一種早熟、抗病莖用西蘭花的育種和培育方法
2023-08-05 07:07:51
一種早熟、抗病莖用西蘭花的育種和培育方法
【專利摘要】本發明涉及一種植物的育種和培育方法，尤其涉及一種莖用西蘭花的育種和培育方法，屬於植物栽培【技術領域】。本發明通過利用西蘭花育種材料與芥蘭育種材料花期人工去雄配製雜交一代種子F1，選擇綜合農藝性狀優良的單株自交得到F2；篩選優異的單株，以單核靠邊期至雙核早期的適合小孢子培養的花蕾進行小孢子培養，創製大量正常的再生植株，篩選出優異的DH植株進行自交，獲得大量植物學性狀穩定、配合力好、花粉量大的DH株系，並選擇其中一個DH株系作為輪迴親本與細胞質雄性不育源材料先雜交，後經過5代回交轉育選育成綜合性狀優良的細胞質雄性不育系CMS091，選擇DH株係為父本與細胞質雄性不育系CMS091試配雜交組合，得到早熟、抗病的莖用西蘭花。
【專利說明】一種早熟、抗病莖用西蘭花的育種和培育方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種植物的育種和培育方法，尤其涉及一種莖用西蘭花的育種和培育方法，屬於植物栽培【技術領域】。
【背景技術】
[0002]莖用西蘭花以其株型緊湊，生長期短，顏色綠，花莖長，花球鬆散，側分枝萌發力強，品味佳，適宜密植，抗逆性、抗病性強的特點而越來越受到種植戶和消費者的歡迎。莖用西蘭花主要以肥嫩的花蕾和花莖供食用，花蕾和花莖色綠翠美，肉質脆嫩，風味香甜，營養豐富，富含維生素A、B、C、E、蛋白質、花青素，礦物質等多種營養成份。它集合了西蘭花的優點，同時又去掉了緊實型西蘭花的缺點。它比緊實型西蘭花甜脆可口 ；其外觀之美、風味之佳遠遠在緊實型西蘭花之上。此外，莖用西蘭花還有健胃助消化、且富含花青素和抗癌物質，其中的抗癌物質高，是一種美味與保健完美結合的高品質、高檔次的功能型綠色蔬菜。目前，蔬菜基地正大面積種植莖用西蘭花，以供應國內外市場。
[0003]莖用西蘭花有較強的雜種優勢，目前生產雜交一代主要有兩種途徑，即利用自交不親和系和顯性細胞核雄性不育系配製雜交種。但利用自交不親和系制種要花費大量的人力和時間進行親本繁殖(通過人工蕾期授粉)，成本很高，推廣面積受制種量制約。更不利的是親本長期連續自交易產生生活力退化，使一些優良的性狀會丟失，雜交種的雜交率很難達到100%。利用顯性細胞核雄性不育系制種繁鎖，複雜，不易推廣。
【發明內容】
[0004]本發明的目的是針對現有技術存在的缺陷，提出一種早熟、抗病莖用西蘭花的育種和培育方法，所得的莖用西蘭花新品種具有產量高，抗病性強、抗逆性強的優勢，方法易於推廣使用。
[0005] 本發明通過利用早熟、優質、抗病的西蘭花育種材料與優質、抗病的芥蘭育種材料花期人工去雄配製雜交一代種子Fl，Fl播種後5葉I心時採用低溫處理後定植，經過田間鑑定，選擇早熟、分枝性強、抗病、抗逆性強、品質好等綜合農藝性狀優良的單株自交得到F2 ；F2播種後5葉I心時採用低溫處理後定植，田間鑑定篩選早熟、分枝性強、抗病、抗逆性強、品質好的單株，以單核靠邊期至雙核早期的適合小孢子培養的花蕾進行小孢子培養，創製大量正常的再生植株，田間採用植株形態特徵法鑑定，多為自發雙單倍體，篩選早熟、分枝性強、抗病、抗逆性強、品質好的優異DH植株進行自交，獲得大量植物學性狀穩定、配合力好、花粉量大的DH株系，並選擇其中一個DH株系0511作為輪迴親本與細胞質雄性不育源材料CMS033先雜交，後經過5代回交轉育選育成綜合性狀優良的細胞質雄性不育系CMS091，其不育系表現為雌蕊功能正常，無異源胞質的不良影響，有較好的經濟性狀，不育性穩定徹底，不育株率和不育度均達100%，具有較高的產量配合力。輪迴親本為保持系。選擇利用小孢子培養的植物學性狀穩定、配合力好、花粉量大的DH株係為父本與優良的細胞質雄性不育系CMS091試配雜交組合。其具體方法如下:一種早熟、抗病莖用西蘭花的育種方法，包括以下步驟:
[0006]第一步、將西蘭花和芥蘭雜交得到種子Fl ；
[0007]第二步、將Fl播種，當小苗長至5葉I心時採用低溫處理後定植，加代處理後選擇早熟、花球松、花莖長、蕾粒細、側分枝萌發力強、抗病、抗逆性強、品質好的單株進行自交得到種子F2 ；
[0008]第三步、將F2播種，當小苗長至5葉I心時採用低溫處理後定植，按第二步的標準選擇單株，選擇單株上單核靠邊期至雙核早期的花蕾，進行小孢子培養得到單倍體材料；
[0009]第四步、將所述單倍體材料在田間自然加倍得到DH植株，進行自交留種，分別編號播種，待苗長至5葉I心時，按照第二步的標準選擇優良的DH株系；
[0010]第五步、按照第二步的標準選擇所述DH株系作為輪迴親本，與細胞質雄性不育源進行雜交，獲得雜交種子；
[0011]第六步、將所述雜交種子播種後，待苗長至5葉I心時，低溫處理後定植，加代處理，進行田間鑑定，選擇植株低溫下幼苗不黃化，生殖生長期花朵開放正常而且植株直立，葉片深綠，有蠟粉，側分枝多，側分枝半直立，枝條挺立，光合能力強，雄蕊退化，雌蕊正常，花器官發育正常，蜜腺大，花蜜多，以及不育株率和不育度100%的不育系單株；
[0012]第七步、將所述DH株系作為回交父本與第六步所述不育系單株進行4-5代回交轉育，得到細胞質雄性不育系，所述DH株係為其保持系；
[0013]第八步、以所述細胞質雄性不育係為母本，以所述DH株係為父本進行雜交，經田間觀察、鑑定、小區評比，生產試驗，篩選出性狀優良的莖用西蘭花雜交組合，即莖用西蘭花新品種。
[0014]本發明利用細胞質雄性不育系制種可以克服利用自交不親和系制種的一系列缺陷。我國對細胞質雄性不育研究雖然起步較晚，在細胞質雄性不育研究中，我國的育種工作者在引進國外研究成果和材料的基礎上作了進一步的研究，取得了一定的進展，通過引進的改良西蘭花細胞質雄性不育源，不育性穩定，不受環境條件影響，花器官發育良好，雄蕊均退化，雌蕊正常，蜜腺大，花蜜多，不育株率和不育度均為100%，克服了苗期低溫黃化，花器官發育異常現象，結實率高，所有的甘藍類蔬菜品種都可以作為它的保持系。並且莖用西蘭花收穫的營養體，在利用細胞質雄性不育系配製雜交種時，不需要恢復系，只需要父本系即可。
[0015]以上方法的所述第一步中，西蘭花選用植株直立，葉片深綠色，側枝I~2個，枝條挺立，光合能力強，中早熟，花球半圓形，較緊實，球色深綠色，蕾粒細，單球質量400 -500g,花器官發育正常，花瓣顏色濃黃，柱頭直立，蜜腺大，花蜜多，開花習性良好，易授粉，結莢長，結實率高，抗病性強，抗逆性強的植株；所述芥蘭選用植株直立，葉片綠色，花球綠色，花球較松，蕾粒中，單球質量100 — 200g,花莖長18 — 22cm,側分枝萌發能力強，植株生長發育正常、花瓣顏色濃黃，柱頭直立，蜜腺發達，花蜜多，花粉量大，結莢長，結實率高，抗病性強，抗逆性強的植株。並採用花期人工去雄配製雜交一代種子Fl。
[0016]所述第四步中，所述DH植株依據植株形態特徵法選擇植株無黃化，無畸形葉，葉色、葉形正常、植株生長正常，花球蕾粒發育正常，花粉量大，能正常結實，進行田間鑑定。
[0017]所述第五步中，DH株系的單株與細胞質雄性不育源材料CMS033進行人工剝蕾或花期套袋雜交，露出柱頭後，將優良且穩定DH株系單株的花粉塗於其上，柱頭正常膨大，獲得雜交種子。選擇的細胞質雄性不育源材料CMS033不育株率和不育度均為100%，克服了苗期低溫黃化，花器官發育異常現象的性狀外，還具有抗逆性強，抗病性強的特點，而且植株直立，葉片深綠，有蠟粉，側分枝多，側分枝半直立，枝條挺立，光合能力強，雄蕊退化，雌蕊正常，花瓣大，顏色濃黃，蜜腺大，花蜜多，柱頭直立，不彎曲，蜜蜂訪花頻率高，時間長，平均達10秒/朵，易授粉，平均莢長達15 cm左右，結實率達20粒/莢，籽粒飽滿，產量高等特點。
[0018]所述低溫處理的條件是溫度4.4~10.6°C，光照度2000LX的光照培養箱內春化處
理20天。
[0019]所述加代處理方法是指每年加代1-2代。西蘭花是綠體春化作物，與大白菜種子春化不同，植株對低溫春化要求不嚴，四季均可開花，採用5葉I心的小苗低溫處理能加快春化速度，較種子春化方式更直接有效，選擇性強，較普通栽培提早15 - 20天開花。具體方法為:將收下的種子脫粒乾淨，去掉癟籽、破子，曬乾，於I月初穴盤育苗，白天20-25°C，夜晚15 - 18°C，5葉I心時放置光照培養箱，白天8 — 12°C，夜晚4.4~10.6°C，培養20天後即可定植，田間利用水簾、風機、遮光網控制夏季高溫、利用燃油控溫設備提高冬季低溫，常年溫度控制在15_28°C之間，在花球形成初期至抽薹開花初期，白天10:30 — 14:30，在大棚內利用霧化裝置，使空氣相對溼度保持在70% — 80%之間，保持土壤溼潤，田間鑑定菌核病、黑腐病的抗病性以及抗逆性的強弱，確保優選單株的抗病性強、抗逆性強。定植後待抽薹開花，進行人工回交授粉，轉育早代，細胞質雄性不育源材料較回交父本提前5天播種，如花期不遇，去掉主枝，促其 側枝發育，調節花期，花期相遇時進行人工剝蕾或花期套袋雜交，5月底6月初收穫；6月下旬再次播種,方法同上，11月底12月初即可收穫,實現一年2代加代快速選育。
[0020]所述小孢子培養方法參見顧宏輝、虞慧芳、趙振卿、王建升、盛小光、張曉輝的發明專利青花菜高二倍體率小孢子再生植株的培養方法(申請號200910101722.5)。供體植株是選擇植株與花蕾健壯的植株；並從中選擇花瓣與花葯長度比在0.5 - 0.8之間，處於單核靠邊期至雙核早期的花蕾培養，其它培養方法相同。
[0021]上述方法的所述西蘭花胞質雄性不育系代號CMS033，所述優良且穩定的DH株系回交父本即保持系代號0511，所述細胞質雄性不育系代號CMS091，所述優良且穩定DH株系父本系代號0582。生物學性狀參見具體實施例部分的表1 一表4。
[0022]本發明進一步提供早熟、抗病莖用西蘭花的培育方法，包括以下步驟:採用簡易大棚採種，不育系與相應的保持系以1:2栽培，開花期在棚內放蜜蜂授粉，每個大棚2箱，花期過後拔除保持系，從不育系植株採種得到母本種子，父本採種棚在開花期通過蜜蜂授粉，提高採種質量。
[0023]培育時，培育基地採用自然屏障隔離，隔離距離在1500米以上，父本與母本按照
1:2進行定植，定植至簡易大棚避雨栽培，氣溫30°C以上時四周通風，開花前注意雜株的及時發現和拔除，開花期在棚內放蜜蜂授粉，每個大棚2箱，花期過後拔除父本系，加強田間
病蟲害的管理。
[0024]本發明所採用的細胞質雄性不育系除雄性不育徹底，不育株率和不育度均為100%，克服了苗期低溫黃化，花器官發育異常現象的性狀外，還具有抗逆性強，抗病性強的特點，而且植株直立，葉片深綠，有蠟粉，側分枝多，側分枝半直立，枝條挺立，光合能力強，雄蕊退化，雌蕊正常，花瓣大，顏色濃黃，蜜腺大，花蜜多，柱頭直立，不彎曲，蜜蜂訪花頻率高，時間長，平均達10秒/朵，易授粉，平均莢長達15 cm左右，結實率達20粒/莢，籽粒飽滿，廣量聞等特點。
[0025]本發明的優點如下:
[0026](I)雄性不育係為細胞質不育，隨母性遺傳，其不育性穩定，不育株率和不育度均為100 %，花器官發育正常，開花結實性狀良好，幼苗低溫條件下不黃化，側分枝多，側分枝半直立，枝條挺立，光合能力強，雄蕊退化，雌蕊正常，蜜腺大，花蜜多，柱頭直立，不彎曲，蜜蜂訪花頻率高，時間長，易授粉，產量高等特點，多代回交不退化，轉育容易，生長勢旺，組合力強。
[0027](2)育種材料是綠體春化作物，對低溫春化要求不嚴，四季均可開花，只要避開高溫和寒冷對開花結實不利影響外，利用降溫和加溫設備把棚內溫度調到15_28°C，可保證育種進展順利，縮短育種年限，加快育種進程，提高育種效率。
[0028](3)轉育早代，不育系比保持系植株生長勢強，具有種間雜交優勢。
[0029](4)轉育早代，不育系的晚抽薹比保持系強，因此轉育早代不育系材料比保持系早播5天。
[0030](5)用不育系配製Fl，種子產量高，制種成本低，省工。
[0031](6)在花球形成初期至抽薹開花初期，使大棚內空氣相對溼度保持在70 - 80%之間，土壤保持溼潤，田間鑑定菌核病、黑腐病等抗病性以及抗逆性的強弱，確保優選單株的抗病性強、抗逆性強，而且不育系抗病性強，增產明顯。
[0032](7)通過游離小孢子培養和常規育種相結合，聚合西蘭花與芥蘭的早熟、多分枝、莖長、花球鬆散、優質、抗病、抗逆等高效基因，培育出目標性狀突出、綜合性狀優良的莖用西蘭花新品種。
[0033]本發明提供的該材料的獲得方法簡便，成本低廉，便於推廣，市場前景廣闊。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0034]圖1為本發明一個實施例的育種流程圖。
【具體實施方式】
[0035]本實施例中第一次作為母本的西蘭花胞質雄性不育系標準代號CMS033、優良且穩定的DH株系標準代號0511、西蘭花胞質雄性不育系標準代號CMS091、優良且穩定的DH株系標準代號0582，可以根據需要在市場上購買到(例如到鎮江瑞繁農藝有限公司購買，地址江蘇省句容市寧杭路112號)，本發明切實可行。
[0036]如圖1所示，本實施例的育種流程如下:
[0037] 育種前，西蘭花選用植株直立，葉片深綠色，側枝I~2個，枝條挺立，光合能力強，中早熟，花球半圓形，較緊實，球色深綠色，蕾粒細，單球質量400 - 500g,花器官發育正常，花瓣顏色濃黃，柱頭直立，蜜腺大，花蜜多，開花習性良好，易授粉，結莢長，結實率高，抗病性強，抗逆性強的植株；所述芥蘭選用植株直立，葉片綠色，花球綠色，花球較松，蕾粒中，單球質量100 — 200g,花莖長18 — 22cm,側分枝萌發能力強,植株生長發育正常、花瓣顏色濃黃，柱頭直立，蜜腺發達，花蜜多，花粉量大，結莢長，結實率高，抗病性強，抗逆性強的植株，具體是第一年3月下旬用3份不同類型(不同熟期、不同葉形和葉色)西蘭花優良的育種材料(越秀、久綠，早生久綠)，2份不同類型(不同熟期、不同葉形和葉色)芥蘭優良的育種材料(香港中花芥蘭、廣東粗條芥蘭)雜交，得到10份不同類型的雜交Fl後代，於當年6月初收穫Fl種子；當年夏季出月下旬)將10份不同類型的Fl播種，分別播種於72孔穴盤中，蔬菜專用營養土育苗，植株有5葉I心時，將其放置在溫度4.4~10.6°C，光照度2000Lx的光照培養箱內春化處理20天後，將植株在花盆內定植並擺放在大棚內生長，田間利用水簾、風機、遮光網控制夏季高溫、利用燃油控溫設備提高冬季低溫，常年溫度控制在15-28°C之間，以利於植株生長，在花球形成初期至抽薹開花初期，使大棚內空氣相對溼度保持在70% — 80%之間，土壤保持溼潤，田間鑑定菌核病、黑腐病的抗病性以及抗逆性等其他綜合性狀。Fl代由於收穫種子數量不等，種植株數50~70株不等，當年9月經田間觀察、鑑定，篩選8個早熟、花球松、花莖長、蕾粒細、側分枝萌發力強、抗病、抗逆性強、品質好的優良單株自交，11月初得到8份F2種子；11月中旬播種於72孔穴盤中，蔬菜專用營養土育苗，植株有5葉I心時，將其放置在溫度4.4~10.6°C，光照度2000XL的光照培養箱內春化處理20天後，將植株在花盆內定植並擺放在大棚內生長，田間利用水簾、風機、遮光網控制夏季高溫、利用燃油控溫設備提高冬季低溫，常年溫度控制在15-28°C之間，以利於植株生長，在花球形成初期至抽薹開花初期，使大棚內空氣相對溼度保持在70% — 80%之間，土壤保持溼潤，田間鑑定菌核病、黑腐病的抗病性以及抗逆性等其他綜合性狀。
[0038]第二年3月上旬以單核靠邊期至雙核早期的適合小孢子培養的花蕾進行小孢子培養，創製大量正常的再生植株，第二年5月下旬植株移栽大棚內，田間採用植株形態特徵法鑑定，多為自發雙單倍體(DH)，第二 8月上旬田間觀察、鑑定，篩選優良單株自交，第二年10月上旬獲得種子並編號，第二年11月上旬播種、經田間觀察、鑑定，篩選早熟、花球松、花莖長、蕾粒細、側分枝萌發力強、抗病、抗逆性強、品質好的優良DH株系繁殖，第三年5月下旬獲得穩定的DH株系親本14份，第三年10月上旬播種。第三年從歐洲、日本等地引進多份西蘭花雄性不育材料，同年8月中旬在鎮江農科所蔬菜基地種植，經田間觀察、鑑定，發現I份材料(CMS033)不育株率和不育度均為100%，克服了苗期低溫黃化，花器官發育異常現象，結實率高的性狀外，還具有抗逆性強，抗病性強的特點，而且植株直立，葉片深綠，有蠟粉，分枝多，分枝半直立，枝條挺立，光合能力強，雄蕊退化，雌蕊正常，花瓣大，顏色濃黃，蜜腺大，花蜜多，柱頭直立，不彎曲，蜜蜂訪花頻率高，時間長，平均達10秒/朵，易授粉，平均莢長達15 cm左右，結實率達20粒/莢，籽粒飽滿，產量高等特點，田間鑑定後選留優良單株假植於大棚越冬；
[0039] 第四年4月上旬用6份不同類型(不同熟期、不同葉形和葉色)優良且穩定的DH株系與之雜交，得到6份不同類型的雜交Fl後代，於當年6月初收穫Fl種子；當年6月底將6份不同類型的Fl及回交父本播種，待植株有5葉I心時，進行春化(條件與上述植株春化條件相同)，春化後，將植株在花盆內定植並擺放在大棚內生長，大棚內溫度、相對溼度調節同前述，以利於植株生長，在生長過程中多次鑑定植株的長勢、抗病性、抗逆性以及其他綜合性狀。Fl代由於收穫種子數量不等，種植株數60~80株不等。在生長過程中多次鑑定各植株長勢、抗病性、抗逆性以及其它綜合農藝性狀，在開花期間檢查Fl植株的育性，篩選不育株率和花朵不育度均為100%的不育株,其中1份材料(父本為0511)的不育株在低溫下幼苗不黃化，生殖生長期花朵開放正常，雄蕊均退化，雌蕊正常，蜜腺大，花蜜多，植株直立，葉片深綠，有蠟粉，側分枝多，側分枝半直立，枝條挺立，光合能力強等綜合性狀優良，然後將Fl與回交父本0511 (回交父本0511種子分批多年播種)花期相遇時進行人工剝蕾或花期套袋回交，第四年11月上旬獲得BCl種子，將BCl於當年秋季(11月下旬)播種，待植株有5葉I心時，進行春化(條件與上述植株春化條件相同)，春化後，將植株置於溫度為15~28°C大棚環境中，大棚內溫度溼度、相對溼度調節同前述，開花時選取部分植株單株套袋自交檢查其育性，發現不育率和不育度為100%，然後BCl為母本與0511(與BCl種植方法相同)回交，得到回交二代BC2。
[0040]將BC2於第五年夏季出月底)播種，待植株有5葉I心時時，進行春化(條件與上述植株春化條件相同)，春化後，將植株置於溫度28°C以下的大棚中，進行加代繁殖，即BC2與0511回交，得到回交三代BC3 ；
[0041]第五年秋季(11月下旬)將BC3播種，春化，春化後將植株置於溫度為15~28°C大棚中，開花後選部分植株套袋自交，檢查不育率為100%，BC3與0511回交得到回交四代BC4。
[0042]將BC4於第六年夏季(6月底)播種，春化，春化後，將植株置於溫度28°C以下的大棚中，進行加代繁殖，11月上旬選育出I個綜合農藝性狀優良及不育性穩定的不育系CMS091 ;同時回交父本(0511)為相應的雄性不育系CMS091的保持系0511。
[0043]第七年3月下旬，不育系CMS091與DH株系親本試配雜交組合65個，當年8月參加田間品種比較試驗，進行田間鑑定、篩選，配合力測定，最終選育出性狀優良的早熟、抗病莖用西蘭花新品種綠薹50(CMS091X0582)，該品種較綠秀蘭(CK)早熟2天、採收期長4天、產量2365.3Kg/667m2，較綠秀蘭(CK) 2102.8Kg/667m2增產12.4%，抗菌核病，黑腐病性強、口感脆甜，綜合農藝性狀表現優良，見表5，表6。
[0044]二綠薹50特徵特性
[0045]早熟，定植後50天即可開始採收。植株半直立、株高約48cm，開展度約50cm，側分枝力強、主花球鬆散，主花球重約350g，花莖長約18 - 22cm，花莖粗約1.8cm，花球嫩綠，莖嫩綠，肉質脆甜，水焯後色澤翠綠，品質優，抗病性強，採收期長達18天左右。
[0046]三繁殖、制種技術要點
[0047]I親本繁殖:採用簡易大棚採種，不育系與相應的保持系以1:2栽培。開花期在棚內放蜜蜂授粉，每個大棚2箱，花期過後拔除保持系。從不育系植株採種得到母本種子。父本採種棚在開花期通過蜜蜂授粉，提高採種質量。
[0048]2雜種一代制種技術:
[0049](I)嚴格隔離:在制種基地一定要採取嚴格隔離措施，最好是自然屏障隔離，隔離距離應在1500米以上。
[0050](2)播期調整:以本發明的不育系CMS091為母本，優良DH株系親本0582為父本進行雜交制種。由於父母本的花期不一致，在制種時為了能使父母本花期相遇，提高種子產量，在播種時需要根據制種地氣候條件調整父母本的播種期。
[0051](3)定植比例:一般情況下，父本與母本按照1:2進行定植。
[0052](4)田間管理:在江蘇地區，一般9月中旬播種，72孔穴盤育苗，5-6葉直接定植簡易大棚避雨栽培，氣溫達30°C以上時四周通風，開花前注意雜株的及時發現和拔除。開花期在棚內放蜜蜂授粉，每個大棚2箱，花期過後拔除父本系。加強田間病蟲害的管理。[0053]表1西蘭花DH自交系0511與西蘭花胞質雄性不育系CMS033回交轉育後代性狀
[0054]
【權利要求】
1.一種早熟、抗病莖用西蘭花的育種方法，包括以下步驟: 第一步、將西蘭花和芥蘭雜交得到種子Fl ； 第二步、將Fl播種，當小苗長至5葉I心時採用低溫處理後定植，加代處理後選擇早熟、花球松、花莖長、蕾粒細、側分枝萌發力強、抗病、抗逆性強、品質好的單株進行自交得到種子F2 ； 第三步、將F2播種，當小苗長至5葉I心時採用低溫處理後定植，按第二步的標準選擇單株，選擇單株上花葯長度比在0.5 — 0.8之間、單核靠邊期至雙核早期的花蕾，進行小孢子培養得到單倍體材料； 第四步、將所述單倍體材料在田間自然加倍得到DH植株，進行自交留種，分別編號播種，待苗長至5葉I心時，按照第二步的標準選擇優良的DH株系； 第五步、按照第二步的標準選擇所述DH株系作為輪迴親本，與細胞質雄性不育源進行雜交，獲得雜交種子； 第六步、將所述雜交種子播種後，待苗長至5葉I心時，低溫處理後定植，加代處理，進行田間鑑定，選擇植株低溫下幼苗不黃化，生殖生長期花朵開放正常，雄蕊退化，雌蕊正常，花器官發育正常，蜜腺大，花蜜多，以及不育株率和不育度100%的不育系單株； 第七步、將所述DH 株系作為回交父本與第六步所述不育系單株進行4-5代回交轉育，得到細胞質雄性不育系，所述DH株係為其保持系； 第八步、以所述細胞質雄性不育係為母本，以所述DH株係為父本進行雜交，經田間觀察、鑑定、小區評比，生產試驗，篩選出性狀優良的莖用西蘭花雜交組合，即莖用西蘭花新品種。
2.根據權利要求1所述早熟、抗病莖用西蘭花的育種方法，其特徵在於:所述第一步中，西蘭花選用植株直立，葉片深綠色，側枝I~2個，枝條挺立，光合能力強，中早熟，花球半圓形，較緊實，球色深綠色，蕾粒細，單球質量400 - 500g,花器官發育正常，花瓣顏色濃黃，柱頭直立，蜜腺大，花蜜多，開花習性良好，易授粉，結莢長，結實率高，抗病性強，抗逆性強的植株；所述芥蘭選用植株直立，葉片綠色，花球綠色，花球較松，蕾粒中，單球質量100 — 200g,花莖長18 — 22cm,側分枝萌發能力強,植株生長發育正常、花瓣顏色濃黃,柱頭直立，蜜腺發達，花蜜多，花粉量大，結莢長，結實率高，抗病性強，抗逆性強的植株。
3.根據權利要求2所述早熟、抗病莖用西蘭花的育種方法，其特徵在於:採用花期人工去雄配製雜交一代種子Fl。
4.根據權利要求1所述早熟、抗病莖用西蘭花的育種方法，其特徵在於:所述第四步中，所述DH植株依據植株形態特徵法選擇植株無黃化，無畸形葉，葉色、葉形正常、植株生長正常，花球蕾粒發育正常，花粉量大，能正常結實，進行田間鑑定。
5.根據權利要求1所述早熟、抗病莖用西蘭花的育種方法，其特徵在於:所述第五步中，DH株系的單株與細胞質雄性不育源材料CMS033進行人工剝蕾或花期套袋雜交，露出柱頭後，將優良且穩定DH株系單株的花粉塗於其上，柱頭正常膨大，獲得雜交種子。
6.根據權利要求1所述早熟、抗病莖用西蘭花的育種方法，其特徵在於:所述低溫處理的條件是溫度4.4~10.6°C，光照度2000Lx的光照培養箱內春化處理20天。
7.根據權利要求1所述早熟、抗病莖用西蘭花的育種方法，其特徵在於:所述加代處理是每年加1-2代，具體是將收下的種子脫粒乾淨，去掉癟籽、破子，曬乾，於I月初穴盤育苗，白天20-25 °C，夜晚15 — 18°C，5葉I心時放置光照培養箱，白天8 — 12°C，夜晚4.4~10.6°C，培養20天後即可定植，田間利用水簾、風機、遮光網控制夏季高溫、利用燃油控溫設備提高冬季低溫，常年溫度控制在15_28°C之間，在花球形成初期至抽薹開花初期，白天10:30 - 14:30，在大棚內利用霧化裝置，保持空氣相對溼度在70% — 80%之間，保持土壤溼潤，田間鑑定菌核病、黑腐病的抗病性以及抗逆性的強弱，確保優選單株的抗病性強、抗逆性強，定植後待抽薹開花，進行人工回交授粉，轉育早代，細胞質雄性不育源材料較回交父本提前5天播種，如花期不遇，去掉主枝，促其側枝發育，調節花期，花期相遇時進行人工剝蕾或花期套袋雜交，5月底6月初收穫；6月下旬再次播種，方法同上，11月底12月初即可收穫，實現一年2代加代快速選育。
8.一種早熟、抗病莖用西蘭花的培育方法，包括以下步驟:採用簡易大棚採種，不育系與相應的保持系以1:2栽培，開花期在棚內放蜜蜂授粉，每個大棚2箱，花期過後拔除保持系，從不育系植株採種得到母本種子，父本採種棚在開花期通過蜜蜂授粉，提高採種質量。
9.根據權利要求8所述早熟、抗病莖用西蘭花的培育方法，其特徵在於:培育基地採用自然屏障隔離，隔離距離在1500米以上，父本與母本按照1:2進行定植，定植至簡易大棚避雨栽培，氣溫30°C以上時四周通風，開花前注意雜株的及時發現和拔除，開花期在棚內放蜜蜂授粉，每個大棚2箱，花期過後拔除父本系，加強田間病蟲害的管理。
【文檔編號】A01H1/04GK103988775SQ201410232478
【公開日】2014年8月20日 申請日期:2014年5月28日 優先權日:2014年5月28日
【發明者】秦文斌, 戴忠良, 吳國平, 毛忠良, 潘躍平, 姚悅梅, 潘永飛, 張振超, 王建華, 肖燕, 陳智超, 劉小鳳 申請人:鎮江瑞繁農藝有限公司