用蘆丁製備槲皮素及異槲皮苷的方法
2023-05-04 21:12:21 3
專利名稱：用蘆丁製備槲皮素及異槲皮苷的方法
技術領域：
本發明涉及一種用蘆丁製備槲皮素及異槲皮苷的方法。
背景技術：
蘆丁是一種黃酮類化合物，在自然界植物中的分布十分廣泛，在很多植物的根、莖、葉、花、果實、種子中都存在。一些常用中藥，如槐米、芸香、養麥、沙棘、銀杏、枸杞、益母草、柴胡、夏枯草、蘆薈、桉樹葉和菸葉等多種植物中都含有蘆丁，蘆丁是我國醫藥工業的重要原料之一。
槲皮素是蘆丁和異槲皮苷的苷元，槲皮素第3碳上連接一個芸香糖基即是蘆丁，去掉芸香糖中的鼠李糖基，僅一個葡萄糖基與槲皮素相聯即為異槲皮苷，其化學結構見下圖 槲皮素 蘆丁 異槲皮苷槲皮素、蘆丁、異槲皮苷化學結構示意圖研究表明，蘆丁具有降低毛細血管通透性、抗炎、抗病毒鎮痛、抗氧化及抑制醛糖還原酶等多方面藥理活性(參見韓英華，秦元璋，蘆丁研究現狀，山東中醫雜誌2003，22(10)635-637)。
槲皮素和異槲皮苷的生理活性遠高於蘆丁，具有抗氧化、抗病毒，以及增強雌性激素的分泌等性質，因此常被用作食品添加劑或輔助藥物給藥。槲皮素和異槲皮苷在自然界植物中分布也很廣泛，但天然含量卻很低，僅有萬分之幾到千分之幾的豐度，很難提取利用(參見CN03133636.1)。
目前，異槲皮苷和槲皮素的製備方法有1、從天然植物中分離提取，如「從生物類黃酮中回收異槲皮素」(CN1355797)等方法，但這類方法要使用大量的有機溶劑，不利於清潔生產，並且產率低，成本高，很難實現產業化生產。2、用酶法水解蘆丁製備異槲皮苷和槲皮素，比如「酶法水解製備異槲皮素和槲皮素的方法」(CN03133636.1)，「從植物生物質提取、純化和轉化類黃酮化合物」(CN1685053A)，該類方法需要使用昂貴的生物酶製劑，工藝設備也較複雜，生產成本較高。3、槲皮素的工業化生產一般採用強酸水解蘆丁的工藝(參見劉亞萍，槲皮素製備方法的研究，時珍國醫國藥，2004，15(10)657-658；何勤，徐雄良等，正交試驗法優選槐米中槲皮素的提取工藝，中草藥，2003，34(5)409-412)，對生產設備的防腐要求較高，且產生三廢，不利於環境保護。
發明內容
本發明要解決的問題是提供一種成本低、無汙染、工藝簡單、轉化率高的用蘆丁製備槲皮素及異槲皮苷的方法。該方法採用高壓水解工藝處理蘆丁，得到異槲皮苷及槲皮素。
為解決上述問題，本發明採用的方法步驟如下1、在高壓反應釜中加入適量水，加熱至沸；2、稱取蘆丁，加入到2～3倍蘆丁重量份數的蒸餾水中攪拌均勻成漿液，將漿液置於前述高壓反應釜內沸水上方的隔板上；3、繼續加熱反應釜，利用水蒸汽排盡釜內空氣後密閉高壓釜，控制釜內飽和水蒸氣壓為0.2～0.8Mpa，水解10分鐘～5小時，可製得混合水解物；4、停止加熱，降溫排汽，取出混合水解物冷卻至5～20℃之間，用3～5倍重量10～20℃之間的蒸餾水離心洗滌2～4次，所得沉澱物再真空乾燥；5、用常規方法從沉澱物中分離提純異槲皮苷和槲皮素。
用液相色譜儀測定蘆丁高壓水解體系中不同組分含量儀器美國Agilent公司1100系列高效液相色譜儀，包括在線真空脫氣機，四元梯度泵，自動進樣器，柱溫箱，DAD二極體陣列檢測器和化學工作站，色譜分析條件Hypersil BDS C18色譜柱(i.d.4.6×250mm，5μm)，柱溫30℃，流動相A(80％乙腈0.02％磷酸水溶液，V/V)，B(0.02％磷酸水溶液，V/V)，C(純水)；檢測中A的濃度變化為0-4min，30％；4～8min，30％～100％；8～14min，100％；14～22min，30％。流速1.0ml/min；檢測波長360nm；參比波長450nm。
根據測定結果，不同飽和蒸汽壓條件對水解體系影響的動態影響見圖1、圖2、圖3；水解反應產物與黃酮標準對照品的HPLC譜圖見圖4、圖5、圖6、圖7，其中，從左到右的波峰分別是蘆丁、異槲皮苷和槲皮素。
本發明具有成本低、無汙染、工藝簡單、轉化率高等優點。
圖1是本發明在0.50Mpa飽和蒸汽壓條件下對水解體系的動態影響示意圖；圖2是本發明在0.60Mpa飽和蒸汽壓條件下對水解體系的動態影響示意圖；圖3是本發明在0.70Mpa飽和蒸汽壓條件下對水解體系的動態影響示意圖；圖4是黃酮標準對照品的HPLC譜圖；圖5是本發明實施例1水解產物HPLC譜圖；圖6是本發明實施例3水解產物HPLC譜圖；圖7是本發明實施例4水解產物HPLC譜圖。
具體實施例方式
實施例1在高壓反應釜中加入適量水，加熱至沸；取醫藥級蘆丁(含量＞95％)1000克，加入到2.5倍蘆丁重量的蒸餾水中攪拌均勻成漿液，將漿液置於高壓反應釜內沸水上方的隔板上；繼續加熱反應釜，利用水蒸汽排盡釜內空氣後密閉高壓釜，控制釜內飽和水蒸汽壓為0.20Mpa，維持5小時，可製得混合水解物；停止加熱，降溫排汽，取出混合水解物冷卻至11℃，用3倍重量14℃的蒸餾水離心洗滌2次，所得沉澱物再真空乾燥；沉澱物經真空乾燥得709克。
用HPLC檢測；蘆丁含量79.1％，異槲皮苷9.48％，槲皮素含量9.09％。
實施例2在高壓反應釜中加入適量水，加熱至沸；取醫藥級蘆丁(含量＞95％)1000克，加入到2倍蘆丁重量的蒸餾水中攪拌均勻成漿液，將漿液置於高壓反應釜內沸水上方的隔板上；繼續加熱反應釜，利用水蒸汽排盡釜內空氣後密閉高壓釜，控制釜內飽和水蒸汽壓為0.50Mpa，維持30分鐘，可製得混合水解物；停止加熱，降溫排汽，取出混合水解物冷卻至5℃，用5倍重量10℃的蒸餾水離心洗滌3次，所得沉澱物再真空乾燥；沉澱物經真空乾燥得798克；。
用HPLC檢測，蘆丁含量68.9％，異槲皮苷10.2％，槲皮素含量18.8％。
實施例3在高壓反應釜中加入適量水，加熱至沸；取醫藥級蘆丁(含量＞95％)1000克，加入到3倍蘆丁重量的蒸餾水中攪拌均勻成漿液，將漿液置於高壓反應釜內沸水上方的隔板上；繼續加熱反應釜，利用水蒸汽排盡釜內空氣後密閉高壓釜，控制釜內飽和水蒸汽壓為0.60Mpa，維持30分鐘，可製得混合水解物；停止加熱，降溫排汽，取出混合水解物冷卻至17℃，用4倍重量17℃的蒸餾水離心洗滌3次，所得沉澱物再真空乾燥；沉澱物經真空乾燥得672克。
用HPLC檢測，蘆丁含量28.6％，異槲皮苷13.7％，槲皮素含量32.4％。
實施例4在高壓反應釜中加入適量水，加熱至沸；取醫藥級蘆丁(含量＞95％)1000克，加入到2.5倍蘆丁重量的蒸餾水中攪拌均勻成漿液，將漿液置於高壓反應釜內沸水上方的隔板上；繼續加熱反應釜，利用水蒸汽排盡釜內空氣後密閉高壓釜，控制釜內飽和水蒸汽壓為0.80Mpa，維持10分鐘，可製得混合水解物；停止加熱，降溫排汽，取出混合水解物冷卻至20℃，用5倍重量20℃的蒸餾水離心洗滌3次，所得沉澱物再真空乾燥；沉澱物經真空乾燥得483克。
用HPLC檢測，槲皮素含量94.3％，蘆丁含量0.34％。
權利要求
1.用蘆丁製備槲皮素及異槲皮苷的方法，包括如下步驟a、在高壓反應釜中加入適量水，加熱至沸；b、稱取蘆丁，加入到2～3倍蘆丁重量份數的蒸餾水中攪拌均勻成漿液，將漿液置於前述高壓反應釜內沸水上方的隔板上；c、繼續加熱反應釜，利用水蒸汽排盡釜內空氣後密閉高壓釜，控制釜內飽和水蒸氣壓為0.2～0.8Mpa，水解10分鐘～5小時，可製得混合水解物；d、停止加熱，降溫排汽，取出混合水解物冷卻至5～20℃之間，用3～5倍重量10～20℃之間的蒸餾水離心洗滌2～4次，所得沉澱物再真空乾燥；e、用常規方法從沉澱物中分離提純異槲皮苷和槲皮素。
全文摘要
用蘆丁製備槲皮素及異槲皮苷的方法；步驟如下在高壓反應釜中加入適量水，加熱至沸；稱取蘆丁，加入到2～3倍蘆丁重量份數的蒸餾水中攪拌均勻成漿液，將漿液置於前述高壓反應釜內沸水上方的隔板上；繼續加熱反應釜，利用水蒸汽排盡釜內空氣後密閉高壓釜，控制釜內飽和水蒸氣壓為0.2～0.8Mpa，水解10分鐘～5小時，可製得混合水解物；停止加熱，降溫排汽，取出混合水解物冷卻至5～20℃之間，用3～5倍重量10～20℃之間的蒸餾水離心洗滌2～4次，所得沉澱物再真空乾燥；用常規方法從沉澱物中分離提純異槲皮苷和槲皮素；本發明具有成本低、無汙染、工藝簡單、轉化率高等優點。
文檔編號C07H17/00GK1817876SQ20061006521
公開日2006年8月16日 申請日期2006年3月20日 優先權日2006年3月20日
發明者陝方, 任貴興 申請人:中國農業科學院作物科學研究所, 山西省農業科學院農產品綜合利用研究所