對α-2-δ蛋白質具有親和力的Y-胺基酸的製備的製作方法

2023-07-20 08:47:26

*")以表示立體(不對稱或手性)中心，儘管沒有星號("*")並不表示化合物不存在立體中心。所述式可指外消旋體或是指個別對映異構體或是指個別非對映異構體，其可以是齊可以不是純的或實質上純的。其它式可包括一或多個波狀鍵("J，)1這些波狀鍵當連接至立體中心時是指單個或作為混合物的兩種立體異構體。同樣，這些波狀鍵當連接至雙鍵時表示Z-異構體、E-異構體或Z和E異構體的混合物。一些式可包括虛線鍵"一一"以表示單鍵或雙鍵。"取代的"基團為那些其中一或多個氫原子已被一或多個非氫原子或基團取代的基團，其限制奈件為滿足價鍵要求且所述取代產生化學性質穩定的化合物。"約"或"大致"在與可量測數值變量一起使用時是指變量的指定值且是指變數的所有在指定值的實驗誤差範圍內(例如，在平均值95%的置信區間內)或在指定值的±10%範圍內的值，兩種情況下值的範圍皆更大。"烷基"是指直鏈和支鏈飽和烴基，其通常具有指定碳原子的數值(亦即，Cw烷基是指具有1、2或3個碳原子的烷基且d"烷基是指具有l、2、3、4、5或6個碳原子的烷基)。烷基的實例包括曱基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、仲丁基、異丁基、叔丁基、戊-l-基、戊-2-基、戊-3-基、3-甲基丁-l-基、3-甲基丁-2-基、2-甲基丁-2-基、2，2，2-三甲基乙-l-基、正己基和其類似基團。"烯基"是指具有一或多個不飽和碳一碳鍵的直鏈和支鏈烴基，且其通常具有指定碳原子的數值。烯基的實例包括乙烯基、l-丙烯-l-基、l-丙烯-2-基、2-丙烯-l-基，1-丁烯-l-基、1-丁烯-2-基-3~丁烯-l-基、3-丁烯-2-基、2-丁烯-l-基、2-丁烯-2-基、2-甲基-1-丙烯-1-基、2-甲基-2-丙烯-l-基、1，3-丁二烯-l-基、1，3-丁二烯-2-基和其類似基團。"炔基，，是指具有一或多個碳-碳參鍵的直鏈或支鏈烴基，且其通常具有指定碳原子的數值。炔基的實例包括乙炔基、l-丙炔-l-基、2-丙炔-l-基、1-丁炔-l-基、3-丁炔-l-基、3-丁炔-2-基-、2-丁炔-1-基和其類似基團。"烷氧基"是指烷基-o-、烯基-0和炔基-0，其中烷基、烯基和炔基如上所定義。烷氧基的實例包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基，異丙氧基、正丁氧基，仲丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基，仲戊氧基和其類似基團。"滷代"和"滷素，，可互換使用，且是指氟，氯，溴和碘。"滷代烷基"、"離代烯基，，，"卣代炔基"和"fi代烷氧基"分別是指被一或多個卣素原子取代的烷基、烯基、炔基和烷氧基，其中烷基、烯基、炔基和烷氧基如上所定義。卣代烷基的實例包括三氟甲基、三氯甲基、五氟乙基，五氟乙基和其類似基團。"環烷基"是指飽和單環和雙環烴環，其通常具有指定構成環的碳原子的數值(亦即，Cw環烷基是指具有3、4、5、6或7個作為環成員的碳原子的環烷基)。除非連接會違背價鍵要求，環烷基可通過任何環原子連接至母體基團或連接至底物。同樣地，除非取代會違背價鍵要求，環烷基可包括一或多個非氫取代基。可用的取代基包括如上所定義的烷基、烯基、炔基、卣代烷基、卣代烯基、卣代炔基、烷氧基、烷氧羰基、烷醯基和面素，且包括羥基、巰基、硝基和氨基。單環環烷基的實例包括環丙基、環丁基、環戊基、環己基和其類似基團。雙環環烷基的實例包括雙環[l.1.O]丁基，雙環[l.1.l]戊基、雙環[2.1.0]戊基、雙環[2.1.1]己基、雙環[3.1.0〗己基、雙環[2.2.1]庚基、雙環[3.2.O]庚基、雙環[3.1.l]庚基、雙環[4.l.O]庚基、雙環[2.2.2]辛基、雙環[3.2.1]辛基、雙環[4.l.l]辛基,雙環[3.3.0〗辛基、雙環[4.2.O]辛基、雙環[3.3.l]壬基、雙環[4.2.l]壬基、雙環[4.3.O]壬基、雙環[3.3,2]癸基、雙環[4.2.2]癸基、雙環[4.3.1]癸基，雙環[4.4.0]癸基、雙環[3.3.3]H"—烷基、雙環[4.3.2]十一烷基、雙環[4.3.3]十二烷基和其類似基團。."環烯基，，是指具有一或多個不飽和碳-碳鍵的單環和雙環烴環，且通常具有指定構成環的碳原子的數值(亦即，Cw環烯基是指具有3，4，5，6或7個作為環成員的碳原子的環烯基)。除非連接會違背價鍵要求，環烯基可通過任何環原子連接至母體基團或連接至底物。同樣地，除非取代會違背價鍵要求，環烯基可包括一或多個非氫取代基。可用的取代基包括如上所定義的烷基、烯基、炔基、卣代烷基、滷代烯基、卣代炔基、烷氧基、烷氧羰基、烷醯基和卣代，且包括羥基、疏基，硝基和氨基。"芳基"和"亞芳基，，分別是指單價和二價芳基，包括含有o至4個獨立選自氮、氧和硫的雜原子的5員和6員單環芳族基團。單環芳基的實例包括苯基、吡咯基、呋喃基、蓉吩基、噢唑基、異塞唑基、咪唑基、三唑基、四唑基、吡唑基、惡唑基、異惡唑基、吡啶基，吡嗪基、噠溱基、嘧啶基和其類似基團。芳基和亞芳基亦包括雙環基團、三環基團等，包括上述5員和6員環的稠合基團。多環芳基的實例包括萘基、聯苯基、葸基、芘基，"t唑基，苯並惡唑基、苯並二惡唑基、苯並噻唑基、苯並咪唑基，苯並噻吩基喹啉基，異喹啉基、吲哚基、苯並呋喃基、嘌呤基、吲嗪基和其類似基團。除非連接會違背價鍵要求，芳基和亞芳基可通過任何環原子連接至母體基團或連接至底物。同樣地，除非取代會違背價鍵要求，芳基和亞芳基可包括一或多個非氫取代基。有用的取代基包括如上所定義的烷基、烯基、炔基、滷代烷基、面代烯基、離代炔基、環烷基、環烯基、烷氧基、環烷氧基、烷醯基、環烷醯基、環烯醯基、烷氧羰基、環烷氧基羰基和鹵素，且包括羥基、巰基、硝基、氨基和烷基氨基。"芳基烷基，，是指芳泰-烷基，其中芳基和烷基如上所定義。實例包括節基、勿基甲基和其類似基團。"離去基團"是指任何在片段化過程中(包括取代反應，消除反應和加成-消除反應)離開分子的基團。離去基團可為離核的，其中基團攜帶一對原先充當離去基團與所述分子之間的鍵的電子離開；或可為離電子的，其中基團未攜帶所述電子對離開。離核離去基團離開的能力視其鹼性強度而定，其中最強鹼性為最差的離去基團。常見的離核離去基團包括氮(例如，源自重氨鹽)；磺酸基，包括烷基磺酸根(例如，甲磺酸根)，氟烷基磺酸根(例如，三氟曱磺酸根、六氟丙磺酸根、九氟丁磺酸根和三氟乙磺酸根)和芳基磺酸根(例如，曱苯磺酸根、對溴苯磺酸根、對氯苯磺酸根和硝基苯磺酸根)。其它離核離去基團包括碳酸根、卣離子、羧酸根陰離;;子、酚鹽離子和烷氧化物。一些較強的鹼(諸如，冊r和0H—)可通過用酸處理而使其成為較好的離去基團。常見的離電子離去基團包括質子、C02和金屬。"對映異構體過量"或"ee"為給定樣品的一種對映異構體超過手性化合物的外消旋樣品的量的測定且以百分比表示。將對映異構體過量定義為100x(er-l)/(er+l)，其中"er"為較多量的對映異構體與較少量的對映異構體的比率。"非對映異構體過量"或"de"為給定樣品的一種非對映異構體超過具有等量非對映異構體的樣品的量的測定且以百分比表示。將非對映異構體過量定義為100x(dr-l)/(dr+l)，其中"dr"為較多量的非對映異構體與較少量的非對映異構體的比率。"立體選擇性"、"對映選擇性"、"非對映立體選擇性"和其變體是指可分別產生較另一種立體異構體、對映異構體或非對映異構體更多的立體異構體、對映異構體或非對映異構體的給定過程(例如，氫化)。"高度立體選擇性，，、"高度對映選擇性，，和"高度非對映立體選擇性"和其變體是指產生一種立體異構體、對映異構體或非對映異構體過量的產物的給定過程，所述立體異構體、對映異構體或非對映異構體佔這些產物的至少約90%。對一對對映異構體或非對映異構體而言，高度對映選擇性或非對映立體選擇性對應於至少約80%的ee或de。"立體異構體富集的，，、"對映異構體富集的"、"非對映異構體富集的"和其變體分別是指具有較另一種立體異構體、對映異構體或非對映異構體更多的一種立體異構體、對映異構體或非對映異構體的化合物樣品。富集程度可通過總產物的％來測定，或對一對對映異構體或非對映異構體面言，可通過ee或de來測定。指定化合物的"立體異構體，，是指所述化合物的相反對映異構體且是指所述化合物的任何非對映異構體或幾何異構體(Z/E)。例如，若指定化合物具有S，R，Z立體化學構型，則其立體異構體將包括其具有S,R，Z構型的相反對映異構體、其具有S，S,Z構型和R，R,Z構型的非對映異構體和其具有S，R，E構型、R，S，E構型、S，S，E構型和R,R，E構型的幾何異構體。"實質上純的立體異構體，，，"實質上純的對映異構體"，"實質上純的非對映異構體，，和其變體分別是指一種包含佔所述樣品至少約95%的立體異構體、對映異構體或非對映異構體的樣品。對於成對對映異構體和非對映異構體而言，實質上純的對映異構體或非對映異構體將對應於ee或de為約90%或更高的樣品。"純立體異構體"、"純對映異構體"、"純非對映異構體"和其變體分別是指一種含有佔所述樣品至少約99.5%的立體異構體，對映異構體或非對映異構體的樣品。對於成對對映異構體和非對映異構體而言，純對映異構體或純非對映異構體將對應於ee或de為約99%或更高的樣品。"相反對映異構體"是指作為參考分子的不可重疊的對映的分子，其可通過反轉所述參考分子的所有立體生成中心而獲得。例如，若參考分子具有S絕對立體化學構型，則相對對映異構體具有R絕對立體化學構型。同樣地，若參考分子具有S，S絕對立體化學構型，則相對對映異構體具有R,R立體化學構型等。"對映選擇性值"或"E"是指經歷化學反應或轉化後化合物的各對映異構體(或一對非對映異構體的各立體異構體)的特異性常數的比率且可通過以下表達式進行計算(對於S對映異構體)，C一K，/K:加一+!—-x9-!KVK鵬=l4-dl-eep』_hi〖l-X(l+ees)]'其中L和^分別為S和R對映異構體轉化的一級速率常數；KSM和K服分別為S和R對映異構體的米氏常數(Michaelisconstant);x為底物的轉化分數；eep和ees分別為產物和底物(反應物)的對映異構體過量。"脂肪酶單位"或"LU"是指當與三丁基錫和乳化劑(阿拉伯膠)在30匸和pH7下接觸時每分鐘可釋出lfimol可滴定的丁酸的酶量(g)。"溶劑合物，，是指包含所公開或主張的化合物和化學計量或非化學計量的量的一或多個溶劑分子(例如，乙醇)的分子絡合物。"水合物"是指包含所公開或主張的化合物和化學計量或非化學計量的量的水的溶劑合物。"藥學上可接受的絡合物、鹽、溶劑合物或水合物，，是指所主張和公開的化合物的絡合物、酸或鹼加成鹽、溶劑合物成水合物處於可靠的醫學判斷範圍內，適用於接觸患者的組織，無不適當的毒性、刺激、過敏反應和其類似反應，與合理的利益/風險比相稱，且有效用於其所期望的用途。"預催化劑"或"催化劑前體"是指可在使用前轉化為催化劑的一種化合物或一組化合物。"治療"是指逆轉、減輕、抑制所述術語所指的障礙或病症的進展，或預防所述術語所指的障礙或病症，或是指預防所述障礙或病症的一或多種症狀。"治療(treatment)"是指如上面剛剛定義的"治療(treating)"的4亍為。表l列出整個說明書中所使用的縮寫。縮寫描述Ac乙醜基ACN乙腈Ac20乙酸酐aq含水的(R，R)-BDPP(2R，4R)-(+)-2，4-雙(二苯膦基)戊烷BESN，N-雙(2-羥基乙基)_2-氨基乙磺酸(R)-BICHEP(R)-(-)-2,2，-雙(二環己基膦基)-6，6'-二曱基-i，r-聯苯BICINEN，N-雙(2-羥基乙基)甘氨酸(S，S)-BICP(2S,2'S)-雙(二苯膦基)-(IS,1'S)-二聯環戊烷BIFUP2，2'-雙(二苯膦基)-4，4',6，6'-四(三氟甲基)-l，l'-聯苯(R)-Tol-BINAP(R)-(+)-2，2'-雙(二對甲苯膦基)-l，l'-聯萘(S)-Tol-BINAP(S)-(+)-2，2'-雙(二對甲苯膦基)-1，1'-聯萘(R)-BIMP(R)-2，2'-雙(二苯膦基)-1'1-聯萘(S)-BINAP(S)-2，2'-雙(二苯膦基)-1'1-聯萘BIPHEP2，2'-雙(二苯膦基)-1，1'-聯苯(R)-Me0-BIPHEP(R)-(6，6'-二甲氧基聯苯-2，2'-二基)-雙(二苯基膦)(R)-C卜MeO-BIPHEP(R)-(+)-5,5'-二氯-6，6'-二甲氧基-2，2'-雙(二苯基膦基)-l，l'-聯苯(S)-Cl-MeO-BIPHEP(S)-(+)-5，5'-二氯-6，6'-二曱氧基-2，2'-雙(二苯基膦基)-1，1'-聯苯BisP*(S，S)-1,2-雙(叔丁基甲基膦基)乙烷(+)-tetraMeBITIANP(S)-(+)-2，2'-雙(二苯膦基)-4，4'，6，6'-四曱基-3，3'-二苯並[6]噻吩Bn卡基BnBr、BnCl苄基溴、苄基氯Boc叔丁氧基羰基B0P六氟磷酸苯並三唑-i-基氧基-三-(二甲氨基)-鱗(R)-(S)-BPPFA(-)-(R)-N,N-二曱基-l-((S)-1'，2-雙(二苯膦基)二茂鐵基)乙胺(R,R)-Et-BPE(+)-l，2-雙((2R，5R)-2，5-二乙基phospholano)乙烷(R，R)-Me-BPE(+)-l，2-雙((2R，5R)-2，5-二曱基phospholano)乙烷(S，S)-BPPM(-)-(2S，4S)-2-二苯膦基甲基-4-二苯膦基-1-叔丁氧基羰基吡咯烷BsBrosyl或對溴苯碌醯基Bun-BuLit-BuBuWBr—t-BuOKt-B感it-B函et-BuONa(+)-CAMP(R)-(+)-環己基(2-茴香基)曱基膦；-種單膦CARB0PH0S甲基-ot-D-葡萄吡喃糖苷-2，6-二苯曱酸酯-3，4_二(雙(3，5-二甲基苯基)次膦酸酯(phosphinite))Cbz節氧羰基CDIN，N-羰基二咪唑X轉化分數CnTunaPHOS具有連接聯苯的6，6'碳原子的-0-(CH2)n-0-基團的2，2'-雙-二苯基膦基-聯苯(例如，對n-4而言的(R)1，14-雙-二苯基膦基-6，7，8，9-四氫-5,10-二氧雜-二苯並[a，c]環癸烯)。COD1，5-環辛二烯(R)-CYCPHOS(R)-1，2-雙(二苯膦基)-l-環己基乙烷DABC01,4-二氮雜雙環[2.2.2]辛烷DBAD偶氮二甲酸二叔丁酯DBN1，5-二氮雜雙環[4.3.0]壬-5-烯DBU1，8"^二氮雜雙環[5.4.O]十一-7-烯DCC二《己基碳化二醯亞胺de非對映異構體過量DEAD偶氮二甲酸二乙酯(R，R)-DEGUPHOSN-爺基-(3R，4R)-3,4-雙(二苯膦基)吡咯烷DIAD偶氮二甲酸二異丙酯(R,R)-DI0P(4R,5R)-(-)-0-亞異丙基-2，3-二羥基-l，4-雙(二苯膦基)丁烷(R，R)-DIPAMP(R,R)-(-)-l，2-雙[(0-甲氧苯基)(苯基)膦基]乙烷DIPEA二異丙基乙胺(休尼格鹼(Httnig'sBase))銨醚基基鋰丁卻鋰甲鈉4基四醇醇基醇基丁丁化丁丁K丁丁正叔溴叔叔叔叔DMAP4-(二甲氨基)吡啶DMF二曱基甲跣胺DMS0二甲亞碸DMT-隨氯化4-(4,6-二甲氧基-l，3，5-三嗪-2-基)-4-曱基嗎啉翁鎮(R，R)-Et-DUPHOS(-)-l，2-雙((2R，5R)-2，5-二乙基phospholano)苯(S，S)-Et-DUPHOS(-)-1，2-雙((2S，5S)-2，5-二乙基phospholano)苯(R，R)-i-Pr-DUPHOS(+)-l，2-雙((2R，5R)-2，5-二異丙基phospholano)苯(R，R)-Me-DUPHOS(—)-1,2-雙((2R，5R)-2，5-二曱基phospholano)苯(S，S)-Me-DUPHOS(-)-l，2—雙((2S，5S)-2，5—二曱基phospholano)苯E在經歷化學反應或轉化後化合物的各對映異構體的對映選擇性值或特異性常數的比率EDCI1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺ee(eep或ees)對映異構體過量(產物或反應物)eq當量cr對映異構體的此率Et乙基Et3N三乙胺EtOAc乙酸乙酯Et20乙醚EtOH乙醇FDPP二苯基膦酸五氟苯酯(R，R)-Et-FerroTANE1，1'-雙((2R,4R)-2,4-二乙基phosphotano)二茂鐵9-勿基甲氧基羰基GC氣相色譜法H、min、s小時、分鐘、秒證ES4-(-羥基乙基).哌嗪-1-乙磺酸駆c乙^H0At1-羥基-7-氮雜苯並三唑H0BtN-羥基苯並三唑H0Dhbt3-羥基-3，4-二氫-4-氧基-1，2,3-笨並三嗪HPLC高效液相色譜法IAcOEt碘乙酸乙酯IPA異丙醇i-PrOAc乙酸異丙酯(R)-(R)-J0SIPH0S(R)-(-)-1-[00-2-(二苯膦基)二茂鐵基]乙基二環己基膦(S)-(S)-J0SIPH0S(S)-(-)-1-[(S)-2-(二苯膦基)二茂鐵基]乙基二環己基膦(R)-(S)-J0SIPH0S(R)-(-)-1-[(S)-2-(二苯膦基)二茂鐵基]乙基二環己基膦K畫S六甲基二矽氮烷鉀KFKarl—FischerKs、KrS或,R對映異構體的一級速率常數S或,'R對^異構體"米氏常數LAH氫化鋰鋁LC/MS液相色譜法/質鐠LDA二異丙基氨基鋰LHMDS六曱基二矽氮烷鋰LICA異丙基環己基氨基鋰LTMP2，2,6，6-四甲基艱咬LU脂肪酶單位Me甲基MeCl2二氯曱烷Mel碘甲烷MEK曱基乙基酮或丁-2-酮MeOH甲醇MeONa甲4鈉MES2-N-嗎啉基乙磺酸(R，R)-t-buty卜(R，R)-l,2-雙(二叔丁基甲基膦基)甲烷miniPHOS(S,S)MandyPhos(S，S)-(-)-2，2'-雙[(R)-(N,N-二曱氨基)(苯基)曱基]-1，1'-雙(二苯膦基)二茂鐵(R)-MonoPhos(R)-(-)-[4,N，N-二甲氨基]二萘並[1，3，2]-dioxaphosphepin(R)-MOP(R)-(+)-2-(二苯膦基)-2'-甲氧基-l,1'-聯萘MOPS3-(N-嗎啉基)丙磺酸MPamegaPascalmp炫點Ms曱磺醯基MTBE甲恭叔丁基醚NMPN-甲:基毗咯烷酮Nsnosyl或硝基苯碌醯基(R,R)-NORPHOS(2R，3R)-(-)-2，3-雙(二苯膦基)雙環[2.2.1〗庚-5-烯(HT三氟甲磺酸根(三氟甲磺酸陰離子)PdCl2(dppf)2二氟[1,1'-雙(二苯膦基)二茂鐵]鈀(II)二氯曱烷加合物(R,S，R，S)-Me-PENNP(IR，2S，4R,5S)-2，5-二甲基-7-磷雜雙環[2.2.1]庚烷HOSPh苯基Ph3P三苯基膦Ph3As三苯基胂(R)-PHANEPHOS(R)-(-)-4，12-雙(二苯膦基)-[2.2]-對環芳(paracyclophane)(S)-PHANEPHOS(S)-(-)-4，12-雙(二苯膦基)-[2-2]-對環芳(R)-PNNPN，N'-雙[(R)-(+)-ct-曱基苯曱基]-N，N'-雙(二苯膦基)乙二胺PPh2-PhOx-Ph(R)-(-)-2-[2-(二苯膦基)苯基]-4-苯基-2-惡唑啉PIPES哌奉「l'4，雙(2-乙磺酸)Pr丙基i-Pr異丙基(R)-PROPHOS(R)—(+)-1，2-雙(二苯膦基)丙烷PyB0P六氟磷酸苯並三唑-l-基-氧基-三-N-吡咯烷基-憐(R)-QUINAP(R)-(+)-1-(2-二苯膦基-l-萘基)異喹啉RaNiRaney鎳RI折射率RT室溫(大致20r至25t:)s/c底物與催化劑的摩爾比Sp物種(R)-SpirOP(1R，5R,6R)-螺[4.4]壬-1，6-二基-二苯基亞膦酸醋；一種螺環次膦酸酯配體(R,R,S，S)TangPhos(R，R，S,S)l，l'-二叔丁基-[2,2']biphospholanylTAPSN-[三(羥基甲基)甲基]-3-氨基丙磺酸TATU四氟硼酸0-(7-氮雜苯並三唑-l-基)-l，1，3，3-四甲基跟故(R)-eTCFP脈塌(R)-2-{[(二叔丁基-磷基)-乙基]-甲基-phosphanyl)-2-甲基-丙烷(S)-eTCFP(S)-2-{[(二叔丁基-磷基)-乙基]-甲基-phosphanyl)-2-甲基-丙烷(R)-mTCFP(R)-2-{[(二叔丁基-磷基)-甲基]-甲基-phosphanyl)-2-甲基-丙烷(%)-mTCFP(S)-2-[(二叔丁基-磷基)-甲基]-甲基-phosphanyl)-2-曱基-丙烷TEA三&醇胺TESN-[5(幾基甲基)甲基]-2-氨基乙磧酸TfTriflyl或三氟甲基磺醯基TFA三氟乙酸THF四氫吹喃TLC薄層色鐠法TMEDAN，N,N',N'-四甲基-1，2-乙二胺TMS三曱基甲矽烷基Tr三苯甲基TRICLNEN-[三(羥基甲基)甲基]甘氨酸Tris緩衝劑三(羥基曱基)氨基甲烷緩衝劑TRITONB氫氧化千基三曱基銨TRIZMA2-氨基-2-(羥基甲基)-1，3-丙二醇Ts曱苯磺醯基或對曱苯磺醯基p-TSA對甲苯磺酸v/v體積百分比w/w重量(質量)百分比以下一些方案和實例可能省略了有機化學領域普通技術人員已知的常見反應(包括氧化、還原等)、分離技術和分析程序的細節。這些反應和技術的詳細資料可在許多論文中查到，包括RichardLarock的ComprehensiveOrganicTransformations(1999)，以及MichaelB.Smith等人編輯的多巻叢書，CompendiumofOrganiCsyntheticMethods(1974-2005)。在許多情況下，起始物質和試劑可來自商業來源或可使用文獻方法進行製備。一些反應方案可能忽略由化學轉換產生的次要產物(例如，酯水解產生的醇，二酸脫羧基產生的C02等)。此外，在一些情況下，反應中間體在未被分離或純化下(即就地)即可用於隨後步驟中。在以下一些反應方案和實例中，某些化合物可使用保護基團進行製備，此方式可防止在另外的反應性位點發生不必要的化學反應。亦可使用保護基團以提高溶解度或者在其它方面改良化合物的物理性質。有關保護基團策略的討論，用於裝上和除去保護基團的材料和方法的描述和用於常見官能基(包括胺、羧酸、醇、酮、醛等)的可用保護基團的彙編參見T.W.Greene與P.G.Wuts的ProtectingGroupsinOrganicChemistry(1999)和P.Kocienski的ProtectiveGroups(2000)，為所有目的其全文引入本文中作為參考。一般而言，在整個說明書中所描述的化學轉換是使用大體上化學計量的量的反應物進行的，儘管某些反應可受益於使用過量的一或多種反應物。此外，在整個說明書中所公開的許多反應是在約室溫和周圍壓力下進行的，但取決於反應動力學、產率等，一些反應可在高壓下或採用較高(例如，回流條件)或較低(例如，-70匸至ox:)的溫度進行。許多化學轉換亦可採用一或多種兼容性溶劑，此可影響反應速率和產率。取決於反應物的性質，所述一或多種溶劑可為極性質子性溶劑(包括水)、極性非質子性溶劑、非極性溶劑或一些組合。在本公開內容中對化學計量範圍，溫度範圍、pH範圍等的任何提及，無論是否明確使用措辭"範圍"，亦包括所示的端點。一般而言且除非另有說明，如果首次結合一式而定義的特定取代基識別符(R1、R2、R3等)，則所述相同取代基識別符隨後的式中使用時具有與先前式中相同的定義。因此，例如，如果第一式1中的R"為氫、滷素或C卜6烷基，則除非有差別地說明或在本文的上下文中清楚地以其它方式說明，否則第二式1中的R"亦為氫、卣素或d—6烷基。本
發明內容涉及用於製備以上式1的光學活性Y-胺基酸和其立體異構體(例如，非對映異構體和相對對映異構體)和其藥學上可接受的絡合物、鹽、溶劑合物和水合物的材料和方法。所主張和公開的方法可提供立體異構體富集的且在許多情況下為純或大體上純的立體異構體的式1的化合物(或其立體異構體)。為清楚起見，本說明書描述了用於製備具有特定立體化學構型的中間體和最終產物的方法和材料。然而，通過使用具有不同立體化學構型的起始物質、拆分劑、手性催化劑等，這些方法可用於製備所公開產物和中間體的相應非對映異構體和相反對映異構體。式1的化合物具有至少兩個立體中心，如由楔形鍵所示，且包括如上所定義的取代基R1、W和R3。式l的化合物包括那些其中^和R2各自獨立為氫或曱基的化合物，其限制條件為r和R2不同時為氫；和那些其中W為d—6烷基(包括甲基、乙基、正丙基或異丙基)的化合物。式1的代表性化合物亦包括那些其中^為氫，112為甲基且113為甲基、乙基、正丙基或異丙基的化合物，即(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-庚酸、(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸、(3S，5R)-3-氨基曱基-5-甲基-壬酸或(3S，5R)-3-氨基甲基-5，7-二甲基-辛酸。所述後述化合物的代表性非對映異構體為(3R，5R)-或(3S，5S)-3-氨基甲基-5-甲基-庚酸、(3R，5R)或(3S，5S)-3-氨基甲基-5-曱基-辛酸、(3R，5R)或(3S，5S)-3-氨基甲基-5-甲基-壬酸和(3R，5R)或(3S，5S)-3-氨基甲基-5，7-二曱基-辛酸;代表性相反對映異構體為(3R，5S)-3-氨基曱基-5-甲基-庚酸、(3R，5S)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸，(3R,5S)-3-氨基甲基-5-甲基-壬酸和(3R，5S)-3-氨基甲基-5，7-二甲基-辛酸。方案1顯示兩種用於製備式1的化合物的方法。這些方法包括<吏手性醇(式2)與活化劑(式3)反應。使所得的活化醇(式4)與2-氰基琥珀酸二酯(式5)反應以得到具有由波狀鍵表示的第二立體中心的2-烷基-2-氰基琥珀酸二酯(式〖6)。隨後使直接連接至所述笫二不對稱碳原子的酯部分(參看式6)裂解以得到3-氰基羧酸酯(式7)，所述3-氰基羧酸酯可通過與拆分劑抑或酶接觸而轉化為需要的最終產物(式1)。在前一方法中，使酯(式7)水解以得到3-氰基羧酸(式8)或鹽。使氰基部分(參看式8)還原經酸化(如果需要)得到Y-胺基酸(式9)，所述Y-胺基酸可通過與拆分劑(例如，手性酸)接觸而拆分，接著分離需要的非對映異構體鹽或游離胺基酸(式1)。或者，使單酯(式7)的一個非對映異構體通過與酶接觸而非對映立體選擇性地水解，結果形成富集在C-3上具有所需的立體化學構型的3-氰基羧酸或酯(式IO)的混合物。將酯或酸(式IO)與木需要的非對映異構體(式ll)分離，且使其水解(如果需要)以得到純的或基本上純的3-氰基羧酸的非對映異構體(式10a)，或者可使其轉化為鹽。使氰基部分還原經酸處理(如果需要)得到式1的化合物。formulaseeoriginaldocumentpage36方案I在式2、式4和式6至式12中的取代基R1、R'和r如以上式1中所定義；式3中的取代基Fr選自甲苯磺醯基、曱磺醯基、對溴苯磺醯基、對氯苯磺醯基、硝基苯磺醯基(nosyl)和三氟甲基磺醯基；式4中的取代基R5為離去基團(例如，R40-);且式3中的取代基X'為卣素(例如，C1)或R40-。式5至式7中的取代基W和R'各自獨立選自Ch烷基、C2—6烯基、Cw炔基、Cw環烷基、Cw環烯基、面代-Ch坑基、滷代-C^烯基、g代-C2—6炔基、芳基-d-6烷基、芳基-Ch蹄基和芳基-Ch快基。式10和式11中的取代基118和R'各自獨立選自氫、C卜6烷基、Cw烯基、Cw炔基、Cw環烷基、Cw環烯基、卣代-CH烷基、由代-Cw烯基、面代-Ch快基，芳基-d-6烷基-、芳基-(V6蜂基和芳基-Ch炔基。其中上述芳基部分中的每一個任選被1至3個獨立選自C卜3烷基、Cw烷氧基、氨基、Cw烷基氨基和面素的取代基取代。X為合適的抗衡離子；優選鹼金屬；更優選鈉。方案I中所示的手性醇(式2)在C-2上具有一個由楔形鍵所示的立體中心且包括如上所定義的取代基R1、W和R3。式2的化合物包括那些其中W和W各自獨立為氫或甲基的化合物，其限制條件為W與W不同時為氫；以及那些其中W為d—6烷基(包括甲基、乙基、正丙基或異丙基)的化合物。式2的代表性化合物亦包括那些其中IC為氫、W為甲基且W為甲基、乙基、正丙基或異丙基的化合物，即(R)-2-甲基-丁-l-醇、(R)-2-甲基-戊-l-醇、(R)-2-甲基-己-l-醇或(R)-2，4-二甲基-戊-l-醇。後述化合物的代表性相反對映異構體為(S)-2-甲基-丁-l-醇、(S)-2-曱基-戊-l-醇、(S)-2-甲基-己-l-醇和(S)-2，4-二甲基-戊-l-醇。如方案I中所示，手性醇(式2)的羥基部分經由與式3的化合物反應而活化。反應通常用過量(例如，約1.05eq至約1.1eq)活化劑(式3)在約-25匸至約室溫的溫度下進行。可用活化劑包括磺醯化劑，諸如，TsCI、MsCI、BsCI、NsCI、TfCl等，和它們相應的酐(例如，對甲苯磺酸酐)。因此，例如，在吡啶和非質子性溶劑(諸如，EtOAc、MeCl2、ACN、THF和其類似物)存在下，使式2的化合物與TsCl反應得到(R)-甲苯-4-磺酸2-甲基-丁酯、(R)-甲苯-4-磺酸2-甲基-戊酯、(R)一甲苯-4-磺酸2-甲基-己酯和(R)-甲苯-4-磺酸2，4-二甲基-戊酯。同樣地，在非質子性溶劑(諸如，MTBE、甲苯或MeCl2)和弱鹼(諸如，Et3N)存在下，使式2的化合物與MsCI反應得到(R)-甲磺酸2-甲基-丁酯、(R)-甲磺酸2-甲基-戊酯、(R)-甲磺酸2-甲基-己酯和(R)-甲磺酸2，4-二甲基-戊酯。羥基部分活化後，在鹼和一或多種溶劑存在下，使所得中間體(式4)與2-氰基琥珀酸二酯(式5)反應得到2-烷基-2-氰基琥珀酸二酯(式6)。式5的代表性化合物包括2-氰基-琥珀酸二乙酯。同樣地，式6的代表性化合物包括(2'R)-2-氰基-2-(2'一甲基-丁基)-琥珀酸二乙酯、(21)-2-氰基-2-(2'-甲基-戊基)-琥珀酸二乙酯、(2'R)-2-氰基-2-(2'-甲基-己基)-琥珀酸二乙酯，和(2'R)-2-氰基-2-(2'，4'-二甲基-戊基)-琥珀酸二乙酯。烷基化作用可在範圍為約室溫至回流、約70t:至1101C或約901C至約IOOX:的溫度下使用化學計量或過量的量(例如，約leq至約1.5eq)的鹼和二酯(式5)進行。代表性的鹼包括第l族金屬的碳酸鹽(例如，CS2C。3和K2C03)、磷酸鹽(例如，K3P0J和烷氧化物(例如，21%Na0Et於EtOH中)和位阻非親核性鹼(諸如，Et3N，t-BuOK、DBN、DBU等)。反應混合物可包含單一有機相或可包含水相、有機相和相轉移催化劑(例如，四烷基銨鹽，諸如，Bu4N+Br-)。代表性有機溶劑包括極性質子性溶劑，諸如，MeOH、EtQH、i-PrOH和其它醇；極性非質子性溶劑，諸如，EtOAc、i-PrOAc、THF、MeCl2和ACN;和非極性芳族和脂族溶劑，諸如，曱苯、庚烷等。在烷基化後，使直接連接至第二不對稱碳原子的酯部分(參看式6)裂解以得到3-氰基羧酸酯(式7)，諸如，(5R)-3-氰基-5-甲基-庚酸乙酯、(5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸乙酯、(5R)-3-氰基-5-甲基-壬酸乙酯和(5和)_3-氰基-5，7-二甲基-辛酸乙酯。可通過使二酯(式6)與氯化物鹽(例如，LiCl、NaCl等)在極性非質子性溶劑(諸如，含水DMS0、NMP等)中且於約135X:或更高的溫度下(即Krapcho條件)反應而除去酯。可使用更高溫度(例如，150X:，160匸或更高)或使用相轉移催化劑(例如，Bii4N+Br-)以將反應時間降低至24小時或更短。通常反應釆用過量的氯化物鹽(例如^約l.leq至約4eq或約1.5eq至約3.5eq)。如方案I中所示且如上所表明，可通過與拆分劑接觸使-3-氰基羧酸酯(式7)轉化為需要的產物(式1)。在此方法中，經由與酸或鹼水溶液接觸使酯(式7)水解得到3-氰基羧酸(式8)或鹽。例如，可使用HC1、H2S04等且使用過量H20處理式7的化合物以得到式8的羧酸。或者，可使用無機鹼水溶液(諸如，LiOH、K0H、NaOH、CsOH、Na2C03、K2C03、CS2C03等)，在任選的極性溶劑(例如，THF、MeOH、EtOH、丙酮、ACN等)中處理式7的化合物得到鹼加成鹽，可使用酸處理所述鹼加成鹽生成3-氰基羧酸(式8)。式$的代表性化合物包括(5R)-3-氰基-5-甲基-庚酸、(5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸、(5R)-3-氰基-5-曱基-壬酸和(5R)-3-氰基-5，7-二曱基-辛酸，及其鹽類。隨後可使羧酸(式8)或其相應鹽的氰基部分還原以在酸處理後(如果需要)得到Y-胺基酸(式9)。通過用弱酸(諸如，H0Ac水溶液)處理Y-胺基酸的鹽而獲得倒數第二步的游離酸。式9的代表性化合物包括(5R)-3-氨基甲基-5-甲基-庚酸、(5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸、(5R)-3-氨基曱基-5-甲基-壬酸和(5R)-3-氨基甲基-5，7-二甲基-辛酸，及其鹽類。經由在催化劑存在下與&反應或經由與還原劑(諸如，LiAlH4、BH3-Me2S等)反應可使氰基部分還原。除Raney鎳和其它海棉狀金屬催化劑的外，潛在可用的催A劑包括非均勻催化劑，其含有約0.1%至約20%或約1%至約5%(按重量計)的過渡金屬(諸如，Ni、Pd,Pt,Rh、Re、Ru和Ir，包括其氧化物和組合)，且其通常通過負載於各種材料上(包括Al20"C、CaC03、SrC03、BaS04、Mg0、Si02、Ti02、Zr02等)。這些金屬中的許多金屬(包括Pd)可摻雜胺、硫化物或第二金屬(諸如，Pb、Cu或Zn)。例示性催化劑因此包括鈀催化劑，諸如，Pd/C，Pd/SrC03、Pd/Al203、Pd/Mg0、Pd/CaC03、Pd/BaS04、Pd0、Pd黑、PdCl2等，其含有以重量計約1%至約5%的Pd。其它催化劑包括Rh/C，Ru/C、Re/C、Pt02、Rh/C、跳等。氰基部分的催化還原通常是在一或多種極性溶劑存在下進行，這些極性溶劑包括但不限於水、醇、醚、酯和酸、諸如，MeOH、EtOH、IPA、THF、EtOAc和H0Ac。反應可在範圍為約5匸至約IOOX:的溫度下進行，儘管反應通常在室溫下進行。一般而言，以重量計，底物與催化劑的比率可在約1:1至約1000:1的範圍內，且&壓力可在氣壓為約0psig至約1500psig的範圍內。更通常而言，底物與催化劑的比率可在約4:1至約20:1的範圍內，且&壓力可在約25psig至約150psig的範圍內。如方案1中所示，拆分倒數第二步Y-胺基酸(式9)得到需要的立體異構體(式l)。可經由與拆分劑(諸如，對映體純或基本上純的酸或鹼(例如，S-扁桃酸、S-酒石酸等))接觸得到一對可經由(例如)重結晶或色譜法分離的非對映異構體(例如具有不同溶解度的鹽)而拆分所述胺基酸(式9)。隨後可從適當非對映異構體經由(例如)與鹼或酸接觸或經由溶劑分離(例如與EtOH、THF等接觸)，使具有需要的立體化學構型的Y-胺基酸(式1)再生。可經由在合適溶劑中多次重結晶進一步富集需要的立體異構體。除如上所述使用拆分劑之外，可經由與酶作用將3-氰基羧酸酯(式7)轉化為需要的產物(式1)。如方案I中所示且如上討論，可經由與酶接觸使單酯(式7)的一個非對映異構體非對映立體選擇性地水解，結果形成含有在C-3上具有所需立體化學構型的3-氰基羧酸(或酶)(式IO)和在C-3上具有相反(不需要的)立體化學構型的3-氰基羧酸酯(或酸)(式ll)的混合物。式10的代表性化合物包括(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-庚酸、(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸、(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-壬酸和(38，510-3-氰基-5，7-二曱基-辛酸，及其鹽類，以及上述化合物的CH烷基酯，包括(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-庚酸乙酯、(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸乙酯、(3S，5R)-3-氰基-5-曱基-壬酸乙酯和(3S，5R)-3-氰基-5，7-二曱基-辛酸乙酯。式11的例示性化合物包括(3R，5R)-3-氯基-5-甲基-庚酸，(3R，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸，(3R，5R)-3-氰基-5-甲基-壬酸和(3R，5R)-3-氰基-5，7-二甲基-辛酸及其鹽類，以及上述化合物的C"烷基酯，包括(3R，5R)-3-氰基-5-甲基-庚酸乙酯、(3R，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸乙酯、(3R，5R)-3-氰基-5-甲基-壬酸乙酯和(3R，5R)-3-氰基-5，7-二曱基-辛酸乙酯。對用於拆分需要的非對映異構體(式10)的酶(生物催化劑)的選擇取決於底物(式7)和生物轉化產物(式10或式11)的結構。底物(式7)包含兩種在C-3上具有相反立體化學構型的非對映異構體(式13和式14),formulaseeoriginaldocumentpage41在式13和式14中，取代基R1、W和W如以上式1和式5中所定義。所述酶使所述兩種非對映異構體(式13或式14)中之一立體選擇性水解。因此，所述酶可為任何在對式13的化合物僅有很小或沒有影響的同時催化式14的化合物水解得到式11的3-氰基羧酸(或鹽)的蛋白質。或者，所述酶可為任何在對式14的化合僅有很小或沒有影響的同時催化式13的化合物水解得到式10的3-氰基羧酸(或鹽)的蛋白質。用於使式13或式14的化合物分別非對映立體選擇性水解為式10或式11的化合物的可用的酶因此包括水解酶，包括脂肪酶、某些蛋白酶和其它立體選擇性酯酶。這些酶可得自多種天然來源，包括動物器官和微生物。參看(例如)市售水解酶的非限制性列表-表2。表2.市售可獲得的水解酶酵商品名豬胰腺脂肪酶CAL-A，凍幹解脂念珠菌(Candidalipolytica)脂肪酶CAL-B，凍幹"念珠地絲菌(Geotrichumcandidum))脂肪酶Pseudomonasaroginosag月旨肪膝假單胞菌屬(PseudomonasSp.)酯酶黑麴黴(Aspergillusniger)脂肪酶洋蔥-4白克霍爾德氏菌(Burkholderiacepacia)月旨肪酶螢光假單孢菌(Pseudomonasfluoresceins)月旨肪酶皺落念^菌(Candidarugosa)脂肪酶德氏根黴(Rhizopusdelemar)月旨脈酶米根黴(Rhizopusoryzae)脂肪酶沙門柏千酪青黴(Penici11iumcamembertii)脂肪酶Altus03Altus11Altus12Altus13Altus28Altus50AmanoCholesterolEsterase2Amano月旨肪酶ASAmano月旨脈酶AHAmano月旨肪酶AK20Amano脂肪酶AYSAmano月旨肪酶DAmano脂肪酶F-AP15Amano月旨肪酶G50爪哇毛黴(Mucorjavanicus)脂脒酶洋蔥伯克霍爾德氏菌(Burkholderiacepacia)脂肪酶洋蔥伯克霍爾德氏菌(Burkholderiacepacia)脂肪醉洋蔥伯克霍爾德氏菌(Burkholderiacepacia)脂肪酵洋蔥伯克霍爾德氏菌(Burkholderiacepacia)脂肪酶洋蔥伯克霍爾德氏菌(Burkholderiacepacia)脂肪酵婁地青黴(PeniciIliumroqueforti)脂肪酶洋蔥伯i霍爾德氏菌(Burkholderiacepacia)脂肪酵麴黴菌(Aspergillus)屬蛋白酶假單胞菌屬脂肪酶真菌脂肪酶微生物，凍幹脂肪酶，CAL-B，凍幹'念珠菌(Candida)屬，凍幹CAL-A，凍千嗜熱黴(Thermomyces)屬脂肪酶產鹼桿菌(Alcaligines)屬，凍幹脂肪酶粘稠色桿菌(Chromobacteriumviscosum)月旨肪酶CAL-B，L2Sol柱狀念珠菌(Candidacylindrac6a)月旨肪酶產肌念珠菌(Candidautilis)脂肪酶雪白根黴(Rhizopusniveus)月旨肪酶豬胰脂肪酶假單胞菌(Pseudomonas)屬脂蛋白脂肪酶細毛嗜熱黴(Thermomuceslanuginosus)月旨肪酶細毛嗜熱黴(Thermomuceslanuginosus)月旨肪酶曼赫根毛黴(Rhizomucormiehei)脂肪酶假單胞菌屬脂肪酶麥胚脂肪酶■少才^t艮黴(Rhizopusarrhizus)脂肪酶胰脂肪酶250木瓜凝乳蛋白酶黑麴黴(Aspergillusniger)蛋白酶米曲i(Aspergillusoryzae)蛋白酶青黴^(Penicillium)屬蛋白酶麴黴菌(Aspergillus)屬蛋白酶腎素小牛胃蛋白酶A邁ano月旨脈酵M10Amano脂肪酶PSAmano月旨肪酶PS-SDAmano脂肪酶PS-CIAmano脂肪酶PS-CIIAmano脂肪酶PS-DIAmano月旨肪酶RAmano月旨肪酶SBioCatalytBioCatalytBioCatalytiBioCatalytBioCatalytBioCatalytBioCatalytics101ics103cs105ics108ics110ics111ics112BioCatalytics115BioCatalytics117Altus26ChriazymeL2SolFluka62302Fluka6SigmaL8SigmaL12SigmaL13SigmaLipolaseSigmaL10Novo871SigmaL6Palatasesig咖L14XIII型SigmaLllSigmaL7XI型ValleyResearchVIAltus33Altus38Altus40Altus41Altus42Altus43Altus45SigmaP24嘉士伯枯草桿菌蛋白酶(Subti1isinCarlsbergProtease)遲緩芽胞桿菌(Bacilluslentus)蛋白酶真菌蛋白酶真菌蛋白酶細菌蛋白酶蛋白酶細菌蛋白酶細菌蛋白酶細菌蛋白酶細菌蛋白酶黑麴黴(Aspergillusniger)蛋白酶雪白根黴(Rhizopusniveus)蛋白酶雪白根黴(Rhizopusniveus)蛋白酶米根黴(Rhizopusoryzae)蛋白酶枯草芽胞桿菌(Bacillussubtilis)蛋白酶米麴黴(Aspergillusoryzae)蛋白酶米曲i(Aspergfflusoryzae)蛋白酶枯草芽胞桿菌(Bacillussubtilis)蛋白酶蜂蜜麴黴(Aspergillusmelleus)蛋白酶嗜熱月旨肪芽孢桿菌(Bacillusstearothemophilus)蛋白酶豬肝酯酶，凍幹豬肝酯酶，凍幹鏈黴菌(Streptomyces)屬蛋白酶白i軸酶Tritirachiumalbum)蛋白酶灰色鏈黴菌(Str印tomycesgriseus)蛋白酶溶組織梭菌(Clostridiumhistolyticum)'蛋白酶牛腸蛋白酶豬腸蛋白酶芽孢桿菌(Baci1lus)屬蛋白酶米麴黴(Aspergillusoryzae)蛋白酶解澱粉芽孢扦菌(Bacillusamyloliquefaciens)蛋白酶Caricapapaya蛋白酶嗜熱解朊芽孢桿菌蛋白酶(Baci1lusthermoproteolyticusrokko)激烈火球菌(Pyrocoecusfuriosis)蛋白酶芽孢桿菌(Bacillus)屬蛋白酶牛胰蛋白酶多粘芽孢桿菌(Bacilluspolymyxa)蛋白酶地衣餘孢桿菌(Baci1lus1icheniformis)蛋白酶齋藤麴黴(Aspergillussaitoi)蛋白酶4油曲i(Aspergillussoyae)蛋白酶Altus10Altus53Genencor真菌蛋白酶500,000GenencorFungal蛋白酶濃縮物GeneneorProtexGenencor蛋白酶899GeneneorMultifectP3000GenencorPrimatanGenencorPurafect(權OL)GenencorMultifectNeutralAmanoAcid蛋白酶AAnianoAcid蛋白酶IIAmartoNewlaseFAmanoPeptidaseRAmanoProleatherFGFAmano蛋白酶AAmano蛋白酵MAmano蛋白酶NAmano蛋白酶PIOAmano蛋白酶SGBioCatChirazymeElBioCatChirazymeE2BioCatalytics118FlukaP6ProteinaseKSigmaP18a胰凝乳蛋白酶ISigmaP16BacterialSigmaP21P胰凝乳蛋白酶SigmaP13ClostripainSigmaP17EnteropeptidaseSigmaP25EnteropeptidaseSigmaP8EsperaseSigmaPIFlavourzymeSigmaP5NeutraseSigmaP12PapainSigmaP10蛋白酶SigmaP14蛋白酶SSigmaP9SavinaseSigmaPI91型(粗製)SigmaP7IX型SigmaP6VIII型SigmaP3XIII型SigmaP4XIX型米麴黴(Aspergillusoryzae)蛋白酶細菌蛋白酶根黴(Rhizopus)屬新脂肪酶米麴黴(Aspergi1lusoryzae)蛋白酶鳳梨[Ananascomosus&Anauas'brecteatus麴黴菌(Aspergilus)屬醯基轉移酶豬腎醯基轉移酶青黴素G醯基轉移酶得自米黑毛黴(Mucormeihei)的酯酶皺落念珠菌(Candidarugosa)酯酶豬胰彈性蛋白酶乙醯膽鹼酯酶膽固醇酯酶PLE-硫酸銨兔肝酯酶假單胞菌(Pseudomonas)屬膽固醇酯酶說明書第37/72頁SigmaP2XXIII型SigmaPllXXIV型Sigmal5NewlaseValidaseFP濃縮物(L)]Bromelian濃縮物AmanoAmiSigmaA-S2醯基轉移酶IAltus06FlukaE5Altus31Altus35SigmaES8BioCatalytiesE3BioCatalyties123SigmaES2SigmaES4如實例部分中所示，可用於使被氰基取代的酯(式13或式14)的非對映立體選擇性轉化為式IO或式11的羧酸(或鹽)的酶包括脂肪酶。特別可用於使式14的被氰基取代的酯轉化為式11的羧酸(或鹽)的脂肪酶包括源自微生物洋蔥伯克霍爾德氏菌(肋ri:力o/^Wacepflc/a)(以前稱為洋蔥假單胞菌C^ew^W70/7fl《ee/ac/a))的酶，諸如那些可自AmanoEnzymeIne.購得的商品名為PS、PS-SD、PS-CI、PS-CII、PS-DI和S的酶。這些酶可以自由流動粉末(PS)形式或凍乾粉末(S)形式獲得，或可固定於陶瓷顆粒(PS-CI和PS-CII)或硅藻土(PS-DI)上。它們具有在約30KLu/g(PS)至約2，200KLu/g(S)範圍內的脂解活性。自AmanoEnzymeInc.購得的脂肪酶PS-SD為用於本發明的方法中的優選酶。特別可用於使式13的被氰基取代的酯轉化為式10的羧酸(或鹽)的脂肪酶包括源自微生物細毛嗜熱黴(r力ei7Z70/Z77CeS/3力"糹//70《^)的酶，諸如那些自Novo-NoEdis^A/S購得的商品名為LIP0LASE⑧的酶。LIP0LASE⑧酶可通過浸沒發酵米麴黴C^/7ei^/7/"s0r7we)微生物而獲得，所述種米麵黴微生物用來自編碼脂肪酶的胺基酸序列的細毛嗜熱黴(7^ei7so邊yces/fl;7"gi/20^/i)DSM4109的DM進行遺傳修飾。LIP0LASE100L和LIP0LASE⑧100T可分別以液體溶液和粒狀固體形式獲得，其各具有100kLU/g的標稱活性(norminalactivity)。其它形式的LIPOLASE⑧包括活性為LIPOLASE100L的一半的LIPOLASE50L和活性與LIPOLASE100L相同但為食品級的LIPOZYMEIOOL。各種篩選技術可用於鑑別合適的酶。舉例而言，可使用下面在實例部分中所述的高通量篩選技術篩選大量市售的酶。可使用富集分離技術'歸選其它酶(或酶的微生物來源)。這些技術通常涉及使用用富集底物補充的碳有限或氮有限的培養基，所述富集底物可為底物(式7)或結構上相似的化合物。可基於微生物在含有富集底物的培養基中生長的能力來選擇潛在可用的微生物以用於進一步研究。隨後通過使微生物細胞的懸浮液與未被拆分的底物接觸且使用分析方法(諸如，手性HPLC、氣相-液相色鐠法、LC/MS等)測試需要的非對映異構體(式10)的存在來評估這些微生物立體選擇性催化酯水解的能力。一旦已經分離出具有必需水解活性的微生物，即可採用酶工程以改善其所產生的酶的性質。例如但不限於，可使用酶工程以增加產率和酯水解的非對映立體選擇性，使酶的溫度和pH操作範圍加寬，和改良酶對有機溶劑的耐受性。可用的酶工程技術包括合理設計方法(諸如定點突變)和利用連續多輪隨機突變，基因表達以及高通量篩選以優化所需性質的體外定向進化技術。參看，例如K.M.Koeller&C.-H.Wong,"Enzymesforchemicalsynthesis,"Nature409:232-240(2001年l月11日)和在此處所引用的參考文獻，其完整的公開內容以引用的方式併入本文中。酶可呈完整微生物細胞、透性化微生物細胞、微生物細胞的提取物、部分純化的酶、純化的酶等。以體積計，酶可包含平均粒徑小於約0.lmm(細分散體)或約0.lmm或更大(粗分散體)的顆粒的分散體。粗酶分散體提供優於細分散體的潛在加工優勢。例如，粗酶顆粒可在分批法中或在半連續或連續方法中重複使用，或比酶的細分散體通常更易於從生物轉化的其它組份中分離(例如通過過濾)。可用的粗酶分散體包括主要包含酶的交聯酶結晶(CLEC)和交聯酶聚集體(CLBA)。其它粗分散體可包括固定於不溶性支撐物之上或之內的酶。可用固體支撐物包括包含海藻酸鉤、聚丙烯醯胺、EUPERG1T和其它聚合材料的聚合物基質和無機基質，諸如CELITE⑧。有關CLEC和其它酶固定技術的一般描述參看M.A.Navia&N.L.St.Clair的美國專利5,618,710。有關CLEA的一般描述，包括它們的製備和用途參看L.Cao&J.Elzinga等人的美國專利申請2003/0149172。有關將CLEC和CLEA技術應用於脂肪酶的論述還可參見A.M.Anderson的BiocatBiotransform,16:181(1998)和P.L6pez-Serrano等人的Bioteehnol,Lett.2,:1379-83(2002)。為所有目的，上述參考文獻的完整公開內容以引用的方式併入本文中。反應混合物可包含單一相或可包含多相(例如，兩相系統或三相系統)。因此，例如，方案I中所示的非對映立體選擇性水解可在單一水相中發生，所述單一水相含有酶、底物(式7)、需要的非對映異構體(式IO)和不需要的非對映異構體(式11)。或者，反應混合物可包含多相系統，所述多相系統包括接觸固相(例如，酶或產物)的水相、接觸有機相的水相或接觸有機相和固相的水相。例如，非對映立體選擇性水解可在包含固相和水相的兩相系統中進行，所述固相含有酶，且所述水相含有底物(式7)、需要的非對映異構體(式IO)和不需要的非對映異構體(式ll)。或者，非對映立體選擇性7JC解可在包含固相、有機相和水相的三相系統中進行，所述固相含有酶，所述有機相含有底物(式7)，且所述水相一開始即含有底物的少量級分。在某些情況下，需要的非對映異構體(式10)為羧酸，其具有較未反應的酯(式14)低的pKa。因羧酸呈現較高的水溶解性，故有機相發生未反應的酯(式")的富集，同時水相發生需要的羧酸(或鹽)的富集。在其它情況下，不需要的非對映異構體(式ll)為羧酸，故有機相發生需要的未反應的酯(式13)的富集，同時水相發生不需要的羧酸(或鹽)的富集。優選地，使不需要的非對映異構體(式ll)選擇性水解為羧酸，羧酸在水相中為可溶的，同時使需要的非對映異構體(式10的酯)未反應且仍留在有機相中。在立體選擇性水解中使用的底物(式7)和生物催化劑的量將特別取決於被氰基取代的酯和酶的性質。然而，一般而言，反應可採用初始濃度為約0.1M至約5.0M的底物，且在許多情況下，底物的初始濃度為約0.1M至約l.OM。此外，反應可通常採用約1%至約20%的酶載量，且在許多情況下，可採用約5%至約15%(重量/重量)的酶栽量。立體選擇性水解可在一定溫度和pH的範圍內進行。例如，反應可在約iox:至約6ot:的溫度下進行，但通常在約室溫至約45ic的溫度下進行。在合理量的時間內(例如，約1小時至約48小時或約1小時至約24小時)，這樣的溫度通常以約80%或更高(例如98%)的de(3S，5R非對映異構體)使底物(式7)基本上完全轉化(例如，約42%至約50%)，同時酶未失活。此外，立體選擇性水解可在約5的pH至約11的pH下進行，更通常在約6的pH至約9的pH下進行，且經常在約6.5的pH至約7.5的pH下進行。在未控制pH的情況下，因隨著底物(式7)水解的進行會生成羧酸(式10或式11)，故反應混合物的pH將下降。為補償這種改變，可在控制內部pH的情況下(例如在合適緩衝劑存在下)進行水解反應，或可在通過添加鹼控制內部pH的情況下進行水解反應。合適緩衝劑包括碳酸氫鈉、磷酸鉀、磷酸鈉、乙酸鈉,、乙酸銨、乙酸鈣、BES、BICINE、HEPES、MES、MOPS、PIPES、TAPS、TES、TRICINE、Tris、TRIZMA⑧或其它pKa為約6至約9的緩沖劑。緩衝劑濃度通常在約5mM至約lmM的範圍內，且通常在約50mM至約200mM的範圍內。合適鹼包括包含KOH、NaOH、麗4011等的水溶液，所述水溶液的濃度在約0.SM至約15M的範圍內，或更通常在約5M至約IOM的範圍內。也可使用其它無機添加劑，諸如乙酸鉤。在底物(式7)發生酶轉化之後或期間，使用標準技術從產物混合物分離出需要非對映異構體(式10)。例如，在單一(水)相分批反應的情況下，可使用有機溶劑(諸如，己烷、庚烷、MeCl2、甲苯、MTBE、THF等)一或多次萃取產物混合物，此舉使分別在水(有機)和有機(水)相中的在C-3上具有需要立體化學構型的酸(酯)(式10)從不需要的酯(酸)(式ll)中分離。或者，在採用富集酸或酯的水相和有機相的多相反應的情況下，可在反應後以分批方式分離兩種非對映異構體(式10和式11)，或可在立體選擇性水解期間半連續或連續地分離兩種非對映異構體。如方案1中所示，一弄需要的非對映異構體(式IO)從反應混合物分離，即任選使用以上與式7的化合物的酯水解相關的條件和試劑對其進行水解。隨後可使所得羧酸(式1Qa)或其相應鹽的氰基部分還原，經酸處理後(如果需要)得到需要的Y-胺基酸(式1)。所述還原可採用與以上所述的用於使式8的化合物的氰基部的分還原相同的條件和試劑且可在不分離式10a的氰基酸的情況下進行。式10a的代表性化合物包括(3S，5R)-3-氰基-5-曱基-庚酸、(3S,5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸、(3S,5R)-3-氰基-5-曱基-壬酸和(3S，5R)-3-氰基-5，7-二甲基-辛酸，及其鹽類。如方案I中所示，可使需要的非對映異構體(式10)轉化為適當鹽，優選轉化為鹼金屬鹽。隨後使所得鹽的氰基部分還原以得到需要Y-胺基酸(式l)的鹽。所述承原可採用與以上所述的用於使式8的化合物的氰基部分的還原相同的條件和試劑。接著可進一步將所得式1的化合物的鹽轉化為游離酸或轉化為其藥學土可接受的鹽、溶劑合物或水合物。式10a的化合物的優選鹽為(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸的鈉鹽。可使用各種方法製備方案1中所示的手性醇(式2)。例如，可使用以上所述的與式7的化合物的酶拆分有關的條件和試劑通過外消旋酯的立體選擇性的酶介導的水解來製備手性醇。例如，在水解酶(例如，脂肪酶)和水存在下可使正癸酸2-甲基-戊酯水解以得到純的(或基本上純的)手性醇(R)-2-甲基-戊-l-醇，其可通過分餾而與非手性酸和未反應的手性酯(正癸酸和(S)-戊酸2-曱基-戊酯)分離。酯底物可使用本領域中已知的方法由相應外消旋醇(例如2-甲基-戊-l-醇)和醯氯(例如正癸醯氯)或酐製備。或者，可通過被適當取代的2-鏈烯酸的不對稱合成製備手性醇(式2)。例如，可在手性催化劑存在下，使2-曱基-戊-2-烯酸(或其鹽)氫化以得到(R)-2-甲基-戊烯酸或其鹽，其可直接用LAH還原得到(R)-2-曱基-戊-l-醇，或轉化為混合酐或醯氯，且接著以NaBH,還原得到手性醇。潛在可用的手性催化劑包括與過渡金屬(諸如釕、銠、銥或鈀)結合的環狀或非環狀手性膦配體(例如，單膦，雙膦、bisphospholane等)或亞膦酸酯配體。Ru-、Rh-、Ir-或Pd-膦、亞膦酸酯或膦基惡唑啉絡合物具有光學活性，因為它們具有手性磷原子或連接至磷原子的手性基團，或因為在BINAP和類似轉阻異構配體的情況下其具有軸向手性。例示性手性配體包括BisP*;(R)-BINAPINE;(S)-Me-二茂鐵-縮酮磷(Ketalphos)，(R，R)-DI0P;(R，R)-DIPAMP;(R)-(S)-BPPFA;(S，S)-BPPM;(+)-CAMP;(S，S)-CHIRAPHOS;(R)-PR0PH0S;(R，R)-N0RPH0S;(R)-BINAP;(R)-CYCPH0S;(R，R)-BDPP;(R，R)-DEGUPHOS;(R，R)-Me-DUPHOS;(R，R)-Et-DUPHOS;(R，R)-i-Pr-DUPHOS;(R，R)-Me-BPE;(R，R)-Et-BPE(R)-PNNP;(R)-BICHEP;(R，S，R，S)-Me-PENNPHOS;(S，S)-BICP;(R，R)-Et-FerroTANE;(R，R)-叔丁基-miniPHOS;(R)-Tol-BINAP;(R)-M0P;(R)-QUINAP;CARB0PH0S;(R)-(S)-J0SIPH0S;(R)-PHANEPHOS;BIPHEP;(R)-Cl-MeO-BIPHEP;(R)-MeO-BIPHEP;(R)-MonoPhos;BIFUP;(R)-SpirOP;(+)-TMBTP;(+)-tetraMeBITIANP;(R，R，S，S)TANGPhos;(R)-PPh廣PhOx-Ph;(S，S)MandyPhos;(R)-eTCFP;(R)-mTCFP和(R)-CnTunaPHOS，其中n為1至6的整數。其它手性配體包括(R)-(-)-卜[(S)_2-(二(3，5-雙三氟甲基苯基)膦基)二茂鐵基]乙基二環己基-膦；(R)-(-)-l-[(S)-2-(二(3，5-雙-三氟甲基苯基)膦基)二茂鐵-基]乙基二(3，5-二甲基苯基)膦；(R)-(-)-1-[(S)-2-(二-叔丁基膦基)二茂鐵基]乙基二(3，5-二甲基苯基)膦；(R)-(-)-l-[(S)-2-(二環己基膦基)二茂鐵基]乙基二叔丁基膦；(R)-(-)-1-[(S)-2-(二環己基膦基)二茂鐵基]乙基二環己基膦(R)-(-)-l-[(S)-2-(二環己基膦基)二茂鐵基]乙基二苯基膦；(R)-(-)-1-[(S)-2-(二(3，5-二甲基-4-甲氧基苯基)膦基)二茂鐵基]乙基二環己基膦；(R)-W-1-[(S)-2-(二苯基瞵基)二茂鐵基]乙基二叔丁基膦；(R)-N-[2-(N，N-二甲氨基)乙基]-N-曱基-l-[(S)-l'，2-雙(二苯膦基)二茂鐵基]乙胺；(R)-(+)-2-[2-(二苯膦基)苯基]-4-(l-甲基乙基)-4，5-二氫惡唑；{1-[((R，R)-2-爺基-phospholany1)-苯-2-基]-(R'，R')-phospholanyl-2-基)-苯基-甲烷，和(1-[((R，R)-2-節基-phospholany1)-乙基]-(R',R')-phospholan-2-基卜苯基-曱坑。可用配體可還包括在的前段落中所述的手性配體的立體異構體(對映異構體和非對映異構體)，其可通過反轉給定配體的所有或某些立體生成中心或通過反轉轉阻異構配體的立體生成軸而獲得。因此，例如，可用的手性配體可亦包括(S)-Cl-MeO-BIPHEP;(S)-PHANEPHOS;(S，S)-Me-DUPH0S:(S，S)rEt-DUPHOS;(S)-BINAP;(S)-Tol-BINAP;(R)-(R)-J0SIPH0S;(S)-(S)-J0SIPH0S:(S)-eTCFP;(S)-mTCFP等。許多手性催化劑、催化劑前體或手性配體可自商業來源獲得或可使用已知方法製備。催化劑前體或預催化劑為可在使用前轉化為手性催化劑的一種化合物或一組化合物。催化劑前體通常包含在抗衡離子X—(諸如，0Tr、PF6—、BF「、SbF6—、C10,等)存在下與膦配體和二烯(例如，降冰片二烯(norboradiene)、C0D、(2-甲基烯丙基)2等)或卣素(Cl或Br)或二烯和卣素絡合的Ru、Rh、Ir或Pd。因此，例如，包含絡合物[(雙膦配體)Rh(C0D)]T的催化劑前體可通過在MeOH中使二烯(COD)氫化以得到[(雙膦配體)Rh(Me0H)2]+X—而轉化為手性催化劑。MeOH隨後被烯醯胺(式2)或烯胺(式4)置換，經對映選擇性氫化為需要的手性化合物(式3)。手性催化劑或催化劑前體的實例包括(+)-TMBTP-釕(II)氯化物丙酮絡合物(S)-Cl-Me0-BIPHEP-釕(II)氯化物EUN絡合物；(S)-BINAP-釕(II)Br2絡合物；(S)-tol-BINAP-釕(II)Br2絡合物；[((3R4R)-3，4-雙(二苯膦基)-l-甲基吡咯啶)-銠-(1，5-環辛二烯)]-四氟硼酸絡合物[((R，R，S,S)-TANGPhos)-銠(I)-雙(1，5-環辛二烯)]-三氟甲烷磺酸絡合物；[(R)-BINAPINE-銠-(1，5-環辛二烯)]-四氟硼酸絡合物；[(S)-eTCFP-(1，5-環辛二烯)-銠(I)]-四氟硼酸絡合物和[(S)-mTCFP-(1，5-環辛二烯)-銠(I)]-四氟硼酸絡合物。對特定手性催化劑和氫化底物而言，底物與催化劑的摩爾比(s/c)取決於H2壓力、反應溫度和溶劑(如果存在)。通常，底物與催化劑的比率大於約100:1或200:1,且底物與催化劑的比率為約1000:1或2000:1是常見的。儘管手性催化劑可重複利用，更高的底物與催化劑的比率更為有效。例如，約1000:1、10，000:1和20，000:1或更高的底物與催化劑的比率將是有效的。不對稱氫化通常在約室溫或室溫以上進行，且在H2壓力約1QkPa(0.latm)或更高壓力下進行。反應混合物的溫度可在約20C至約80X:的範圍內且&壓力可在約10kPa至約5000kPa或更高的範圍內，但更通常在約10kPa至約100kPa的範圍內。通常對溫度、H2壓力和底物與催化劑的比率的組合進行選擇以提供在約24小時內使底物(式2或式4)大體上完全轉化(即約95重量％)。對許多手性催化劑而言，降低H2壓力可增加對映選擇性。多種溶劑可用於不對稱氫化中，包括質子性溶劑，諸如，水、MeOH、EtOH和i-PrOH。其他可用溶劑包括非質子性極性溶劑，諸如，THF、乙酸乙酯和丙酮。立體選擇性氫化可採用單一溶劑或可採用溶劑的混合物，諸如，THF與MeOH、THF與水、EtOH與水、MeOH與水等。式1的化合物或其非對映異構體可通過，例如分步重結晶或色譜法或通過在適當溶劑中重綍晶進一步富集，或者，可按方案2所說明的來製備式IO或式11的化合物。方案2其中R1、R2、R3、118和1(9如上所定義;R4選自甲苯磺醯基、甲磺醯基、對溴苯磺醯基、對氯苯磺醯基、硝基苯磺醯基和三氟甲基磺醯基，優選甲磺醯基；R5為合適離去基團，諸如1140-,優選甲磺醯基-O-W為Cw烷基，優選甲基；t為卣素，優選氯或溴；R'-f為鹼金屬卣化物，優選溴化鈉；且X2為卣素，優選溴。，，式4的化合物可通過如以上方案1中所述的方法由式3的化合物製備。式19的化合物可通過使化學計量或過量的量的式18的化合物與式4的化合物在溫度於45"C至90匸的範圍內反應2小時至6小時而由式4的化合物和式18的化合物製備。反應混合物可包含水相、有機相和相轉移催化劑(例如，四烷基銨鹽，諸如，Bu4N+Br-)。代表性有機溶劑包括極性非質子性溶劑(諸如，TMBE、THF、EtOAc、iPrOAc)和非極性芳族溶劑(諸如曱苯)。式7的化合物可通過式19的化合物和式20的原酸酯化合物製備。可使用化學計量或過量的量(例如，1當量至1.5當量)的式20的化合物在溫度於-5E至5X:的範圍內經歷2小時至12小時來進行烷基化。代表性鹼包括KOtBu，LDA、nBuLi和LiHMDS，可使用過量的鹼(例如，1.2當量至3當量)。反應混合物包含單一有機溶劑(例如，THF、TBME或曱苯)。在酸性條件(例如，HCI、H2S04等)下的處理過程中以過量的水使中間體原酸酶產物水解，從而得到式7的羧酸酯。式IO或11的化合物可如方案1中所述通過用適當酶的非對映立體選擇性水解而由式7的化合物製備。優選地，酶為源自微生物洋蔥伯克霍爾德氏菌(^/rir力0/der/ace/;ac/fl)或微生物細毛嗜熱黴(r力ei7Z70邁yces/a/mgi'/zosi/s)的月旨肪酶。最優選地，酶為由AmanoEnzymeInc購得的洋蔥伯克霍爾德氏菌脂肪酶；最優選脂肪酶PS-SD。如整個說明書所述，所公開的化合物中的許多化合物具有立體異構體。這些化合物中的一些化合物可作為單一對映異構體(對映純化合物)或對映異構體的混合物(富集和外消旋樣品)而存在，其取決於樣品中一種對映異構體多於另一種對映異構體的相對過量而定，且其可呈現光學活性。所述立體異構體(其為不能重疊的鏡像)具有立體生成軸或一或多個立體中心(即手性)。其它所公開的化合物可為非對映的立體異構體。所述稱為非對映異構體的立體異構體可為手性或非手性的(不含有立體中心)。其包括含有烯基或環狀基團的分子，故順/反(或Z/E)立體異構體是可能的，或其包括含有兩個或兩個以上立體中心的分子，在這些分子中反轉單個立體中心可產生相應的非對映異構體。除非清楚地另有說明(例如，通過使用立體鍵、立體中心描述符等)，本發明的範圍通常包括參考化合物和其立體異構體，無論其各自為純化合物(例如對映純)或混命物(即對映異構富集的或外消旋的)。一些化合物亦可含有酮基或肟基，故可發生互變異構現象。在這種情況下，本發明通常包括互變異構體，無論其各自為純化合物或混合物。式1的化合物的藥學上可接受的鹽包括其酸加成鹽和鹼鹽。合適酸加成鹽可自形成無毒性鹽的酸形成。實例包括乙酸鹽、己二酸鹽、天冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、碳酸氬鹽/碳酸鹽，硫酸氫鹽/硫酸鹽、硼酸鹽、棘腦磺酸鹽、檸檬酸鹽、環己氨基磺酸鹽、乙二磺酸鹽、乙磺酸鹽、f酸鹽、富馬酸鹽、葡庚糖酸鹽、葡糖酸鹽、葡糖醛酸鹽、六氟磷酸鹽、羥節基苯甲酸鹽、鹽酸鹽/氯化物、氫溴酸鹽/溴化物、氫碘酸鹽/碘化物、羥乙磺酸鹽、乳酸鹽、蘋果酸鹽、馬來酸鹽、丙二酸鹽、甲磺酸鹽、甲基硫酸鹽、萘酸鹽、2-萘磺酸鹽、煙酸鹽、硝酸鹽、乳清酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、雙羥萘酸鹽、磷酸鹽/磷酸氫鹽/磷酸二氫鹽，焦穀氨酸鹽，葡糖二酸鹽，硬脂酸鹽、琥珀酸鹽、丹寧酸鹽、酒石酸鹽，甲苯磺酸鹽，三氟乙酸鹽和xinofoate鹽。合適鹼鹽可自形成無毒性鹽的鹼形成。實例包括鋁鹽，精氨酸鹽、爺星鹽、鈣鹽、膽鹼鹽、二乙胺鹽、二醇胺鹽、甘氨酸鹽、賴氨酸鹽、鎂鹽、葡甲胺鹽、醇胺鹽;、鉀鹽、鈉鹽和氨丁三醇鹽和鋅鹽。亦可形成酸和鹼的半鹽，例如，半硫酸鹽和半鈣鹽。有關合適鹽的綜述參看Stahl與Wermuth的HandbookofPharmaeeutiealSalts:Properties,Selection,andUse(Wi1ey-VCH，2002)。式1的化合物的藥學上可接受的鹽可通過以下三種方法中的一或多種而製備(i)通過使式1的化合物與需要的酸或鹼反應；(ii)通過使用需要的酸或鹼由式1的化合物的合適前體除去酸不穩定或鹼不穩定保護基或通過使合適環狀前體例如，內酯或內醯胺開環；或(iii)通過使式1的;化合物的一種鹽與適當酸或鹼反應或通過合適的離子交換柱而轉化為另一種鹽。所有三種反應通常均在溶液中進行。所得鹽可沉澱出並通過過濾收集或可通過蒸發溶劑而收回。所得鹽的離子化程度可在完全離子化與幾乎未離子化之間變化。本發明的化合物可以在完全無定形至完全結晶的範圍內的固態連續體形式存在。術語"無定形"是指一種狀態，其中所述物質在分子水平上缺乏長程有序，且取決於溫度可呈現固體或液體的物理性質。通常這些物質不能產生獨特的x射線衍射圖樣，且儘管其呈現固體性質，更多地將其正式描述為液體。加熱後，出現固體至液體性質的改變，其以狀態改變為特徵，通常為二級變化("玻璃轉移")。術語"結晶"是指在分子水平上物質具有規則有序的內部結構且能產生獨特的具有限定峰的x射線衍射圖樣的固相。如果充分加熱這些物質亦會呈現液體的性質，但從固體至液體的改變以相變為特徵，通常為一級變化("熔點")。本發明的化合物亦可以非溶劑合物和溶劑合物的形式存在。本文使用術語"溶劑合物"來描述一種包含本發明的化合物和一或多種藥學上可接受的溶劑分子(例如，乙醇)的分子絡合物。當所述溶劑為水時採用術語"水合物"。一種用於有機水合物的目前公認的分類系統為一種限定隔離位點、通道和金屬離子配位水合物的系統-參看K.R.Morris的PolymorphisminPharmaceuticalSolids(H,G.Brittain編，MarcelDekker，1995)。隔離位點水合物為其中水分子通過介入有機分子之間而避免彼此直接接觸的水合物。在通道水合物中，水分子位於晶格通道中，在這些晶格通道中水分子與其它水分子鄰接。在金屬離子配位水合物中，所述水分子鍵合至金屬離子。當溶劑或水緊密結合時，絡合物將具有良好確定的與溼度無關的化學計量。然而，當與溶劑或水較弱結合時，如在通道溶劑合物和吸溼性化合物中，水/溶劑含量將取決於溼度和乾燥條件。在這種情況下，非化學計量將是正常的。多組份絡合物(不同於鹽和溶劑合物)亦包括在本發明的範圍內，其中藥物和至少一種其它組份以化學計量或非化學劑量的量存在。所述類型絡合物包括籠形物(藥物主體包合絡合物)和共晶體。後者通常定義為通過非共價相互作用結合在一起的中性分子組份的結晶性絡合物，但可亦為中性分子與鹽的絡合物。共晶體可通過熔融結晶，通過從溶劑中重結晶或通過用物理方法一起研磨組份而製備-參看0.Almarsson與M.I.Zaworotko的ChemCommun，17，1889-1896(2004)。有關多組份絡合物的一般綜述參看Haleblian的JPharmSci，64(8)，1269-1288(1975年8月)。本發明的化合物當在適當條件下亦可以介晶態(中間相或液晶)存在。介晶態為在真晶狀態與真液體狀態(熔融物或溶液)之間的中間狀態。將由於溫度改變引起的介晶現象描述為"熱致性，，，且將由添加第二組份(諸如，水或另一溶劑)引起的介晶現象描述為"溶致性"。將可能形成溶致性中間相的化合物描述為"兩親媒性，，且其是由具有離子(諸如，C0(TNa+、-COOT或S03—Na+)或非離子(諸如，N—N+(CH3)3)極性頭端的分子組成。更多信息參看N.H.Hartshorne與A.Stuart的CrystalsandthePolarizingMicroscope,第4版(EdwardArnold,1970)。在下文中，所有對式1的化合物的提及包括提及其鹽、溶劑合物、多組份絡合物和液晶，以及其鹽的溶劑合物、多組份絡合物和液晶；且包括其所有多晶型物和晶體慣態、如下文中所定義的其前藥和異構體(包括光學、幾何和互變異構體)以及同位素標記的式1的化合物。可分析式1的化合物的生物醫藥學性質，諸如，溶解度和溶液穩定性(在一定pH範圍內)、滲透性等，以便選擇最適當劑型和給藥途徑用於治療所建議的適應症i欲用於醫藥用途的式1的化合物可以結晶或無定形產物給予。其可通過諸如沉澱、結晶、凍幹、噴霧乾燥或蒸發乾燥的方法，例如以固態塞、散劑或薄膜的形式獲得。為此目的，可使用微波或射頻乾燥。式1的化合物可單獨或與一或多種本發明的其它化合物組合或與一或多種其它藥物(或藥物的任何組合)組合給予。通常其將與一或多種藥學上可接受的賦形刑結合以製劑的形式給予。本文使用術語"賦形劑"用來描述除本發明化合物之外的任何成份。對賦形劑的選擇在很大程度上取決於諸如特定的給藥方式、賦形劑對溶解度和穩定性的影響以及劑型的性質。本領域技術人員容易了解適於遞送式I的化合物的藥物組合物和用於製備這些藥物組合物的方法。這些組合物和用於製備它們的方法可例如在Remington'sPharmaeeuticalSciellees，第19版(MackPublishingCompany,1995)中查到。口服給藥式1的化合物，特別是(3S，5R)-3-氨基曱基-5-甲基-辛酸形式A可經口給予。口服給藥可涉及吞咽以使化合物進入胃腸道，和/或涉及頰、舌或舌下給藥，化合物通過這些給藥由口腔直接進入血流。適於口服給藥的製劑包括固態、半固態或液態系統，諸如，片劑；含有多微粒或納米微粒、液體或粉末的軟或硬膠嚢；錠劑(包括液體填充的)；口香糖；凝膠；快速分散劑型；薄膜片；卵狀體；噴霧劑和頰/黏膜粘附貼片。液體製劑包括懸浮液、溶液、糖漿和酏劑。這些製劑可作為填充劑用在軟或硬膠囊(例如由明膠或羥丙基甲基纖維素製成)中且通常包含一種載體(例如，水、乙醇、聚乙二醇、丙二醇、曱基纖維素或合適的油)和一或多種乳化劑和/或懸浮劑。液體製劑亦可通過使固體重配而製備，例如由藥嚢製備。式1的化合物，特別是(3S，5R)-3-氨基曱基-5-曱基-辛酸形式A亦可用於快速溶解、快速崩解劑型中，諸如那些描述在Liang與Chen的Expert0pini011inTherapeuticPatents,11(6),981-986(2001)中的劑型。對片劑劑型而言，視劑量而定，藥物可佔劑型的1重量。/。至80重量％，更通常佔劑型的5重量％至60重量％。除藥物外，片劑通常含有崩解劑。崩解劑的實例包括羥乙酸澱粉鈉、羧甲基纖維素鈉、羧甲基纖維素鈣、交聯羧甲纖維素鈉、交聯聚維酮，聚乙烯吡咯烷酮、曱基纖維素、微晶纖維素、低級碳烷基取代的羥丙基纖維素、澱粉、預膠凝化澱粉和海藻酸鈉。一般而言，崩解劑佔劑型的1重量％至25重量％，優選佔劑型的5重量％至20重量％。粘合劑通常用於將粘合性質賦予片劑製劑。合適粘合劑包括微晶纖維素、明膠、糖、聚乙二醇、天然和合成膠、聚乙烯吡咯烷酮、預膠凝化澱粉、羥丙基纖維素和羥丙基甲基纖維素。片劑亦可含有稀釋劑，諸如乳糖(單水合物、噴霧乾燥單水合物、無水物等)、甘露醇、木糖醇、右旋糖、蔗糖、；山梨醇、微晶纖維素、澱粉和二水合磷酸氫二鈞。錠劑亦任選包含表面活性劑(諸如，月桂基硫酸鈉和聚山梨醇酯80)和助流劑(諸如，二氧化矽和滑石粉)。若存在，則表面活性劑可佔錠劑的0.2重量％至5重量％,且助流劑可佔錠劑的0.2重量％至1重量％。片劑亦通常含有潤滑劑，諸如，硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、硬脂酸鋅，硬脂醯富馬酸鈉以及硬脂酸鎂與月桂基硫酸鈉的混合物。潤滑劑通常佔片劑的0.25重量％至10重量o/。，優選佔片劑的0.5重量％至3重°°其它可能的成份包括抗氧化劑、著色劑、調味劑、防腐劑和味覺掩蔽劑。例示性片劑含有至多約80%的藥物、約10重量％至約90重量％的粘合劑、約0重量％至約85重量％的稀釋劑、約2重量％至約10重量％的崩解劑和約0.25重量％至約10重量％的潤滑劑。可直接壓縮或通過滾筒壓縮片劑摻合物以形成片劑。片劑摻合物或摻合物的部分可選地在壓片前被溼式、乾式或熔融造粒，被熔融凝固或擠壓。最終製劑可包含一或多層且可被包衣或未被包衣；甚至可將其裝入膠囊中。片劑製劑由H.Lieberman與L.Lachman在PharmaceuticalDosageForms:Tablets,第l巻(MarcelDekker，NewYork,1980)中進行了論述。用於人或獸用用途的消費性口服薄膜片通常為可彎的水溶性或水可膨脹性的薄膜片劑型，其可迅速溶解或粘附黏膜且通常包含式1的化合物、薄膜形成聚合物、粘合劑、溶劑、保溼劑、增塑劑、穩定劑或乳化劑、粘度改良劑和溶劑。製劑的一些組份可執行一種以上的功能。式1的化合物可為水溶性或不溶性化合物。水溶性化合物通常佔溶質的1重量％至80重量％，更通常佔溶質的20重量％至50重量％。溶解度較低的化合物可能佔組合物的更大比例，通常至多為溶質的88重量％。或者，式1的化合物可以多微粒珠的形式存在。成膜聚合物可選自天然多糖、蛋白質或合成水膠體，且通常以在0.01重量％至99重量％範圍內的量存在，更通常以在30重量％至80重量％範圍內的量存在。其它可能成份包括抗氧化劑、著色劑、調味劑和香味增強劑、防腐劑、刺激唾液分泌劑、冷卻劑、共溶劑(包括油)、軟化劑、膨化劑、消泡劑、表面活性劑和味覺掩蔽劑。本發明的薄膜片通常承通過蒸發千燥包衣於一可剝襯底支撐物或紙上的含水薄膜而製備。此操作可在千燥烘箱或烘道中完成，通常在組合塗布機乾燥器中完成，或通過冷凍乾燥或真空化完成。用於口服給藥的固態製劑可配製為立即釋放和/或修飾釋放製劑。修飾釋放製劑包括延時釋放、持續釋放、脈衝釋放、控制釋放、靶向釋放和程序釋放。用於本發明的目的的合適修飾釋歡製劑描述在美國專利6,106,864中。其它合適的釋放技術的詳細資料，諸如高能分散液和滲透性且包衣的顆粒可在Verma等人的PharmaceuticalTechnologyOn-line，25(2)，1-14(2001)中查到。使用口香糖以達成控制釋放描述在W000/35298中。非腸道給藥式1的化合物，特別是(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A可亦直接給藥進入血流中，進入肌肉中，或進入內臟中。用於非腸道給藥的合適方式包括靜脈內、動脈內、腹膜內、鞘內、心室內，尿道內、胸骨內、頭碩內、肌肉內、滑膜內和皮下給藥。用於非腸道給藥的合適裝置包括針(包括，微針)注射器、無針注射器和輸注技術裝置。局部給藥式1的化合物，特別是(3S，5R)-3-氨基曱基-5-曱基-辛酸形式A亦可被局部、皮(內)或透皮給藥至皮膚或黏膜。用於此目的的典型製劑包括凝膠、水凝膠、洗劑、溶液，乳骨、軟骨、粉劑、敷料劑、泡沫劑、薄膜、皮膚貼片、糯米紙、植入物、海綿、纖維、繃帶和微乳液。亦可使用脂質體。典型的載體包括醇、水、礦物油、液體礦脂、白礦脂、甘油、聚乙二醇和丙二醇。可混入穿透增強劑-參看，例如Finnin與Morgan的JPharmSci,88(10)，955-958(1999年10月)。局部給藥的其它方式包括通過電穿孔技術、離子導入療法、超聲藥物透入療法、超聲電滲法和微針或無針(例如，Powderject、Bioject等)注射遞送。吸入/鼻內給藥式1的化合物，特別是(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A亦可經鼻內或通過吸入給予，通常以來自乾粉吸入器的乾粉(例如，單獨；呈混合物形式例如在與乳糖形成的幹摻合物中；或呈混合的組份顆粒形式，例如與諸如磷脂醯膽鹼的磷脂混合形式)給予；在使用或未使用合適推進劑(諸如1，1，1,2-四氟乙烷或1，1，1，2，3，3，3-七氟丙烷)下，以來自加壓容器、泵,、噴霧裝置，霧化器(優選為使用電水動力學以產生細霧的霧化器)或噴霧器的氣溶膠噴霧形式給予；或以滴鼻劑形式給予。對鼻內使用而言，所述粉末可包含生物粘著劑，例如殼聚糖或環糊精。直腸/陰道內給藥式1的化合物，特別是(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A可例如以栓劑、陰道藥栓或灌腸劑的形式經直腸成陰道給予。可可脂為傳統的栓劑基質，但如果適當可使用各種替代物。經眼/耳給藥式1的化合物，特別是(3S，5R)-3-氨基曱基-5-甲基-辛酸形式A亦可直接給藥至眼或耳，通常以在等張、pH經調節、無菌的生理鹽水中的微化懸浮液或溶液的滴劑形式給予。適於經眼和經耳給藥的其它製劑包括軟骨、凝膠、生物可降解(例如，可吸收的凝膠海綿、膠原蛋白)和生物不可降解(例如矽氧烷)植入物、糯米紙、晶狀體和顆粒或嚢泡系統，諸如，類脂質體(niosome)或脂質體。其它技術式1的化合物，特別是(3S，5R)-3-氨基甲基-5-曱基-辛酸形式A可組合可溶性大分子實體(諸如，環糊精和其合適衍生物或含有聚乙二醇的聚合物)以便改良其溶解度，溶解速率，味覺掩蔽、生物可用性和/或穩定性以用於上述給藥方式中的任一種。例如，發現藥物-環糊精絡合物通常可用於多數劑型和給藥途徑中。可使用包合絡合物和非包合絡合物兩者。除與藥物直接絡合外，環糊精可用作輔助添加劑，即用作載體，稀釋劑或增溶劑。最常用於這些目的的環糊精為ot-環糊精、p-環糊精和Y-環糊精，其實例可在國際專利申請W091/11172、W094/02518和W098/55148中找到。組件試劑盒由於例如為治療特定疾病或病症可能需要給予活性化合物的組合，故可方便地以適於共同給予組合物的試劑盒形式組合兩種或兩種以上的藥物組合物，其中的至少一種含有式1的化合物，此方式在本發明的範圍內。因此，本發明的試劑盒包含兩種或兩種以上的分開的藥物組合物，其中的至少一種含有式1的化合物，特別是(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A，且包含用於分別保留這些組合物的裝置，諸如，容器、分隔的瓶或分隔的箔袋。所述試劑盒的一個實例為熟悉的用於包裝片劑、膠囊等的泡軍包裝。本發明的試劑盒特別適於例如經口和非腸道給予不同劑型，適於以不同給藥間隔給予分開的組合物，或適於所述分開組合物相互間滴定。為有助於依從性，所述試劑盒通常包含給藥說明且可具備所謂的記憶輔助物。劑量對給藥至患者而言，式1的化合物的總日劑量通常在0.l邁g至1000mg範圍內，此劑量當然應視給藥方式而定。總日劑量可以單劑或分若干劑給予且可根據醫師的判斷落在本文所給定的典型範圍之外。(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A的優選日劑量範圍在lmg至250mg範圍內；更優選日劑量範圍在lmg至125mg範圍內。這些劑量基於體重約60kg至70kg的平均人類對象。所述醫師將易於確定用於體重落在所述範風之外的對象，諸如嬰兒和老年人的劑量。為避免產生疑義，本文中對"治療，，的提及包括提及治癒性、緩解性和預防性治療。實施例以下實例用於說明而非限制本發明，且其代表本發明的特定實施例。使用96孔板進行酶篩選，此在D.Yazbeck等人的Synth.Catal.345:524-32(2003)中有描述，為所有目的，其完整公開內容以引用的方式併入本文中。所有在篩選平板中使用的酶(參看表2)可自商業酶供貨商獲得，這些供貨商包括AmanoEnzymeInc.(Nagoya，Japan)、Roche(Basel，Switzerland)、NovoNordisk(Bagsvaerd，Denmark)、AltusBiologiesInc.(Cambridge,MA)、Biocatalytics(Pasadena，CA)、Toyobo(Osaka，Japan)、Sigma-Aldrich(St.Louis，M0)、Fluka(Buchs,Switzerland)、GenencotInternational，Inc,(Rochester，NY)和ValleyResearch(SouthBend,IN)。在EppendorfThermomixer-R(糧)中實施篩選反應。隨後較大規模的酶拆分採用LIPOLASE100LEX,其可自Novo-NordiskA/S購得(CAS號:9001-62-1)，以及脂肪酶PS、PS-CI、PS-CII和PS-DII，其可自AmanoEnzymeInc購得。實施例l.(R)-甲烷磺酸2-甲基-戊酯的製備將(R)-2-甲基-戊-l-醇(260kg，2500mol)、甲基叔丁基醚(2000L)裝入4000L的反應器中，且使其冷卻至-iox:至ox:。加入甲磺醯氯(310kg，2600mol)，且接著添加Et3N(310kg,3100mol)，同時維持內部溫度在O"C至101C。添加完成後，使反應混合物溫至15C至25匸且在所述溫度下攪拌至少1小時直至通過氣相色鐠法分析反應已完全。接著將HC1水溶液(88kgHC1在700L水中)添加至反應混合物中。攪拌所得混合物至少15分鐘，靜置至少15分鐘，且接著除去下層水相。用水(790L)和碳酸氬鈉水緣液(67kg碳酸氫鈉在840L水中)洗滌上層有機相。然後在真空下濃縮溶液以除去甲基叔丁基醚，得到油狀標題化合物(472kg,95%產率)。^NMR(400MHz，CDC13)4.07-3.93ppm(m，2H)，2.97(s，3H)，1.91-1.80(m，1H)，1.42-1.09(m，4H)，0，94(d,J=6.57Hz，3H)，0.87(t，J=6.56Hz，3H);13C賺(CDCh)74.73，37.01，34.81，32.65，19.71，16.29，14.04。實施例2.(2'R)-2-氰基-2-(2'-甲基-戊基)-琥珀酸二乙酯的製備將(R)-甲烷磺酸2-甲基-戊酯(245kg，1359mol)、2-氰基-琥珀酸二乙酯(298kg，1495mol)和無水乙醇(1300kg)裝入4000L的反應器中。添加乙醇鈉(在乙醇中，5—06kg,21重量％)。將所得溶液加熱至701C至75C且在所述溫度下攪拌混合物至少18小時直至通過氣相色鐠法分析反應已完全。反應完成後，接著將HC1水溶液(32kgHC1在280L水中)添加至反應混合物中直至PH小於2。添加另外的水"00L)，然後且在真空下濃縮反應混合物以除去乙醇。添加甲基叔丁基醚(1000kg),且攪拌混合物至少15分鐘，靜置至少15分鐘，且接著用甲基叔丁基醚(900kg)反萃取下層水相。在真空下濃縮組合的有機相，得到深色油狀標題化合物,(294kg，79%產率，針對純度進行校正)。^NMR(400MHz，CDC13)4.2》ppm(q，J=7.07Hz，2H)，4.18(q，J=7.07Hz，2H)，3.03(dd，t=6.6,7.1Hz，2H)，1.93-1.61(m，3H)，1.40-1.20(m，IOH)，0.95-0.82(m,6H);13C腿(CDC1》168.91，168.67，168.59，168.57，119.08，118.82，62.95，62.90，44.32，44.19，42.21，42.02，39.77,39.64,30.05，29.91,20.37,19.91,19.66，13.99。實施例3.(5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸乙酯的製備(方法A)將NaCl(175kg，3003mol)、溴化四丁基銨(33.lkg，103mol)，水(87L)和二甲亞碸(1OOOkg)加入4000L的反應器中。裝入(2'R)-2-氰基-2-(2'-甲基-戊基)-琥珀酸二乙酯(243kg,858mol),將混合物加熱至1351C至138t:且在所述溫度下攪拌至少48小時直至通過氣相色鐠法分析反應已完全。在反應冷卻至25"C至35TC後，添加庚烷(S90kg)，且攪拌混合物至少15分鐘，靜置至少15分鐘，且接著除去下層水相。用水(800L)洗滌上層有機相。用炭使含有產物的庚烷溶液脫色，且在真空下濃縮，得到橘黃色油狀標題化合物(133.9kg，74%產率，針對純度進行校正)。'HNMR(400MHz，CDC13)4.20ppm(q，J=7.07Hz，2H)，3.13-3.01(m，1H)，2.75-2.49(m,2H)，1.80-1.06(m，10H)，0.98—0.86(m,6H);13CNMR(CDC13)169.69，169,65，121.28，120.99，61.14，39.38，39.15，38.98，37.67，37.23,36.95，30.54，30.47，25.67,25.45，19.78，19.61，19.53，18.56，14.13,14.05。實施例4.(SR)-3-氰泰-S-甲基-辛酸乙酯的製備(方法B)將LiCl(3.89g,0.0918mol)、水(7mL)和二甲亞碸(72mL)加入250fflL的燒瓶中。加入(2'R)-2-氰基-2-(2'-甲基-戊基)-琥珀酸二乙酯(25.4g，0.0706mol，78.74%，由氣相色鐠法分析而得)，將混合物加熱至35C至138X:且在所述溫度下攪拌至少24小時直至通過氣相色譜法分析反應完全。在反應冷卻至25匸至35X:後，添加庚烷(72mL)，飽和NaCl溶液(72mL)和水(72mL)，且攪拌混合物至少15分鐘，靜置至少15分鐘，且接著用庚烷(100mL)洗滌下層水相。在真空下濃縮組合的有機相，得到橘黃色油狀標題化合物(13.0g，84%產率，針對純度進行校正)。實施例5.(5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸鈉鹽的製備將(5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸乙酯(250kg，1183mol)和四氫呋喃(450kg)加入4000L的反應器中。製備NaOH水溶液(350L水中的50%NaOH,190kg)且接著將其添加至四氫呋喃溶液中。在20C至30匸下攪拌所得溶液至少2小時，直至通過氣相色鐠分析反應已完全。此後，通過真空蒸餾除去四氫呋喃，得到標題化合物的水溶液，其可立即用於下一步驟中。實施例6.(5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸鈉鹽的製備將海綿鎳催化劑(3.2kg,Johnson&MatheyA7000)加入120L的高壓釜中，接著加入(5沁-3-lC基-5-曱基-辛酸鈉鹽水溶液(15kg在60L水中)，且在50psig氬氣、30C至35匸下使所得混合物氫化至少18小時，或直至氫氣吸收停止。接著將反應冷卻至20X:至30t:，且通過O.2pm過濾器過濾而除去用過的催化劑。用水(2x22L)洗滌濾餅，且將所得標題化合物的水溶液直接用於下一步驟中。實施例7.(5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸的製備將(5R)-3-氨基-甲基-5-曱基-辛酸的水溶液(約150kg在約1000L水中)裝入4000L的反應器中，且使其冷卻至Or至5"C。添加水醋酸直至pH為6.3至6.80。將無水乙醇(40kg)添加至混合物中。在20分鐘以內將所得漿液加熱至65匸至70x:，且經3小時冷卻至ox:至5C通過過濾收集產物，得到呈水溼性濾餅的標題化合物(76kg，97%產率，針對純度進行校正，10%水，由Karl-Fischer分析而得)，其可用於下一步驟中。力建(40醒z,D3C0D)4,97ppm(BS，3H),3.00-2.74(m，2H)，2.48-2.02(m，3H)，1.61-1.03(m,7H)，0.94-086(m，6H);13CNMR(D3COD)181.10，181.07，46.65,45.86，44.25,43.15，42.16，41.64，41.35，33.45，31.25，31.20，21.45，21.41，20.52，20.12，15.15,15.12。實施例8.通過與拆分劑接觸進行(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸的製備將水溼(國(5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸(76kg，365mol)、(S)-扁桃酸(34.8kg,229mol)，無水乙醇(1780kg)和水(115L)加入4000L的反應器中。將所得混合物加熱至651C至70X:且攪拌直至固體溶解。接著經2小時將溶液冷卻'至OiC至5X:且在所述溫度下再攪拌1小時。通過過濾收集產物，且用-20iC乙醇(3x60kg)洗滌濾餅。將粗產物(18kg,48。/。產率)和乙醇(167kg)加入反應器中。將混合物冷卻至至51C且在所述溫度下攪拌1.5小時。接著通過過濾收集產物。且用-20"C乙醇(3xl83kg)洗滌濾餅得到標題化合物(17kg，94%產率)。在188.1653amu處觀測到標題化合物的準分子離子(MH+)，且與理論值188.1650相一致；測量值確定分子式為C1H21N02，因為在測量值的5-ppm(0.9mDa)實驗誤差範圍內沒有其它僅含有C、H、N和0的合理替代化學實體可以分子離子形式存在IR(KBr)2955.8cm—、22.12.1，1643.8，1551.7，1389.9;力NMR(400MHz，D3COD)4.91ppm(bs，2H)，3.01-2.73(m，2H)，2.,45-2.22(m,2H)，1.60-1.48(m，1H)，1.45-1.04(m，6H)，0.98二086(m，6H);13C醒(D3C0D)181.04，45.91，44.30，42.13,40,65，33.42，31.24，21.39，20.49，15.11。實施例9.酶篩選通過使(5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸乙酯(式15)經酶水解得到(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸鈉鹽(式16，n)和(3R，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸乙酯(式17，R"-Et)或(3S，5R)-3-氰基-5-曱基-辛酸乙酯(式16,R、Et)和(3R，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸鈉鹽(式17,!T-Na+)而進行。使用包含沉積於96孔板的獨立孔中的個別酶的篩選試劑盒進行酶篩選，所述篩選試劑盒預先根據D.Yazbeck等人在Synth.Catal.345:524-32(2003)中所描述的方法而製備。各孔具有0.3mL的空體積(淺孔板)。96孔板中有一孔僅含有磷酸鹽緩沖液(10yL，0.1M，pH7.2)。幾乎沒有例外；各剩餘孔含有等分量的酶aOjjL，83mg/mL),這些酶中的多數系列於以上表2中。使用前，將篩選試劑盒自-8or;儲存室取出且使酶在室溫下解凍約5分鐘。使用多通道移液器將磷酸鉀緩沖液(85yL，O.IM，pH7.2)分配於各孔中。隨後通過多通道移液器將濃縮底物(式15，5jiL)添加至各孔中且在30匸和750rpm下培養96孔中的反應混合物。24小時後通過將各反應混合物轉移入第二塊96孔板的獨立孔中而使反應'中止並取樣。各孔具有2mL的空體積(深孔板)且含有乙酸乙酯(lmL)和HCI(lN，100^L)。通過用移液器抽吸孔內容物而使各孔組份混合。使第二塊板離心且將IO(VL有機上清液自各孔轉入第三塊96孔板(淺板)的獨立孔中。隨後使用可滲透的墊蓋密封第三塊板的孔。一旦孔被密封，將第三塊板轉移至GC系統中以測定非對映立體選擇性(de)。表3列出酶、商品名、E值。x和被篩選的一些酶的選擇性。對給定酶而言，可將E值理解為一對非對映異構體(底物)的相對反應性。使用來自UniversityofGraz的稱為Ee2的電腦程式且根據GC/導出數據(轉化分數、x和de)計算出表3中列出的E值。在表3中，選擇性對應於非對映異,體(3R，5R)-3-氰基-5-曱基-辛酸乙酯或(3S，5R)-3-氰基-5-曱基-辛酸乙酯-經歷給定酶的最充分水解。表3.實施例l的篩選反應結果酶商品名EX選擇性豬鵬鰣Altus031.515(3R，5R)^!fe^K菌(Candidacytindracea)脂^SlFluka623021.43(3R，5R)洋蔥伯M爾德氏菌(Burkholderiac印acia)脂肪AnianoLipaseAH20015(3R，5R)縈光假#"&菌(Pseudoinonasfluorescens)月旨^#AmanoLipaseAK2020025(3R，5R)^4^菌(Candidarugosa)脂A^AmanoLipaseAYS1.42(3R，5R)德W疼郵izopusdelemar)脂Mil"AmanoLipaseD644(3S，5R)擬鵬(Rhizopusoryzae)月旨^rSlAmanoLipaseF-AP15201(3S，5R)沙門柏乾酪青審(Penicilliumcamembertii)脂AmanoLipaseG501.16(3S，5R)鵬爪唾4^l(Mucorjavanicus)月旨^S^i^AmanoLipaseM1083(3S，5R)洋蔥伯絲爾德氏菌(Burkholderiac印acia)脂肪AmanoLipasePS20045(3R，5R)假單胞菌(Pseudomonas)屬脂AjilBioCatalytics10347(3S,5R)魁物，凍幹脂麟BioCatalytics1081745(3R,5R)CAL-B，凍幹BioCatalytics1101.296(3S，5R)4^K菌(Candida)屬，凍幹BioCatalytics1111.28(3R，5R)CAL-A，凍幹BioCatalytics1121.6(3R,5R)嗜絲(Thermomyces)屬脂鵬BioCatalytics115750(3S，5R)產自菌(Alcaligines)屬，凍幹脂,BioCatalytics1171531(3R，5R)CAL-B，L2SolChriazymeSol1.331(3R，5R)細4j^t熱黴(Thermoniuceslarmginosus)月旨MilSigmaL9Upolase1550(3S，5R)細4/#^^(Thermomuceslarmginosus)月旨^rS^SigmaL10Novo8711068(3S,5R)曼5^M^,zofflucormiehei)月旨Mi^,SigmaL6Palatase5.390(3S,5R)真菌蛋白酶棘物Gen咖or1010(3R，5R)牛胰蛋白酶SigmaP18ot-胰凝乳1010(3R，5R)蛋白酶I風梨[Ananascomosus&AnanasBromclian1010(3R，5R)Bracteatus(L)]ConcentrateSigmaA-S2AcylaseI260(3S,5R)得自高j;錄菌Mucormeihei的酉練FlukaE5579(3S，5R)SigmaES81.154(3S,5R)膽固醇酉辦BioCatalyticsE31.154(3S，5R)BioCatalytics1231.371(3S，5R)實施例10.通過酶催化拆分進行(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸叔丁基銨鹽的製備將(5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸乙酯(8g，37.85mmol)添加至配備pH電極、頂置式攪拌器和鹼添加管線的50mL反應器中，接著添加乙酸鉤溶液(8mL),去離子水(3.8mL)和LIP0LASE⑧100LEX(0.2mL)。在室溫下攪拌所得懸浮液24小時。通過添加4MNaOH而將溶液的pH維持於7.0。通過氣相色鐠法監測反應的進程(轉化率和產物和起始物質的%de)且在已消耗45%的起始物質後使反應中止(添加約4.3mLNaOH)。反應完成後，添加甲苯(2QmL)，且攪拌混合物1分鐘。通過添加濃HC1水溶液使pH降低至3.0且攪拌溶液5分鐘，接著將溶液轉移至分液漏鬥/萃取器中。使有機層分離且用10mL甲苯對水層進行l次萃取。合併有機層且使甲苯蒸發直至幹。將粗產物((3S，5R)-3-氰基-5-曱基-辛酸的鈉鹽，75%非對映異構體過量，由氣相色鐠法分析而得)再懸浮於曱基叔丁基醚(40mL)中。在攪拌的同時將叔丁胺(1.52g，1.1當量)逐滴添加至混合物中，歷經5分鐘的時間。晶體在添加完成後不久即沉澱出，且將這些晶體收集於布氏漏鬥中。用甲基叔丁基醚(2x20mL)洗滌固體。接著在真空下乾燥殘餘物得到標題化合物(2.58g，96%非對映異構體過量，由氣相色譜法分析而得)。實施例11.通過(3R，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸乙酯至(3R，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸鈉鹽的酶水解進行的(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸乙酯的拆分在201C至25"C的溫度下將50%NaOH水溶液(2.Okg)添加至含有砩酸鈉(磷酸二氫鈉)單水合物(4.7kg)和水(1650L)的容器中。攪拌15分鐘後，檢測混合物的pH以確保其處於6.0至8.O的範圍內。添加AmanoPS脂肪酶(17kg)且在20X:至25C下攪拌混合物30分鐘至60分鐘。過濾混合物以除去固體且濾液與碳酸氫鈉(51kg)、(5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸乙酯(154kg)和水(10L)合併。使混合物在約501C下反應24小時至48小時。通過氣相色鐠法監測酶水解的進程，且當基於氣相色鐠法分析發現(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸乙酯與(3R，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸鈉鹽的比率大於99:l時認為酶水解已完全。在反應完成後，將混合物添加至裝有NaCl(510kg)的容器中，且在201C至"r下攪拌容器的內容物。用甲基叔丁基醚(680L)萃取混合物且使水相與有機相分離。棄去水相且用NaCl(26kg)、碳酸氫鈉(2kg)和水(85L)洗滌有機相。在固體溶解後，再次用MTBE(680L)萃取混合物，使水相與有機相分離，且再次用NaCl(26kg)、碳酸氫鈉(2kg)和水(85L)洗滌有機相。在水相與有機相分離後，在70C和大氣壓下蒸餾有機相得到油狀(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸乙酯(48.9kg，88%產率)。^醒R(400MHz，CDC13)4.17ppm(q，J=7.83Hz，2H)，3.13-3.06(m，1H)，2.71-2.58(m，2H),1.75-1.64(m，10H)，0.95(d,J=6.343H)，0.92(t，J=6.83，3H，13CNMR(CDC13)170.4，121.8,61.1，39.6，38.6，37.0，31.0，25.9，20.0，18.5，13.9。實施例12.由(3S，5R)'-3-氰基-5-甲基-辛酸乙酯製備(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸用次氯酸鈉水溶液(35kg，12%)和水(35L)處理在甲基叔丁基醚中含有(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸乙酯(30。/。)的溶液(700kg)。在室溫下攪拌混合物2小時後，使混合物靜置3小時，且將水相與有機相分離。在室溫下用水(15OL)洗滌有機相且使混合物分離為水相與有機相。分離出有機相且隨後與NaOH水溶液(13"g，50%)和水(5601>)與有機相反應。在室溫下攪拌反應混合物2.5小時至3.5小時且使混合物靜置2小時。將所得的含有(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸鈉鹽的水相裝入已裝入海綿鎳A-7063(43kg)的高壓釜中且用氮氣吹洗。將所述高壓蒼加熱至281C至32"且用氬氣加壓至50psig。使壓力維持於50psig，歷經18小時至24小時。陣後將高壓釜冷卻至20匸至"x:且使壓力降至20psig至30psig進行取樣。當(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸鈉鹽的轉化分率為99%或更大，則反應完全。過濾反應混合物且在20X:至30t:的溫度下合併濾液與檸檬酸水溶液(64kg在136kg水中)。添加乙醇(310L)且將混合物加熱至55匸至60X:。使混合物維持在所述狀態1小時，然後以約-15X:/小時的速率冷卻直至混合物的溫度降至約至81C的溫度。在該溫度攪拌混合物約1.5小時並過濾。在21C至81C下用水(1S0L)衝洗所得濾餅，接著在室溫下用氮吹掃乾燥直至水含量低於1%(由Karl-Fischer分析而得)，因此得到粗產物(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸。將粗產物(129kg)裝入容器中。將水(774kg)和無水乙醇(774kg)添加至所述容器中且使所得混合物加熱回流(約80r)直至溶液澄清。使溶液通過拋光過濾器(lp)且再次加熱回流直至溶液澄清。使溶液以約-20C/小時的速率冷卻直至其溫度降至約5X:的溫度，在此期間沉澱形成。使所得漿液維持在ox:至5x:約90分鐘以完成結晶過程。過濾漿液以分離標題化^^物，用無水乙醇(305kg)沖洗所述標題化合物且藉助氮吹掃在40"C至約45t:的溫度下將其乾燥直至水含量(由Karl-Fischer分析而得)和乙醇含量(由氣相色譜法分析而得)皆低於0.5重量％。由(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸乙酯製備標題化合物的代表性產率為約76%。實施例13.(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸甲酯的製備甲烷磺酸2-曱基-戊酯將甲苯(170ml，8.5ml/g,以2-曱基-戊-l-醇的重量計)，2-曱基-戊-1-醇(20.OOg，0.20摩爾，一次性加入)和三乙胺(21.78g，0.22摩爾，一次性加入)加入反應容器中。將反應混合物冷卻至-iot;至-5x:的溫度且在維持溫度於-iox:至-5x:的同時逐滴添加甲磺醯氯(22.42g，0.2摩爾)。在-10C至-5t:的溫度下攪拌所述反應1小時。用1.0MHC1水溶液(60ml，3ml/g,以2-曱基-戊-l-醇的重量計)使反應中止，且攪拌30分鐘。將反應混合物溫至251C且使相分離。用1MNaHC03水溶液(60ml，3ml/g，以2-甲基-戊-l-醇的重量計)洗滌有機相且使相分離。將所得的甲烷磺酸2-甲基-戊酯的甲苯溶液直接用於下一步驟。l-溴-2-曱基-戊烷將甲烷磺酸2-曱基-戊酯(35.29g，0.2摩爾，甲苯溶液)、H20(14ml,0.4ml/g，以甲烷磺酸2-甲基-戊酯的重量計)、NaBr(20.14g，0.2摩爾)和溴化四丁基銨(12.61g，0.04摩爾)加入反應容器中。將反應混合物加熱至90匸且在所述溫度下攪拌3小時。加入&0(600ml,3ml/g，以曱烷磺酸2-甲基-戊酯的重量計)且使相分離。將所得的1-溴-2-甲基-戊烷的甲苯溶液直接用於以下步驟中。(5R)-3-氰基-5-甲基辛酸曱酯將甲苯(152ml,4.7ml/g，以l-溴-2-甲基-戊烷的重量計)裝入反應容器中，接著在攪拌下一次性加入叔丁醇鉀(76.87g，0.69摩爾)。將反應混合物冷卻至-10匸至-5C的溫度。將4，4，4-三甲氧基-丁腈(37.39g，0.23摩爾)加入自上一步驟獲得的1-溴-2-曱基-戊烷的曱苯溶液中，且將所得溶液逐滴添加至所述反應中，同時維持溫度於-5r。在-10x:至-5r的溫度下攪拌反應混合物18小時。用H20(323ml，10ml/g，以l-溴-2-甲基-戊烷的重量計)中止反應，逐滴添加濃HC1(48.5ml)至pH處於1-2的範圍，且在25X:下攪拌反應混合物1小時。使相分離，且用H20(323ml，10ml/g，以l-溴-2-甲基-戊烷的重量計)洗滌有機相，且使相分離。自有機相蒸餾出曱苯至留下的體積為65ml。直接將所得的(5R)-3-氰基-5-甲基辛酸甲酯的甲苯溶液用於以下步驟中。(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸曱酯將NaHC03(47.4g，0.75當量)、KH2P04(4.4g，0.042當量)和HaOH(0.84g，0.031當量)加入水(1500mL)中，且在室溫下攪拌直至形成溶液。將酶LipasePS-SD(30g，可自AmanoEnzymeInc.購得)加入所述反應中且在室溫下攪拌懸浮液直至形成溶液。將反應混合物加熱至45t;，同時一次性添加(5R)-3-氰基-5-甲基辛酸曱酯(150g,0.76摩爾，1當量)的甲苯溶液，歷經5分鐘的時間。在"X:下劇烈攪拌所得的水懸浮液中的油48小時。反應完成後，用叔丁基甲基醚(600mL)萃取產物，合併有機相，且用鹽水(300mL)洗滌有機相。以叔丁基甲基醚溶液的形式保留標題化合物中以進一步用於(3S，510-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸的製備。實施例14.(3S,5R)-3-氨基曱基-5-甲基-辛酸形式A方法A將乙醇(25mL)與水(25mL)加入容器中且劇烈攪拌以確保混合。加入粗製(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸(2.5g)，且將懸浮液加熱至回流溫度(801C)直至形成溶液。在801C下攪拌所述反應1小時以確保完全溶解。通過在線過濾器過濾溶液且將溶液轉移至無汙斑的容器中。以o.5t:/分鐘的速率使溶液冷卻，直至溫度降至67x:，且在67x:下用0.5%在漿液中的微粒化晶種(2.5-10pm)進行接種。以0.5t:/分鐘的速率將懸浮液冷卻至0匸，且在0匸下攪拌12小時。通過過濾收集產物且用無微物水(2.5mL)洗滌濾餅，接著用無微物乙醇(2.SmL)洗滌濾餅。在真空、40匸下對產物進行塔盤乾燥或直至水含量低於0.5重量％。方法B將在乙醇和水(50:50，按體積計)中的粗製(3S，SR)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸(25mg/mL)加入反應器中，且在整個過程中以適當快的速率維持攪動。以0.5X:/分鐘的加熱速率將反應器加熱至55X:的溫度且使溫度維持在551C1小時以確保完全溶解。以0.5C/分鐘的速率使溶液冷卻至51C且在所述溫度下維持15分鐘。用5%在漿液(75mg/mL，在乙醇中)中的微粒化晶種(2-25jim)對溶液進行接種。在接種前攪動乙醇晶種漿液以破壞聚集。接種後再使溫度維持於51C下歷經20分鐘。以0.5E/分鐘的速率使所得漿液冷卻至O匸且在所述溫度下維持2小時。在真空下過濾出固體且用冷乙醇洗滌。在真空烘箱中於50匸下千燥經過濾的固體。方法c將在乙醇和水(50:50，按體積計)中的粗製(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸(5Offlg/niL)加入反應器中，且在整個過程中以適當快的速率維持攪動。以0.5r/分鐘的加熱速率將反應器加熱至80匸(回流溫度)。使溫度維持於80"C下歷經1小時以確保完全溶解。以0.5匸/分鐘的速率使溶液冷卻至ox:且維持於o匸下歷經2小時。在真空下過濾出固體且用冷乙醇洗滌。在真空烘箱中於50r下乾燥經過濾的固體。(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A的表徵使用以下技術對(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A進行表徵1.粉末X射線衍射(PXRD)2.差示掃描量熱測定(DSC)3.傅立葉變換紅外光鐠(FT-IR)4.傅立葉變換拉曼光謙(FT-Raman)使用以下實驗條件。粉末X射線衍射(PXRD)使用配有自動試樣更換器、e.8測角儀、自動光束髮散狹縫和PSDVantec-1檢測器的Bruker-AXSLtd.D4粉末X射線衍射儀確定粉末X射線衍射圖樣。通過將其置放於低背景矽晶圓樣品底座上面製備用於分析的樣品。在旋轉樣品的同對使用工作於40kV/30mA下的X射線管的銅K-ctiX射線(波長-1.5406A)照射試樣。用以在28範圍為2。至55。之間設定為每0.018°步進O.2秒計數的連續模式運轉的測角儀進行分析。正如本領域技術人員將意識到的，以下給出的表1和表2內的各種峰的相對強度可因許多因素(諸如，X射線光束下晶體的定向效應或所分析材料的純度或樣品的結晶度)而變化。峰位置亦可因樣品高度的變化而移動，但峰位置仍基本上如給定表中所限定。本領域技術人員根據布拉格(Bragg)方程式-n入=2dsin6亦應了解使用不同波長的測量將導致產生不同位移。這些通過使用替代波長所產生的其它PXRD圖樣可視為本發明的結晶物質的PXRD圖樣的替代性表示，且這些圖樣亦在本發明的範圍內。形式A的晶體結構可通過單晶X射線衍射分析而確定。此外，可使用AccelrysMaterialsStudi。TM[版本2.2]的"ReflexPowderDiffraction"模組自單晶結構計算出26角、d間距和相對強度。在各種情況下有關的模擬參數為波長-l.540562A(CuKct)偏振因子=0.5Pseudo-Voigt特徵(U-O.01，V--0.001，W-0.002)差示掃描量熱測定(DSC)使用PerkinElmerPyris1DSC在50nl的具有鋁蓋的通風鋁盤中進行DSc。在ioc至215x:的範圍內，大致以每分鐘iox:的速率加熱3mg樣品，同時用氮氣進行淨化。FT-IR使用配備"GoldenGate"單次反射ATR附件(鑽石頂板和硒化鋅透鏡)和DTGSKBr檢測器的ThermoNicoletAvatarFT-IR光i普儀獲取IR光鐠。以2cm—1的解析度釆集光譜且總共掃描256次。使用Happ-Genzel變足跡法。因FT-IR光鐠使用單次反射ATR進行記錄，故無需進行制樣。使用ATRFT-IR會引起紅外波段的相對強度不同於那些使用KBr碟或石蠟糊制樣而獲得的透射FT-IR光譜中所見的紅外波段的相對強度。由於ATRFT-IR的性質，較低波數的波段比那些較高波數的波段更強。除非另有說明，實驗誤差為±2cm1。FT-Raman使用配備1064nmNdYAG雷射和鍺檢測器的ThermoNicoler960FT-Raman光鐠儀釆集拉曼光鐠。使用320mW雷射功率對樣品採集光譜且解析度為2cm_1，共掃描5140次。使用Happ-Genzel變跡法。將各樣品(大致5mg)置放於玻璃小瓶中且暴露於雷射輻射。數據以作為Raman位移函數的Raman強度的形式而呈現。除非另有說明，實驗誤差為土2ciif1。數據圖1中顯示測量得到的PXRD圖樣。其中相對強度高於5%的主要特徵峰列於表l中。圖2中顯示計算而得的PXRD圖樣。其中相對強度高於5%的主要特徵峰列於表2中。(3S，5R)-3-氨基甲基-5-曱基-辛酸形式A的主要特徵峰在26角為7.7度，15.8度、20，8度和23.1度士O.2度處。圖3中顯示(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A的DSC熱分析圖，且所述圖顯示在1941C土21C時出現一個單尖銳吸熱峰最高值。此現象表示(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A的熔化。(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A的FT-IR光傳顯示於圖4和圖5中。其中(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A的主要特徵峰列於表3中。(3S,5R)-3-氨基甲基-5-曱基-辛酸形式型的FT-Raman光語顯示於圖6和圖7中。(3S，5R)-3-氨基曱基-5-甲基-辛酸形式A的主要特徵峰列於表4中。表1.來自(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A的測量圖樣的PXRD特徵峰tableseeoriginaldocumentpage76表2.來自(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A的計算圖樣的PXRD特徵峰tableseeoriginaldocumentpage76tableseeoriginaldocumentpage77表3.(3S，5R)-3-氨基曱基-5-曱基-辛酸形式AFT-IR數據的峰列表主要吸收光譜帶頻率列於下表中(W:弱，m:中等，s:強)。強度指定是相對於光譜中的主要光譜帶而言且並非基於來自基線測量得到的絕對值。tableseeoriginaldocumentpage77tableseeoriginaldocumentpage78表4.(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式AFT-Raman數據的峰列表相對強度、良好確定的FT-Raman光譜帶的峰表。強度指定是相對於光譜中的主要光譜帶而言且並非基於來自基線測量得到的絕對值。(W:弱，m:中等，s:強，vs:極強)tableseeoriginaldocumentpage78圖1顯示(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A測量得到的PXRD圖樣圖2顯示(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A計算得到的PXRD圖樣圖3顯示(3S,5R)-3-氨基曱基-5-甲基-辛酸形式A的DSC熱分析圖固4顯示(3S，5R)-3-氨基曱基-5-甲基-辛酸形式A的FT-IR光譜圖5顯示(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A的FT-IR光鐠的指紋區圖6顯示(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A的FT-Raman光譜圖7顯示(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A的FT-Raman光鐠的指紋區應注意除非上下文清楚地另有說明，本說明書和隨附權利要求中所使用的單數詞(諸如，"一，，或"所述")可以指單個物件或是指多個物件。因此，例如，提及含有"一種化合物"的組合物可包括單種化合物或兩種或兩種以上的化合物。應了解以上的描述是用來說明而非限制。在閱讀以上的描述後，許多實施例對於本領域技術人員而言將顯而易見。因此，本發明的範圍應根據隨附權利要求而確定且包括這些權利要求對其享有權利的等同物的全部範圍。所有論文和參照文獻，包括專利、專利申請和出版物的公開內容的全文以引用方式併入本文並用於所有目的。權利要求1.用於製備式10的化合物或其鹽的方法其中R1和R2各自獨立選自氫和C1-3烷基，其限制條件為R1與R2不同時為氫；R3選自C1-6烷基、C2-6烯基、C3-6環烷基、C3-6環烷基-C1-6烷基，C1-6烷氧基，芳基和芳基-C1-3烷基，其中各芳基部分任選被1至3個獨立選自C1-3烷基、C1-3烷氧基，氨基、C1-3烷基氨基和滷素的取代基取代，其中上述的烷基、烯基、環烷基和烷氧基部分中的每一個任選被1至3個氟原子取代；並且R8選自C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-7環烷基、C3-7環烯基，滷代-C1-6烷基、滷代-C2-6烯基、滷代-C2-6炔基、芳基-C2-6烷基、芳基-C2-6烯基和芳基-C2-6炔基；其中上述芳基部分中的每一個可以任選被1至3個獨立選自C1-3烷基，C1-3烷氧基，氨基、C1-3烷基氨基和滷素的取代基取代；且其中所述方法包含(a)使式7的化合物與酶接觸，其中所述酶將所述式7的化合物非立體選擇性地水解為式11a的化合物；其中R1、R2和R3如式10的化合物中所定義；並且式7中的R6選自C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-7環烷基、C3-7環烯基、滷代-C1-6烷基、滷代-C2-6烯基、滷代-C2-6炔基、芳基-C1-6烷基、芳基-C2-6烯基和芳基-C2-6炔基，其中上述芳基部分中的每一個可以任選被1至3個獨立選自C1-3烷基；C1-3烷氧基、氨基、C1-3烷基氨基和滷素的取代基取代，和(b)分離所述式10的化合物。2.權利要求1的方法，其中W和W為Cw烷基。3.權利要求1或2的方法，其中R'和W各自獨立為氫或曱基，其限制條件為^與R2不同時為氫，且R3為C卜6烷基。4.權利要求l-3任一項的方法，其中W為氫，W為甲基，且R3為乙基。5.權利要求l-4任一項的方法，其中在步驟(a)中的所述酶為脂肪酶。6.權利要求5的方法，其中所述脂肪酶源自微生物洋蔥伯克霍爾德菌(^/rl/o^/er/acepac/a)或微生物疏棉狀嗜熱絲孢菌7.權利要求l-6任一項的方法，其進一步包含以下步驟(c)任選將所述式10的化合物轉化為其鹽優選轉化為其鹼金屬鹽；最優選轉化為其鈉鹽。8.式7的化合物formulaseeoriginaldocumentpage4其中R1、R2、R3和^如權利要求l所定義。9.權利要求8的化合物，其中R6為Cw烷基。10.權利要求8或9的化合物，其中R'為甲基、乙基、正丙基或異丙基。11.式10的化侖物formulaseeoriginaldocumentpage4或其鹽，其中R1,R2、R3和R8如權利要求1所定義。12.權利要求10的化合物，其中R8選自氫和Cw烷基。13.權利要求11或12的化合物，其中R8是選自氫、曱基、乙基、正丙基和異丙基。14.權利要求8-13任一項的化合物，其中！^和^各自獨立為氫或曱基，其限制條件為R'與R2不同時為氫，且R3為d—6烷基。15.權利要求8-14任一項的化合物，其中W為氫，r為甲基，且W選自曱基、乙基、正丙基和異丙基。16.權利要求8-15任一項的化合物，其中W為氫，W為甲基，且W為乙基。17.權利要求8的化合物，其選自(2'R)-2-氰基-2-(2'-甲基-丁基)-琥珀酸二乙酯；(2'R)-2-氰基-2-(2'-甲基-戊基)-琥珀酸二乙酯；(2'R)-2-氰基-2-(2'-甲基-己基)-琥珀酸二乙酯(2'R)-2-氰基-2-(2'，4'-二甲基-戊基)-琥珀酸二乙酯；(5R)-3-氰基-5-甲基庚酸乙酯；(5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸乙酯；(5R)-3-氰基-5-曱基-壬酸乙酯；(5R)-3-氰基-5，7-二甲基-辛酸乙酯；(5R)-3-氰基-5-甲基-庚酸；(5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸；(5R)-3-氰基-5-甲基-壬酸；(5R)-3-氰基-5，7-二曱基-辛酸；(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-庚酸；(3S，5R)-3-氰基-5-曱基-辛酸；(3S，5R)-3-氰基-5-曱基-壬酸；(3S，5R)-3-氰基-5，7-二甲基-辛酸；(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-庚酸乙酯；(3S，5R)-3-氰基-5-曱基-辛酸乙酯；(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-壬酸乙酯；(3S，5R)-3-氰基-5，7-二甲基-辛酸乙酯；(3R，5R)-3-氰基-5-曱基-庚酸；(3R，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸；(3R，5R)-3-氰基-5-曱基-壬酸；(3R，5R)-3-氰基-5，7-二甲基-辛酸；(3R，5R)-3-氰基-5-甲基-庚酸乙酯；(3R，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸乙酯；(3R，5R)-3-氰基-5-甲基-壬酸乙酯；(3R,5R)-3-氰基-5，7-二甲基-辛酸乙酯；及其鹽。18.權利要求17的化合物，其為(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸或其鹽或酯。19.製備式l的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑合物或水合物的方法其中R1，112和113如權利要求1、3或4中任一項所定義；且其中所述方法包含權利要求1至7任一項中所定義的方法的步驟(a)至(c)，且進一步包含以下步驟(d)還原式10的化合物或其鹽的氰基部分以得到式1的化合物或其鹽和(e)任選進一步將所得的式1的化合物或其鹽轉化為其藥學上可接受的鹽，溶劑合物或水合物。20.製備式7的化合物或其鹽的方法其中R1、R2和W如權利要求1、3和4任一項中所定義；且R6為d-6烷基，且其中所述方法包含(a)在鹼存在下使式19的化合物與式20的原酸酯化合物反應，formulaseeoriginaldocumentpage7其中R1、R2、W和RS如式7的化合物中所定義；且乂2為滷素，和(b)使所得的原酸酯中間產物水解以得到所述式7的羧酸酯。全文摘要本發明公開了用於製備光學活性的式1的γ-胺基酸的物質和方法，所述γ-胺基酸可結合鈣離子通道的α-2-δ(α2δ)亞單位。文檔編號C07C255/19GK101341117SQ200680048461公開日2009年1月7日申請日期2006年12月11日優先權日2005年12月21日發明者B·A·皮爾曼,J·E·薩恩斯,L·C·弗蘭克林,L·M·莫塔,M·C·埃文斯,N·J·維利斯,T·N·南寧加申請人:輝瑞產品公司