用於蛋白純化的層析柱的製作方法

2023-07-26 03:08:46

用於蛋白純化的層析柱的製作方法
【專利摘要】本實用新型提供一種用於蛋白純化的層析柱，屬於生物純化器械領域。本實用新型提供的層析柱，柱體上設置刻度，方便操作人員對填料高度和進樣量的掌握；柱體頂端設置U型篩網，便於緩衝液、樣品液、洗脫液等液體從柱體的四壁流下，避免引起飛濺。本實用新型結構簡單，操作方便，蛋白的純化效果好。
【專利說明】 用於蛋白純化的層析柱
【技術領域】
[0001]本實用新型屬於生物純化器械，具體涉及一種用於蛋白純化的層析柱。
【背景技術】
[0002]目前，多種化合物的組合物、天然產物及中藥的分離純化，主要是採用柱色譜，使用層析柱，通過柱層析過程來實現。傳統的柱色譜是將混合化合物放置在玻璃柱柱床的頂端，使混合溶劑組成的洗脫劑(流動相)在重力作用下，通過裝有吸附性介質材料(固定相)的垂直玻璃柱，分離得到各個較純的產品(純品)，其原理是:由於混合化合物中各組分對色譜柱中固定相和流動相的親和力不同，故根據混合化合物的性質選擇合適的固定相和流動相，可以達到將其中各組分儘可能分離的目的，分離的產品在柱子出口分別被收集到各個收集瓶中，然後，鑑定各個收集瓶中的收集到的層析液，根據鑑定結果合併和濃縮各相同層析液，得到各個純品。
[0003]常見層析柱根據壓力不同可分為常壓柱、中壓柱和高壓柱。常壓柱在實際中用得最多，常常是自己根據需要採用不同材料的層析柱、裝填不同的填料來實現目標物質的分離純化。玻璃層析柱又尤其常用，常包括柱體、活塞，有的還包括位於柱體上端的用於固定加液球的倒鉤等。目前常見的玻璃層析柱存在如下不足:一方面，在玻璃層析柱的填料裝填和被分離物質樣品裝填中，常常根據不同填料和不同物質採用不同的填料，樣品比例，以利於在達到最佳分離效果的同時節約填料，而填料.樣品的比例通常參照其體積比，但是目前常用玻璃柱沒有刻度，常常需要操作人員憑經驗目測或用其他度量工具進行測量，非常麻煩；另一方面，在層析過程中，常常需要掌握樣品在分離介質即填料中的遷移速度，然後根據遷移速度進行流出液的速度調節，以利於在達到最佳分離效果的同時節約層析時間，但是目前的層析柱沒有刻度，常常是在不同時間點對某個層析色帶的位置用記號筆標記，這樣的做法不夠準確，同時標記筆所標記的記號可能會因為添加洗脫劑時的洩漏而被衝刷掉，需要再次標記，很不方便。
[0004]此外，目前的層析柱在進樣時，樣品溶液從層析柱頂端的中部直接流進柱體，容易造成柱體內填料飛濺至層析柱的內壁上。由於層析用的填料常常是比較昂貴的，飛濺至內壁上的填料沒有在層析中得到充分的利用，影響層析效果。

【發明內容】

[0005]為解決上述問題，本實用新型提供一種用於蛋白純化的層析柱，採用如下技術方案:
[0006]一種用於蛋白純化的層析柱，包括柱頭和柱體，所述柱頭與柱體為螺紋連接，其特徵在於，所述柱頭的頂部設有供矽膠軟管通過的通孔；所述柱體採用透明的玻璃材質，所述柱體上沿柱體軸向設置有均勻的刻度；所述柱體的頂部設置可拆卸的U型篩網，所述U型篩網為上端開口、下端封閉的喇叭形狀，所述U型篩網的側壁含有通孔；所述U型篩網的上部放置中速定性濾紙濾膜，所述濾膜的表面積大於或者等於U型篩網的表面積；所述柱體的底部為錐形出口 ；所述錐形出口的上部設置篩板，所述的篩板的孔徑為0.2^0.4 μ m。
[0007]優選地，所述柱頭和柱體的連接處設有密封圈，所述的密封圈為矽膠材質。
[0008]本實用新型具有如下有益效果:
[0009]1.本實用新型提供的層析柱，其柱體採用透明的玻璃材質，並且在柱體上設置均勻的刻度，如此設置，有利於在層析柱的填料裝填和樣品上樣時方便準確地把握填料樣品比例，通過觀察某個色帶在不同時間點所在的刻度位置，從而方便掌握被分離物質在層析柱中的遷移速率，使整個層析過程更方便，提高分離效率和整個工作效率。
[0010]2.本實用新型提供的層析柱，在柱體的頂部設置可拆卸的U型篩網，所述U型篩網為為上端開口、下端封閉的喇叭形狀，並且U型篩網的側壁含有通孔，如此設置，有利於緩衝液、樣品液、洗脫 液從柱體頂部進入時，是沿著柱體的四壁流下的，不會造成柱體內液體的飛濺，引起填料飛濺在柱體的四壁上，影響填料高度，從而影響蛋白的純化效果。
[0011]3.本實用新型提供的層析柱，在錐形出口的上部設置篩板，並限定篩板的孔徑為
0.2、.4μπι，如此這樣便可以達到蛋白純化時的填料不會隨著緩衝液、樣品液、洗脫液一起，從錐形出口流失，但又不會影響緩衝液、樣品液和洗脫液從錐形出口的流出效果。
[0012]4.本實用新型提供的層析柱，U型篩網的上部放置中速定性濾紙濾膜，可以對待分離的樣品液進行初步分離，攔截粒徑比較大的未處理完全的菌體等雜質。
[0013]5.本實用新型提供的層析柱，在柱頭和柱體的連接處設有密封圈，便於柱頭和柱體的密閉，避免緩衝液、樣品液、洗脫液從兩者的縫隙處流出，造成浪費。
[0014]6.本實用新型提供的層析柱，結構簡單，操作方便，蛋白的純化效果好。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0015]圖1為本實用新型的結構示意圖；其中，I表示柱頭；2表示矽膠軟管；3表示錐形出口；4表不刻度；5表不篩板；6表不U型篩網；7表不柱體。
【具體實施方式】
[0016]下面結合附圖和實施例對本實用新型作進一步說明。除下述實施方式外，本實用新型還可以有其他實施方式，凡採用等同替換或等效變換形成的技術方案，均落在本實用新型要求的保護範圍內。
[0017]如圖1所示，一種用於蛋白純化的層析柱，包括柱頭I和柱體7，所述柱頭I與柱體7為螺紋連接，其特徵在於，所述柱頭I的頂部設有供矽膠軟管2通過的通孔；所述柱體7採用透明的玻璃材質，所述柱體7上沿柱體軸向設置有均勻的刻度4 ;所述柱體7的頂部設置可拆卸的U型篩網6，所述U型篩網6為上端開口、下端封閉的喇叭形狀，所述U型篩網6的側壁含有通孔；所述U型篩網6的上部放置中速定性濾紙濾膜(在圖中並沒有標示出來，其設置在篩網的上部，但是不超過柱體頂部的水平位置)，所述濾膜的表面積大於或者等於U型篩網6的表面積；所述柱體7的底部為錐形出口 3 ;所述錐形出口 3的上部設置篩板5，所述的篩板5的孔徑為0.2^0.4 μ m。
[0018]作為優選，在柱頭I和柱體7的連接處設有密封圈(在圖中並沒有標註出來)，用於密封作用，所述的密封圈為矽膠材質，密封效果更佳。
【權利要求】
1.一種用於蛋白純化的層析柱，包括柱頭(I)和柱體(7)，所述柱頭(I)與柱體(7)為螺紋連接，其特徵在於，所述柱頭(I)的頂部設有供矽膠軟管(2)通過的通孔；所述柱體(7)採用透明的玻璃材質，所述柱體(7)上沿柱體軸向設置有均勻的刻度(4);所述柱體(7)的頂部設置可拆卸的U型篩網(6)，所述U型篩網(6)為上端開口、下端封閉的喇叭形狀，所述U型篩網(6)的側壁含有通孔；所述U型篩網(6)的上部放置中速定性濾紙濾膜，所述濾膜的表面積大於或者等於U型篩網(6)的表面積；所述柱體(7)的底部為錐形出口(3);所述錐形出口(3)的上部設置篩板(5)，所述的篩板(5)的孔徑為0.2^0.4 μ m0
2.根據權利要求1所述的用於蛋白純化的層析柱，其特徵在於，所述柱頭(I)和柱體(7)的連接處設 有密封圈，所述的密封圈為矽膠材質。
【文檔編號】C07K1/16GK203678010SQ201320789887
【公開日】2014年7月2日 申請日期:2013年12月5日 優先權日:2013年12月5日
【發明者】朱輝, 鄧濤 申請人:成都雅途生物技術有限公司