一種細胞色素c製備新方法
2023-05-19 02:31:36 2
專利名稱:一種細胞色素c製備新方法
技術領域:
本發明屬於化工技術領域,尤其是涉及到細胞色素c的製備方法。
背景技術:
細胞色素C是一種含鐵卟啉的蛋白質,是生物氧化過程中的電子傳遞體。其作用 原理為在酶存在的情況下,對組織的氧化、還原有迅速的酶促作用。通常外源性細胞色素C 不能進入健康細胞,但在缺氧時,細胞膜的通透性增加,細胞色素C便有可能進入細胞及線 粒體內,增強細胞氧化,提高氧的利用。 目前市售細胞色素C注射液用於組織缺氧的急救和輔助用藥,如一氧化碳中毒、 催眠藥中毒、新生兒窒息、嚴重休克缺氧、麻醉及肺部疾病引起的呼吸困難、高山缺氧、腦缺 氧、心臟疾病引起的缺氧等。 現有細胞色素C提取方法是用硫酸水溶液提取,此法提取條件較劇烈,耗時長,而 且收率較低。
發明內容
本發明的目的在於改進已有技術的不足而提供一種以哺乳動物心肌為原料,採用 硫酸鋁溶液提取法製備,得到細胞色素C,本發明具有方法成本低、步驟簡單、提取條件溫 和、引入雜質少、反應物無汙染、適合工業化大生產的特點。 本發明的目的是這樣實現的,一種細胞色素C的製備方法,其特點是以哺乳動物 心肌為原料,採用硫酸鋁溶液提取法製備,得到細胞色素C。 為進一步實現本發明的目的,可以是用硫酸鋁溶液一次或多次提取,提取時硫酸 鋁的濃度控制在O. 1_10%,硫酸鋁溶液的體積控制在l-5倍心肌體積,提取pH值控制在 3-6,反應溫度控制在0-3(TC,提取時間控制在1-4小時。 為了更進一步實現本發明的目的,可以是所述的製備方法是,將心肌絞碎,加入 1-5倍心肌體積的硫酸鋁溶液,硫酸鋁溶液的濃度為0. 1-10%,控制pH值在3-6之間,控 制溫度在0-3(TC之間,提取l-4h,再經過濾,心渣可再經硫酸鋁溶液提取,提取液經沸石吸 附,洗脫,鹽析,超濾除鹽,凍幹,得到細胞色素C。 本發明涉及的技術方法是以市售的哺乳動物心肌為原料,採用硫酸鋁溶液提取法 製備,得到細胞色素C。該方法成本低,步驟簡單,提取條件溫和,引入雜質少,反應產物無汙 染,通過對反應時間、反應溫度、反應pH值和硫酸鋁的濃度控制,可得到目標產物,適合工 業化大生產。
具體實施方案 實施例l,細胞色素C製備方法,將5kg豬心絞碎,加入15L濃度為2X硫酸鋁溶液, pH值控制在3,降低溫度至0°C ,提取2小時,再經過濾,得到的提取液經沸石吸附,洗脫,鹽 析,超濾除鹽,凍幹,得到產品0. 9g。
實施例2,將30kg牛心絞碎,置於夾層反應罐中,加入60L濃度為3%硫酸鋁溶液, pH值控制在6,控制溫度至15°C ,提取3小時,再經過濾,心渣可再經硫酸鋁溶液按前述方法 分別提取2次,得到的所有提取液經沸石吸附,洗脫,鹽析,超濾除鹽,凍幹,得到產品5. 9g。
實施例3,將100kg馬心絞碎,加入400L濃度為6X硫酸鋁溶液,pH值控制在5,降 低溫度至30°C ,提取4小時,再經過濾,心渣可再經硫酸鋁溶液按前述方法分別提取8次,得 到的所有提取液經沸石吸附,洗脫,鹽析,超濾除鹽,凍幹,得到產品18. 5g。
權利要求
一種細胞色素C的製備方法,其特徵是以哺乳動物心肌為原料,將心肌採用濃度為0.1-10%的硫酸鋁溶液採用提取法製備,得到細胞色素C。
2. 根據權利1要求所述的一種細胞色素C的製備方法,其特徵是所述的製備方法是使 用硫酸鋁溶液一次或多次提取,提取時加入1-5倍心肌體積的硫酸鋁溶液,硫酸鋁溶液的 濃度為0. 1-10% ,控制pH值在3-6之間,控制溫度在0-3(TC之間,提取1_4小時,再經過濾, 得到提取液,心渣可按前述方法反覆提取,提取液經沸石吸附,洗脫,鹽析,超濾除鹽,凍幹, 得到細胞色素C。
3. 根據權利1和2要求所述的一種細胞色素C的製備方法,其特徵是使用的原料為攪 碎的哺乳動物心肌。
全文摘要
本發明公布了一種細胞色素C的提取方法。以哺乳動物心肌為原料,採用硫酸鋁溶液提取法製備,提取過程中硫酸鋁的濃度控制在0.1-10%,硫酸鋁溶液的體積控制在1-5倍量心肌體積,提取pH值控制在3-6,反應溫度控制在0-30℃,提取時間控制在1-4h。再經吸附洗脫,最終得到細胞色素C。本發明具有方法成本低、步驟簡單、提取條件溫和、引入雜質少、反應物無汙染、適合工業化大生產的特點。
文檔編號C07K1/14GK101709086SQ20091022951
公開日2010年5月19日 申請日期2009年10月26日 優先權日2009年10月26日
發明者張立勇, 王建強, 由守誼, 齊東綺 申請人:煙臺東誠生化股份有限公司