熱濃縮，至濃縮物為稀糖漿狀為止；冷卻後，慢慢加入4倍體積4℃下預冷的95％乙醇，邊加邊攪拌至混合均勻，在冰箱中醇析24小時，離心除去乙醇，收集沉澱，減壓乾燥，得納米香菇多糖粗品；C.將納米香菇多糖粗品溶於35℃恆溫的蒸餾水中，趁熱過濾，邊攪邊加入蛋白酶，保溫4小時後升溫至80℃，維持10分鐘，過濾；濾液用2M NaOH溶液調pH7.0，加熱至沸，加入活性炭，保溫15分鐘，過濾；濾液調pH7，過陰離子柱，收集流出液；調pH至中性，過陽離子柱，收集流出液；最後過凝膠柱，收集流出液；向流出液中加入95％乙醇，使混合物含醇量達70％，靜置16小時，過濾，充分洗滌，低溫乾燥，得納米香菇多糖22.4克；D.取納米香菇多糖22.4克，用適量注射用水溶解，然後加水至10000ml，再調節PH值至6.8，濾過，濾過，分裝(2ml/支)，滅菌，即得納米香菇多糖注射液。
實施例5納米香菇多糖粉針劑的製備香菇子實體35kg甘露醇1kg注射用水適量製成 10000ml製備方法A.將35kg香菇子實體置於提取罐中，加水並導入微波萃取，使其以30億次/秒的速度作極性變化運動，其微波萃取的溫度為60℃，時間5小時；將萃取液在60℃溫度下減壓濃縮8小時；將減壓濃縮液置於噴霧乾燥塔中，用超音射流技術，在60℃溫度、0.05Mpa壓力下，以超音速瞬間射流乾燥，速度為500米/秒，得納米香菇；
B.取納米香菇，採用20倍的水小火煎煮4小時，在3000轉/分的轉速下離心20分鐘，取上清液，加熱濃縮，至濃縮物為稀糖漿狀為止；冷卻後，慢慢加入5倍體積4℃下預冷的95％乙醇，邊加邊攪拌至混合均勻，在冰箱中醇析24小時，離心除去乙醇，收集沉澱，減壓乾燥，得納米香菇多糖粗品；C.將納米香菇多糖粗品溶於35℃恆溫的蒸餾水中，趁熱過濾，邊攪邊加入蛋白酶，保溫2小時後升溫至80℃，維持10分鐘，過濾；濾液用2M NaOH溶液調pH7.0，加熱至沸，加入活性炭，保溫15分鐘，過濾；濾液調pH7，過陰離子柱，收集流出液；調pH至中性，過陽離子柱，收集流出液；最後過凝膠柱，收集流出液；向流出液中加入95％乙醇，使混合物含醇量達70％，靜置12小時，過濾，充分洗滌，低溫乾燥，得納米香菇多糖23.6克；D.取納米香菇多糖22.1克，用適量注射用水溶解，然後加入甘露醇1kg，攪拌，溶解，濾過，加水至10000ml，再調節PH值至6.5，濾過，即得該凍乾粉針劑凍幹所用的有效成分混合液；將有效成分混合液按每瓶2ml分裝後，未封口放入與凍幹箱尺寸相應的金屬盤內，對凍幹箱進行滅菌處理，並將其擱板的溫度降低至-30℃，迅速將裝有製劑的金屬盤放入凍幹箱內，維持2小時，然後對凍幹箱進行真空處理，使箱內的真空度為0.2Pa，再將擱板升溫，並嚴格控制在共熔點-2℃以下，保持12小時，最後升溫至40℃，並保持一定時間，使製劑溫度與擱板溫度重合，放入無菌的過濾氣體，控制製劑的含水量在2％，迅速封口即可。
實施例6納米香菇多糖粉針劑的製備香菇子實體35kg甘露醇0.5kg葡萄糖0.5kg注射用水適量製成 10000ml製備方法A.將香菇子實體置於提取罐中，加水並導入微波萃取，使其以60億次/秒的速度作極性變化運動，其微波萃取的溫度為40℃，時間5小時；將萃取液在40℃溫度下減壓濃縮16小時；將減壓濃縮液置於噴霧乾燥塔中，用超音速射流技術，在40℃溫度、0.05Mpa壓力下，以超音速瞬間射流乾燥，速度為1000米/秒，得納米香菇；B.取納米香菇，採用30倍的水小火煎煮3小時，在4000轉/分的轉速下離心10分鐘，取上清液，加熱濃縮，至濃縮物為稀糖漿狀為止；冷卻後，慢慢加入3倍體積預冷(4℃)的95％乙醇，邊加邊攪拌至混合均勻，在冰箱中醇析24小時，離心除去乙醇，收集沉澱，減壓乾燥，得納米香菇多糖粗品；C.將納米香菇多糖粗品溶於35℃恆溫的蒸餾水中，趁熱過濾，邊攪邊加入蛋白酶，保溫4小時後升溫至80℃，維持10分鐘，過濾；濾液用2M NaOH溶液調pH7.0，加熱至沸，加入活性炭，保溫15分鐘，過濾；濾液調pH7，過陰離子柱，收集流出液；調pH至中性，過陽離子柱，收集流出液；最後過凝膠柱，收集流出液；向流出液中加入95％乙醇，使混合物含醇量達70％，靜置16小時，過濾，充分洗滌，低溫乾燥，得納米香菇多糖22.4克；D.取納米香菇多糖22.4克，用適量注射用水溶解，然後加入甘露醇0.5kg、水解明膠0.5kg，攪拌，溶解，濾過，加水至10000ml，再調節PH值至7.0，濾過，即得該凍乾粉針劑凍幹所用有效成分的混合液；將有效成分混合液按每瓶2ml分裝後，未封口放入與凍幹箱尺寸相應的金屬盤內，對凍幹箱進行滅菌處理，並將其擱板的溫度降低至-35℃，迅速將裝有製劑的金屬盤放入凍幹箱內，維持4小時，然後對凍幹箱進行真空處理，使箱內的真空度為0.2Pa，再將擱板升溫，並嚴格控制在共熔點-2℃以下，保持14小時，最後升溫至35℃，並保持一定時間，使製劑溫度與擱板溫度重合，放入無菌的過濾氣體，控制製劑的含水量在2％，迅速封口即可。
實施例7納米香菇多糖粉針劑的製備香菇子實體34kg蔗糖 0.5kg注射用水適量製成 10000ml製備方法A.將香菇子實體置於提取罐中，加水並導入微波萃取，使其以25億次/秒的速度作極性變化運動，其微波萃取的溫度為30℃，時間10小時；將萃取液在30℃溫度下減壓濃縮48小時；將減壓濃縮液置於噴霧乾燥塔中，用超音射流技術，在30℃溫度、0Mpa壓力下，以超音速瞬間射流乾燥，速度為300米/秒，得納米香菇；B.取納米香菇，採用40倍的水小火煎煮2小時，在2000轉/分的轉速下離心30分鐘，取上清液，加熱濃縮，至濃縮物為稀糖漿狀為止；冷卻後，慢慢加入2倍體積預冷(4℃)的95％乙醇，邊加邊攪拌至混合均勻，在冰箱中醇析24小時，離心除去乙醇，收集沉澱，減壓乾燥，得納米香菇多糖粗品；C.將納米香菇多糖粗品溶於35℃恆溫的蒸餾水中，趁熱過濾，邊攪邊加入蛋白酶，保溫3小時後升溫至80℃，維持10分鐘，過濾；濾液用2M NaOH溶液調pH7.0，加熱至沸，加入活性炭，保溫15分鐘，過濾；濾液調pH7，過陰離子柱，收集流出液；調pH至中性，過陽離子柱，收集流出液；最後過凝膠柱，收集流出液；向流出液中加入95％乙醇，使混合物含醇量達70％，靜置18小時，過濾，充分洗滌，低溫乾燥，得納米香菇多糖；D.取納米香菇多糖用適量注射用水溶解，然後加入水解明膠0.5kg，攪拌，溶解，濾過，加水至10000ml，再調節PH值至7.5，濾過，即得該凍乾粉針劑凍幹所用的有效成分提取液；將有效成分提取液按每瓶2ml分裝後，未封口放入與凍幹箱尺寸相應的金屬盤內，對凍幹箱進行滅菌處理，並將其擱板的溫度降低至-35℃，迅速將裝有製劑的金屬盤放入凍幹箱內，維持4小時，然後對凍幹箱進行真空處理，使箱內的真空度為0.2Pa，再將擱板升溫，並嚴格控制在共熔點-2℃以下，保持14小時，最後升溫至35℃，並保持一定時間，使製劑溫度與擱板溫度重合，放入無菌的過濾氣體，控制製劑的含水量在2％，迅速封口即可。
實施例8納米香菇多糖粉針劑的製備香菇子實體40kg葡萄糖1.0kg注射用水適量製成 10000ml製備方法A.將香菇子實體置於提取罐中，加水並導入微波萃取，使其以55億次/秒的速度作極性變化運動，其微波萃取的溫度為50℃，時間1小時；將萃取液在50℃溫度下減壓濃縮3小時；將減壓濃縮液置於噴霧乾燥塔中，用超音射流技術，在50℃溫度、0Mpa壓力下，以超音速瞬間射流乾燥，速度為800米/秒，得納米香菇；B.取納米香菇，採用25倍的水小火煎煮2小時，在2500轉/分的轉速下離心30分鐘，取上清液，加熱濃縮，至濃縮物為稀糖漿狀為止；冷卻後，慢慢加入4倍體積預冷(4℃)的95％乙醇，邊加邊攪拌至混合均勻，在冰箱中醇析24小時，離心除去乙醇，收集沉澱，減壓乾燥，得納米香菇多糖粗品；C.將納米香菇多糖粗品溶於35℃恆溫的蒸餾水中，趁熱過濾，邊攪邊加入蛋白酶，保溫3小時後升溫至80℃，維持10分鐘，過濾；濾液用2M NaOH溶液調pH7.0，加熱至沸，加入活性炭，保溫15分鐘，過濾；濾液調pH7，過陰離子柱，收集流出液；調pH至中性，過陽離子柱，收集流出液；最後過凝膠柱，收集流出液；向流出液中加入95％乙醇，使混合物含醇量達70％，靜置24小時，過濾，充分洗滌，低溫乾燥，得納米香菇多糖29.4克；D.取納米香菇多糖22.4克，用適量注射用水溶解，然後加入葡萄糖1.0kg，攪拌，溶解，濾過，加水至10000ml，再調節PH值至8.0，濾過，即得該凍乾粉針劑凍幹所用的有效成分混合液；將有效成分混合液按每瓶2ml分裝後，未封口放入與凍幹箱尺寸相應的金屬盤內，對凍幹箱進行滅菌處理，並將其擱板的溫度降低至-35℃，迅速將裝有製劑的金屬盤放入凍幹箱內，維持4小時，然後對凍幹箱進行真空處理，使箱內的真空度為0.2Pa，再將擱板升溫，並嚴格控制在共熔點-2℃以下，保持14小時，最後升溫至35℃，並保持一定時間，使製劑溫度與擱板溫度重合，放入無菌的過濾氣體，控制製劑的含水量在2％，迅速封口即可。
實施例9納米香菇多糖粉針劑的製備香菇子實體38kg乳糖 1.0kg注射用水適量製成 10000ml
製備方法A.將香菇子實體置於提取罐中，加水並導入微波萃取，使其以80億次/秒的速度作極性變化運動，其微波萃取的溫度為45℃，時間8小時；將萃取液在45℃溫度下減壓濃縮72小時；將減壓濃縮液置於噴霧乾燥塔中，用超音射流技術，在45℃溫度、0.02Mpa壓力下，以超音速瞬間射流乾燥，速度為600米/秒，得納米香菇；B.取納米香菇，採用35倍的水小火煎煮3小時，在3500轉/分的轉速下離心20分鐘，取上清液，加熱濃縮，至濃縮物為稀糖漿狀為止；冷卻後，慢慢加入4倍體積預冷(4℃)的95％乙醇，邊加邊攪拌至混合均勻，在冰箱中醇析24小時，離心除去乙醇，收集沉澱，減壓乾燥，得納米香菇多糖粗品；C.將納米香菇多糖粗品溶於35℃恆溫的蒸餾水中，趁熱過濾，邊攪邊加入蛋白酶，保溫4小時後升溫至80℃，維持10分鐘，過濾；濾液用2M NaOH溶液調pH7.0，加熱至沸，加入活性炭，保溫15分鐘，過濾；濾液調pH7，過陰離子柱，收集流出液；調pH至中性，過陽離子柱，收集流出液；最後過凝膠柱，收集流出液；向流出液中加入95％乙醇，使混合物含醇量達70％，靜置12小時，過濾，充分洗滌，低溫乾燥，得納米香菇多糖；D.取上述所得納米香菇多糖，用適量注射用水溶解，然後加入葡萄糖1.0kg，攪拌，溶解，濾過，加水至10000ml，再調節PH值至6.0，濾過，即得該凍乾粉針劑凍幹所用的有效成分提取液；將有效成分提取液按每瓶2ml分裝後，未封口放入與凍幹箱尺寸相應的金屬盤內，對凍幹箱進行滅菌處理，並將其擱板的溫度降低至-35℃，迅速將裝有製劑的金屬盤放入凍幹箱內，維持4小時，然後對凍幹箱進行真空處理，使箱內的真空度為0.2Pa，再將擱板升溫，並嚴格控制在共熔點-2℃以下，保持14小時，最後升溫至35℃，並保持一定時間，使製劑溫度與擱板溫度重合，放入無菌的過濾氣體，控制製劑的含水量在2％，迅速封口即可。
權利要求
1.一種治療癌症、病毒性肝炎的納米香菇多糖的製備方法，其特徵在於該方法為A.將香菇子實體置於提取罐中，加水並導入微波萃取，使其以20～80億次/秒的速度作極性變化運動，其微波萃取的溫度為50～70℃，時間5～10小時；將萃取液在40～60℃溫度下減壓濃縮8～16小時；將減壓濃縮液置於噴霧乾燥塔中，用超音速射流技術，在40～60℃溫度、0.05～1.0Mpa壓力下，以超音速瞬間射流乾燥，速度為500～1000米/秒，得納米香菇；B.取納米香菇，採用20～40倍的水回流2～4小時，在2000～4000轉/分的轉速下離心10～30分鐘，取上清液，加熱濃縮至稀糖漿狀為止；冷卻後，加入2～5倍體積在4℃下預冷的95％乙醇，邊加邊攪拌至混合均勻，冷藏24小時，離心除去乙醇，收集沉澱，減壓乾燥，得納米香菇多糖粗品；C.將納米香菇多糖粗品溶於35℃恆溫的蒸餾水中，趁熱過濾，邊攪拌邊加入蛋白酶，保溫2～4小時後升溫至80℃，維持10分鐘，過濾；濾液用2M NaOH溶液調pH7.4，加熱至沸，加入活性炭，保溫15分鐘，過濾；濾液調pH7，過陰離子柱，收集流出液；調pH至中性，過陽離子柱，收集流出液；最後過凝膠柱，收集流出液；向流出液中加入95％乙醇，使混合液含醇量達70％，靜置12-24小時，過濾，洗滌，低溫乾燥，得納米香菇多糖。
2.如權利要求1所述的一種治療癌症、病毒性肝炎的納米香菇多糖的製備方法，其特徵在於該方法為A.將香菇子實體置於提取罐中，加水並導入微波萃取，使其以30億次/秒的速度作極性變化運動，其微波萃取的溫度為60℃，時間5小時；將萃取液在60℃溫度下減壓濃縮8小時；將減壓濃縮液置於噴霧乾燥塔中，用超音速射流技術，在60℃溫度、0.05Mpa壓力下，以超音速瞬間射流乾燥，速度為500米/秒，得納米香菇；B.取納米香菇，採用20倍的水回流4小時，在3000轉/分的轉速下離心20分鐘，取上清液，加熱濃縮，至濃縮物為稀糖漿狀為止；冷卻後，加入2倍體積在4℃下預冷的95％乙醇，邊加邊攪拌至混合均勻，冷藏24小時，離心除去乙醇，收集沉澱，減壓乾燥，得納米香菇多糖粗品；C.將納米香菇多糖粗品溶於35℃恆溫的蒸餾水中，趁熱過濾，邊攪邊加入蛋白酶，保溫2小時後升溫至80℃，維持10分鐘，過濾；濾液用2M NaOH溶液調pH7.0，加熱至沸，加入活性炭，保溫15分鐘，過濾；濾液調pH7，過陰離子柱，收集流出液；調pH至中性，過陽離子柱，收集流出液；最後過凝膠柱，收集流出液；向流出液中加入95％乙醇，使混合液含醇量達70％，靜置12小時，過濾，洗滌，低溫乾燥，得納米香菇多糖。
3.如權利要求1所述的一種治療癌症、病毒性肝炎的納米香菇多糖的製備方法，其特徵在於該方法為A.將香菇子實體加工成飲片，置於提取罐中，加水並導入微波萃取，使其以80億次/秒的速度作極性變化運動，其微波萃取的溫度為40℃，時間10小時；將萃取液在40℃溫度下減壓濃縮16小時；將減壓濃縮液置於噴霧乾燥塔中，用超音速射流技術，在40℃溫度、1.0Mpa壓力下，以超音速瞬間射流乾燥，速度為1000米/秒，得納米香菇；B.取納米香菇，採用30倍的水回流3小時，在4000轉/分的轉速下離心10分鐘，取上清液，加熱濃縮至稀糖漿狀為止；冷卻後，加入4倍體積在4℃下預冷的95％乙醇，邊加邊攪拌至混合均勻，在冰箱中冷藏24小時，離心除去乙醇，收集沉澱，減壓乾燥，得納米香菇多糖粗品；C.將納米香菇多糖粗品溶於35℃恆溫的蒸餾水中，趁熱過濾，邊攪邊加入蛋白酶，保溫4小時後升溫至80℃，維持10分鐘，過濾；濾液用2M NaOH溶液調pH7.0，加熱至沸，加入活性炭，保溫15分鐘，過濾；濾液調pH7，過陰離子柱，收集流出液；調pH至中性，過陽離子柱，收集流出液；最後過凝膠柱，收集流出液；向流出液中加入95％乙醇，使混合液含醇量達70％，靜置16小時，過濾，洗滌，低溫乾燥，得納米香菇多糖。
4.一種治療癌症、病毒性肝炎的納米香菇多糖注射液的製備方法，其特徵在於是該方法為A.將香菇子實體置於提取罐中，加水並導入微波萃取，使其以20～80億次/秒的速度作極性變化運動，其微波萃取的溫度為50～70℃，時間5～10小時；將萃取液在40～60℃溫度下減壓濃縮8～16小時；將減壓濃縮液置於噴霧乾燥塔中，用超音速射流技術，在40～60℃溫度、0.05～1.0Mpa壓力下，以超音速瞬間射流乾燥，速度為500～1000米/秒，得納米香菇；B.取納米香菇，採用20～40倍的水回流2～4小時，在2000～4000轉/分的轉速下離心10～30分鐘，取上清液，加熱濃縮至稀糖漿狀為止；冷卻後，加入2～5倍體積在4℃下預冷的95％乙醇，邊加邊攪拌至混合均勻，冷藏24小時，離心除去乙醇，收集沉澱，減壓乾燥，得納米香菇多糖粗品；C.將納米香菇多糖粗品溶於35℃恆溫的蒸餾水中，趁熱過濾，邊攪拌邊加入蛋白酶，保溫2～4小時後升溫至80℃，維持10分鐘，過濾；濾液用2M NaOH溶液調pH7.4，加熱至沸，加入活性炭，保溫15分鐘，過濾；濾液調pH7，過陰離子柱，收集流出液；調pH至中性，過陽離子柱，收集流出液；最後過凝膠柱，收集流出液；向流出液中加入95％乙醇，使混合液含醇量達70％，靜置12-24小時，過濾，洗滌，低溫乾燥，得納米香菇多糖；D.取納米香菇多糖，加入注射用水至溶解，並調節PH值至6～8，濾過，分裝，滅菌，即得納米香菇多糖注射液。
5.如權利4所述的一種治療癌症、病毒性肝炎的納米香菇多糖注射液的製備方法，其特徵在於該方法為A.將香菇子實體置於提取罐中，加水並導入微波萃取，使其以30億次/秒的速度作極性變化運動，其微波萃取的溫度為60℃，時間5小時；將萃取液在60℃溫度下減壓濃縮8小時；將減壓濃縮液置於噴霧乾燥塔中，用超音速射流技術，在60℃溫度、0.05Mpa壓力下，以超音速瞬間射流乾燥，速度為500米/秒，得納米香菇；B.取納米香菇，採用20倍的水回流4小時，在3000轉/分的轉速下離心20分鐘，取上清液，加熱濃縮，至濃縮物為稀糖漿狀為止；冷卻後，加入2倍體積在4℃下預冷的95％乙醇，邊加邊攪拌至混合均勻，冷藏24小時，離心除去乙醇，收集沉澱，減壓乾燥，得納米香菇多糖粗品；C.將納米香菇多糖粗品溶於35℃恆溫的蒸餾水中，趁熱過濾，邊攪邊加入蛋白酶，保溫2小時後升溫至80℃，維持10分鐘，過濾；濾液用2M NaOH溶液調pH7.0，加熱至沸，加入活性炭，保溫15分鐘，過濾；濾液調pH7，過陰離子柱，收集流出液；調pH至中性，過陽離子柱，收集流出液；最後過凝膠柱，收集流出液；向流出液中加入95％乙醇，使混合液含醇量達70％，靜置12小時，過濾，洗滌，低溫乾燥，得納米香菇多糖；D.取納米香菇多糖，加入注射用水至溶解，並調節PH值至6.5，濾過，分裝，滅菌，即得納米香菇多糖注射液。
6.如權利要求4所述的一種治療癌症、病毒性肝炎的納米香菇多糖注射液的製備方法，其特徵在於該方法為A.將香菇子實體加工成飲片，置於提取罐中，加水並導入微波萃取，使其以80億次/秒的速度作極性變化運動，其微波萃取的溫度為40℃，時間10小時；將萃取液在40℃溫度下減壓濃縮16小時；將減壓濃縮液置於噴霧乾燥塔中，用超音速射流技術，在40℃溫度、1.0Mpa壓力下，以超音速瞬間射流乾燥，速度為1000米/秒，得納米香菇；B.取納米香菇，採用30倍的水回流3小時，在4000轉/分的轉速下離心10分鐘，取上清液，加熱濃縮至稀糖漿狀為止；冷卻後，加入4倍體積在4℃下預冷的95％乙醇，邊加邊攪拌至混合均勻，在冰箱中冷藏24小時，離心除去乙醇，收集沉澱，減壓乾燥，得納米香菇多糖粗品；C.將納米香菇多糖粗品溶於35℃恆溫的蒸餾水中，趁熱過濾，邊攪邊加入蛋白酶，保溫4小時後升溫至80℃，維持10分鐘，過濾；濾液用2M NaOH溶液調pH7.0，加熱至沸，加入活性炭，保溫15分鐘，過濾；濾液調pH7，過陰離子柱，收集流出液；調pH至中性，過陽離子柱，收集流出液；最後過凝膠柱，收集流出液；向流出液中加入95％乙醇，使混合液含醇量達70％，靜置16小時，過濾，洗滌，低溫乾燥，得納米香菇多糖；D.取納米香菇多糖，加入注射用水至溶解，並調節PH值至6.8，濾過，分裝，滅菌，即得納米香菇多糖注射液。
7.一種治療癌症、病毒性肝炎的納米香菇多糖凍乾粉針的製備方法，其特徵在於是該方法為A.將香菇子實體置於提取罐中，加水並導入微波萃取，使其以20～80億次/秒的速度作極性變化運動，其微波萃取的溫度為50～70℃，時間5～10小時；將萃取液在40～60℃溫度下減壓濃縮8～16小時；將減壓濃縮液置於噴霧乾燥塔中，用超音速射流技術，在40～60℃溫度、0.05～1.0Mpa壓力下，以超音速瞬間射流乾燥，速度為500～1000米/秒，得納米香菇；B.取納米香菇，採用20～40倍的水回流2～4小時，在2000～4000轉/分的轉速下離心10～30分鐘，取上清液，加熱濃縮至稀糖漿狀為止；冷卻後，加入2～5倍體積在4℃下預冷的95％乙醇，邊加邊攪拌至混合均勻，冷藏24小時，離心除去乙醇，收集沉澱，減壓乾燥，得納米香菇多糖粗品；C.將納米香菇多糖粗品溶於35℃恆溫的蒸餾水中，趁熱過濾，邊攪拌邊加入蛋白酶，保溫2～4小時後升溫至80℃，維持10分鐘，過濾；濾液用2M NaOH溶液調pH7.4，加熱至沸，加入活性炭，保溫15分鐘，過濾；濾液調pH7，過陰離子柱，收集流出液；調pH至中性，過陽離子柱，收集流出液；最後過凝膠柱，收集流出液；向流出液中加入95％乙醇，使混合液含醇量達70％，靜置12-24小時，過濾，洗滌，低溫乾燥，得納米香菇多糖；D.取納米香菇多糖，加入注射用水至溶解，按每毫升加入賦形劑甘露醇、乳糖、水解明膠、蔗糖、葡萄糖或它們的混合物0.05～0.2克，攪拌，溶解，濾過，並加注射用水適量，再調節PH值至6～8，即得該凍乾粉針劑凍幹所用的有效成分混合液，冷凍乾燥製成凍乾粉針。
8.如權利要求7所述的一種治療癌症、病毒性肝炎的納米香菇多糖凍乾粉針的製備方法，其特徵在於該方法為A.將香菇子實體置於提取罐中，加水並導入微波萃取，使其以30億次/秒的速度作極性變化運動，其微波萃取的溫度為60℃，時間5小時；將萃取液在60℃溫度下減壓濃縮8小時；將減壓濃縮液置於噴霧乾燥塔中，用超音速射流技術，在60℃溫度、0.05Mpa壓力下，以超音速瞬間射流乾燥，速度為500米/秒，得納米香菇；B.取納米香菇，採用20倍的水回流4小時，在3000轉/分的轉速下離心20分鐘，取上清液，加熱濃縮，至濃縮物為稀糖漿狀為止；冷卻後，加入2倍體積在4℃下預冷的95％乙醇，邊加邊攪拌至混合均勻，冷藏24小時，離心除去乙醇，收集沉澱，減壓乾燥，得納米香菇多糖粗品；C.將納米香菇多糖粗品溶於35℃恆溫的蒸餾水中，趁熱過濾，邊攪邊加入蛋白酶，保溫2小時後升溫至80℃，維持10分鐘，過濾；濾液用2M NaOH溶液調pH7.0，加熱至沸，加入活性炭，保溫15分鐘，過濾；濾液調pH7，過陰離子柱，收集流出液；調pH至中性，過陽離子柱，收集流出液；最後過凝膠柱，收集流出液；向流出液中加入95％乙醇，使混合液含醇量達70％，靜置12小時，過濾，洗滌，低溫乾燥，得納米香菇多糖；D.取納米香菇多糖加入注射用水至溶解，按每毫升加入賦形劑甘露醇0.05克，攪拌，溶解，濾過，並加注射用水適量，再調節PH值至6～8，即得該凍乾粉針劑凍幹所用的有效成分混合液，冷凍乾燥製成凍乾粉針。
9.如權利要求7所述的一種治療癌症、病毒性肝炎的納米香菇多糖凍乾粉針的製備方法，其特徵在於該方法為A.將香菇子實體加工成飲片，置於提取罐中，加水並導入微波萃取，使其以80億次/秒的速度作極性變化運動，其微波萃取的溫度為40℃，時間10小時；將萃取液在40℃溫度下減壓濃縮16小時；將減壓濃縮液置於噴霧乾燥塔中，用超音速射流技術，在40℃溫度、1.0Mpa壓力下，以超音速瞬間射流乾燥，速度為1000米/秒，得納米香菇；B.取納米香菇，採用30倍的水回流3小時，在4000轉/分的轉速下離心10分鐘，取上清液，加熱濃縮至稀糖漿狀為止；冷卻後，加入4倍體積在4℃下預冷的95％乙醇，邊加邊攪拌至混合均勻，在冰箱中冷藏24小時，離心除去乙醇，收集沉澱，減壓乾燥，得納米香菇多糖粗品；C.將納米香菇多糖粗品溶於35℃恆溫的蒸餾水中，趁熱過濾，邊攪邊加入蛋白酶，保溫4小時後升溫至80℃，維持10分鐘，過濾；濾液用2M NaOH溶液調pH7.0，加熱至沸，加入活性炭，保溫15分鐘，過濾；濾液調pH7，過陰離子柱，收集流出液；調pH至中性，過陽離子柱，收集流出液；最後過凝膠柱，收集流出液；向流出液中加入95％乙醇，使混合液含醇量達70％，靜置16小時，過濾，洗滌，低溫乾燥，得納米香菇多糖；D.取納米香菇多糖加入注射用水至溶解，按每毫升加入賦形劑水解明膠0.1克，攪拌，溶解，濾過，並加注射用水適量，再調節PH值至6～8，即得該凍乾粉針劑凍幹所用的有效成分混合液，冷凍乾燥製成凍乾粉針。
10.如權利要求7、8、9所述的一種治療癌症、病毒性肝炎的納米香菇多糖凍乾粉針的製備方法，其特徵在於D步驟中所述的冷凍乾燥為將凍幹所用的有效成分提取液按每瓶定量分裝後，未封口放入凍幹箱的金屬盤內，並將其擱板的溫度降低至-25℃-50℃，迅速將裝有製劑的金屬盤放入凍幹箱內，維持1-6小時，然後對凍幹箱進行真空處理，使箱內的真空度為0.2-0.5Pa，再將擱板升溫，並嚴格控制在共熔點-2℃以下，保持10-24小時，最後升溫至30℃～40℃，並保持一定時間，使製劑溫度與擱板溫度重合，放入無菌的過濾氣體，控制製劑的含水量在1-5％，迅速封口即可。
11.如權利要求10所述的一種治療癌症、病毒性肝炎的納米香菇多糖凍乾粉針的製備方法，其特徵在於D步驟中所述的冷凍乾燥為將凍幹所用的有效成分提取液按每瓶定量分裝後，未封口放入凍幹箱的金屬盤內，並將其擱板的溫度降低至-30℃，迅速將裝有製劑的金屬盤放入凍幹箱內，維持2小時，然後對凍幹箱進行真空處理，使箱內的真空度為0.3Pa，再將擱板升溫，並嚴格控制在共熔點-2℃以下，保持12小時，最後升溫至40℃，並保持一定時間，使製劑溫度與擱板溫度重合，放入無菌的過濾氣體，控制製劑的含水量在2％，迅速封口即可。
12.如權利要求10所述的一種治療癌症、病毒性肝炎的納米香菇多糖凍乾粉針的製備方法，其特徵在於D步驟中所述的冷凍乾燥為將凍幹所用的有效成分提取液按每瓶定量分裝後，未封口放入凍幹箱的金屬盤內，並將其擱板的溫度降低至-35℃，迅速將裝有製劑的金屬盤放入凍幹箱內，維持4小時，然後對凍幹箱進行真空處理，使箱內的真空度為0.2Pa，再將擱板升溫，並嚴格控制在共熔點-2℃以下，保持14小時，最後升溫至35℃，並保持一定時間，使製劑溫度與擱板溫度重合，放入無菌的過濾氣體，控制製劑的含水量在2％，迅速封口即可。
13.如權利要求10所述的一種治療癌症、病毒性肝炎的納米香菇多糖凍乾粉針的製備方法，其特徵在於D步驟中所述的冷凍乾燥為將凍幹所用的有效成分提取液按每瓶定量分裝後，未封口放入凍幹箱的金屬盤內，並將其擱板的溫度降低至-30℃，迅速將裝有製劑的金屬盤放入凍幹箱內，維持3小時，然後對凍幹箱進行真空處理，使箱內的真空度為0.2Pa，再將擱板升溫，並嚴格控制在共熔點-2℃以下，保持18小時，最後升溫至40℃，並保持一定時間，使製劑溫度與擱板溫度重合，放入無菌的過濾氣體，控制製劑的含水量在2％，迅速封口即可。
全文摘要
本發明公開了一種納米香菇多糖的製備工藝及其注射劑的製備方法。納米香菇多糖注射劑是以香菇子實體為原料，採用微波萃取、超音速射流技術先製備納米香菇，提取納米香菇多糖，再製成注射液或加賦形劑凍幹製成粉針劑。與現有的同類香菇多糖製劑相比，納米香菇多糖注射劑具有提取工藝先進科學，流程簡單，水溶性好，收率和純度更高的優點。
文檔編號A61P1/16GK1765934SQ20041008615
公開日2006年5月3日 申請日期2004年10月27日 優先權日2004年10月27日
發明者馮偉, 衛銀波, 崔建彤, 曹建軍 申請人:山西亞寶藥業集團股份有限公司